昆明小鼠与裸鼠原位胃癌模型的比较

2015年中国新诊断食管癌47.8万人，37.5万人死于食管癌，分别占2015年癌症新诊断人数和死亡人数的11.1%和13.3%［1］。

对于食管癌的治疗，手术仍是主要治疗方法［2］，大多数患者预后较差，5年生存率不到20%［3］。

放、化疗仍是治疗食管鳞癌患者（ESCC ）的主流方法，然而药物有效率低且并发症大［4-6］。

近年来，以分子为靶标的治疗已发展成为食管癌中一种有希望的有效治疗方法。

主要是抗EGFR 抑制剂［5］，很多药物仍处于临床试验阶段，对于ESCC 患者是否安全有效仍有待评估。

因此建立模拟患者来源的ESCC 特异性的模型对临床前研究、药物评估、治疗和预后具有重要的转化意义。

目前已知的研究食管癌的动物模型不少，许多已进入主流研究平台［7-9］。

患者来源的移植瘤（PDX ）模型，PDX 模型是将患者手术切除的肿瘤组织移植到免疫缺陷小鼠体内，这不仅能够高度保留患者肿瘤组织的异质性、病理特征，还保存了肿瘤细胞间相互作用及肿瘤微环境［10］。

PDX 模型可以直接携带患者身上肿瘤靶标的模型，并且药效反应与临床结果一致［11］，因此PDX 模型对于ESCC 患者精准用药的筛选具有很大的优势。

目Comparison of B-NDG ®and BALB/c mouse models bearing patient-derived xenografts of esophageal squamous cell carcinomaGUAN Liuliu 1,2,ZOU Qingqing 1,2,LIU Qian 2,3,CHEN Size 1,2,31Department of Oncology,3Scientific Research Center,First Affiliated Hospital of Guangdong Pharmaceutical University;2Guangdong Provincial Engineering Research Center for Esophageal Cancer Precise Therapy,Guangzhou 510080,China摘要：目的探讨不同品系的小鼠对于食管鳞癌患者来源的异种移植瘤（ESCC PDX ）成瘤率的影响，为ESCC 的临床个体化治疗建立更优势的临床前动物模型。

人胃癌组织块裸鼠原位移植 转移模型的建立刘　平1,赵志泉1,张小勇1,潘世扬2,杨国平2,丁小健2摘　要:目的　用肿瘤组织块原位移植,建立人胃癌裸小鼠原位移植 转移模型。

方法　以人胃低分化腺癌细胞系接种于裸小鼠皮下,形成稳定传代的皮下移植瘤,再取该肿瘤组织块原位移植于裸鼠胃壁,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率。

结果　原位移植成功率(成瘤率)为100%、局部淋巴结转移率100%、远处淋巴结转移率90%、肝转移发生率为75%。

荷瘤鼠的中位生存期为14周,晚期出现消瘦和全身衰竭。

结论　该裸小鼠原位移植 转移模型的生物学行为与人胃癌自然生长和转移过程相似,可作为一种有价值的工具用于胃癌转移机理和抗转移实验治疗的研究。

关键词:胃肿瘤;胃癌细胞;裸小鼠;疾病模型中图分类号:R 735.2 文献标识码:A 文章编号:100028578(2001)0120015202 收稿日期:2000201206;修回日期:2000204214基金项目:江苏省教委自然科学基金资助项目(95052)作者单位:1.210029南京医科大学第一附属医院消化科,2.中心实验室Establ ishm en t of Orthotop ic I m plan t M eta sta tic M odel of Hu manStomach Cancer usi ng I n tact Tu m or T issue i n Nude M iceL I U P ing ,ZHAO Zh i 2quan ,ZHAN G X iao 2yong ,et alD ep a rt m en t of D ig estive d isease ,T he F irst A f f lia ted H osp ita l ,N anj ing M ed ica l U n iversity ,N anj ing 210029,Ch inaAbstract :Objective To develop nude m ou se o rtho top ic i m p lan t m etastatic m odel of hum an gastric can 2cer u sing in tact tum o r tissue .M ethods T um o r cell line of hum an gastric adenocarcinom a w as inocu lated subcu taneou sly in to nude m ice to develop i m p lan t 2tum o r .In tact tum o r tissue w as then co llected and i m 2p lan ted o rtho top ically in to the nude m ou se stom ach .T he local tum o r grow th characteristics ,tum o r 2takerates and m etastasis rates w ere exam ined .Results A 100%tum o r 2take rate w as ob tained in the m odel.T he m etastases of local and distan t lym p h nodes ere ob served in 100%and 90%of the nude m ice resp ectivce 2ly .T he liver m etastases w ere found in 75%of the n i m als .T he m edian su rvival ti m e of the tum o r 2bearing nude m ice w as 14w eek s .Em acicati on and exhau sti on of the nude m ice w ere p resen ted in late stage of the exp eri m en t .Conclusion T he grow th and m etastasis characteristics of hum an stom ach cancer w ere exh ib itedin the o rtho top ic i m p lan t m etastatic m odel.T h is tum o r m odel m igh t be a u sefu l too l in the researches on m etastatic m echan is m s and an ti m etastasis treatm en t of hum an stom ach cancer .Key words :Stom ach neop las m s ;T um o r 2cells ;D isease m odel ;N ude m ou se 我国各种恶性肿瘤中胃癌的发病率居首位,占23%。

显微镜下人胃癌裸鼠原位移植和转移模型的建立摘要】目的显微镜下建立一种能很好模拟人体内生物学行为的胃癌裸小鼠原位移植和转移模型。

方法采用人胃癌SGC-7901细胞株在裸鼠皮下反复传5代形成实体瘤，显微镜下将人胃癌裸鼠皮下移植瘤块种植于裸小鼠胃壁，建立胃癌裸小鼠原位移植和转移模型16个，观察建立的模型肿瘤生长状况、移植成功率和自发转移的发生率，常规HE染色，观察胃癌原位移植瘤、胃癌淋巴结转移和肝转移的病理切片，电镜下观察肿瘤超微结构。

结果胃癌裸鼠皮下移植瘤原位移植的原位成瘤率达100％（16/16），淋巴结广泛转移率为87.5%(14/16)，肝转移发生率为75％(12/16)，腹水形成率为12.5%(2/16)。

结论显微镜下建立原位移植和转移模型成功率高，且具有人胃癌自然生长过程的特点和生物学活性。

【关键词】胃肿瘤肿瘤细胞原位移植疾病模型裸小鼠【中图分类号】R73-35【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）31-0110-03The establishment of orthotopic implant and metastatic models of human stomach cancer in nude mice under the microscopeLIN Qi , CHEN Hui-yu(Department of General Surgery, The First Hospital of Lianyungang City，Lianyungang, 222002，China)【Abstract】 Objective To develop a nude mouse model of human gastric cancer which can mimic its natural human biologic activities under the microscope. Methods Human gastric cancer SGC-7901 was cultured in nude mice repeatedly for 5 generations to get the Tumor subcutaneous solid tumor, which was then emulsified and orthotopicly implanted into the nude mouse stomach under the microscope to develop 16 implant-tumors. The tumor growth characteristic, tumor-take rates and metastatic rates were analyzed grossly. The gastric orthotopically transplantation, gastric cancer lymphatic metastasis and hepatic metastasis by HE staining, the ultrostructures, by electron microscopy were analyzed too.Results The tumor-take rate was 100％, the metastases of lymph nodes and livers were 87.5％ and 75％, ascites formation is 12.5%. Conclusion To repeat the model under the microscope is easy and qualified, which can exhibiting natural growth characters and biological activities successfully.【Key words】 stomach neoplasms tumor cells orthotopicthansplantation disease model nude mouse理想的人类肿瘤动物模型的建立是研究肿瘤生长和转移生物学以及寻求抗癌新药和新方法的重要工具。

关于人胃癌裸鼠原位移植和转移模型的建立及其生物学特性观察【摘要】目的建立一种能很好模拟人体内生物学行为的胃癌裸小鼠原位移植和转移模型。

方法采用人胃癌SGC-7901细胞株在裸鼠皮下经反复传5代形成实体瘤的完整组织块，建立人胃癌裸小鼠原位移植生长和转移模型16个。

观察所建立的模型肿瘤生长状况、移植成功率和自发转移的发生率，常规H-E染色光镜下观察胃癌原位移植瘤、胃癌淋巴结转移和肝转移情况。

电镜下观察肿瘤超微结构及免疫组化S-P法检测肿瘤诱导型环氧化酶-2（COX-2）。

结果胃癌裸鼠原位移植块再次原位移植的原位成瘤率达100％（16/16），淋巴结广泛转移率为87.5%（14/16），肝转移发生率为75.0％（12/16），腹腔积液形成率为12.5%（2/16）。

结论原位移植和转移模型均具有人胃癌自然生长过程的特点，具有人胃癌的生物学活性。

【关键词】胃肿瘤肿瘤细胞原位移植疾病模型裸小鼠Abstract： Objective To develop a nude mouse model of human gastric cancer that can mimic its natural human biologic activities. Methods Human gastric cancer cell line SGC-7901 was cultured in nude mice repeatedly for 5 generations to get the subcutaneous solid tumor， which was then emulsified and orthotopicly inplanted into the anterior wall of the stomach in 16 nude mice. The tumor growth characters， tumor-take rate and metastatic rate were studied grossly， the transplanted tumor and its lymphatic and hepatic metastases， after routine H-E staining; the ultrastructures， by electron microscopy; and COX-2， by immunohistochemical method． Results The tumor-take rate was 100％（16/16）， the rates of metastasis to lymph nodes and liver were 87.5％（14/16） and 75.0％（12/16） respectively， the rate of ascites formation was 12.5%（2/16）. Conclusion The model of human stomach cancer established is qualified， exhibiting natural growth characters and biological activities.Key words: stomach neoplasms; orthotopic thansplantation; disease model; nude mouse既往胃癌动物模型的建立多采用皮下接种方式，虽然这种移植方式简单易行，肿瘤的生长情况也便于观察，且在一定程度上也近似地模拟了原有肿瘤的形态学、生物学及生物化学特性；然而接种于裸小鼠皮下组织毕竟属于异位移植，脱离了其起源组织器官的微环境，因此在实验中移植瘤的某些行为常不同于患者原发恶性肿瘤的生物学行为。

抗肿瘤药物体内筛选标准操作规程概述：抗肿瘤药物是指能够直接杀伤或抑制肿瘤细胞生长或增殖的一类药物,作用机制包括抑制肿瘤细胞核酸或蛋白质的合成、干扰大分子物质代谢、干扰微管系统、抑制拓扑异构酶等.本操作规程包括与抗肿瘤药物申请临床试验和申请上市有关的非临床有效性和安全性研究的内容,其中着力强调非临床有效性和安全性之间的关联性，以及非临床研究和临床试验之间的关联性。

旨在一方面为抗肿瘤药物的非临床研究提供技术参考；另一方面,通过技术要求引导科学有序的研发过程，使国内此类药物的研发更趋规范和合理。

本操作规程仅代表目前对抗肿瘤药物非临床研究的一般性认识.具体药物的非临床研究应在本指导原则的基础上,根据药物的自身特点制订研究方案。

研究目的：建立一套包括抗肿瘤药物体内作用的药效学研究和评价体系及相应的标准操作规程以及抗肿瘤药物安全性和作用新机制的研究.①有效性研究抗肿瘤药物有效性研究的目的主要在于探索受试物的作用机制、作用强度、抗瘤谱等,为之后的安全性评价以及临床试验中适应症、给药方案的选择提参考信息。

②安全性评价安全性评价的目的主要包括：（1）估算 I 期临床试验的起始剂量；（2）预测药物的毒性靶器官或靶组织；（3）预测药物毒性的性质、程度和可逆性；（4）为临床试验方案的制订提供参考.研究计划:(a)小鼠急性毒性测试按照急性毒性测试的常规方法，选用昆明种小鼠,通过腹腔注射方式给药，测定体外抗肿瘤活性突出的化合物的半数致死量（LD50)，参考给药小鼠体重变化情况，评价化合物的急性毒性，并确定小鼠体内抗肿瘤活性测试的给药剂量。

（b）小鼠体内抗肿瘤活性测试根据动物体内抗肿瘤活性测试的标准方法，选用昆明种小鼠，皮下接种肉瘤S180或肺癌H22瘤株，选择体外活性突出且急性毒性较低的化合物，设定合适的剂量通过腹腔注射方式给药，以临床常用抗肿瘤药物环磷酰胺作为阳性对照药物，测定肿瘤生长抑制作为体内活性评价指标。

(c）专利保护范围内的化合物的继续合成申请保护范围较大的专利,合成部分可能具有良好活性的新的化合物,拓展研究范围，发现活性更强的化合物，并申请新的发明专利。

胃癌动物模型研究现状【摘要】目的：确定适合我实验室实际条件的检测化疗药物对胃癌患者活检肿瘤组织的作用所使用的Ex vivo 动物模型，并拟定构建方法。

方法：查阅近年来关于胃癌动物模型的文献，做一简单综述，总结目前胃癌动物模型的研究现状。

结论：我实验室可以尝试构建异种原位移植的胃癌动物模型，并进一步尝试应用于化疗药物药效研究。

引言随着分子生物学理论技术的日新月异，胃癌的基础研究也不断深入，但分子水平的结果仍缺乏说服力，肿瘤动物模型能够在生物个体水平模拟肿瘤发生、发展、转移的病理过程。

建立一种成熟、可靠、可复制性强，能够最大程度模拟人类胃癌浸润、转移的胃癌动物模型有助于为胃癌发病机制、预防、治疗等领域的基础研究结果提供强有力的依据。

现就目前胃癌动物模型的研究状况做一简单的综述。

1实验动物的选择理论上所有哺乳类动物均能作为胃癌动物模型，但根据实际情况可选用的动物有鼠、犬、灵长类动物。

1.1灵长类动物是与人类高度同源的物种，但数量有限，难以成规模的用于动物模型的制备。

1.2犬的胃组织结构与人类相似，如果胃癌模型构建成熟，可以进行X线检查和胃镜检查随访，但其费用高，造模所需周期长，不易大批量的进行模型复制和重复验证，且对于异种移植成功率较小，没有成熟的免疫缺陷型动物难以广泛的应用。

1.3 实验用小鼠、大鼠与前两种相比具有费用低廉、体积小生命力强、易于饲养以及造模所需周期短等优点，广泛被用于生物学研究。

其品系繁多，近交系、远交系、免疫缺陷型、基因敲除型种类完备，目前用于各种胃癌动物模型的建立。

1.3.1诱癌率较高的wiste大鼠常用于诱发型的胃癌动物模型。

1.3.2蒙古沙土鼠因自然感染胃炎概率小,存活期长于小鼠,感染人幽门螺旋杆菌后易出现胃部的组织学病变,所以适宜于幽门螺旋杆菌感染的胃癌模型建立[1]1.3.3 裸鼠因先天缺乏胸腺, T细胞免疫功能接近于零,所以人体肿瘤异种移植时无排斥反应,移植后肿瘤仍保持其原有的组织形态、免疫学特点、特有的染色体组型以及对抗肿瘤药的原有敏感性。

《运用裸鼠动物模型筛选胃癌转移相关蛋白和基因》一、引言胃癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均居高不下。

胃癌的转移是导致患者死亡的主要原因之一。

因此，研究胃癌转移的机制，寻找有效的治疗靶点，对于提高胃癌患者的生存率具有重要意义。

近年来，随着生物医学技术的不断发展，裸鼠动物模型在胃癌研究中得到了广泛应用。

本文旨在运用裸鼠动物模型，筛选胃癌转移相关蛋白和基因，以期为胃癌的转移机制研究和治疗提供新的思路和方法。

二、材料与方法1. 动物模型构建选用裸鼠作为动物模型，通过胃部注射胃癌细胞株构建胃癌转移模型。

在建模过程中，严格控制实验条件，确保模型的可重复性和可靠性。

2. 样品采集与处理在模型建立后，定期采集裸鼠的肿瘤组织、正常组织及血液等样本。

样品经过处理后，用于后续的蛋白质组学、基因组学等实验。

3. 实验方法采用蛋白质组学、基因组学、生物信息学等技术手段，对样品进行检测和分析。

具体包括样品制备、质谱分析、基因芯片检测、生物信息学分析等。

三、实验结果1. 胃癌转移相关蛋白的筛选通过蛋白质组学分析，我们发现胃癌转移过程中存在一系列差异表达蛋白。

这些蛋白在胃癌组织中的表达水平明显高于正常组织，且与胃癌的转移密切相关。

进一步分析这些蛋白的功能和作用机制，有助于揭示胃癌转移的分子机制。

2. 胃癌转移相关基因的筛选基因组学分析显示，胃癌组织中存在一系列与转移相关的基因。

这些基因的表达水平与胃癌的转移密切相关，且在胃癌的发生和发展过程中发挥着重要作用。

通过生物信息学分析，我们进一步探讨了这些基因的互作网络和调控机制。

3. 裸鼠动物模型的应用价值裸鼠动物模型在胃癌转移研究中具有重要价值。

通过构建胃癌转移模型，我们可以更好地模拟人体内胃癌的转移过程，从而更准确地评估胃癌转移相关蛋白和基因的作用和价值。

此外，裸鼠动物模型还为我们提供了研究胃癌转移机制、筛选治疗靶点以及评估新药疗效的重要工具。

四、讨论本文通过运用裸鼠动物模型，成功筛选出胃癌转移相关蛋白和基因。

两种方法建立小鼠原位肝癌模型的比较摘要】目的比较建立小鼠原位肝癌模型的两种方法的优劣。

方法分别采用肝脏原位注射细胞法和尾静脉高压水流动力学注射法建立小鼠原位肝癌模型，对两组小鼠肝脏的成瘤情况进行比较。

结果两组小鼠均能在短期内成瘤，且成瘤率高。

结论尾静脉高压水流动力学注射法比原位注射细胞法更容易操作，小鼠存活率高，肝脏成瘤更均匀。

【关键词】原位肝癌模型高压水流动力学注射【中图分类号】R73-3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）14-0382-02原发性肝细胞肝癌是我国乃至全球范围内的研究热点，而原位肝癌小鼠模型是进行原发性肝细胞肝癌基础研究和临床研究的重要工具。

目前原位肝癌模型主要采用化学诱导法（DEN），但是该方法建立模型成瘤的时间比较长，大概需要6-8个月，导致研究的周期很长。

本文尝试了两种比较快速地建立小鼠原位肝癌模型的方法--肝脏原位注射细胞法和尾静脉高压水流动力学注射法，并对这两种方法建立的小鼠模型进行了比较。

1 实验材料及方法1.1 实验动物与试剂C57BL/6小鼠7-8周，雄性，20只,购自上海斯莱克实验动物有限公司。

Hepa1-6细胞株购自中科院上海细胞库。

DMEM高糖培养基，胎牛血清，购自上海英潍捷基公司。

水合氯醛、碘伏购自国药集团。

注射器，手术器械、缝合线、针领自苏州大学材料供应中心。

1.2 方法1.2.1 细胞悬液制备 Hepa 1-6在37℃、5 % CO2 的细胞培养箱中培养，取对数生长期细胞,0.25%胰蛋白酶消化后,收集于15mL离心管中，用PBS调整细胞悬液浓度至5×107/mL用于原位注射细胞法,每只小鼠注射20uL。

用PBS调整细胞悬液浓度至5×105/mL 用于尾静脉高压水流动力学注射法每只小鼠注射2mL。

1.2.2 小鼠分组 20只7-8周龄的C57BL/6雄性小鼠分为2组，第1组10只进行肝脏原位注射细胞建立模型，第2组10只采用尾静脉高压水流动力学注射的方法建立模型。

裸小鼠胃癌原位移植模型的建立田树红;王日超;肖敏;符健【摘要】目的建立一种新的裸小鼠胃癌原位移植模型.方法采用Matrx VIP 3000型气体麻醉系统对实验动物进行麻醉.分别用"包埋法"、"挂线法"、和"胃囊法"建立BALB/c裸小鼠胃癌原位移植瘤模型.术后用Caliper IVIS Kinetic小动物活体成像系统对实体瘤的生长情况进行检测和分析.术后28 d对肿瘤组织进行组织病理学检查.结果采用包埋法建立胃癌原位移植裸小鼠模型,除了与其它常用方法一样具有高移植成功率以外,还具有操作简便、时间短、难度低、肿瘤组织不易与其它组织直接接触等特点.结论包埋法能快速制备大批量小鼠胃癌原位移植模型,为胃癌原位移植模型相关研究提供便利.%Objective To establish a new orthotopic gastric cancer model in nude mice. Methods The BALB/c nude mice were anesthesized by Matrx VIP 3000 type gas anesthesia systems. Orthotopic gastric cancer models were established by embedding method,thread?ligation method or gastric bursa method in the nude mice. The tumor growth after transplantation in living body was detected by a Caliper IVIS Kinetic small animal imaging system. Samples of the transplanted tumor tissues for histological examination were taken at 28 days after transplantation. Results The orthotopic gastric cancer model was successfully established by embedding method. Compared with the models prepared by other commonly used methods, it showed obvious advantages such as a high success rate of transplantation, simple operation, short time, less difficulty, and less direct contact of the implanted tumor tissue with other organs, etc. Conclusions Large amountof mouse models of orthotopic gastric cancer can be prepared rapidly by the embedding method, thus, provide a convenient tool for related research of gastric cancer in future.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2017(027)002【总页数】4页(P21-24)【关键词】胃癌;原位移植;小动物活体成像;气体麻醉【作者】田树红;王日超;肖敏;符健【作者单位】海南医学院海南省药物安全性评价研究中心,海南海口 571199;海南医学院海南省药物安全性评价研究中心,海南海口 571199;海南医学院海南省药物安全性评价研究中心,海南海口 571199;海南医学院海南省药物安全性评价研究中心,海南海口 571199【正文语种】中文【中图分类】R⁃33胃癌是常见的消化道癌症之一，在世界癌症致死病例中位列第2，仅次于肺癌，抗胃癌药物的研发也越来越受到重视。