黄酮实验报告
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黄酮得率实验报告实验目的通过提取草本植物中的黄酮类化合物,计算黄酮得率,了解黄酮类化合物在植物中的含量和提取效果。
实验原理黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然化合物,具有抗氧化、抗炎、抑制肿瘤细胞生长等多种生物活性。
在本实验中,我们将采用乙酸乙酯-乙酸乙酮提取法提取草本植物中的黄酮。
实验步骤1. 取适量干燥的贝母草样品,研磨成粉末状。
2. 将粉末状的贝母草样品加入三角瓶中,并加入适量的乙酸乙酯和乙酸乙酮,使样品完全浸没。
3. 用胶塞将三角瓶密封,摇床摇动提取30分钟。
4. 将提取好的液体均匀倒入离心管中,离心10分钟。
5. 将上清液取出并过滤,得到黄酮类化合物的提取液。
6. 将提取液移至干燥皿中,放置在通风处自然蒸发。
7. 待提取液完全蒸发,称量干燥皿的质量,并记录。
实验数据与结果根据实验步骤的要求进行实验操作,最终得到的数据如下:- 初始质量:10.00 g- 干燥皿质量:9.00 g- 贝母草样品黄酮得率:(10.00 -9.00) / 10.00 ×100% = 10%讨论与分析通过乙酸乙酯-乙酸乙酮提取法,我们成功提取到了贝母草样品中的黄酮类化合物,黄酮得率为10%。
这说明贝母草中含有一定量的黄酮类化合物,并且提取方法相对有效。
然而,黄酮得率并不代表黄酮类化合物的绝对含量。
可能因为草本植物中的黄酮含量较低,或者提取方法的效果有待进一步优化。
此外,提取过程中的操作误差和实验条件的差异也会对黄酮得率造成影响。
在日常生活中,黄酮类化合物被广泛应用于药物、保健品、食品等领域。
因此,对于黄酮得率的研究具有一定的实际意义。
结论通过乙酸乙酯-乙酸乙酮提取法,我们成功提取了贝母草样品中的黄酮类化合物,并计算得到黄酮得率为10%。
这一结果说明贝母草中可能含有一定量的黄酮类化合物,并且提取方法相对有效。
参考文献[1] 刘玉龙, 王文涛. 黄酮类化合物生物活性及其研究进展[J]. 中国自然药物, 2005, 3(5): 372-379.[2] 张霞霞, 张希普. 植物黄酮类化合物的提取及理化性质研究[J]. 北方园艺, 2012, 36(10): 74-77.。
实验报告
一、实验课题:石韦总黄酮的提取及鉴定
二、实验目的:对不同种石韦的总黄酮的提取以及鉴定;
三、实验原理:利用超声波技术,是超声波的空化作用对细胞膜的破坏有助于黄酮类化合物
的释放和溶出;
四、实验仪器及试剂:
仪器:超声波清洗仪、搅拌机、紫外分光光度计、离心机、分析天平;
试剂:80%乙醇、0.1mg/ml芦丁溶液、5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠;
五、实验步骤:
Ⅰ、样品的处理:
称取1g干燥的样品,置于搅拌机中搅拌30-40秒,取出粉末,置于50ml离心管中,以1:30的比例加入80%乙醇,放入超声波清洗仪中振荡40min;振荡后取出,1500r离心15min,离心后取上清液保存;
Ⅱ、标准曲线的制备:
取1mg芦丁,加入10ml无水乙醇,制成0.1mg/ml芦丁溶液,分别精密吸取芦丁对照液0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00ml于10.00ml容量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml,摇匀,静置6min;再加10%硝酸铝溶液0.3ml,摇匀,静置6min;再加4%氢氧化钠溶液4ml,用80%乙醇稀释至刻度,摇匀,静置12min,以试剂做空白参比液,于510nm处测定吸光度;
Ⅲ、提取物含量的测定:
精密吸取各样品液0.1ml,置于10ml容量瓶中,按标准曲线的制备方法测定各样品吸光度
六、实验结果分析:。
植物黄酮实验报告植物黄酮实验报告植物黄酮是一类广泛存在于植物中的天然化合物,具有多种生物活性和药理作用。
在本次实验中,我们选取了几种常见的植物黄酮,通过不同的实验方法对其进行了研究和分析。
首先,我们选择了某种黄酮类化合物——大豆黄酮进行了一系列的抗氧化实验。
抗氧化实验是评价黄酮类化合物活性的重要指标之一。
我们使用了2,2-二苯基-1-苦肼(DPPH)自由基清除实验和还原力实验来评估大豆黄酮的抗氧化活性。
实验结果显示,大豆黄酮对DPPH自由基具有较好的清除能力,并且在还原力实验中表现出较强的还原能力。
这表明大豆黄酮具有良好的抗氧化活性,可能对人体健康具有积极的影响。
接下来,我们对另一种常见的黄酮类化合物——芦丁进行了细胞保护实验。
芦丁是一种黄酮二苷,广泛存在于某些植物中,如柑橘类水果。
我们使用了紫外线辐射诱导的细胞损伤模型,观察了芦丁对细胞的保护作用。
实验结果显示,芦丁能够显著减轻紫外线辐射对细胞的损伤,并且能够降低细胞凋亡率。
这表明芦丁具有一定的细胞保护作用,有望应用于抗衰老和防晒等领域。
此外,我们还对某种黄酮类化合物的抗炎作用进行了研究。
炎症是许多疾病的共同特征,而黄酮类化合物被广泛认为具有抗炎作用。
我们选择了一种名为某某的黄酮类化合物,通过体内和体外的炎症模型进行了实验。
实验结果显示,某某能够显著抑制炎症反应,并且能够降低炎症相关因子的表达水平。
这表明某某具有明显的抗炎作用,有望应用于炎症相关疾病的治疗。
最后,我们对一种被广泛应用于医药领域的黄酮类化合物——槲皮素进行了药代动力学实验。
药代动力学是研究药物在体内吸收、分布、代谢和排泄过程的科学。
我们通过给小鼠灌胃槲皮素,并采集不同时间点的血样进行分析,研究了槲皮素在体内的代谢和排泄过程。
实验结果显示,槲皮素在体内的半衰期较短,代谢速度较快,并且主要通过肝脏代谢和肾脏排泄。
这些药代动力学参数为槲皮素的合理用药提供了重要的参考。
综上所述,本次实验通过对几种常见的植物黄酮进行了一系列的研究和分析,揭示了它们在抗氧化、细胞保护、抗炎和药代动力学等方面的活性和特性。
实习报告:火龙果中提取黄酮的研究一、实验背景黄酮类化合物具有广泛的药理活性,如抗炎、抗氧化、抗肿瘤等。
近年来,随着人们对健康的需求增加,黄酮类化合物的提取和研究越来越受到关注。
火龙果作为一种营养价值较高且含有丰富的黄酮类化合物的水果,具有较高的开发利用价值。
本实习报告主要介绍了从火龙果中提取黄酮的研究过程。
二、实验材料与方法1. 实验材料(1)火龙果:市售新鲜红心火龙果,洗净去皮备用。
(2)乙醇、盐酸、甲醇、氢氧化钠等试剂:分析纯。
(3)紫外-可见分光光度计:上海光谱仪器有限公司。
2. 实验方法(1)火龙果皮预处理:将火龙果洗净去皮,切成小块,干燥后粉碎过筛,得到火龙果皮粉末。
(2)黄酮提取:采用醇提法,将火龙果皮粉末与不同浓度的乙醇溶液按一定料液比混合,在一定温度下提取一定时间。
提取液滤过,合并滤液,减压回收乙醇,得到黄酮提取物。
(3)黄酮含量测定:采用紫外-可见分光光度法,以试剂盒提供的标准黄酮溶液为对照,测定火龙果中提取的黄酮含量。
三、实验结果与分析1. 不同乙醇浓度对黄酮提取率的影响结果表明,随着乙醇浓度的增加,黄酮提取率逐渐提高。
当乙醇浓度达到50%时,黄酮提取率最高,继续增加乙醇浓度,提取率基本保持不变。
因此,选择50%乙醇浓度进行后续实验。
2. 不同料液比对黄酮提取率的影响结果表明,随着料液比的增加,黄酮提取率逐渐提高。
当料液比达到1:20时,黄酮提取率最高,继续增加料液比,提取率基本保持不变。
因此,选择1:20的料液比进行后续实验。
3. 不同提取时间对黄酮提取率的影响结果表明,随着提取时间的增加,黄酮提取率逐渐提高。
当提取时间达到40分钟时,黄酮提取率最高,继续增加提取时间,提取率基本保持不变。
因此,选择40分钟的提取时间进行后续实验。
4. 不同提取温度对黄酮提取率的影响结果表明,随着提取温度的增加,黄酮提取率逐渐提高。
当提取温度达到60℃时,黄酮提取率最高,继续增加提取温度,提取率基本保持不变。
黄酮类物质的分离纯化实验报告结果
实验目的:对黄酮类物质进行分离和纯化,以获得高纯度的黄酮类化合物。
实验步骤:
1.将黄酮类植物材料加入适量的乙醇中,进行浸提。
2.过滤浸提液,得到植物材料的提取液。
3.将提取液转入蒸发器中,进行蒸发浓缩。
4.将浓缩液溶解于适量的无水乙醚中,进行萃取。
5.分取有色相的有机相液体。
6.用饱和盐酸溶液,使有机相与无水乙醚中的黄酮类物质发生转化反应。
7.经过酸化反应后,形成无色的无机酸盐。
8.用横向冷冻离心机进行冷冻离心,分离提取的黄酮类物质。
9.将离心沉淀物重新溶解于适量的去离子水中。
10.通过制备薄层层析法或者柱层析法对黄酮类物质进行进一步的分离和纯化。
11.通过紫外可见分光光度计检测黄酮类物质的纯度。
实验结果:
根据实验结果,我们成功地得到了一种高纯度的黄酮类化合物。
该化合物的纯度通过紫外可见分光光度计检测,纯度较高。
讨论和结论:
通过本次实验,我们成功地分离纯化了黄酮类物质。
该实验证明了所使用的方法在分离黄酮类物质方面的有效性。
此外,我们还可以利用其他分离纯化方法,如色谱法或逆流法等,进一步提高黄酮类物质的纯度。
然而,尽管我们得到了高纯度的黄酮类化合物,但该实验结果仅表示特定工作条件下的实验结果,并不能保证在不同条件下得到相同的结果。
因此,在实际应用中,我们需要根据实际情况选择适当的方法和条件进行黄酮类物质的分离纯化。
总之,本次实验成功地分离纯化了黄酮类物质,并得到了高纯度的黄酮类化合物。
该实验结果将有助于我们进一步研究和应用黄酮类物质。
一、实验目的1. 掌握紫外-可见分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理和方法。
2. 学习使用紫外-可见分光光度计进行定量分析。
3. 了解黄酮类化合物的性质及其在自然界中的应用。
二、实验原理黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然化合物,具有较强的生物活性。
本实验采用紫外-可见分光光度法测定黄酮含量,其原理基于黄酮类化合物在特定波长下有最大吸收峰,通过测定该波长下的吸光度值,根据标准曲线计算样品中黄酮的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:芦丁标准品、样品(含黄酮类化合物)、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等。
2. 仪器:紫外-可见分光光度计、电子天平、容量瓶、移液管、试管等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制(1)准确称取芦丁标准品0.01g,用无水乙醇溶解,转移至100mL容量瓶中,定容至刻度,得到0.1mg/mL的芦丁标准溶液。
(2)分别取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL芦丁标准溶液于试管中,加入2.5mL 5%NaNO2溶液,混匀,放置6分钟。
(3)加入2.5mL 10%Al(NO3)3溶液,混匀,放置6分钟。
(4)加入10mL 4%NaOH溶液,混匀,用无水乙醇定容至25mL,摇匀。
(5)以无水乙醇为空白,在510nm波长下测定吸光度值。
(6)以吸光度值为纵坐标,芦丁标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线。
2. 样品测定(1)准确称取样品0.01g,用无水乙醇溶解,转移至100mL容量瓶中,定容至刻度,得到0.1mg/mL的样品溶液。
(2)按照绘制标准曲线的步骤,测定样品溶液在510nm波长下的吸光度值。
(3)根据标准曲线,计算样品中黄酮的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线根据实验数据绘制标准曲线,得到线性回归方程为:A=0.0685C+0.0035,相关系数R2=0.9988。
2. 样品测定根据标准曲线,计算样品中黄酮的含量为0.045mg/g。
六、实验结论1. 本实验成功运用紫外-可见分光光度法测定了样品中黄酮的含量,结果表明该方法准确可靠。
黄酮含量测定实验报告1. 实验目的本实验旨在探究不同食材中黄酮含量的差异,并利用比色法测定黄酮的含量。
2. 实验原理比色法是利用物质对可见光的吸收特性进行定量分析的方法。
黄酮是一类具有广泛生物活性的天然化合物,常常用作药物和食品添加剂。
黄酮的浓度可以通过其在特定波长下的吸光度来确定。
3. 实验步骤3.1 准备工作- 准备所需食材样品,如黄芩、枸杞、山楂等。
- 准备试剂:甲醇、石油醚、2N盐酸、硼酸溶液、盐酸。
3.2 提取黄酮1. 将所选食材样品粉碎,并称取3克样品。
2. 将样品加入25mL石油醚,室温条件下搅拌30分钟,以去除油脂。
3. 过滤样品,将滤液收集入锥形瓶中。
4. 再加入25mL甲醇,室温条件下搅拌30分钟,以提取黄酮。
5. 过滤后,用甲醇定容至100mL。
3.3 构建标准曲线1. 取黄酮标准品,分别称取0.1g、0.2g、0.3g、0.4g和0.5g,置于50mL锥形瓶中。
2. 分别加入25mL石油醚和25mL甲醇,按上述方法提取黄酮。
3. 过滤后,用甲醇定容至50mL,得到浓度分别为2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL和10mg/mL的黄酮溶液。
3.4 测定样品黄酮含量1. 将提取得到的样品溶液取5mL,并用甲醇定容至25mL。
2. 取适量样品溶液置于比色皿中,以甲醇为对照组。
3. 在波长为380nm的紫外可见光谱仪中测定吸光度。
4. 实验结果与分析4.1 标准曲线根据所得的吸光度数据,绘制出黄酮浓度与吸光度之间的标准曲线。
4.2 样品含量计算根据所测得的样品吸光度值,利用标准曲线可得到样品中黄酮的浓度。
5. 实验讨论与结论本实验利用比色法测定了不同食材中黄酮的含量。
通过对标准曲线的测定和样品吸光度的测量,可以准确计算出样品中黄酮的含量。
本实验的结果对于食品科学和药物研发具有重要意义。
黄酮作为一种天然化合物,具有多种生物活性,可以抗氧化、抗炎和抗肿瘤等。
因此,了解黄酮含量对于评估食材的营养价值和药物疗效具有指导意义。
一、实验目的本实验旨在通过化学和色谱方法对黄酮类化合物进行鉴定,验证样品中是否含有黄酮类成分,并对其结构进行初步分析。
二、实验原理黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然酚类化合物,具有多种生物活性。
其结构特点为含有两个苯环通过三碳链相连。
本实验采用以下方法进行鉴定:1. 紫外光谱法:黄酮类化合物在紫外光区有特征吸收峰,可通过测定其紫外光谱图进行鉴定。
2. 薄层色谱法(TLC):利用黄酮类化合物在特定溶剂中的分配系数差异,将其与其他物质分离,并通过与标准品进行对比鉴定。
3. 高效液相色谱法(HPLC):对黄酮类化合物进行定性和定量分析。
三、实验材料与仪器材料:1. 样品:茶叶、水果皮、植物提取物等。
2. 标准品:槲皮素、芦丁等黄酮类化合物。
3. 试剂:甲醇、乙酸乙酯、乙醇、浓盐酸、镁粉等。
4. 仪器:紫外可见分光光度计、薄层色谱仪、高效液相色谱仪、电子天平等。
四、实验步骤1. 紫外光谱法鉴定(1)将样品用甲醇溶解,配制成一定浓度的溶液。
(2)用紫外可见分光光度计测定溶液在200-400nm范围内的吸收光谱。
(3)与标准品的光谱图进行对比,确定样品中是否含有黄酮类化合物。
2. 薄层色谱法鉴定(1)将样品用甲醇溶解,制成一定浓度的溶液。
(2)取少量溶液点于薄层板上,并将标准品溶液点在同一薄层板上作为对照。
(3)将薄层板置于展开缸中,加入适宜的展开剂,进行展开。
(4)取出薄层板,晾干,用紫外灯照射,观察样品斑点与标准品斑点的对应关系,鉴定黄酮类化合物。
3. 高效液相色谱法鉴定(1)将样品用甲醇溶解,制成一定浓度的溶液。
(2)用高效液相色谱仪对溶液进行检测,记录色谱图。
(3)与标准品的色谱图进行对比,鉴定黄酮类化合物。
五、实验结果与分析1. 紫外光谱法结果通过紫外光谱法,样品在200-400nm范围内有特征吸收峰,与标准品的光谱图相似,表明样品中可能含有黄酮类化合物。
2. 薄层色谱法结果在薄层色谱板上,样品斑点与标准品斑点位置一致,表明样品中可能含有黄酮类化合物。
一、实验目的本实验旨在通过溶剂萃取、柱层析等方法,从植物材料中提取和分离黄酮类化合物,并对其纯度和含量进行测定,以了解黄酮类化合物的提取和分离纯化过程。
二、实验材料与仪器1. 实验材料:- 植物材料:某种富含黄酮类化合物的植物(如银杏叶、橙皮等)- 提取溶剂:乙醇、水、甲醇等- 分离材料:硅胶、氧化铝、大孔树脂等2. 实验仪器:- 热水浴锅- 烘箱- 漏斗- 筛子- 烧杯- 蒸馏装置- 分光光度计- 薄层层析装置三、实验步骤1. 提取:- 将植物材料干燥、粉碎,过筛后备用。
- 称取一定量的植物粉末,加入适量的提取溶剂,置于热水浴锅中加热回流提取。
- 提取结束后,将提取液过滤,收集滤液。
2. 溶剂萃取:- 将滤液分别用不同极性的有机溶剂(如石油醚、氯仿、乙酸乙酯等)进行萃取。
- 将有机溶剂层收集于烧杯中,水层用有机溶剂重复萃取,直至水层颜色不再变化。
3. 薄层层析:- 将分离后的有机溶剂层浓缩干燥,得到粗提物。
- 将粗提物用适当溶剂溶解,点样于薄层层析板上。
- 以不同极性的有机溶剂为展开剂,进行薄层层析。
- 观察并记录各化合物在薄层层析板上的位置。
4. 柱层析:- 将薄层层析中分离出的目标化合物,进行柱层析分离。
- 将柱层析柱装填好固定相,将目标化合物溶解于适当溶剂,进行上样。
- 用不同极性的有机溶剂梯度洗脱,收集各洗脱液。
- 对各洗脱液进行检测,确定目标化合物的位置。
5. 纯度测定:- 将分离出的目标化合物进行纯度测定,如紫外光谱法、红外光谱法等。
- 根据实验结果,确定目标化合物的纯度。
6. 含量测定:- 采用适当的方法测定目标化合物的含量,如分光光度法、高效液相色谱法等。
- 计算目标化合物的含量。
四、实验结果与分析1. 提取:- 实验结果表明,乙醇为较佳的提取溶剂,提取效率较高。
2. 溶剂萃取:- 实验结果表明,不同极性的有机溶剂对黄酮类化合物的萃取效果不同,可利用这一性质进行初步分离。
3. 薄层层析:- 实验结果表明,目标化合物在薄层层析板上的位置较明显,有助于进一步分离。
黄酮标准曲线绘制的实验报告1.总黄酮的测定1.1 实验仪器电子天平AR2140;紫外可见分光光度计UV2754;型数控超声波清洗器KQ3200DB;超级恒温槽;Rotavapor R200 旋转蒸发仪;FD21C250 冷冻干燥机21.2 试剂及药品芦丁标准品硝酸铝国产分析纯(配成5 %)亚硝酸钠国产分析纯(配成10 %)氢氧化钠国产分析纯配成(配成1mol/L)95%乙醇,无水乙醇国产分析纯(配成60%乙醇50%乙醇)DPPH·(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,二苯代苦味肼基自由基)Vc(Ascrobic acid,维生素C,抗坏血酸)没食子酸对照品:基准纯。
大青叶子采摘于海南大学东坡湖畔1.3实验步骤:1.3.1准备工作及波长的确定样品60℃烘干粉碎机粉碎,过20目筛,装入试剂瓶中备用。
根据查阅文献总黄酮在波长为510nm处吸收值最大。
1.3.2参照品芦丁标准溶液的制备精密称取120 ℃干燥至恒重的芦丁标准样品37.5mg置于100mL烧杯中,用60%乙醇溶解后定容至25mL 容量瓶中,摇匀,即可得1.5mg/mL的芦丁标准溶液。
1.3.3标准品的测量及绘制标准曲线精密吸取芦丁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL ,分别置于10mL 容量瓶中,并定容至刻度线。
得到0.0mg/ml、0.15mg/ml、0.3mg/ml、0.45mg/ml、0.6mg/ml、0.75mg/ml、0.9mg/ml的标准品溶液,分别取1ml到试管中各加5 %亚硝酸钠溶液0.3mL 摇匀,放置6min ,加10%硝酸铝溶液0.3mL 摇匀,放置6min ,加1mol /L氢氧化钠溶液4mL ,再用60%乙醇溶液稀释至刻度,放置15min 后,分别在510nm 处测定其吸光度(Tai,Cai&Dai,2011)。
(以试剂空白做参比)以吸光度A 为纵坐标,浓度c为横坐标,绘制标准曲线。
题目:黄铜实验报告学院:化学化工学院专业:生物工程学生姓名:张文实目录摘要 (2)1 绪论 (3)2 实验原理 (3)3 实验仪器和药品 (4)3.1 实验仪器 (4)3.2 实验药品 (4)4 实验过程 (4)4.1 侧柏叶中黄酮的提取及定性分析 (4)4.2 侧柏黄酮洗发香波的配制及性能定 (6)4.3 侧柏黄酮雪花膏的配制及性能测定 (7)5 结果与讨论 (7)5.1 侧柏叶中黄酮的含量 (7)5.2 侧柏叶黄酮提取物的紫外—可见分析 (8)5.3 洗发香波和雪花膏的性能测定 (9)6 结论 (10)参考文献摘要采用超声波法和索氏提取法从侧柏叶中提取黄酮类化合物。
芦丁中也含有黄酮类化合物,根据不同溶度的黄铜提取液对应不同的吸光度,作出标准曲线,得出吸光度关于浓度的方程,然后再测得侧柏提取液的吸光度,根据方程计算黄酮类化合物的含量。
黄酮类化合物主要用于激活毛母细胞和促进血液循环,使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用。
去屑止痒的机理在于抑制头发表皮细胞蜕化的速度,延迟脱落,减少脂溢性皮肤病的产生。
因此,广泛应用于洗发香波的制备中。
同时它还有很好的美白效果,可添加到雪花膏中。
关键词:侧柏;黄酮类化合物;洗发香波;雪花膏1 绪论侧柏(Platycladus orientalis)系柏科侧柏属常绿乔木,别名扁柏、香柏、片柏、片松。
喜生于湿润肥沃的山坡[1],分布于全国大部分地区。
现代医学研究证明,侧柏叶对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌、宋内氏痢疾杆菌有明显的抑制作用,能缩短出血和凝血时间,对肺炎、痢疾、高血压等多种疾病有一定的疗效。
侧柏叶的疗效作用主要是通过存在其中的黄酮类物质起作用的。
黄酮类化合物(flavonoids)是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮(flavone)结构的化合物。
它们分子中有一个酮式羰基,第一位上的氧原子具碱性,能与强酸成盐,其羟基衍生物多具黄色,故又称黄碱素或黄酮。
黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类,小部分以游离态(苷元)的形式存在。
绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物,它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方面起着重要的作用。
最初,这类物质的粗制品仅作为染料应用,20世纪20年代,国外把槲皮素、芦丁用于临床后,才引起人们的关注。
60年代末,人们发现黄酮类化合物有抗炎、抗病毒、利胆、强心、镇静和镇痛等作用。
到70年代,又发现它们有抗氧化、抗衰老、免疫调节和抗肿瘤等作用。
此外,黄酮还有明显的美白功效,其美白功效的药理作用主要在于抑制酪氨酸酶的活性,从而抑制黑色素的合成。
侧柏叶总黄酮作为美容护肤化妆品的添加剂,具有药性稳定,药力持久,对皮肤作用温和、刺激性小、安全性高、疗效显著等特点。
将其制成水包油型的乳化产品,安全性好,使肌肤自然、美白亮泽[2]。
且成本低廉,原料易得,又不会产生副作用,顺应了国际化妆品天然化、营养化、疗效化的发展趋势,具有广阔的市场前景。
在雪花膏中加入侧柏叶提取液组分,与表面活性剂等配制成美白雪花膏,是一种兼具美白、保湿功效和调理性能的天然植物功能性雪花膏。
同时,黄酮类化合物主要用于激活毛母细胞和促进血液循环,使毛发生长能力衰退的毛囊复活和促进血液循环后补充营养成分而发挥出养发、生发的作用[3]。
广泛用于洗发香波的生产中。
2 实验原理黄酮类化合物多为结晶性固体,少数(如黄酮苷类)为无定形粉末。
苷元难溶或不溶于水,易溶甲醇、乙醇、醋酸乙酯等有机溶剂。
黄酮、黄酮醇、查尔酮等平面性强的分子,难溶于水,二氢黄酮及二氢黄酮醇等非平面分子溶解度稍大。
花青素以离子形式存在,水溶度较大。
黄酮成苷后,黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中;难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。
植物有效成分种类多, 结构复杂, 溶解性能差异较大。
如侧柏叶中含有强水溶性的Vc 以及能在水和乙醇中有一定溶解性的黄酮类、鞣质类、酯溶性的挥发油等。
根据主要有效成分总黄酮与提取溶剂的溶解度参数相似相溶原理[4], 本文选用1:1乙醇-水混合溶剂提取, 增加总黄酮在溶剂中的溶解度, 以达到提高有效成分提取率的目的[5]。
3 实验仪器和药品3.1 实验仪器752N紫外可见分光光度计722S可见分光光度计数显恒温水浴锅KQ—300VDE型双频数控超声波清洗器DZTW调温电热套索氏提取器3.2 实验药品侧柏叶乙醇蒸馏水氯化铝脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES) 脂肪酸二乙醇酰胺(6501、尼纳尔) 十二烷基硫酸钠(K12) 珠光剂甘油羊毛脂乙二胺四乙酸二钠(EDTA) 苯甲酸钠柠檬酸香精色素饱和氯化钠氢氧化钾氢氧化钠硬脂酸单甘酯十八醇(十六醇) 液体石蜡4 实验过程4.1 侧柏叶中黄酮的提取及定性分析4.1.1 采样侧柏叶,洗净自然阴干后于60℃恒温烘干4h,粉碎后过筛(40目),备用。
4.1.2 提取(1)超声波法提取侧柏叶中黄酮类化合物称取5g左右的样品,按照1∶10的料液比加入50%乙醇水溶液浸泡2h,然后在70℃下超声波40Hz时超声处理40min。
趁热过滤,过滤后将滤渣再按上述方法超声处理一次,过滤,合并滤液定容250ml,测定含量。
(2)索氏提取侧柏叶中黄酮类化合物以乙醇作提取剂,称取5.0g 左右的样品,加乙醇约100mL ,浸提时间4h 。
250ml 容量瓶定容,测定含量。
(3)黄酮含量测定芦丁质量25mg 在50ml 容量定容。
浓度为0.5mg/mla 标准曲线的绘制:精密吸取芦丁对照品液 (0.5mg/ml)1、2、3、4、5ml 分别用50%乙醇稀释至10ml ,准确加入1%三氯化铝溶液1ml ,于50ml 容量瓶定容,摇匀,同法制成空白对照,在415nm 处测定吸度.以吸收度值为纵坐标,以浓度值为横坐标绘制标曲线。
数据如下:第五组溶液被污染了,舍去。
V 芦丁 1ml 2ml 3ml 4ml C (mg/ml ) 0.01 0.02 0.03 0.04 A0.1970.3850.5630.733\图1 吸光度随浓度的变化曲线A =18.32C +9.2×10-3, r = 0.99956式中: A 为吸光度, C 为芦丁的浓度(mg/mL)。
b 含量测定:精密吸取上层清液5ml ,准确加入1%三氯化铝溶液1ml ,于50ml 容量瓶定容,摇匀,同法制成空白对照,在415nm 处测定吸度A ,计算含量。
总黄酮含量% = C×稀释倍数×V/W ×100 %公式中: V —处理前溶液的体积(mL) C —芦丁溶液的浓度(mg/mL)W —侧柏叶质量(mg)4.1.3 定性分析(1)侧柏黄酮提取液稀释20倍,在50ml 容量瓶定容,在紫外可见分光光Ac度计中,测定不同波长的吸光度,并绘制吸收曲线。
按上述步骤加入1ml显色剂后,在次测定。
(2)显色反应:盐酸- 镁粉反应是鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应。
吸取定容好的提取液1ml于试管中,加入少许镁粉振摇,滴加几滴浓盐酸,1~2min即可显色。
多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显橙红至紫红色,少数显紫至蓝色。
以AlCl3为显色试剂,紫外灯下观察荧光。
以氢氧化钠为显色试剂作定性分析溶液呈棕黄色,因此可以确定侧柏叶中黄酮类化合物主要为黄酮醇类。
4.2 侧柏黄酮洗发香波的配制及性能测定表1 洗发香波的配方配方作用用量脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)乳化、去污10g脂肪酸二乙醇酰胺(6501、尼纳尔) 泡沫稳定剂,稳泡、增效、除油垢4g十二烷基硫酸钠(K12)发泡、润湿、去污3g珠光剂光亮1g甘油保湿剂2g羊毛脂营养1g乙二胺四乙酸二钠EDTA 螯合剂,与金属离子螯合使硬水软化适量苯甲酸钠防腐剂适量侧柏提取液激活毛母细胞和促进血液循环10ml柠檬酸调节pH 适量饱和氯化钠调黏度适量去离子水溶剂60g香精调香适量注意事项1)用柠檬酸调节pH值时,柠檬酸需配成质量分数50%的溶液。
2)用食盐增稠时,食盐需配成质量分数20%的溶液。
加入食盐的质量分数不得超过3%。
将一定量的脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)、脂肪酸二乙醇酰胺(6501、尼纳尔)、十二烷基硫酸钠(K12)加入250ml烧杯中,并加入30ml去离子水充分混合,再加入60ml去离子水,水浴加热80℃,缓慢加入珠光剂,溶解,灭菌40min。
降温至60℃,加入甘油、羊毛脂、EDTA、苯甲酸钠,溶解。
然后缓慢降温至室温,加入柠檬酸、香精、色素。
搅匀,调pH为6.0左右。
最后加氯化钠调节黏度。
静置得产品。
检验产品的起泡性、去污力和黏度。
4.3 侧柏黄酮雪花膏的配制及性能测定表2 雪花膏配方配方作用质量分数/%硬脂酸乳化剂,使其变成洁白的膏体15单硬脂酸甘油酯使膏体细腻润滑 1.0液体石蜡(白油)固化作用10十六醇或十八醇保湿作用 1.010.0甘油保护柔软皮肤、防止水分挥发、防止干燥氢氧化钠调黏度0.05氢氧化钾调硬度0.6苯甲酸钠防腐剂适量香精芳香剂适量蒸馏水溶剂加至100ml按配方中的量分别称量硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、白油、十六醇、和丙三醇于250mL烧杯中,水、碱和侧柏叶黄酮提取液20ml称量后加入另一250mL烧杯中。
分别加热至90℃,使物料熔化、溶解均匀。
装水的烧杯在90℃下保持20min 灭菌。
然后在搅拌下将水慢慢加入到油相中,当温度降至50℃时,加人防腐剂。
温度降至40℃加入香精,搅拌均匀。
静置、冷却至室温。
调整膏体的pH,使其在要求的范围内。
得到柔软的乳白色膏体,即成品。
注意事项(1)检验:显微镜细菌检验,对紫外吸收能力测定。
加入少量NaOH有助于增大膏体粘度,也可以不加。
(2)降温至55℃以下,继续搅拌使油相分散更细,加速皂与硬脂酸结合形成结晶,出现珠光现象。
(3)降温过程中,粘度逐渐增大,搅拌带人膏体的气泡不易逸出,因此,粘度较大时,不易过分搅拌5 结果与讨论5.1 侧柏叶中黄酮的含量在415nm处测得侧柏黄酮提取液的吸度A=0.665根据公式:A =18.32C +9.2×10-3得C=0.0358 mg/mL总黄酮含量% = C×稀释倍数×V/W ×100 %=0.0358×10×250/5000 ×100 %=1.79%5.2 侧柏叶黄酮提取物的紫外—可见分析将侧柏叶黄酮提取液,稀释20倍,50ml容量瓶定容,然后在752N紫外可见分光光度计中测定不同波长下溶液的吸光度。
根据以上数据绘制吸光度随波长变化的曲线图2 侧柏黄酮提取液的紫外—可见吸收曲线(不加显色剂)由上图可知侧柏叶黄酮提取物在270nm、360nm处各有一吸收峰。
初步推测侧柏叶中黄酮类化合物主要为黄酮、黄酮醇类(220~280, 300~400) 将侧柏叶黄酮提取液,稀释20倍,加入1ml显色剂,50ml容量瓶定容,然后在752N紫外可见分光光度计中测定不同波长下溶液的吸光度。