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肠道杆菌检验(实验)一、实验目的本实验的主要目的在于检测食品和水中的肠道杆菌，以此评估其是否达到安全要求。
通过本实验，可以了解肠道杆菌的常见特点和检测方法，培养学生科学的实验技能能力。
二、实验原理肠道杆菌是一种典型的大肠杆菌，被广泛应用于食品和水质检测中。
它主要存在于动物肠道中，也能够存在于它们的排泄物中，因此如果食品和水受到动物排泄物的污染，就会存在肠道杆菌。
通过检测肠道杆菌的存在和检测数量，可以判断食品和水的卫生质量是否达到安全要求。
肠道杆菌在营养富含的培养基上易于生长，并可以通过简单的染色方法进行检测。
常用的检测方法包括在培养基上培养并计数，或者利用PCR技术进行定量和鉴定。
三、实验步骤1. 实验准备(1) 肠道杆菌检测脱氧胆酸琼脂培养基、营养琼脂培养基、氧气酒精灯、电热板、灭菌器、微孔过滤膜、灭菌钳等。
(2) 检测器具：恒温培养箱、显微镜等。
(3) 检测样品：需要检测的食品或水样品。
2. 实验操作(1) 样品处理：对待检测的食品或水样品进行处理，如筛选、稀释等等，以达到最佳的检测效果。
(2) 复制脱氧胆酸琼脂培养基和营养琼脂培养基，用微孔过滤膜将样品过滤到培养基上，放入恒温培养箱中进行培养。
(3) 测量生长：在一定时间后，观察脱氧胆酸琼脂培养基中的菌落数量，判断是否存在肠道杆菌，并计算出菌量。
(4) 进行染色：将培养细胞染色，观察细胞形态，以鉴定是否存在肠道杆菌。
四、实验注意事项(1) 实验过程中需要注意卫生，防止污染样品。
(2) 营养琼脂培养基和脱氧胆酸琼脂培养基必须进行灭菌处理。
(3) 实验过程需要严格按照实验操作步骤进行，以免影响结果。
五、实验结果及分析通过检测食品和水中的肠道杆菌，在不同的培养基上进行培养和计数，可以判断食品和水是否满足卫生要求。
如果检测出的肠道杆菌数量较高，则说明食品或水存在严重的卫生问题，需要及时采取措施加以解决。
通过本实验可以培养学生的科学思维能力，提高其对卫生的认识和保健意识。
综合性实验一脓汁和粪便标本中病原菌的检测从临床标本中分离细菌的目的是为了查找与疾病有关的病原菌，这对于临床治疗及预后调查是很有价值的。
所以，在分离时应掌握以下原则，以便指导检出病原菌，避免漏诊误诊。
1．了解微生物在人体的分布。
人体的很多部位与外界相通，存在正常菌群，分离时应注意标本中的菌群是正常菌群的污染，还是致病菌。
另外，机体的某些部位(如血液、骨髓)是无菌的，如检出细菌，应视为致病菌。
2．了解标本来源及临床情况，以便有目的地检出病原菌。
3．根据标本来源和可能存在的病原菌确定选用各种分离培养基，以提高检出率。
如血平板可用于化脓性链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎球菌等的分离。
常见的化脓性病原菌有葡萄球菌、链球菌、淋球菌、脑膜炎球菌、肺炎链球菌、结核杆菌、假单胞菌、流感杆菌等。
脓汁标本在做细菌分离培养的同时，均须直接涂片检查，观察是否有典型形态的菌体，芽胞有无，为临床提供最初的诊治依据。
粪便标本中常含有很多杂菌，应根据检验目的菌的不同而选择培养基(如SS、伊红美蓝平板，碱性蛋白胨水)，尽可能地抑制杂菌，以利于病原菌的检出。
粪便标本中常见的病原菌有志贺氏菌属、致病性大肠杆菌、弧菌属、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌等。
粪便标本中因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形态无法分辩是否为病原菌，因此，粪便标本一般不作直接涂片检查，只有检查霍乱弧菌、结核杆菌、疑似葡萄球菌或艰难梭菌引起的伪膜性肠炎，以及菌群失调时，才作直接涂片检查。
细菌鉴定工作的原则及基本方法是：1、必须用纯的细菌培养物作鉴定。
因为不同的细菌生化反应结果相差较大，而反应结果是以阳性或阴性表示的，一旦用混合菌做生化反应，结果不可分析。
2、鉴定方法的选择。
测定细菌特征的实验方法很多，应根据鉴定目的选择有价值的、快速简便的试验项目，既能完成鉴定，试验项目又尽可能少。
一、培养基的制备Preparation of Culture Media【实验目的】1了解细菌生长的基本营养条件。
化脓性球菌、粪便标本肠道致病菌的鉴定流程下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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肠道病原菌的分离与鉴定实验报告摘要本实验旨在分离、鉴定肠道病原菌，并深入了解肠道病原菌对人们健康的影响。
本实验采用选择性培养基和生化试剂对样品进行处理和鉴定，最终成功分离出大肠杆菌、沙门菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等肠道病原菌。
引言肠道病原菌是导致肠胃疾病的主要病因之一。
一些细菌和病毒都可引起肠道感染，导致腹泻、呕吐、腹痛等不适症状。
有些肠道病原菌很难通过常规的培养方法进行分离和鉴定，因此对于其鉴定至关重要。
在临床和实验室中，肠道病原菌的鉴定是非常重要的。
在本实验中，我们将通过选择性培养基和生化试剂来分离和鉴定肠道病原菌。
材料与方法实验所需材料：-食品样品（牛肉、猪肉、家禽产品等）-选择性培养基（MacConkey agar, SS agar, XLD agar）-氯霉素（50μg/ml）-β-半乳糖苷酶-生化试剂（甲基红、青田霉素、麦芽糖、尿素、甲酸氢钠、甲酸亚铁、碳酸氢铵、硫代硫酸钠、氧化亚铁、硫酸铜、氯化铵、硝酸钴、聚苯乙烯乳胶、过氧化氢）实验步骤：1. 食品样品的处理：将样品切成小块，加入100 ml的含氯霉素（50μg/ml)的生理盐水中，放在室温下搅动10分钟，再将悬浮液离心10分钟，取沉淀制备10倍连续稀释液备用。
2. 分离培养：取三个不同的选择性培养基MacConkey agar、SS agar和XLD agar，分别接种均匀悬浮液并用无菌环展开，然后使其在37℃恒温箱中孵化24小时。
3. 生化识别：观察菌落的形态、颜色和表面涂膜，并用生化试剂行革兰染色、甲基红反应、青田霉素试验、尿素酶试验、甲酸氢钠氧化试验、甲酸亚铁还原试验、碳酸氢铵水解试验、硫代硫酸钠还原试验、氧化亚铁试验、硫酸铜凝集试验、氯化铵水解试验、硝酸钴试验、聚苯乙烯乳胶凝聚试验和过氧化氢试验，根据结果进行分类鉴定。
结果经过实验分离和鉴定，本实验成功分离出大肠杆菌和沙门菌等常见的肠道病原菌，并且还分离出一株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。
项目9：常见病原菌的病原学检查【目的要求】掌握常见病原菌的检查方法和结果观察。
【实验内容】一、 常见化脓性球菌的检查（一）化脓性球菌的病原生物学检测程序在临床上，一般化脓性感染的诊断并不困难，有时为了确定病原菌种，选择用药，特别是疑似败血症患者须与其它发热性疾病进行鉴别诊断时，方进行必要的微生物学检查。
本实验通过脓汁病原菌检查这一系统实验过程，初步掌握化脓性球菌的检查程序和鉴定方法。
脓汁中病原球菌的检查程序 脓 汁↓ 肉眼观察直接涂片 分离培养（血琼脂平板）↓革兰氏染色 菌落观察 革兰氏染色大小 溶血现象 - +肾形 成 对 排列【材料】①脓汁(取自可疑化脓性球菌感染病人)或血液(取自可疑为败血症病人)不溶血草绿色溶血环透明溶血环矛头状成对排列球形链状排列球形葡萄状排列菊糖发酵试验胆汁溶菌试验甘露醇发酵试验血浆凝固酶试验②血琼脂平板③革兰氏染色液④家兔血清⑤去氧胆酸钠溶液(10％)⑥生理盐水⑦载物玻片，小试管等。
【方法】1．标本采集①一般用无菌棉棒(拭子)采取脓汁及病灶分泌物。
②取材如遇深部脓肿时，用碘酒及酒精棉球消毒患部皮肤，然后再以无菌棉拭子采取溃疡深处的分泌物。
③采取脓肿处的脓汁，如怀疑有厌氧菌，最好用注射器抽取脓汁立即送检。
④标本采取后应及时检查，如不能立即检验应置冰箱中保存，以防杂菌污染。
⑤对可疑为败血症的病人，按无菌操作采血5ml，立即注入葡萄糖肉汤培养基内增菌，12～18h后再作分离培养。
2．肉眼观察观察脓汁性状、色调、有无恶臭气味等，如脓汁带绿色时，可能有绿脓杆菌的感染，如有恶臭气味可能有厌氧菌感染。
3．染色镜检将脓汁直接涂片用革兰氏染色观察细菌形态、排列及染色性，在涂片上通常可见到革兰氏阳性暗紫色的球菌散在于蔷薇色的白细胞之间或其中。
4．分离培养将脓汁(或血液增菌材料)划线接种于血琼脂平板上，置37℃培养18—24h，观察划线上的菌落是一种或几种，有无溶血环，从菌落中选最适于钓菌的代表菌落观察，并用接种环取菌落的一部分作涂片，革兰氏染色，镜检，观察形态及染色性，结合菌落特点及涂片检查，即可初步识别。
