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自制血细胞分析仪室内全血质控品及其性能评价摘要】目的：研究自制稳定可靠的血细胞分析室内质控品并评价其性能。
方法：收集我院体检健康者及门诊发热病人各1例的新鲜血标本，分别加入一定量的细胞固定液及细胞保养液等，制备成血细胞室内质控品， 4℃保存，并将自制的质控品和普通标本多次同时检测，记录并分析其重复性、稳定性等质控性能，瑞氏染色观察血细胞形态。
结果：在长达6个月的稳定性观察中，各个分析项目的重复性较好，变异系数都在允许范围内，血细胞形态基本正常。
结论：自制的血细胞分析用室内质控品各技术指标均能充分满足日常检测室内质控品的要求，且制作简便，成本价格低廉，可以较好地应用于日常血细胞分析检测的室内质量控制工作中。
【关键词】血细胞分析仪；质控品；全血血细胞分析是目前医院极为普及的项目，仪器分析的广泛应用和自动化的提高，需要使用大量的质控品来监控测定误差，以确保这些仪器能准确稳定地运行。
而国内外商品化质控品不同程度地存在价格昂贵、稳定期短、来源不充分等缺点，为节省成本并保证临床检验工作质量，制备合格的稳定的血细胞室内质控品变得尤为重要[1]。
本研究尝试自制稳定可靠的血细胞分析室内质控品并评价其性能。
1. 材料和方法1.1仪器 SYSMEX-KX21血细胞分析仪，全血校准品由Sysmex公司提供，稀释液、溶血剂、清洗剂为原仪器配套。
1.2 试剂[6-8] 化学试剂均为分析纯。
1.2.1 细胞固定液量取25%戊二醛1.5 ml、40%甲醛7 ml、甲醇2 ml，用95%乙醇补足至100 ml。
1.2.2 细胞保养液氯化钠1 g、枸橼酸0.8 g、枸橼酸钠4 g、葡萄糖4 g、磷酸氢二钠0.4 g、硼酸2 g、蔗糖10 g、海藻糖 10 g、碳酸氢钠0.2 g，加入约90 ml蒸馏水溶解，用蒸馏水定容至100 ml，0.45μm滤纸过滤。
1.2.3 防腐剂配制5%的N3Na，应用终浓度为0.05%；80万单位青霉素注射粉剂加入5 ml灭菌注射用水溶解，按照每ml质控品加入1μl青霉素。
1.目的和适用范围1.1.为监测和评价本实验室检验结果的稳定性和可靠性，预防差错的产生，特制定本程序。
1.2.适用于本实验室各项实验项目。
2.术语：2.1.质量控制：监视全过程，排除误差，防止变化，维持标准化现状的一个管理过程。
2.2.精密度：指对同一项目，同一方法，对同一标本重复测定结果的一致程度。
通常用结果的平均值和标准差表示。
2.3.准确性：指各测定结果与真值（或靶值）之间的一致性。
准确性好不一定精密度高，精密度高不一定准确性好。
2.4.随机误差：指操作中不可避免和无法预料的误差，是检验工作中存在最多的一种误差，反映测定精密度的好坏。
2.5.系统误差：指由于仪器，试剂，标准对照等的变化而使测定结果与靶值（或真值）之间出现的具有同一倾向性的误差，反映出测定准确性的误差，一般有明显规律，可以预防或校正。
2.6.过失误差：分为恒定误差和成比例误差两类，前者往往由于某一种原因造成，其大小与检验结果本身无关，后者与检验结果存在一定比例关系。
过失误差是由于责任心不强，操作错误造成。
如标本搞错，稀释比例、时间、温度、计算、登记错误等。
2.7.“即刻法”质控：在对同一批外部质控血清连续测定3次后，即可对第3次检验结果进行质控。
3.职责：3.1.各实验项目操作者负责本实验每批质控品的操作，质控结果判定，绘制质控图。
3.2.检验科负责人负责质控结果的复核，失控情况的处理，定期召开质控分析会。
4.质控工作内容：4.1.外部质控品的准备及使用要求：4.1.1.购买外部质控品：4.1.1.1.质控品必须经过国家批准；质控品为低值，S/CO值宜为2-3之间。
4.1.1.2.从经国家授权或有资质的机构购入，做好购买和接收记录。
4.1.1.3.若单支包装量过大，可融化后稀释至所需的浓度，按一周的实验用量进行分装、分类、标记、封口，-20℃冻存，以后每周取用一支。
4.1.1.4.质控品的确认：每次新购入的质控品必须随标本同批检测，并经上一批质控品判定合格后方可使用。
血液检验分析前质量保证和室内质量控制要求主要包括以下：分析前质量管理分析中质量管理分析后质量管理一、分析前质量管理1）做好操作人员上岗前的培训2）选择合适的仪器安装环境（远离电磁场、热源、防潮、防阳光直射、温度18-25度、湿度<80%、要有稳压电源3）做好仪器的鉴定和校准（包括准确度、精密性、重复性、可比性、干扰试验等）4）结果的比对5）做好分析前仪器的校准6）注意受检者生理状态对结果的影响①妊娠5个月以上或新生儿WBC明显增多②大量吸烟，血中HbCO增高，Hb会明显增高，特别是煤气中毒更为明显③每日不同时间WBC 也有一定差别。
7）分析前标本应注意的事项：标本的采集、抗凝剂、血标本的存放标本的采集：保持标本完整性、控制各种干扰因素；保持标本新鲜，及时送检；拒绝溶血混匀PLT；混匀不完全；抗凝不完全，导致血小板聚集或产生血凝块，从而影响检测。
抗凝剂：血常规检验首选抗凝剂为EDTA—K2，浓度一般为1.5-2.2mg/ml。
要注意的是，有些标本会出现EDTA-K2耐受问题（PLT假性极度低下）。
解决方法：可采用枸橼酸钠抗凝。
血标本的存放：若标本不能及时检验，须采取有效存放措施，血常规应放常温放置，不超过24h，放冰箱PLT会减少。
二、分析中质量管理1、仪器的正确操作与注意事项（1）每日开机后，首先用稀释液测定仪器背景（本底计数）（2）标本在检测前一定要充分混匀。
2、室内质控CBC质控的要求质控品的选择：推荐使用非定值质控物，应至少使用2个浓度水平（含正常和异常水平）的质控品质控的数量：至少两个水平质控项目：Hb、WBC、RBC、HCT、PLT质控频率：门诊至少1次/8小时、病房2次/24小时质控方法：至少使用L-J法靶值的确定：至少检测3天，至少20个结果的均值、SD的确定：通过一段时间的反复检测确定，室内质控的平均标准差作为该质控品的SD失控的判断规则：实验室自定，推荐至少使用13S规则失控的分析与处理、失控报告的填写失控数据的管理：原则上每月统计1次3、注意某些病理因素对结果的影响1、由于MM、巨球蛋白血症、转移癌等疾病血中含冷球蛋白或白血病、妊娠、糖尿病血中含冷纤维蛋白，可使血液中非晶体物质聚集，因而导致WBC、PLT假性增高，解决方法：将标本放置37度水浴箱30分钟，握在手心，充分颠倒混匀后，立即上机检测。
输血科室内质量控制与室间质量评价管理规程一、室内质量控制管理规程（一）目的：为保证实验数据的准确、可靠。
（二）范围：ABO血型正反定型、Rh血型、红细胞不规则抗体筛查（三）管理要求：1 .室内质控质控方法与测定项目检测方法一致，符合相关要求。
本室质控方法为各试剂间的互相验证。
2 .需在每日实验前进行，只有当质控结果达到实验室设定的接受范围，才能签发当天的化验报告。
3 .当室内质控结果出现失控时，需仔细分析、查明原因，若是真失控，应该在重做的质控结果在控后，对相应的所有失控的患者标本进行重新测定，方可发出报告；若是假失控,病人标本可以按原测定结果报告。
4 .质控品检测的全过程需严格按照操作说明进行，不能任意更改。
5 .质控品必须在有效期内使用。
6 .实验室每月末要对当月的室内质控结果进行分析评价并与质控品必须与患者标本在相同条件下进行检测。
7 .每天质控结果做好原始记录并保存。
二、室间质量评价管理规程（一）目的：利用实验室间的比对来确定实验室的能力，评价各实验室测定结果的正确性，是否保持在临床所能接受的误差范围内，即借助外部力量进行回顾性检查。
（二）范围：卫生部临床检验中心室间质评、大连市输血质控中心室间质评（三）管理要求：1 .开展室间质评项目，每年参加卫生部临床检验中心室间质评（每年3次）、大连市输血质控中心室间质评（每年1次）。
2 .在各室间质评的规定时间完成室间质评分析,3 .在做室间质评检测前，应对整个分析系统（含检测设备、试剂、校准物、质控物）进行必要的维护和检查更换，以保持正常的工作状态。
4 .收到室间质评物后应按规定妥善保存，确保其品质不变。
5 .在检测过程中应与病人标本一起随机检测，独立完成分析报告，不得修改原始检查结果，更不得与其它单位核对，以保证室间评价的真实性。
6 .室间质评分析在规定时间完成后，如实认真填写回报表，上交科主任，由科主任审签后统一寄给省临检中心，原始记录保存在实验室内以备核查和分析。
临床血液学检验的质量控制和改进临床血液学检验的质量控制和改进应贯穿于仪器使用的整个使用周期，体现在每一个标本或者说每一个病人的检验过程中。
临床实验室的质量控制目标就是检测结果的准确、精密、快捷和经济。
按照实验室质量管理学的基本理论，文件、程序、执行、记录和改进是构成质量管理的5大基本环节。
这就要求按照《临床实验室管理办法》或国际上通用的实验室认可的要求认真做好临床实验室全面质量管理。
首先要制订质量管理的各种文件，其中最重要的是标准操作程序（SOP），然后所有操作者都按程序进行工作，执行了就要记录，各种记录本就是质量保证，控制和改进的客观资料。
在工作中通过室内质控、室间质评或比对试验以及临床医生和病人的反馈意见发现问题，制订改进措施，进一步提高质量，如此循环，使质量管理工作始终处于动态的发展之中。
下面就从实验室环境、试剂、室内质控和室间质评四个方面就如何保证血细胞计数和凝血试验的质量做简要介绍。
实验室环境要求室温18°C~25°C，相对湿度30%~80％，有一定的通风，防尘措施；安装UPS，避免电磁干扰，仪器周围有一定空间，便于仪器散热；环境清洁，防潮，仪器实验台稳固。
对实验室环境的监测必须形成制度，坚持进行，而不流于形式。
应将此工作内容写入仪器使用的 SOP 文件，并认真做好每日记录并及时纠正不符合要求的状况。
试剂要求试剂必须配套使用，血液分析仪的试剂主要有稀释液、清洗液、溶血剂、校准品和质控物，五分类仪器还需要另外的稀释液和不同的荧光染液。
凝血仪也有相配套的最佳试剂，包括校准品和质控品。
我们主张使用与仪器配套的原装试剂，至少在仪器评价和开始使用的阶段要这样。
随着使用经验的积累，可以试用自制或国内生产的试剂，但是必须保证检测结果的一致性。
室内质控室内质控的目的是监测一个检验系统，包括方法学、仪器、试剂、外部环境以及操作过程等各种综合因素作用下检测结果的稳定性，即重复性。
如果使用定值质控品做质控操作还能反映检测系统的准确性。
