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血细胞化学染色简单记1.过氧化酶染色：检测过氧化酶。
胞质中无颗粒为阴性，出现细小颗粒分布稀疏为弱阳，出现密集粗大颗粒为强阳性。
强阳性（嗜酸性粒细胞）、弱阳或阴（单核粒细胞）、阴性（淋、红、巨、浆、嗜碱）；临床意义：辅助诊断急淋非急淋、鉴别急淋急粒。
注意：（1）过氧化物酶染色急性粒细胞白血病为阳性，急性淋巴细胞白血病是阴性。
（2）粒细胞中原始粒细胞是阴性，嗜碱性粒细胞是阴性。
2.过碘酸-雪夫反应：检测糖类物质。
胞质中出现紫红色颗粒、块状或弥漫状红色为阳性反应。
阳性（淋、粒、单、巨、血小板）（嗜酸特异颗粒间胞质为阳性、嗜碱粒细胞特异颗粒为阳性）阴性（分化差的原粒、幼红和红）。
临床意义：红白血病和骨髓异常增生综合征时幼红可呈阳性反应，良性贫血幼细胞多数为阴性。
戈谢细胞为强阳性，尼曼-匹克细胞呈阴性。
注意：（1）急性粒细胞白血病为阴性，急性淋巴细胞白血病是阳性。
（2）戈谢细胞为阳性，尼曼-匹克细胞为阴性。
3.碱性磷酸酶染色：只有中性粒细胞为阳性，临床意义碱性磷酸酶（NAP）的生理及病理增多减少。
注意：（1）慢性粒细胞白血病积分降低，类白血病积分升高。
4.氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色：阴性或弱阳（原粒、嗜酸）；阳性或强阳（早幼粒至成熟中幼粒、嗜碱）。
临床作用：急粒为阳性、急单和急淋为阴性。
注意：（1）该染色是粒细胞特异性染色。
5.α-醋酸萘酚酯酶染色：阴性或弱阳（粒系、淋巴系、红系）；阳性（单核系、巨核、血小板）注意：（1）所有抑制试验中只有单核细胞会受抑制，所有可以用来鉴别粒细胞白血病和单核细胞白血病。
6.醋酸AS-D萘酚酯酶染色：基本同与α-醋酸萘酚酯酶染色。
注意：（1）同α-醋酸萘酚酯酶染色。
《临床血液学与血液检验》教学大纲编写单位：西安医学院医学技术系临床检验教研室编写时间：2008年6月20日教务处印制2008年6月20日一、课程简介二、学时分配表第一章血液学概述和发展史[教学目标与要求]掌握：血液学、临床血液学、血液检验的定义。
了解：血液学的概述及发展史。
[教学时数] 1学时[教学内容]第一节概述详细讲解第二节血液学发展史一、血细胞的认识（一）血细胞数量的检测（二）红细胞的认识（三）白细胞的认识1．对粒细胞的认识2．对单核细胞的认识3．对淋巴细胞和浆细胞的认识一般讲解二、血栓与止血的认识三、骨髓干细胞与造学调控的认识（一）造血干细胞的认识（二）骨髓间质干细胞的认识（三）造血调控的认识第二章血液学与临床的关系[教学目标与要求]了解：血液检验与循证医学的关系，血液学与疾病、检验的关系。
[教学时数] 1学时[教学内容]第一节血液学与疾病的关系一、血液病合并非血液系统疾病二、非血液系统疾病合并血液病三、血液制品的临床应用第二节血液学与检验的关系一般讲解一、血液学检验的任务二、检验医师的责任第三节血液检验与循证医学的关系一、循证医学二、血液检验与循证医学的关系第三章造血检验的基础理论[教学目标与要求]掌握：1.血细胞增殖及发育成熟的一般规律；（五号宋体字）2. 造血微环境、造血干、祖细胞的定义及特点。
熟悉：1．出生后骨髓造血特点,造血微循环定义；2．造血干细胞、造血祖细胞的特点；3．造血正向调控及负向调控因子的种类，常见调控因子的作用；4．细胞调亡的定义。
了解：1．胚胎期造血特点,造血微循环作用；2．造血的基因调控，其它各种造血正向调控及负向调控因子的作用；3．细胞调亡的特征及机制。
[重点]1.血细胞增殖及发育成熟的一般规律；2. 造血微环境、造血干、祖细胞的定义及特点。
{难点]1. 血细胞增殖及发育成熟的一般规律；2. 造血的调控。
[教学时数] 2学时[教学内容]第一节造血器官一、胚胎期造血器官（一）中胚叶造血一般讲解（二）肝脏造血（三）骨髓造血二、出生后造血器官（一）骨髓造血1．红骨髓2．黄骨髓（二）淋巴器官造血详细讲解 1．胸腺2．脾3．淋巴结（三）髓外造血第二节造血微环境一、骨髓微血管系统二、骨髓基质细胞及其分泌因子三、骨髓的神经第三节造血干（祖）细胞及骨髓间质干细胞一、造血干细胞和造血祖细胞1．造血干细胞2．造血祖细胞二、骨髓间质干细胞第四节血细胞的发育与成熟一、血细胞的发育二、血细胞发育成熟的一般规律（一）血细胞的命名（二）血细胞发育成熟的一般规律第五节造血的调控一、造血的基因调控（一）原癌基因（二）抑癌基因（三）信号转导的调控二、造血的体液调节（一）造血的正向调控因子（二）造血的负向调控因子第四章造血检验的基本方法第一节血象和骨髓象检验[教学目标与要求]掌握：1.正常血细胞形态学特点；（五号宋体字）2. 血象和骨髓象的检验方法及分析内容和方法；3．骨髓片报告的正确填写；4．正常骨髓像的特点。
细胞化学染色检验摘要】细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成的一门科学。
它以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质(酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等)作定性、定位、半定量分析的方法。
【关键词】血液细胞染色检验过氧化物酶(peroxidase，POX)染色方法有Washburn法、四甲基联苯胺法和改良的Pereira染色法等。
前者曾是最为常用的方法，但由于其底物联苯胺具有致癌性，故现常用后两者，下面分别介绍这两种方法的原理。
四甲基联苯胺法粒细胞和部分单核细胞的溶酶体颗粒中含有过氧化物酶，POX能分解 H2O2而释放出新生氧，使四甲基联苯胺氧化成联苯胺蓝，后者与亚硝基铁氰化钠结合，再进一步氧化形成稳定的蓝色物质，沉淀于酶活性的细胞质内。
改良的Pereira染色法粒细胞和部分单核细胞中POX能分解H2O2而释放出新生氧，使碘化钾氧化生成碘，碘再与煌焦油蓝作用形成蓝绿色沉淀，定位于酶活性的细胞质内。
1 苏丹黑染色原理苏丹黑B(Sudan black B，SBB)是一种脂溶性重氮染料，能溶解于细胞内的含脂结构(如中性脂肪、磷脂、糖脂和类固醇)中，而使脂类物质显示出来，呈棕黑色或深黑色。
脂类物质在粒细胞中丰富，单核细胞中也有少量。
2 中性粒细胞碱性磷酸酶染色原理中性粒细胞碱性磷酸酶(neutrophilic alkaline phosphatase，NAP)染色的方法有G0mori钙-钴法和Kaplow偶氮偶联法，因为钙-钴法操作较为繁琐且所需时间长，而偶氮偶联法的试剂盒操作方便，染色时间短，故目前国内常用偶氮偶联法。
Kaplow偶氮偶联法成熟中性粒细胞碱性磷酸酶在pH 9.6左右的碱性环境中，能水解基质液中的磷酸萘酚钠底物，释放出萘酚，后者与重氮盐偶联，生成不溶性的有色沉淀，定位于细胞质酶活性所在之处。
不同的底物与重氮盐的组合不同，化学反应过程以α-醋酸萘酚钠为例。
3 酸性磷酸酶染色原理酸性磷酶(acid phosphatase，ACP)存在于细胞的溶酶体颗粒中，有的细胞中酸性磷酸酶耐酒石酸，故抗酒石酸酸性磷酸酶染色有助于某些疾病的诊断及鉴别诊断。
2017 第四章血细胞化学染色的临床应用一、A11、采用过氧化物酶染色鉴别急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的主要鉴别点是A、急性粒细胞白血病阳性颗粒呈弥散分布，急性淋巴细胞白血病阳性颗粒呈局灶分布B、急性粒细胞白血病阳性颗粒较多且粗大，急性淋巴细胞白血病阳性颗粒较小且细小C、急性粒细胞白血病阳性颗粒较小且细小，急性淋巴细胞白血病阳性颗粒较多且粗大D、白血病性原始粒细胞呈阴性反应，原始、幼稚淋巴细胞均呈阳性反应E、白血病性原始粒细胞呈阳性反应，原始、幼稚淋巴细胞均呈阴性反应2、过氧化物酶染色呈阴性的细胞是A、早幼粒细胞B、中性中幼粒细胞C、淋巴细胞D、嗜酸性粒细胞E、单核细胞3、过氧化物酶染色阳性反应程度最强的是A、中性分叶核粒细胞B、嗜酸性粒细胞C、嗜碱性粒细胞D、单核细胞E、淋巴细胞4、过氧化物酶染色结果显示“颗粒较粗，局灶分布”，结果判断应为A、（－）B、（＋）C、（＋＋）D、（＋＋＋）E、（＋＋＋＋）5、属于细胞化学染色的是A、瑞氏染色B、革兰染色C、墨汁染色D、抗酸染色E、铁染色6、过氧化物酶染色中，被初生态氧氧化的物质是A、酒石酸B、重氮盐C、过碘酸D、四甲基联苯胺E、亚铁氰化钾7、关于氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色，下列概念不正确的是（）。
A、其活性随粒细胞的成熟而增强B、淋巴细胞、浆细胞和幼红细胞均呈阴性C、单核细胞为阴性，个别呈弱阳性D、急性粒细胞白血病原始细胞多呈阳性E、原粒细胞为阴性反应或阳性反应，自早幼细胞至成熟中性粒细胞均为阳性反应8、中性粒细胞碱性磷酸酶积分（NAP）在下列疾病的鉴别中，哪项是不正确的（）。
A、慢粒时NAP积分明显降低，而类白血病时则明显升高B、急淋时NAP积分明显降低，而急粒时则明显升高C、PNH病时NAP积分明显降低，而再障时则明显升高D、真性红细胞增多症时NAP积分明显升高，而继发性红细胞增多症时NAP无明显变化E、骨髓增生异常综合征，NAP积分值减低，骨髓纤维化NAP可增高9、最适宜用于鉴别原粒和原淋的细胞化学染色是（）。
《临床血液学检验》课程教学大纲[课程概述]临床血液学检验是采用各种实验方法和技术分析研究血液和造血器官的病理变化，以阐明血液系统疾病的发生机制，用于造血系统疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后监测的一门科学。
血液学检验既属于血液学范畴，又是检验医学的一个分支，是检验医学的主干课程之一。
近十年来，血液学基础理论研究随着实验手段的不断更新而迅速发展，而实验性很强的血液学，也越来越多的引进各种新的检验项目或赋予基础检验以新的评价。
作为一门理论与实践相结合的课程，临床血液学检验设置在检验医学专业必修课程中，其目的是使该专业的学生掌握血液学检验的基本理论、基本知识和基本技能，为今后临床工作打下坚实的基础。
通过本课程的学习，要求学生能够掌握本门课程的基本理论知识，熟悉临床血液学相关基础知识；同时掌握血细胞的正常形态和常见血液病的检验方法及血液学特点，能对常见血液病作出初步诊断结论。
[课程目标]设置本课程的具体目标是：临床血液学检验的任务是利用血细胞的检验技术，超微结构技术、病理学技术、生物化学技术、免疫学技术、分子遗传学技术、生物遗传工程、细胞生物学及分子生物学技术以及其他多种技术，对血液系统疾病和非血液系统疾病所致的血液学异常进行基础理论的研究和临床诊治的观察，从而促进血液学和临床血液学的发展和提高，推动了血液病学研究向更高层次迈进。
学生需要经过基础医学、临床医学和实验医学的专门学习和培养，不仅要有熟练的实验医学技能，正确掌握各项有关血液病诊断和反映病情的实验；适应血液学的发展，建立有关新实验，还要有一定程度的基础医学和临床医学知识，为血液病做出诊断。
该课程共分四篇：造血细胞及其检验、红细胞疾病及其检验、白细胞疾病及其检验和血栓与止血及其检验。
它是以血液学的理论为基础，以检验的实验方法为手段，以临床常见的血液病为主线，创建了一个理论-检验-疾病相结合、紧密联系的新体系，且在实践过程中不断发展、完善和提高。
第四章血液分析仪及其临床应用考纲·检测原理·检测参数·血细胞直方图·方法学评价·临床应用检测原理（一）电阻抗法（库尔特原理）1.库尔特原理将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中，将小孔管插进细胞悬液中。
小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。
当接通电源后，位于小孔管两侧的电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔（直径＜100μm，厚度约75μm）向小孔管内部流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出血液中血细胞数量和体积值。
2.白细胞分类计数原理根据电阻抗法原理，经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时，脉冲大小不同，将体积为35～450fl白细胞分为256个通道。
3.血红蛋白测定原理当稀释血液中加入溶血剂后，红细胞溶解并释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形第 1 页共11 页成一种血红蛋白衍生物，在特定波长（530～550nm）下比色，吸光度变化与稀释液中Hb含量成正比，最终显示Hb浓度。
如含氰化钾的溶血剂，与血红蛋白作用后形成氰化血红蛋白，其最大吸收峰接近540nm。
（二）光散射法血液分析仪检测原理1.白细胞计数和分类计数原理（1）激光与细胞化学法（2）容量、电导、光散射法（3）电阻抗与射频法（4）多角度偏振光散射（MAPSS）法2.红细胞检测原理3.血小板检测原理4.网织红细胞计数原理（1）激光与细胞化学法1）过氧化物酶检测通道：2）嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道血液与酸性表面活性剂反应，不仅红细胞溶解，而且除嗜碱性粒细胞外，其他所有白细胞膜均被破坏，胞质溢出，仅剩裸核。
当激光束照射到细胞时，产生不同强度的散射光，形成二维细胞图，其中，嗜碱性粒细胞呈高狭角散射，定位于细胞图上部，裸核细胞则位于细胞图下部。
第一篇绪论第一章血液学概述和发展史第一节血液学概述一、血液学(hematology)是医学科学的一个独立分支。
研究对象：血液和造血组织（如骨髓）。
研究内容：1、血细胞形态学：血液骨髓有形成分形态。
2、血细胞生理学：研究细胞来源、增殖分化的功能。
3、血液生化学：研究血细胞组成、结构、代谢和血浆成分。
4、血液免疫学：研究细胞免疫和体液免疫。
5、遗传血液学：研究血液遗传方式和信息传递。
6、血液流变学：研究血液流动性和血细胞变形性。
7、实验血液学：研究实验技术和建立实验方法。
二、临床血液学(clinical hematology)是以疾病为研究对象、基础理论与临床实践紧密结合的综合性临床学科。
主要研究来源于血液和造血组织的原发性血液病以及非血液病所致的继发性血液病。
重点研究血细胞（如白血病）、造血组织（如再障）、出血倾向（如血友病）和血栓栓塞（如深静脉血栓形成）等的致病原因、发病机制、临床表现和诊治措施等。
三、临床血液学和血液检验(clinical hematology and hematologic examinations)两者有机地结合起来，以血液学的理论为基础，以检验学的实验方法为手段，以临床血液病为工作对象，是临床和实验技术紧密结合的综合性医学应用科学。
近20年来，医学分子生物学的进展全面推动了血液分子细胞生物学的发展，使认识和诊断疾病从原来的细胞水平上升到亚细胞，到目前的分子水平。
本课程主要学习血液和骨髓中血细胞形态学和各种血液病的细胞学诊断，以及溶血、出血和血栓性疾病的病理和生理和实验室诊断与治疗监测的方法。
第二节血液学发展史历史：1616年：Harvey发现人体血液循环；1590年：Jansen发现显微镜；1673年：Leeuwwonhook发现RBC；1749年：发现WBC；1842年：Donne发现Pt；1852～1878年：Vievordt、Gramer govers发明血细胞计数、Hb测定。
医学检验学基础知识：血细胞化学染色小结医学检验血液学是医疗卫生事业单位招聘考试中出题率相对较高的内容，其中血细胞化学染色可以说是血液学中的难点及重点,考试中很容易出题，它的各个试验多且内容繁杂,不容易记忆,同学们也很容易混淆的地方，今天今天帮助大家梳理，以便大家更好地复习和记忆。
常用的血细胞化学染色有过氧化酶染色(POX),过碘酸-雪夫反应(PAS)，碱性磷酸酶染色(NAP)，氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色(AS-D-NCE)，-醋酸萘酚酯酶染色( -NAE)，碱性-丁酸萘酚酯酶染色( -NBE)，铁染色。
结果判断:结果阳性：1.POX:棕黑色颗粒2.PAS：红色颗粒块状呈弥漫状红色3.NAP：灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀4.AS-D-NCE:红色沉淀5. -NAE：棕黑色颗粒沉淀6. -NBE：蓝色颗粒7.铁染色：弥散蓝色，颗粒状，小珠状或块状正常血细胞的染色反应：1.POX：粒细胞系统：绝大部分(+)单核细胞系统：可(-)/(+)淋巴细胞系统：(-)2.NAP：粒细胞系统：绝大部分(+)单核细胞系统：绝大部分(+)淋巴细胞系统：绝大部分(-)3.NAP：除了巨噬细胞(+)，其他都(-)4.AS-D-NCE：粒细胞系统：原始粒细胞绝可(-)/(+)，大部分(+) 单核细胞系统：绝大部分(+)淋巴细胞系统：(-)5. -NAE：粒细胞系统：绝大部分(+)单核细胞系统：原始单细胞绝可(-)/弱(+)，其他(+)淋巴细胞系统：绝大部分(-)6. -NBE：粒细胞系统：(-)单核细胞系统：绝大部分(+)淋巴细胞系统：B淋巴(-)，其他(+)7.铁染色：细胞外铁：大多(++)临床意义：1.POX:鉴别急性白血病2.PAS：白血病分型3.NAP:主要慢性粒细胞白血病与类白血病的鉴别：慢性粒细胞白血病：NAP积分值常为0类白血病：NAP积分值明显增高4.AS-D-NCE:急性粒细胞白血病(+)，急单急淋(-)5. -NAE：急粒大部分(-)不能被NAF抑制;急单大部分(+)能被NAF抑制;急淋大部分(-)6. -NBE：与-NBE染色的临床意义相同7.铁染色：诊断缺铁性性贫血。
临床检验技术师《基础知识》考前点题卷二[单选题]1.正常人每日排出的总尿量为A.5～6（江南博哥）LB.4～5LC.3～4LD.1～2LE.0.5L以下参考答案：D参考解析：成人每日排尿总量为1～2L。
儿童：按儿童每公斤体重计排尿量。
掌握“第七章尿理学检验1”知识点。
[单选题]2.PT测定使用的真空采血管盖子颜色是A.红色B.紫色C.绿色D.蓝色E.黑色参考答案：D参考解析：蓝色采血管中含有枸橼酸钠抗凝剂，用于凝血检查（PT、APTT、因子测定）。
掌握“第一章血液样本采集和血涂片制备3,4”知识点。
[单选题]3.属于在蔬菜中提取的酶是A.ALPB.脲酶C.葡萄糖氧化酶D.HRPE.β半乳糖苷酶参考答案：D参考解析：辣根过氧化物酶（HRP）来源于蔬菜植物辣根中，分子量40kD，是由无色的糖蛋白（主酶）和亚铁血红蛋白（辅基）结合而成的复合物。
掌握“第九章酶免疫技术的特点2”知识点。
[单选题]4.类白血病按细胞形态分型最常见的是A.浆细胞型B.单核细胞型C.淋巴细胞型D.嗜酸粒细胞型E.中性粒细胞型参考答案：E参考解析：类白血病反应，中性粒细胞型：此型最常见。
粒细胞显著增多，白细胞总数超过50×109/L，可伴有中幼粒、早幼粒甚至原粒细胞出现。
中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）积分显著增高。
掌握“第十八章其他细胞疾病及其实验诊断2”知识点。
[单选题]5.关于半抗原的描述，正确的是A.既有免疫原性，又有反应原性B.仅有免疫原性，没有反应原性C.仅有反应原性，没有免疫原性D.既没有免疫原性，也没有反应原性E.仅有部分免疫原性和反应原性参考答案：C参考解析：半抗原指某物质在独立存在时只具有抗原性而无免疫原性，这些物质称为半抗原。
半抗原与蛋白质载体或高分子聚合物结合后才有免疫原性。
掌握“第三章免疫原和抗血清制备3”知识点。
[单选题]6.门诊患者尿液常规检查多采用A.晨尿B.随机尿C.餐前尿D.餐后尿E.中段尿参考答案：B参考解析：随机尿这种标本不受时间限制，便于留取。
