激素溶解方法
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常用激素溶解方法
1、吲哚乙酸(IAA):溶于乙醇、热水、碱性溶液,碱性溶液中稳定;一般使用95%酒精、NaOH溶液溶解;
2、吲哚丁酸(IBA):溶于乙醇、热水、碱性溶液,碱性溶液中稳定;一般使用95%酒精、NaOH溶液溶解;
3、萘乙酸(NAA):溶于乙醇、碱性溶液;一般使用95%酒精或NaOH溶液溶解;
4、玉米素(ZT):溶于乙醇或碱性溶液;一般使用95%酒精或NaOH溶液溶解
5、6-苄基氨基嘌呤(6-BA):溶于碱性溶液或酸性溶液;一般使用0.1molHCl或NaOH溶液溶解;
6、赤霉素(GA3):溶于乙醇,使用95%酒精溶解
备注:生长素一般使用95%乙醇或NaOH 溶解;
分裂素一般使用NaOH溶液、95%乙醇或稀HCl溶解;。
1)0.1 %升汞的配制方法:
称取0.5 g升汞粉末,加入少量浓HCL(1 M)溶解,然后定容至500 ml容量瓶中
2)0.5 mg/ml 6-BA:
用少量1 mol/L的NaOH溶解,然后定容至容量瓶中
3)0.5 mg/ml NAA:
用少量1 mol/L NaOH溶解,然后定容至容量瓶中
4)0.5 mg/ml 2,4-D:
用少量1 mol/L 少量95 %乙醇溶解,然后定容至容量瓶中
5)1 mg/mlTDZ
用少量1 mol/L NaOH溶解,然后定容至容量瓶中
6)Picloram
以无菌水溶解后过滤灭菌
7)IBA 配制0.2 mg/ml
用95 %酒精溶解,再用蒸溜水稀释后分别配制成0.2 mg/ml的母液。
要注意,配制时,要把溶解有IBA的酒精倒入水中,不要把水倒入溶解有IBA的酒精中,否则会引起沉淀。
发生沉淀后不可使用。
8)1 mg/ml 6-KT的溶解方法
用少量1 mol/LNaOH溶解,然后用蒸馏水稀释。
激素的测定方法参考王学奎(2015)《植物生理生化实验原理与技术》一书中的高效液相色谱法,以2016年采自尚志市水稻田的野慈姑球茎为材料,6-12月每个月测定一次野慈姑球茎内CA3和ABA的含量。
试验材料的处理称取1-2g样品,在冰浴下研磨匀浆,加入80%的预冷甲醇20ml,保鲜膜密封,在4℃冰箱里冷浸过夜。
浸提液抽滤,10ml甲醇润洗研钵2次,过滤后与浸提液合并,40℃下减压蒸发至没有甲醇残余。
剩余水相完全转移到三角瓶中,用30ml石油醚萃取脱色2次,弃去醚相。
加0.01gPVPP(交联聚乙烯吡咯烷酮,crosslinked polyvinylpyrrolidone),超声30mim,抽滤用30ml,乙酸乙酯萃取3次,合并酯相,40℃下减压蒸干。
用甲醇(色谱纯)溶解残留物并定容至2ml,经0.45μm微孔滤膜过滤得待测液,保存于4℃冰箱中。
测定(1)标准曲线的绘制取一定量GA3和ABA标准品,用甲醇(色谱纯)溶解,配制成不同浓度的溶液,点击“运行控制”菜单,再选择“运行方法”,手动或自动进样器进样10-30μL,进行液相检测分析。
在一定浓度范围内,4种激素峰面积与浓度呈良好线性关系时,即可绘制标准曲线。
(2)取同样体积的待测样品,进样。
待样品峰全部出完,冲洗30min待基线平直后,即可分析下一个样品。
(3)定性根据标准品的保留时间判断样品中的对应激素峰。
选择与已知标样具有相同保留时间的样品的峰面积,并根据对应的标准曲线查出对应激素的浓度ρ(μg/mL),然后根据下式计算鲜样(FW)中各激素的含量:样品中激素含量(μg/kg FW)=ρ·V Tm·V S式中:ρ为根据样品峰面积从标准曲线查得的对应激素浓度(μg/mL);V T为待测样总体积(mL);V S为进样量(μL);m为样品鲜质量(g)。
培养基母液的配制(一)激素母液由于多数生长调节物质难溶于水,因此配法各不相同,激素母液可以在2~4℃冰箱中保存。
在配制药品前,应准备好一定容积的小烧杯、玻璃棒,用纯净水冲洗干净方可使用:1、IAA、IBA、GA3、ZT可先用少量95%酒精溶解,再加水定容,摇匀后贮于试剂瓶中,贴上标签。
2、2,4-D、KT、可用少量10%的Noah溶解,再加水定容。
3、6-BA可用少量1mol/LHCl溶解后,再加水定容。
4、NAA可溶于热水或少量95%酒精中,再加水定容至一定体积。
5、1mg/ml的2.4-D的配制:称取0.1g2,4-D,用少量1mol/LNaOH 溶解,然后定容到100ml容量瓶中。
6、1mg/ml的6BA的配制:称取0.1g6-BA,用少量1mol/LNaOH 溶解,然后定容到100ml容量瓶中。
7、1mg/ml的NAA的配制:称取0.1gNAA,用少量95%酒精助溶,然后定容到100ml容量瓶中。
8、1mol/L的HCl的配制:量取83.3ml盐酸加水稀释定容至1L。
(一般、组培室用量少,配制500ml即可,即:称取盐酸41.65ml 稀释定容至500ml。
配制盐酸时。
需要带口罩、戴手套。
)9、10%的NaOH的配制:称取10gNaOH,加少量纯净水溶解,然后定容到100ml容量瓶中。
10、HgCl2 的配制:称量1g的HgCl2,加热水后进行溶解定容至1L。
二、培养基配制配错培养基造成的危害比组培技术中其他任何失误都大。
因此,配制培养基和称取其他成分必须绝对小心。
为了降低配错培养基的风险,最好准备一张纸,详细地写出配制培养基过程中所需的成分和配置步骤。
每配完一种成分或配完一种母液,划掉相应的记录。
1、一般而言,分化配方的配制:除萱草琼脂为5.5g/L外,其它植物为琼脂5g/L。
白糖为30g/L。
母液粉为4.74g/L。
用自己配制的母液配培养基时,大量母液(1号)50ml/L,微量(2~5号为5 ml/L)。
中国药典收载的甾体激素类药物的含量测定方法中国药典收载的甾体激素类药物的含量测定方法有以下几种:
1. 容量法:适用于甾体激素类药物的水或乙醇溶解度的测定。
具体测定方法包括蒸馏法和溶剂提取法等。
2. 光谱分析法:适用于甾体激素类药物的光谱分析法,如紫外 - 可见分光光度法、红外光谱法和核磁共振法等。
3. 色谱分析法:适用于甾体激素类药物的色谱分析法,如高效液相色谱法、气相色谱法和凝胶色谱法等。
4. 化学分析法:适用于甾体激素类药物的化学分析法,如酸碱中和法、氧化还原法、盐析法等。
以上方法均可用于甾体激素类药物的含量测定,但具体使用方法应根据药物的性质和测定要求进行选择。
同时,中国药典还收录了一些甾体激素类药物的质量标准和规范,以确保药品的质量和安全性。
高效液相色谱法快速分析植物内源性激素植物内源性激素在植物生长和发育过程中起着重要的调节作用。
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)作为一种先进的分析技术,被广泛地用于植物内源性激素的定量分析和研究。
通过快速、准确地分析植物内源性激素,我们可以深入了解植物的生长和发育调控机制,为农业生产和植物育种提供重要的理论指导和实践应用。
一、植物内源性激素的概述植物内源性激素是一类在植物体内合成和调节生长发育的化合物,包括生长素、赤霉素、脱落酸、激素酮、保护素和亚硫酸氨基酸等。
它们在调节植物生长和发育过程中发挥着不可或缺的作用,如控制细胞分裂和伸长、调节根系和茎的形态发育、调控开花和果实发育等。
了解植物内源性激素的合成、分布和调控机制对于揭示植物的生长发育规律具有重要意义。
二、高效液相色谱法在植物内源性激素分析中的优势高效液相色谱法是一种在液相中进行分离和测定的分析技术,具有分离能力强、选择性好、分析速度快以及样品处理简单等优点,因此被广泛应用于植物内源性激素的定量分析中。
与传统的色谱方法相比,高效液相色谱法具有以下几个优势:1.分离能力强:高效液相色谱法能够有效地将混合样品中的激素物质分离出来,得到高纯度的化合物。
这一点对于复杂的植物组织和生理液体样品分析尤为重要。
2.选择性好:高效液相色谱法能够通过调整色谱柱、流动相和检测器等条件,实现对不同内源性激素的选择性分离和测定,从而提高了分析的准确性和可靠性。
3.分析速度快:高效液相色谱法具有快速分析的特点,一般可以在几分钟到几十分钟内完成一次分析,提高了实验效率。
4.样品处理简单:高效液相色谱法在样品处理时通常只需简单的提取和净化步骤,可以大大简化实验过程,提高了实验效率。
三、高效液相色谱法快速分析植物内源性激素的方法高效液相色谱法快速分析植物内源性激素的方法主要包括激素提取、净化和检测。
根据不同植物内源性激素的特性和含量,可以选择不同的样品处理方法和色谱条件。
常用激素溶解方法
1、吲哚乙酸(IAA):溶于乙醇、热水、碱性溶液,碱性溶液中稳定;一般使用95%酒精、NaOH溶液溶解;
2、吲哚丁酸(IBA):溶于乙醇、热水、碱性溶液,碱性溶液中稳定;一般使用95%酒精、NaOH溶液溶解;
3、萘乙酸(NAA):溶于乙醇、碱性溶液;一般使用95%酒精或NaOH溶液溶解;
4、玉米素(ZT):溶于乙醇或碱性溶液;一般使用95%酒精或NaOH溶液溶解
5、6-苄基氨基嘌呤(6-BA):溶于碱性溶液或酸性溶液;一般使用0.1molHCl或NaOH溶液溶解;
6、赤霉素(GA3):溶于乙醇,使用95%酒精溶解
备注:生长素一般使用95%乙醇或NaOH 溶解;
分裂素一般使用NaOH溶液、95%乙醇或稀HCl溶解;。