实验3卵磷脂的提取和鉴定

生命科学与技术系生化技术综合实验报告设计（论文）题目鸡蛋中卵磷脂的提取与鉴定姓名学号所属系专业年级电子邮箱指导教师电子邮箱年月摘要卵磷脂是甘油、胆碱、磷酸、饱和及不饱和脂肪酸组成的一种磷脂类物质，它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的本成份、研究发现卵磷脂具延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力，促进脂肪代谢、防止出现脂肪肝、降低血清胆固醇等方面的作用。

被英国科学家喻为“健脑的黄金、养心的极品”。

在西方国家卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。

卵磷脂在动植物体内分布广泛．其中以蛋黄中含量最为丰富。

卵磷脂按照其纯度的高低，一般分为PC50、PC 60 、PC 70、PC80、PC 90、PC95等产品形式。

最高可以提纯到98%，因为其纯度越高，氧化性能越强，故提纯到98%的卵磷脂需要做氢化处理。

然后保存。

未经过氢化处理的卵磷脂，一般要求在充氮的密封容器中。

纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。

利用95％乙醇在蛋黄溶液里进行浸提取，再加入乙醚过滤，加入一定量的丙酮在旋转干燥仪器中把乙醇蒸发出来，取溶胶性的物质，加入丙酮冲洗除杂，冲洗多次取得粗品，让后再加入无水乙醇溶解，加入金属沉淀剂进行精提取，取出少量精品，在碱性条件下溶解，分别用钼酸铵，斐林试剂，滤纸，氢氧化钠，对卵磷脂进行定性检测关键词：蛋黄卵磷脂；提取；纯化；鉴定。

卵磷脂的提取与鉴定卵磷脂(lecithin) 是一种含磷的类脂类生理活性物质, 同时又是一种天然表面活性剂 [1～2], 化学名称为磷脂酰胆碱，它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的基本成份，空间结构的卵磷脂分子是由一个极性的“头部”(甘油和胆碱磷酸脂部分) 和两条非极性的“尾巴”(两个依附于甘油主框架上的脂肪酸) 组成, 它是典型的两性电解质 [3]主要集中在大脑、神经系统、免疫系统及心、肝、肾、生殖腺等重要器官内) ,是人体必需的胆碱和必需脂肪酸的重要来源 [4] 纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。

【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定一、实验目的1.了解卵磷脂的结构与性质；2.熟练掌握蛋黄中卵磷脂的提取和鉴定方法；3.通过提取和鉴定，初步了解卵磷脂的含量。

二、实验原理1.卵磷脂介绍卵磷脂是一类含有疏水性脂肪酸、酯等亲脂性成分和疏水性羟基等亲水性成分的复合脂类，具有良好的亲水性和亲油性能。

卵磷脂是细胞膜的组成成分之一，并参与了许多生命过程的调节和控制。

由于分子结构中含有类似细胞膜的磷酸基和羟基，因此卵磷脂可以与水和油相溶液中间的界面上，形成磷双层结构和微乳液，从而可以作为乳化剂、增稠剂、抗氧化剂等在食品、化妆品、医药等领域应用。

2.实验步骤将去壳的新鲜鸡蛋取出蛋黄，用盐水洗净表面的蛋白质，然后压成泥，称取25g，加入160 ml乙醇和70 ml氯仿，振荡提取24h，滤去蛋黄泥，得到提取液。

用氮气吹干提取液，再用5 ml碘化铵溶液的Ninhydrin试剂涂抹于硅胶薄层板上，加热显色，可以看到卵磷脂的蓝色斑点。

通过比对标准卵磷脂反应斑点和实验过程得到的反应斑点，可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量。

三、实验操作3.1 实验仪器和药品仪器：薄层色谱仪、干燥箱、氮气吹口等。

药品：鸡蛋、碘化铵溶液、Ninhydrin试剂。

三、实验注意事项1.实验过程中要避免阳光直射和空气流通；2.对于采用氮气吹干的提取液，需要注意气压和吹干时间，以免造成温度过高或时间过长的现象；3.在硅胶薄层板上涂斑注意均匀和用量的控制，避免溢出或浓度过高导致显色结果出现异常；4.硅胶薄层板在干燥箱中加热时要控制温度和时间，尽量保证试验中硅胶薄层板上出现的斑点的颜色鲜艳而稳定；5.硅胶薄层板上的斑点大小和颜色的变化需要通过标准试验和实验操作的对比来确定实验结果。

四、实验结果分析通过本实验，我们可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量，并通过对标准试剂和实验结果的对比，也可以得到质量较好的卵磷脂含量。

通过初步检测，我们可以确定卵磷脂含量的多少，并初步判断蛋黄的质量。

卵磷脂的提取和纯化浙江工业大学药学院罗杨春宋建林杰摘要：本实验探索以油菜花油脚为原料，制备高纯度卵磷脂的最佳条件，选择树脂类型、反应温度、反应时间、萃取剂等因素进行单因素实验。

实验结果表明：关键词：卵磷脂提取纯化离子交换树脂正文：1. 前言卵磷脂是一类具有重要生理活性和表面活性的生命物质，在生物细胞膜的功能和代谢方面具有十分重要的调节作用。

药用卵磷脂是磷脂类产品中最具高附加值的产品形态。

它不仅要求纯度高，而且要求乳化能力强，并达到静脉注射用的相关要求，其提取工艺和技术比较复杂、难度较大。

其中分离脑磷脂与卵磷脂方面为提高卵磷脂产品纯度较为关键的步骤。

国内外学者利用溶剂萃取法、超临界流体分离法、高效液相色谱法和柱层析法等方法分离纯化磷脂酰胆碱的分离效果一般不理想并且适应面窄;柱层析法是目前主要的研究方法,多数采用Al2O3为分离介质,但分离过程中PC和PE分离的选择性仍不理想,分离后PC中溶血磷脂(LPC)的分离不彻底,使该方法在制备注射级卵磷脂时受到极大限制。

利用大孔型离子交换树脂对PC,PE,LPC吸附能力的不同，可进行分离。

离子交换树脂法具有吸附容量大、选择性好、易于解吸、机械强度高、再生处理简单、吸附速度快等特点，从而达到高效的分离效果。

2.材料和方法2.1 药品与试剂自备粗卵磷脂（PC含量约为47%）丙酮（分析级）、无水乙醇（分析级）、超纯水 ZnCl2、CuSO4·5H2O、CaCl2、MgCl22.2 实验步骤2.2.1离子交换：用0.1mol/L NaOH 10mL碱洗、0.1mol/L Hcl 10mL酸洗各种树脂（D113、116、001x7、001x10、201x4）最后再水洗。

取一定量的CuSO4·5H2O、CaCl2、MgCl2、Zn(Ac)2配成浓度为0.05mol/L的溶液。

活化后的树脂各取1g至50ml具塞锥形瓶中，分别加入0.03mol/L的各溶液，恒温水浴震荡24 小时，水浴温度为36℃。

实验九卵磷脂的提取和鉴定实验目的：熟悉卵磷脂的提取方法和常见的鉴定方法。

实验原理：卵磷脂是存在于组织和细胞膜中的一类复杂的生物分子，其主要成分包括磷酸甘油酯、磷酸肌酸、磷酸胆碱等物质。

卵磷脂在生物体内扮演着极为重要的生理功能，在维持生物体的正常生理代谢过程中发挥着重要作用。

卵磷脂的提取方法：材料：鸡蛋黄、乙醇、正己烷、醋酸乙酯。

1.取足够多的鸡蛋黄，用纯净水洗净后晾干备用。

2.将洗净干燥的鸡蛋黄取出，剥去蛋壳并取出蛋黄，用刀将其压成泥状。

3.将压成泥状的鸡蛋黄放入烧杯中，加入适量的乙醇，不断搅拌，使其混合均匀。

4.待混合好的鸡蛋黄和乙醇彻底混合均匀后，将其倒入滤布中，将滤液与滤涤液分离开来。

5.将滤液中酒精分离鸡蛋黄接着加入等量的正己烷，用250ml分液漏斗进行振荡后，取出下层酒精分离液。

6.将酒精中的卵磷脂析出，将析出卵磷脂加入等量的醋酸乙酯中溶解，即可得到卵磷脂。

卵磷脂的鉴定：1.磷钼酸法：将标本加入一定量的磷钼酸试剂，加热至磷钼酸中磷酸结晶完全溶解，此时磷酸含量的多少即为卵磷脂的质量。

其原理是卵磷脂中的磷酸和磷钼酸反应，生成黄色的磷钼酸沉淀。

2.碱水解法：将标本与氢氧化钠混合，使卵磷脂水解产生酰基胆碱。

然后加入硫酸和琼脂，沉淀下来的物质即为卵磷脂。

3.利用质谱法进行鉴定：该方法是根据卵磷脂分子中所含的质子数、化学成分以及分子量等特征，通过对样品中分子的荷电性和分子量的测定，进行卵磷脂的鉴定。

实验步骤：1.取少量卵磷脂样品溶于水中。

2.将卵磷脂样品反复洗涤至清洁，然后加入磷钼酸试剂。

3.待磷钼酸在样品中完全溶解后，使用分光光度计测定溶液中吸收光谱，从而得出样品中卵磷脂的质量。

实验结论：通过卵磷脂的提取方法和鉴定方法，我们可以成功地得到卵磷脂，并确定了样品中卵磷脂的数量和质量。

这为我们进一步研究卵磷脂的生理功能以及用途奠定了基础。

卵磷脂的提取与鉴定一试验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的卵磷脂的提取与鉴定一实验目的了解用乙醇作为溶剂提取卵磷脂的原理和方法。

二实验原理卵磷脂在脑神经细胞中含量很高，蛋黄中含有特别高。

根据卵磷脂溶于乙醇、乙醚等有机溶剂进行提取。

新提取的卵磷脂为白色蜡状物，与空气接触后被氧化为黄褐色。

利用卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺(特殊的鱼腥臭味)进行鉴别。

三实验器材与试剂鸡蛋黄、乙醇(95,)、10,NaOH、烧杯、量筒等。

四实验步骤1 提取卵磷脂取2g蛋黄于15mL(95,)乙醇，过滤、蒸气浴蒸干，残留物为卵磷脂。

2 鉴别取少量的卵磷脂于试管中，加10,NaOH溶液2mL，水浴加热是否产生鱼腥臭味。

五注意事项滤液要清。

六作业完成实验报告，写出实验小结。

1粗脂肪的提取和定量测定——索氏提取法一实验目的1 学习和掌握用索氏提取器提取脂肪的原理和方法2 学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。

二实验原理利用脂类物质溶于有机溶剂的特性，在索氏提取器中用有机溶剂对样品中的的脂类物质进行提取。

因提取的物质是脂类物质的混合物，故称其为粗脂肪。

三实验器材1索氏提取器 2 分析天平 3 烧杯 4 恒温水浴锅 5 脱脂棉和脱脂滤纸 6 镊子7 干燥器四实验试剂与材料1 样品2 石油醚五实验步骤1称量索氏提取瓶将索氏提取瓶洗净烘干至恒重，记录重量。

2提取样品粗脂肪将石油醚加到提取瓶内约为瓶容积1/2—2/3。

将样品包放入提取管内。

连接索氏提取器各个部分。

用70度,80度恒温水浴加热提取瓶，抽提进行2―3小时，直至提取管内的石油醚用滤纸检验无油迹为止，表示提取完全。

3 计算样品中粗脂肪的含量提取完毕，取出滤纸包，再回馏一次，倒出石油醚。

取下提取瓶，洗净瓶的外壁，烘干至恒重。

记录重量。

2按照下式计算样品中粗脂肪的百分含量。

粗脂肪(,),(提取后提取瓶的重量,提取前提取瓶的重量)/样品重量*100% 六作业计算样品中粗脂肪的含量，完成实验报告。