高效薄层色谱HPTLC

高效薄层色谱法鉴别6种中药多糖杨成，管佳，章江生，李绍平*（澳门大学中华医药研究院，澳门）摘要：目的鉴别不同来源的中药多糖。

方法采用高效薄层色谱法分析多糖酸水解产物，同时应用2种显色剂以及薄层扫描技术，获得可区别中药多糖的特征图谱。

结果以正丁醇：甲醇：氯仿：冰醋酸：水=12.5: 5:4.5:1.5:1.5(v/v)为展开剂，7种标准单糖和2种糖醛酸为对照，使用苯胺-二苯胺为糖类成分显色剂，结合茚三酮显色剂检查氨基酸类成分，获得了多糖酸水解产物中两类成分的特征薄层色谱，可用于区分来自冬虫夏草、灵芝、黄芪、人参、西洋参和三七的6种多糖组分。

结论建立了一种可鉴别6种中药多糖的高效薄层色谱法，此法简单快速，经济实用，可以用于多糖类成分质量控制。

关键词：多糖，高效薄层色谱，质量控制，中药Discrimination of Polysaccharides from Six Traditional Chinese Medicines using High-performance Thin-layer ChromatographyYANG Cheng, GUAN Jia, ZHANG Jiang-sheng, LI Shao-ping* (Institute of Chinese Medical Sciences, University of Macau, Macao SAR, China)ABSTRACT: OBJECTIVE To distinguish the polysaccharides from different Traditional Chinese medicines (TCMs). METHODS The acid hydrolyzates of polysaccharides were analyzed by high-performance thin-layer chromatography (HPTLC) combined with two coloration methods and thin layer scanning technique. RESULTS The chromatography was performed on nano silica gel 60 plate with n-butanol -methanol-chloroform- acetic acid-water (12.5:5:4.5:1.5:1.5, v/v/v/v/v) as mobile phase. 7 monosaccharides and 2 glycuronic acids were used as reference compounds. The aniline-diphenylamine solution and ninhydrin solution were employed for detection of saccharides and amino acids, respectively. The polysaccharides from Cordyceps sinensis, Ganoderma lucidum, Astragalus memberanaceus, Panax ginseng, Panax quinquefolii and Panax notogiseng were easily discriminated based on their characteristic TLC profiles. CONCLUSION A simple, rapid and effective HPTLC method was developed for distinguishing the polysaccharides from 6 TCMs, which is helpful to control the quality of polysaccharides from Chinese medicine.KEY WORDS: Polysaccharides; HPTLC; Quality control; TCMs多糖是一类由单糖（通常大于10个）通过糖苷键连接而成的生物大分子聚合物，是生物体维持生命活动的必需物质。

薄层色谱法汇总范文薄层色谱法（Thin-Layer Chromatography，简称TLC）是一种广泛应用于化学分析和生化分离的色谱技术。

TLC基于物质在固定相上的吸附、分配和离子交换等作用，在短时间内对混合物进行快速分离、分析和纯化。

以下是对TLC进行详细汇总的相关信息。

TLC的原理基于固液分配平衡，它由一个支撑固相和一个涂覆在其上的液体固相组成。

样品和流动相在固液界面发生相互作用，样品成分通过分配到液体固相中而与流动相分离。

TLC可以用于分离、定量分析、纯化和结构确认。

TLC具有许多优点。

首先，它是一种快速、简单、低成本的分析技术。

其次，TLC对化合物的纯度和分子量没有特殊要求，几乎能分离出所有的化合物混合物。

此外，TLC使用的流动相和吸附剂非常广泛，适用于不同类型化合物的分离。

在TLC中，选择合适的流动相非常重要。

流动相的组成和性质直接影响着样品的迁移率和分离效果。

一般来说，流动相的极性应与样品的极性相近，以增强样品在色谱板上的移动力和分离效果。

常用的流动相有无机溶剂、有机溶剂和溶剂混合物等。

TLC的应用非常广泛。

在有机合成中，它可用于化合物的分离和纯化。

在药物分析中，TLC可用于对药品进行定性和定量分析。

在食品检测中，TLC可检测食品中的添加剂、农药和重金属等有害物质。

在环境分析中，TLC可以用于监测水样和土壤中的污染物。

此外，TLC还可以用于植物学、天文学和生物医学等领域的研究。

为了进一步提高TLC的分离效果和分析速度，人们对TLC进行了许多改进和发展。

其中，高效薄层色谱（High Performance Thin-Layer Chromatography，简称HPTLC）是一种改良的TLC技术，具有更高的分离效能和分离速度。

与传统TLC相比，HPTLC使用更细的颗粒支撑固相和更小的样品斑点，使得分离更快和更准确。

总之，薄层色谱法是一种重要的化学分析技术，具有快速、简单、低成本和广泛适用于不同领域的优点。

硝基咪唑类药物测定方法——薄层色谱法16.1.4.2 测定办法生物基质中硝基咪唑类药物的残留分析主要有免疫学办法(IA)、毛细管电泳法(CE)、薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)和蔼相色谱法(GC)。

早期讨论集中于单个或几个化合物的分析，现在多残留高通量分析办法得到了较快进展。

随着质谱的推广以及该类药物“零残留量”的执行，使得液相色谱-质谱(LC-MS)和蔼相色谱-质谱(GC-MS)办法成为讨论主流。

(1)薄层色谱法(thin layerchromatography，TLC) TLC系将相宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一匀称薄层。

待点样、绽开后，按照比移值(Rf)与相宜的对比物按同法所得的色谱图的比移值作对照，用以举行药物的鉴别、杂质检查或含量测定。

TLC是迅速分别和定性分析少量物质的一种很重要的试验技术。

Meshram等用TLC测定MNZ和咪康唑硝酸盐。

固定相用法硅胶(silica gel 60 GF254)，绽开剂为甲苯--(3.0+2.0+0.6，v/v)，在240nm波长显像光密度计检测。

MNZ、咪康唑硝酸盐的保留因子分离为0.34和0.55；MNZ线性范围为300～700ng/点，咪康唑硝酸盐线性范围600～1400ng/点；采纳标准加入法测得MNZ和咪康唑硝酸盐的回收率分离为100.13%±1.59%(点高度)、98.92%±0.76% (点面积)和99.49±1.58% ( 点高度)、99.63%±1.46%(点面积)。

但该办法未对组织中残留样品举行测定。

高效薄层色谱法(high performance thin layer chromatography，HPTLC)由经典的TLC进展而来，优点是点样量少，分析时光快，分别度和辨别率好，对样品处理要求最低，操作最简便，LOD可达纳克(ng)至皮克(pg)水平。

Gaugain等报道了用HPTLC 测定猪和家禽组织中DMZ、RNZ、DMZOH残留的办法。

高效薄层色谱实践如何选择RP-HPTLC 反相高效预制薄层色谱板作者：Michael Schulz 和Susanne Minarik自1966年起德国默克公司（Merck KGaA ， EMD, Darmstadt ）就开始为薄层色谱法提供商品预制薄层板。

1975年起该公司推出了HPTLC 高效预制薄层色谱板，1978年开始销售硅胶改性的反相固定相，中等极性固定相系列的薄层板稍晚些时候(1982 －1987)实现了商品化。

Michael Schulz 是目前该公司PC-RLP-SIL （材料和生命化学品研发-硅胶合成）实验室主任，负责薄层色谱板相关技术的研发。

译者按：作为欧洲第二大薄层色谱板生产商的德国MN 公司（MACHEREY-NAGEL ，GmbH & Co. KG ，Düren ）也同样拥有成熟的薄层色谱预制板产品系列，可为用户提供良好的产品体验。

简介平面色谱中的大部分分离任务通常在硅胶、氧化铝或纤维素等极性吸附剂的预制板上完成。

最常用的固定相是6 nm 孔径的硅胶60。

虽然（反相）疏水性薄层具有一些独特的优势，但目前还没有在薄层色谱上得到广泛的应用。

编者按：反相改性（RP-TLC ）的预制板对于所有的化合物类别都具有很广的选择性。

它不再需要复杂的多元展开剂配比，通常2元流动相如甲醇/水或乙腈/水已经够用。

通过调节流动相中水相的比例，保留行为即可得到系统的改变。

由于反相吸附剂的表面活性相对较低，也降低了不稳定化合物在分析过程中产生降解的潜在风险。

相对湿度对于保留行为的影响也变得非常小，这是由于吸附剂的疏水特性和所使用的含水流动相。

反相薄层的另外一个优点是色谱方法可方便地转移到HPLC 法的RP-C18色谱柱上。

本文对改性薄层亲脂的疏水性表面特性对薄层色谱行为的影响通过分离甾醇的实例加以探讨，并对HPTLC RP-18 F 254s 预制板和HPTLC RP-18W F 254s 水可湿性的预制板进行了比较。

黄曲霉素小分子物质夹心法1.薄层层析(TLC)法TLC法是测定黄曲霉毒素的经典方法，在薄层板展开后，在365 nm 紫外灯下，黄曲霉毒素B1，B2，G1和G2分别显示紫色、蓝紫色、绿色和绿色荧光。

TLC法的特异性较差，灵敏度相对较差，且测定黄曲霉毒素专一性不够，经常引起测量误差。

但由于此法设备简单，易于普及，所以国内外仍在使用。

2.高效薄层(HPTLC)法HPTLC法测定黄曲霉毒素采用目前国际上流行的样品处理方法——固相萃取法(SPE)中针对真菌和病毒的多功能净化(MFC)柱。

采用MFC柱净化后，仅用单相展开即可达到分离测定的目的，不仅节省了工作时间，提高了工作效率，而且进一步减少了有毒有害溶剂的用量。

Stroka等将免疫亲合柱净化应用于TLC法测定，进行单相展开并用荧光密度计定量，此方法能检测含量明显低于当前欧盟标准的黄曲霉毒素。

Kamimura等用HPTLC方法测定玉米、花生、荞麦等样品，并与通过公职分析化学家协会(AOAC)认证的分析花生及花生制品中黄曲霉素的方法CB(Contamination Branch)法和BF(Best Foods)法进行比较，4种主要黄曲霉毒素的检测限均不高于0.2μg／kg，回收率与CB法一样均高于BF法。

3.高压薄层色谱(OPTLC)法高压薄层色谱于1979年由Tyihak提出，它结合了经典薄层色谱法、高效薄层色谱法与高效液相色谱法的优点，是一种能够提高薄层分离效率的平面液相色谱技术。

随着实验技术的不断成熟，OPTLC法在饲料和食物中黄曲霉毒素的检测方面的应用越来越多。

Eszter Papp等发展了一系列适合检测玉米和小麦中黄曲霉毒素的OPTLC方法。

【高效液相色谱(HPLC)法】由于具有稳定、准确、灵敏等优点，HPLC法已成为当前进行黄曲霉毒素定量研究的首选方法。

分析黄曲霉毒素的液相色谱方法包括正相液相色谱方法(NPLC)和反相液相色谱方法(RPLC)。

反相高效液相色谱(RP-HPLC)系统易操作，流动相具有低毒性，可同时分离、分析样品中黄曲霉毒素B1，B2，G1，G2且不受样品沸点、热稳定性、和分子量限制，所以目前使用荧光检测器的反相HPLC法已经成为检测黄曲霉毒素的主要测定方法。

HPTLC 检测鱼类制品中组胺及其他生物胺▲位于德国德累斯顿（Dresden）的LUA（从左到右） ▲Karl Speer教授Sevrt Kretzschmar, Sibylle Neugebauer和Dieter Hübner博士在CAMAG CBS 83（1999年9月）中我们报道过瑞士伯尔尼的兽药和毒物学研究所采用薄层色谱定量测定组胺，分离使用碳18反相薄层，保利试剂用作色谱后衍生。

以下是分析鱼肉中7种生物胺的方法和其他分析方法比较，试验是在德国德累斯顿食品化学部门Landesuntersuchungsanstalt für das Gesundheits und Veterinärwesen Saxony （LUA）进行的。

色谱前的丹磺酰氯衍生化是基于埃及Dokki食品技术与奶制品科学部门的论著[1]。

Kretzschmar的毕业论文[2]由德累斯顿技术大学食品化学学院的Speer教授指导。

介绍鱼和鱼类制品在不适当的保存过程中会增加生物胺类的形成，尤其是组胺。

为了保护消费者远离生物胺的毒害，关于鱼类卫生的16种法令设定了有关物质的限量（目前仅为组胺）。

由于其他的生物胺也具有生理学活性，也应当同样被分析。

为此，必须建立一个筛选方法能够在短时间内处理大批量的样品。

薄层色谱的方法正好适合于检测胺的允许限量。

并且因为减少了分析的干扰，结果可以媲美HPLC、ELISA 和荧光分析方法。

首先，样品用10%的三氯乙酸（TCA）萃取。

萃取液用丹磺酰氯处理。

混合物衍生化后，胺被萃取出来并在硅胶薄层上分离。

可在紫外365 nm下通过目视进行半定量检测或用光密度计在UV 365/>400 nm下定量分析。

供试品溶液的制备取鱼类样品10 g，制成匀浆，加入80 mL 10%的三氯醋酸（TCA）。

混合物在9000 G下均质90 秒。

用10%三氯醋酸定容到100 mL并过滤，滤液立即分析或在-20 ℃下保存备用。

高效薄层色谱法及其应用简介1薄层色谱技术简介薄层色谱(thin layer chromatography,TLC)是一种快速、简便、高效、经济、应用广泛的色谱分析方法。

薄层色谱的特点是可以同时分离多个样品,分析成本低,对样品预处理要求低,对固定相、展开剂的选择自由度大,适用于含有不易从分离介质脱附或含有悬浮微粒或需要色谱后衍生化处理的样品分析。

TLC广泛地应用于药物、生化、食品和环境分析等方面,在定性鉴定、半定量以及定量分析中发挥着重要作用。

常规的TLC法存在展开时间长、展开剂体积需求大和分离结果差等缺点。

高效薄层色谱法是近年来迅速发展的一种高效、快速、操作简便、结果准确、灵敏度高和重现性好的薄层色谱新技术,已广泛用于各个领域。

1.1常规的薄层色谱方法TLC分离的选择性主要取决于固定相的化学组成及其表面的化学性质。

常规薄层色谱的固定相为未改性的硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺等,平均颗粒度20μm,点样量1~5μL,展开时间30~200min,检测限1~5ng。

以正相色谱占主导地位,设备简单,所需资金投入少;不足之处是分离所需时间长,有明显的扩散效应。

1.2高效薄层色谱高效薄层色谱(HPTLC)采用更细、更均匀的改性硅胶和纤维素为固定相,对吸附剂进行疏水和亲水改性,可以实现正相和反相薄层色谱分离,提高了色谱的选择性。

C2、C8和C18化学键合硅胶板为常见反相薄层板。

高效板厚平均100~250μm、点样量0. 1~0. 2μL,展距3~6cm,展开时间3~20min,最小检测量0. 1~0. 5μg,较常规TLC可改善分离度,提高灵敏度和重现性,适用于定量测定。

2薄层色谱的在应用化学领域的应用应用化学学科领域非常宽广，涉及石油化工、精细化工、药物分析、环境监测等多方面。

色谱分析技术在这些领域都有着广泛的应用。

当然随着技术的发展，气象色谱和高效液相色谱的应用范围越来越广，已将成为现代化学化工领域一种必不可少的分析方法。

默克薄层色谱（TLC）的基本原理TLC是一种广泛应用于定量和定性分析的分离技术，以固定在玻璃、塑料或铝板上的吸附剂作为固定相而且还可使用流动相的液体溶剂，该溶剂在携带样品穿过色谱板时，对其进行分离。

与其他分离技术相比，TLC更为简单、灵敏，分析更快速。

经典TLC板默克的经典TLC板具有光滑致密的硅胶60涂层，可确保色谱带细窄。

经典的TLC板，如默克的多格式板，具有各种板面尺寸的铝、玻璃或塑料载底，并配有两种用于紫外线检测的荧光指示剂。

除了未改性的二氧化硅TLC板，默克还提供特殊的TLC板，包括：•改性硅胶TLC板，作为HPLC的先导方法，可实现更好的分离•氧化铝TLC板，可用于分离中性和碱性化合物•纤维素TLC板，可用于精准分析极性物质•硅藻土和混合层板，可分离极性或中等极性的化合物•浓缩带TLC板，可用于大体积样品的应用和分离•具有独特激光代码的GLP TLC板，有助于保存文档和记录HPTLC板HPTLC板可减少谱带扩散并缩紧色谱区或斑点。

HPTLC板，包括默克的多格式板，有多种尺寸和载底以及两种不同的荧光指示剂可供选择。

默克经典的硅胶HPTLC板可对复杂样品进行快速灵敏的定量分析，适用于手动和仪器操作。

默克还供应多种特殊的HPTLC 板，包括：•改性硅胶HPTLC板，可用于复杂的分离•纤维素HPTLC板，可用于亲水和极性物质分离•LiChrospher® HPTLC板，经优化可用于快速高通量分离•高纯度HPTLC板，可最小化背景信号，实现无污染分离•ProteoChrom®HPTLC板，可用于分析肽和蛋白质消化物•浓缩带HPTLC板，可用于大体积样品的应用和分离•具有独特激光代码的GLP HPTLC板，可帮助进行文档记录和保存MS级TLC和HPTLC板默克Supelco®的MS级板可对经TLC和HPTLC板分离和干燥的样品直接进行质谱分析。

色谱分离后，还可用于基于洗脱或基于解吸的TLC-MS。

测量维生素c方法
测量维生素C的常见方法有：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：基于维生素C与某些荧光物质反应的原理，利用HPLC分离、检测和定量维生素C。

2. 紫外-可见分光光度法（UV-Vis）：利用维生素C在特定波长下的吸收特性，通过测量样品在特定波长处的光吸收强度，来确定维生素C的浓度。

3. 高效薄层色谱法（HPTLC）：使用薄层色谱技术分离样品中的维生素C，并通过比较样品斑点的强度和标准品斑点的强度，来定量维生素C。

4. 比色法：基于维生素C与某些试剂（例如二苯基胺、二巯基二氨等）在酸性条件下发生反应产生有色化合物的原理，通过测量产生的有色化合物的吸光度来测量维生素C的含量。

5. 滴定法：使用氧化还原滴定的方法，将含有维生素C的样品与氧化剂（例如碘酸钾溶液）反应，通过滴加还原剂（例如二硫代硫酸钠溶液）使氧化剂完全消耗，通过反应所需的还原剂的体积来确定维生素C的浓度。

以上方法都可以测量维生素C的含量，具体选择取决于实验设计、设备条件和分析要求等因素。

高效薄层色谱（HPTLC）分析
高效薄层色谱（HPTLC）可支持您进行定性和定量分析研究，高效薄层色谱技术能够分离样品混合物中的化合物。

百泰派克生物科技基于高效薄层色谱（HPTLC）检测平台为您提供高效薄层色谱分析服务。

hptlc。

基于高效薄层色谱分析的应用广泛，包括
1. 乙酰水杨酸、水杨酸和水杨酰胺分析。

2. 血浆奥硝唑分析。

3. 食品饮料三氯蔗糖和果糖分析。

4. 辣椒素分析。

5. 牛奶三聚氰胺分析。

6. 人体皮肤非极性脂质分析。

7. 人体皮肤神经酰胺分析。

8. 磷脂分析。

9. 银杏内酯A、B、C和白果内酯分析。

10. 银杏白果类黄酮芦丁分析。

11. 香料非法染料分析。

12. 药物剂型中的甲硝唑分析。

13. 软胶囊辅酶Q10分析。

14. 番茄提取物黄曲霉毒素B1、G1、B2和G2分析。

15. 中国植物马兜铃酸的指纹图谱分析。

16. 生物发光筛选。

17. 越桔提取物中苋菜红分析。

18. Triphala的鉴定。

19. 脂肪油的鉴定。

20. DPPH筛选。

21. 脂肪油USP分析。