感觉神经缺失对兔下颌骨牵张成骨影响的生物力学观察

神经生长因子对兔下颌骨骨折愈合的影响于立明，陈　坤，兰　青，张　伟１１１２（１．广东医学院附属医院口腔科，广东湛江５２４００１；２．吉林大学口腔医学院，吉林长春１３００４１）ＥｆｆｅｃｔｏｆｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｏｎｍａｎｄｉｂｌｅｆｒａｃｔｕｒｅｈｅａｌｉｎｇYU Li-ming ,CHEN Kun ,LAN Qing ,ZHANG Wei1112(1.Department of Stomatology,Affiliated Hospital of GuangdongMedical College,Zhanjiang 524001,China)Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Objective Methods Results Conclusion To study the role of nerve growth factor (NGF)in fracture healing of mandible.Thirty rabbits were randomly divided into NGF and control groups.After establishing right mandible fracture model and then fixing with titanium plate,the animals received local injection of 0.4g/d NGF or normal saline for 7days.The rabbits were sacrificed,and the mandibles were removed 7,14,and 28days after operation.The density,gray scale and morphometry of osteotylus were detected by bone densitometer,molybdenum target X-ray and HE stain,respecyively.The density and gray scale of osteotylus were significantly higher in NGF group than those in control group (<0.01)on days 7,14and 28postoperation.Osteoblast index,percentage of trabecular volume and trabecular thickness increased remarkably in NGF group on days 14and 28postoperation compared with control group (<0.01).Exogenous NGF can promote the fracture healing ofmandible.nerve growth factor;fracture healing;bone density;morphometryμP P 摘　要：关键词：中图分类号：文献标识码：文章编号：目的方法结果结论ＤＯＩ：(NGF)30NGF 15NGF 0.4g/d 71428X-71428NGF (<0.01)1428NGF (<0.01)NGF R 683A1005-4057(2011)02-0122-0410.3969/j.issn.1005-4057.2011.02.002探讨神经生长因子对下颌骨骨折愈合的作用。

兔下颌骨牵张成骨实验动物模型的建立中文摘要目的：建立兔下颌骨牵张成骨实验动物模型。

方法：选用30只新西兰大白兔，随机分为5组，每组6只。

在右侧下颌骨第一前磨牙前方和颏孔之间行骨切开术，用自制牵张器固定。

经过7天潜伏期，以每次0.25mm，每天2次的速度牵张，连续6天。

在术后每周进行X线观察，观察模型建立后牵张成骨（distraction osteogenesis.DO）的可行性。

分别在牵张结束,固定期第2、4、6、8周处死动物，切取标本行组织学观察，免疫组化观察和定量CT测定。

结果：大体标本示：实验动物手术后均成活、健康状况良好。

全部动物右侧下颌骨被成功的延长3mm，安置D0装置后伤口愈合良好，自制的DO装置固定牢靠。

X 线示：随固定时间的延长，牵张区均可见新骨逐渐形成，密度影逐渐增强。

组织学观察示：牵张结束牵张区中央为沿牵张力方向排列的胶原纤维束为主；固定期2周牵张间隙内可见沿牵张方向走行的较细的骨小梁结构；固定期4周：牵张区己被沿牵张方向走行的较粗的骨小梁结构所充满；固定期6周牵张区骨小梁沿牵拉方向呈编织状；固定期8周可见成熟的板层骨。

随着牵张时间的延长，新骨在牵张区内不断生成，成熟。

牵张区新骨的成骨方式为膜内成骨。

免疫组化染色示成骨细胞内Ⅰ型胶原呈阳性表达。

在固定期2、4周，成骨细胞内Ⅰ型胶原表达强于固定期6、8周。

结论：1. 根据兔下颌骨离体标本设计的内置式兔下颌骨牵张器，完全符合DO 动物实验的要求。

2. 兔下颌骨牵张成骨中新骨的成骨方式为膜内成骨3．兔作为牵张成骨动物模型具有很高的可行性和可重复性。

关键词:牵张成骨下颌骨动物模型兔The establishment of an animal model of mandibular distraction osteogenesis in rabbitsabstractObjective:To establish an animal model of mandibular distraction osteogenesis in rabbitsMethods:30 white New Zealand rabbits were divided into 5 groups randomly. Each group has 6 rabbits. Osteotomy was performed on right mandible between the first premolar and mental foramen .Bone stumps were repositioned and fixed with self-devised distraction equipment. After 6 days latency period,the distraction was carried out with the frequency of 2 times a day and with the rate of 0.25 mm once for 6 days. The new generation bone were studied by X- ray every week after the operation. When distraction completed , and the rabbits sacrificed after 0, 2 ,4 ,6 ,and 8 weeks. The specimens were take for Quantitative Computed Tomography(QCT),immunohistochemistry and histology examination.Results:specimens macrography All rabbits were in good condition with in the experiment period. The right mandible of every rabbits were lengthend 3mm successful.During the experiment period ,well healing was found between the distraction device and surrounding tissues.The instrument fixed well.X-ray With the time of fixation passing,the density of new bone was enhanced gradually.Histology showed that at the end ofdistraction period the distraction zone was filled with fibers arrayed from the distraction direction;on the second week of consolidation period the new bone trabecula extended from the distraction direction; on the fourth week of consolidation period the distraction zone was filled with mature bone trabecula arrayed from the distraction direction; on the sixth week of consolidation period ,woven bone was found in the distraction zone;on the eighth week of consolidation period, lamellar bone was found in the distraction zone.New bone gradually formed and matured within distraction gap along the time of study. The new bone regeneration was formed by intramembranous ossification.Immunohistochemistry show that the expression of CollagenⅠwas observed in the osteoblasts.The expression of CollagenⅠin the osteoblasts on the fourth week of consolidation period and on the second week of consolidation period was stronger than other time.Conclusion: 1.The internal fixed distracter that designed according to the structure of the mandible of rabbits maybe used for animal experiment.2.The new bone regeneration was formed by intramembranous ossification.3.Rabbit is a good animal for developing an experimentalmodel on study of distraction osteogenesis.Key words:Distraction Osteogenesis(DO) Animal model Mandible Rabbit前言牵张成骨（distraction osteogenesis.DO）是一种内源性组织工程技术，指在骨缝处或截开的骨断端处用特制的牵张装置以一定的速度和频率牵开，从而激发机体的自我修复和自我再生潜力，使两骨段延长并在其间隙内形成新生骨组织，以达到延长骨组织的目的。

第一部分实验动物骨缺损模型的研究和制备建立。

要建立骨不连接的实验动物模型，目前常用的有两种方法，其一是通过损害或阻止骨再生，其二是去除足够的骨质，后者称为基准大小缺损型骨不连接。

基准大小骨缺损的修复有许多影响因素：ｌ、动物的种类。

骨再生能力与动物的生物等级成反比，即越是高等的动物，骨再生修复能力越低。

２、动物的年龄。

发育期年龄的动物的成骨能力高于其他时期。

３、实验性缺损的解剖部位。

在动物个体之间不同骨骼、不同部位，其骨修复能力不同，而在同一动物的对称两侧骨之问则无差别。

４、骨缺损的大小。

５、骨膜的损伤程度。

ｌ、实验方法１、１实验动物相关解剖数据的测量ｌ、１、１实验动物：五月龄成年新西兰大白兔，体重２．０—２．５ｋｇ，雌雄不限。

实验部位：股骨。

特点：股骨为单一负重骨；可制作长的缺损；附近有可以进行手术操作的感觉神经、运动神经和血管；可以采用钢板螺丝钉固定。

标本：双侧股骨标本，共１０具。

ｌ、１、２测量项目：股骨干长度；股骨干中段骨皮质厚度；骨干横径与矢径；髓腔横径与矢径。

ｌ、１、３测量器材：游标卡尺。

１、ｌ、４方法：取５月龄成年新西兰大白兔（所有实验动物均由南方医院动物实验中心提供）５只，体重２．０－２．５ｋｇ。

耳缘静脉注射空气栓塞处死，剔取双侧股骨，用游标卡尺测量股骨长度、股骨干中点处矢状径和横径、股骨干中点骨皮质厚度（屈、伸、内、外侧四点骨皮质厚度的均值）和髓腔内径（髓腔横第一部分实验动物骨缺损模型的研究和制备图１—１大腿外侧入路，切开皮肤，皮下组织及深筋膜。

图１—２从股外侧肌与股二头肌之间的外侧肌间隙进入。

图１．３分别制作１０ｍｍ、１５ｍｍ、２０ｍｍ股骨干中段的骨与骨膜缺损。

图ｌ－４股骨前面钢板固定，钢丝辅助固定。

ａｎｄｄｅｅｐｆａｓｃｉａ．Ｆｉｇ．１－１Ａｐｐｒｏａｃｈ：Ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｓｋｉｎ，ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｔｉｓｓｕｅＦｉｇ．１－２Ｅｎｔｅｒｉｎｇｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｐａｔｉｕｍｉｎｔｅｒｍｕｓｃｕｌａｒｅｂｅｔｗｅｅｎｍｕｓｃｕｌｕｓｖａｓｔｕｓｌａｔｅｒａｌｉｓａｎｄｂｉｃｅｐｓｍｕｓｃｌｅｏｆｔｈｉｇｈ．Ｆｉｇ．１－３１０ｍｍ、１５ｍｍ、２０ｍｍｏｆｔｈｅｒａｂｂｉｔｆｅｍｏｒａｌｓｈａｆｔｓｂｏｎｅａｎｄｐｅｆｉｏｓｔｅｕｍｗｅｒｅｒｅｓｅｃｔｅｄｓｅｐａｒａｔｅｌｙｉｎｔｈｅｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｄｅｓｉｇｎ．Ｆｉｇ．１－４ＴｈｅｐｌａｔｅＷａｓｆｉｘｅｄｏｎｔｈｅａｎｔｅｒｉｏｒｓｕｒｆａｃｅｏｆｆｅｍｕｒ，ａｄｄｅｄｂｙｓｔｅｅｌ—ｗｉｒｅ．１０第一部分实验动物骨缺损模型的研究和制备２、２骨缺损模型手术结果分析２、２、１一般观察：所有实验动物无感染或死亡现象，皮肤无坏死，无内固定松动失败，全部进入结果分析。

兔双侧下颌骨牵引成骨动物模型的建立作者：李刚等来源：《中国美容医学》2013年第12期[摘要]目的：使用CBX01-15型兔下颌骨专用牵引器，建立兔双侧下颌骨牵引成骨动物模型，并评价其牵引效果。

方法：新西兰大白兔8只，行双侧下颌骨截骨术，安置牵引器。

延迟5天后，两侧下颌骨均以0.5mm/次，2次/天的速度牵引15天，牵引结束后固定8周，新骨分别行大体、放射学和组织学检查。

结果：所有动物均良好耐受牵引及固定，未发生死亡，双侧下颌体均显著延长。

固定8周时，两侧新骨均接近正常骨。

结论：兔双侧下颌骨牵引成骨动物模型牵引效果可靠，新骨再生良好。

[关键词]双侧下颌骨；牵引成骨；动物模型[中图分类号]R782 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2013）12-01299-03牵引成骨（distraction osteogenesis， DO）是一种通过一定频率和速度缓慢牵引骨裂隙，获得新骨再生的临床技术[1]。

建立有效的动物模型是进行牵引成骨临床研究的基础。

本研究应用自行设计的CBX01-15型兔下颌骨专用牵引器，进行兔双侧下颌骨截骨，并安置牵引器，对称性牵引，获得了良好的骨再生，未发生动物死亡，现报道如下。

1 材料和方法1.1 新西兰白兔8只，由徐州医学院实验动物中心提供，全身骨骼系统发育良好，口颌系统无异常，体重2.8～3.2kg。

1.2 牵引器：为自行设计，由浙江省慈溪市慈北口腔器械有限公司生产的纯钛CBX01-15型兔下颌骨专用牵引器。

可牵引距离20mm，螺杆每旋转360°牵开0.4mm。

1.3 动物手术及牵引过程：予2%戊巴比妥钠，30mg/kg，经兔耳缘静脉注射行全身麻醉。

颌下备皮，碘伏消毒铺无菌巾。

切开皮肤、皮下、肌层，分离达下颌骨下缘，贴骨面翻开骨膜，显露下颌骨体部及颏孔，在下颌第一臼齿与颏孔之间，裂钻垂直于下颌骨下缘行双侧下颌骨皮质骨截骨，折断下颌骨，注意保护下牙槽血管神经束，避让近下颌骨下缘骨内段下牙槽神经，使用直径1.6mm钻头钻孔，直径2.0mm钛钉固定牵引器。

转化生长因子在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中表达的实验研究的开题报告
一、研究背景
随着人口老龄化程度的加剧和骨缺损相关疾病的不断增多，神经生长因子在骨修复治疗中的临床应用愈加广泛。

为了进一步探究神经生长因子在骨修复过程中的作用和机制，本研究以转化生长因子（TGF）作为研究对象，从分子层面深入探究其在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中的表达情况和作用机制，为临床治疗提供理论参考和实践指导。

二、研究目的
本研究旨在探究转化生长因子在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中的表达情况，分析其作用机制，为临床治疗提供重要的理论依据和实践指导。

三、研究方法
1.实验对象及组分：
本研究选取30只健康有满口牙齿、体重相近的新西兰大白兔为实验对象，分为对照组和实验组。

2.实验方法：
对照组采用普通缝线进行硬膜下注射；实验组采用TGF进行硬膜下注射。

3.实验过程：
制作下颌骨缺损模型后，加入TGF进行硬膜下注射，注射进程术后第3天开始并持续14天。

4.实验指标：
主要观察指标包括下颌骨缺损面积、骨组织生长情况、血管新生情况等，并进行统计分析。

四、研究意义
本研究将深入探究转化生长因子在复合异种部分脱钙骨修复兔下颌骨缺损中的作用机制，为临床治疗提供更为全面、深入的指导和参考，为改善人类生命质量、推动医疗技术水平的提升贡献力量。

失神经支配在胫骨牵张成骨延长过程中的骨再生及Runx2表达郑科;宋冬惠;冯兴梅;祝颂松;胡静;叶斌【摘要】BACKGROUND:During the healing of fractures, removal of sciatic nerve can result in insufficient mechanical rigidity of newborn woven bone. However, there are less reports concerning the denervation effects during distraction osteogenesis. OBJECTIVE:To observe the effect of removal of the sciatic nerve on bone regeneration and the expression of Runt-related transcription factor 2 (Runx2) protein during distraction osteogenesis in a rabbit model. METHODS:Twenty-four adult male New Zealand rabbits were selected and underwent left tibial osteodistraction to construct animal models of distraction osteogenesis. Before distraction, the animals were randomly divided into group R (resecting the left sciatic nerve) and group I (intact left sciatic nerve). Six weeks after completion of distraction, the animals were kil ed and the lengthened tibias were harvested for radiography, three-dimensional CT reconstruction, histological evaluation, connectivity density (Conn.D) evaluation. RESULTS AND CONCLUSION:New regenerated bone was present and Runx2 protein was expressed in the distraction gaps of al animals at the end of the study, as revealed by radiography, three-dimensional CT reconstruction, and histological observation. However, less new bone formation and a lower degree of mineralization and expression of Runx2 protein were observed in group R compared with group I. The results suggest that thedenervation appears to have an inhibitory effect on bone formation and the expression of Runx2 protein during distraction osteogenesis.%背景：研究发现，去除坐骨神经会导致骨折愈合过程中新生编织骨机械硬度不足，而目前对有关失神经因素在牵张成骨过程中作用的相关报道较少。

兔失神经骨骼肌萎缩模型的建立及意义刘永斌;唐莉;刘坤祥【摘要】Objective To search for a suitable method for establishing the denervated skeletal muscle atrophy model.Methods 16 male and female New Zealand white rabbits were randomly divided into two groups:control group A and experimental group B.Under sterile conditions,cutting off the tibial nerve of rabbit as the experimental group,another group without any treatment as the control group.After the operation,the general living conditions of the animals were observed,and the muscle wet weight,the muscle fiber cross-sectional area and the number of motor end plates of the gastrocnemius muscle of the two groups were measured at the fourth and the eighth week postoperatively.Results The animals in the control group are in good condition,and the animals in the experimental group survived.The routine doses of cefminox are injected into the animals in the experimental group of postoperative 3 days,they had no signs of red swelling or wound infection and they are in good conditions.After four and eight weeks of cutting off the tibial nerve,the wet weight of muscle,the muscle fiber cross-sectional area and the number of motor end-plates of the gastrocnemius muscle of the two groups were measured.There was a significant difference in the operation side and the contralateral side of experimental group.And there was the same result between the experimental group and the control group(all P<0.05).Conclusion It is an appropriate way to establish denervated skeletal muscle atrophy model inrabbits.%目的探讨建立兔失神经骨骼肌萎缩模型的适合方法,并观察失神经骨骼肌形态变化.方法选取雌雄不限的新西兰大白兔16只,随机分为对照组和实验组.实验组兔无菌下切断其胫神经,对照组兔不作任何处理;两组动物常规单笼饲养.术后观察动物的一般生存状况,并于术后4、8周分别测定两组兔的腓肠肌的肌湿重、肌纤维横截面积,以及运动终板的数目.结果对照组动物状态良好,实验组动物全部存活.术后前3 d给予常规剂量头孢米诺后,实验组动物均未出现伤口红肿、感染,状态良好.切断胫神经4、8周后,测定两组兔的腓肠肌的肌湿重、肌纤维横截面积以及运动终板的数目,实验组的手术侧与健侧,实验组与对照组两两相比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论切断兔的胫神经可以作为建立动物失神经肌萎缩模型的合适方法.【期刊名称】《临床神经外科杂志》【年(卷),期】2017(014)002【总页数】4页(P129-132)【关键词】兔;失神经肌萎缩;动物模型【作者】刘永斌;唐莉;刘坤祥【作者单位】563000 遵义,遵义医学院人体解剖教研室;563000 遵义,遵义医学院人体解剖教研室;563000 遵义,遵义医学院人体解剖教研室【正文语种】中文【中图分类】R322骨骼肌失神经肌萎缩症在临床上比较常见，由于神经再生的速度极为缓慢，再生轴突到达运动终板前靶肌肉已发生了不可逆的萎缩[1-2]。

摘要：目的：本实验通过将骨髓间充质干细胞（mscs）注射于兔下颌骨牵张成骨处后，了解 mscs 对牵张成骨处促进成骨的机制。

方法：实验组将 mscs 注射于右侧牵张成骨处，而对照组注入等量的生理盐水。

x线图像分析系统计算新生骨生成区的平均灰度值。

免疫组化的方法检测牵张成骨处新生骨组织中骨保护素的表达。

结果：兔下颌骨牵张成骨实验动物模型造模成功，mscs注射可促进牵张区骨量增加，局部组织中骨保护素的表达明显高于对照组。

结论：mscs的促成骨作用可能通过表达骨保护素来实现。

关键词：牵引成骨；骨髓间充质干细胞；载体；骨保护素abstract：【中图分类号】r551.3 【文献标识码】b 【文章编号】1002-3763（2014）07-0009-02牵张成骨（ distraction osteogenesis， do）是一种内源性骨组织工程技术，主要是通过将骨骼切开，并在切骨线两侧安放特制的牵张器，在牵张力的作用下，切骨间隙逐渐增宽，从而达到延长骨骼目的。

是目前国内外口腔颌面外科领域的研究热点之一[1]。

骨髓间充质干细胞（ mesenehymal stem cell， mscs）是一群具有多向分化潜能的干细胞，在体外特定的诱导条件下可以分化为骨、软骨、神经、脂肪、肌肉及肝等多种功能细胞。

骨保护素（osteoprotegerin， opg）是一种新的肿瘤坏死因子受体家族成员，能够竞争性地与核因子-kb 配体结合，抑制破骨细胞活化，参与骨形成和改建，在骨的代谢平衡过程中起到极其重要作用。

本实验通过检测骨的牵张间隙内注射mscs后局部组织中的opg表达情况，进一步阐释其促成骨作用的机理。

1 材料与方法1.1 日本大耳白兔 20只兔下颌骨牵引器）、 sabc免疫组化试剂盒和 opg多克隆抗体1.2 兔骨髓间质干细胞的体外培养及鉴定1.3 兔单侧下颌骨do模型的建立及实验分组：实验动物麻醉成功后，常规皮肤消毒，暴露右侧下颌体，行下颌骨切开术并将牵张器固定于口外。

兔口轮匝肌失神经支配与再支配后形态学变化及功能恢复
的比较研究的开题报告
一、研究背景及意义
兔口轮匝肌是控制口唇运动的肌肉之一，其正常收缩能够保持口唇对称并对食物的咀嚼和语音的发音产生重要的作用。

然而，该肌肉的失神经支配或再支配与一些疾
病和损伤有关，导致口唇的肌肉功能受损和口腔疾病的发生。

因此，了解兔口轮匝肌
失神经支配或再支配后的形态学变化和功能恢复情况有助于临床治疗和疾病预防。

二、研究目的
本研究旨在比较兔口轮匝肌失神经支配和再支配后的形态学变化和功能恢复情况，为口腔疾病临床治疗提供依据。

三、研究内容与方法
本研究将采用动物实验方法，选取30只健康成年兔，分为3组。

其中，10只兔将进行兔口轮匝肌失神经支配手术，10只兔将进行兔口轮匝肌再支配手术，另外10
只兔为对照组。

手术后，将观察并比较三组兔口轮匝肌的形态学变化和功能恢复情况，并记录相关数据。

形态学方面，将采用组织学染色和显微镜观察法进行分析，以比较
不同时间段内兔口轮匝肌结构的变化。

功能恢复方面，将采用运动学测试和动力学分
析法以及肌肉电图检测法、咀嚼行为分析法等方法综合分析。

四、研究预期结果及意义
预期结果为兔口轮匝肌失神经支配或再支配后的形态学变化和功能恢复情况将有所不同，并且不同手术时间段以及观察方法可能会对结果产生影响。

研究结果将为临
床医生提供口腔疾病治疗的参考，同时也将为相关学科提供理论基础，帮助人们更好
地理解兔口轮匝肌失神经支配和再支配过程中的生物学机制。

［文章编号］1000-2200(2021)01鄄0006鄄04-基础医学•神经生长因子对兔牙髓干细胞体外增殖、成骨分化影响的实验研究路晓淼'，姜晟2,李孝亮2,田瑞雪「，刘姗姗「，赵莉莉「，张凯1［摘要］目的：探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对兔牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)体外增殖及成骨分化的影响，为牙髓组织的损伤修复提供新线索。

方法:采用酶解组织块法分离培养健康新西兰兔的DPSCs，光镜下观察其形态学及生长变化。

将培养的第3代DPSCs分为3组：空白组(只有DPSCs)、实验组(DPSCs混合100滋g/L NGF)和对照组(DPSCs混合矿化液)。

观察实验7d和14d时3组的细胞形态及碱性磷酸酶活性结果,RT-qPCR检测各组Runx-2、COL-1以及OCN的基因表达水平。

结果:体外培养的DPSCs生长良好，贴壁生长，大多为多角形或长梭形,呈巢式或集落生长;3组的碱性磷酸酶活性在实验14d时均高于实验7d时的数值，且7d和14d时实验组与空白组、对照组差异均有统计学意义(P< 0.05)；RT-qPCR结果显示培养14d时实验组中Runx-2、COL-1和OCN基因的表达量均高于空白组(P<0.05)。

结论:NGF可以提高DPSCs的增殖和成骨分化能力，两者的联合应用修复效果优于DPSCs单独应用。

［关键词］兔牙髓干细胞;神经生长因子;成骨分化［中图法分类号］R782.1［文献标志码］A DOI：10.13898/ki.issn.1000-2200.2021.01.002Effect of nerve growth factor on the proliferationand differentiation of rabbit dental pulp stem cells in vitroLU Xiao-miao1,JIANG Sheng2,LI Xiao-liang2,TIAN Rui-xue1,LIU Shan-shan1, ZHAO Li-li1,ZHANG Kai1(1.Department f Stomatology,The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College,Bengbu Anhui233004；2.Department of Stomatology Bengbu Medical College,Bengbu Anhui233030,China)［Abstract］Objective:To investigate the effects of nerve growth factor(NGF)on the proliferation and differentiation of rabbit dental pulp stem cells(DPSCs)in vitro,and provide a new clue for the repair of dental pulp tissue.Methods:The DPSCs from healthy New Zealand rabbits were isolated and cultured by tissue enzymedigestion method,and the morphology and growth changes of cells were observed under light microscope.The third passage DPSCs were divided into the blank group(only DPSCs),experimental group(DPSCs mixed with100g/L NGF)and control group(DPSCs mixed with mineralization solution).The cell morphology and alkaline phosphatase (ALP)activity in three groups were investigated after7days and14days of culture,and the mRNA expression levels of COL-1,Runx-2and OCN were detected using RT-qPCR.Results:The DPSCs cultured in vitro grew well,adhered to the wall,and most of them were polygonal or spindle shaped with nest or colony growth.The ALP activity value in three groups after14d of culture were higher than that on the7th day of culture, and the differences of which among three groups after7and14d of culture were significant(P<0.05).The results of RT-qPCR showed that the expression levels of COL-1,Runx-2and OCN mRNA in experimental group after14d of culture were higher than those in blank group(P<0.05).Conclusions:The NGF can promote the proliferation and osteogenic differentiation of rabbit DPSCs,and the combined application effect of the two is better than that of DPSCs alone.［Key words］rabbit dental pulp stem cells；nerve growth factor；osteogenic differentiation牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)是外胚层来源的干细胞,具有较高的细胞活性及多向分化潜能，因其取材丰富、易于培养等优点一直受到研究者的青睐。

全身应用神经生长因子在兔下颌骨牵张成骨中的作用符涛，杨擎天，张雅博，石东岳，杜兆杰(中国人民解放军第425医院五官科，海南三亚572000)【摘要】目的研究全身应用神经生长因子(NGF)促进兔下颌骨牵张成骨的作用。

方法24只新西兰白兔按随机数表法分为四组，每组6只，分别为：固定期2周NGF 组、固定期2周NaCl 组(即空白组)、固定期4周NGF 组、固定期4周NaCl 组(即空白组)。

全麻后双侧下颌骨行骨劈开并植入牵张器，经4d 延迟期，牵引10d ，速度为0.5mm/12h 。

按组别分别给予NGF (0.6µg/d×20d)和相当量生理盐水(1mL/d×20d)肌注。

于牵张期10d 及固定期2、4周行X 线、HE 染色及生物力学检测。

结果X 线示：NGF 组较空白组牵张区有更多新骨形成，骨钙化程度更高；HE 染色示：NGF 组较空白组新生骨小梁数量更多，排列更加规则；生物力学检测示：固定期2周NGF 组最大载荷为(12.18±1.65)N 、挠曲强度为(11.54±1.27)MPa ，均比空白组高25.9%(P <0.05)；固定期4周NGF 组最大载荷为(17.83±1.92)N 、挠曲强度为(16.28±1.74)MPa ，均比空白组高14.9%(P <0.05)。

结论全身注射神经生长因子能促进牵张成骨中牵张区下颌骨的骨再生。

【关键词】新西兰白兔；神经生长因子；牵张成骨；下颌骨【中图分类号】R -332【文献标识码】A【文章编号】1003—6350（2016）23—3794—04Effect of systemic application of nerve growth factor in rabbit models of mandibular distraction osteogenesis.FU Tao,YANG Qing-tian,ZHANG Ya-bo,SHI Dong-yue,DU Zhao-jie.Department of Ophthalmology and Otorhinolaryngology,No.425Hospital of Chinese PLA,Sanya 572000,Hainan,CHINA【Abstract 】ObjectiveTo evaluate the ability of systemic application of nerve growth factor (NGF)to enhancecallus mineralization in rabbit models of mandibular distraction osteogenesis.MethodsTwenty-four New Zealandwhite rabbits were randomly divided into 4groups (each with 6rabbits):consolidation 2weeks NGF group,consolida-tion 2weeks NaCl group (control group),consolidation 4weeks NGF group,consolidation 4weeks NaCl group (control group),under bilateral distraction osteogenesis at a rate of 0.5mm/12h for 10days,with a delay period of 4d.Immedi-ately after surgery,NGF (0.6µg/d×20d)and considerable amount of sodium chloride (1mL/d×20d)were intramus-cularly injected respectively.The rabbits were sacrificed at consolidation time of 2and 4weeks for X-ray,histomor-phometric and Biomechanical testing.ResultsNGF groups showed higher degree of mineralization and a greateramount of new bone trabeculae in the distracted area.Biomechanical testing showed that the maximum loading and flexural strength of consolidation 2weeks NGF group were (12.18±1.65)N and (11.54±1.27)Mpa,which were 25.9%higher than those in the control group (P <0.05),and the maximum loading and flexural strength of consolida-tion 4weeks NGF groups were (17.83±1.92)N and (16.28±1.74)Mpa,which were 14.9%higher than those in the control group (P <0.05).Conclusion Systematic application of NGF can accelerate callus mineralization in distractionosteogenesis.【Key words 】New Zealand white rabbits;Nerve growth factor;Distraction osteogenesis;Mandible·论著·doi:10.3969/j.issn.1003-6350.2016.23.004基金项目：海南省三亚市卫生科技创新项目（编号：2014YW48）通讯作者：杜兆杰。

失神经因素对兔松质骨骨折愈合改变的试验性研究的开题报告题目：失神经因素对兔松质骨骨折愈合改变的试验性研究背景：松质骨骨折在临床上非常常见，然而骨折愈合过程却需要多种生理和神经因素的联合作用。

失神经因素是指在神经系统受到损伤或切除后引起的感受器和中枢神经系统的改变。

最近的研究表明，信号缺失和神经萎缩的病理过程可以影响骨折愈合的速度和质量。

尽管许多神经因素参与骨折的治疗过程，但缺少对失神经因素对骨折恢复的影响的深入研究。

研究目的：本研究将评估缺少神经因素对兔松质骨骨折愈合的影响，并探讨在急性骨折伤害疼痛管理中应用神经因素的可行性。

我们将通过评估神经因素的存在与不存在对健康和病态兔的骨折愈合的影响来分析神经因素对骨折愈合的作用。

研究设计：本研究将在30只基因之间的健康成年雄性新西兰白兔（4-5个月，平均体重2kg）中实施。

将随机将它们分为3组：对照组（组A），失神经因素组（组B）和干预组（组C）。

为了制造骨折，将采用玻璃纤维针穿透肌肉填充松质骨的方法。

在组B中，将神经因素进行剖离并且组C中，给予神经因素干预。

将记录每组中兔体、骨折治疗过程和骨折治愈质量的变化和恢复时间。

预期结果：本实验的结果将提供关于失神经因素对松质骨骨折治愈质量和恢复时间的影响的新信息。

我们预期组C的骨折恢复会更快，骨折治愈质量更高。

这些结果可能会进一步促进失神经因素在急性创伤疼痛管理中的应用。

结论：本研究将为认识神经因素对骨折治疗的影响以及能否应用神经因素进行急性骨折伤害疼痛管理提供新的见解。

此外，研究结果将为不仅是骨折恢复而且包括其他骨科疾病治疗提供有价值的信息。

兔下颌骨骨膜牵张成骨的实验研究刘少华;魏奉才;张东;孙善珍;赵华强;李国菊【期刊名称】《华西口腔医学杂志》【年(卷),期】2006(24)3【摘要】目的探讨骨膜牵张成骨术的新方法.方法将自制骨膜牵张器固定于3只兔的双侧下颌骨表面,左侧行骨膜牵张,右侧不牵张,作为对照.牵张过程结束后处死所有动物,标本进行X线和组织学检查.结果3只动物术后情况良好,无明显并发症.在大体标本和X线片上表现出新骨形成.组织学检查显示牵张区有成骨样细胞浸润和骨组织形成.结论骨膜牵张成骨技术能够为骨缺损的修复提供一种新的方法.【总页数】3页(P273-275)【作者】刘少华;魏奉才;张东;孙善珍;赵华强;李国菊【作者单位】山东大学齐鲁医院,口腔颌面外科,山东,济南,250012;山东大学齐鲁医院,口腔颌面外科,山东,济南,250012;山东大学齐鲁医院,口腔颌面外科,山东,济南,250012;山东大学口腔医院,口腔颌面外科,山东,济南,250012;山东大学口腔医院,口腔颌面外科,山东,济南,250012;山东大学口腔医院,口腔颌面外科,山东,济南,250012【正文语种】中文【中图分类】R782.4【相关文献】1.神经生长因子修饰的间充质干细胞促进兔下颌骨牵张成骨时下牙槽神经损伤修复的实验研究 [J], 赵英华;刘晓昌;高乐;陈李彤;杨子桧;王磊2.骨形态发生蛋白-2基因修饰骨髓间充质干细胞复合对氧化聚乙烯和聚丙烯共聚物移植促进兔下颌骨牵张成骨的实验研究 [J], 周诺;黄旋平;江献芳;宋继传;李华;谢庆条3.下颌骨骨膜牵张成骨的实验研究 [J], 刘亚;宋庆高;尹鑫海;满城4.骨膜蛋白促进兔下颌骨快速牵张成骨的实验研究 [J], 蒋校文; 黄华庆; 陈金勇; 彭海艳5.骨膜蛋白促进兔下颌骨快速牵张成骨的实验研究 [J], 蒋校文; 黄华庆; 陈金勇; 彭海艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

腰交感神经阻滞对兔股骨头缺血性坏死骨修复的影响河北医科大学第三医院麻醉科（石家庄，050051）柳顺锁郑玉珍孟庆云目的:股骨头缺血性坏死（FHIN）是临床上的常见病，治疗方法有多种，均不够理想。

腰交感神经阻滞（LSNB）可增加支配区域的血流量，调节骨代谢。

从理论上LSNB可促进FHIN的修复，本实验研究LSNB对FHIN后修复的影响，并探讨其作用机制。

方法：择成年日本大耳白兔72只，随机分为3组：实验组（A 组），实验对照组（B组）及空白对照组（C组）。

A、B组兔在麻醉下，参照杨述华、栾景源等的方法分别建立兔FHIN模型和腰交感神经周围置管术。

术后3天开始给药，A组兔经硬膜外导管注入0.25%布比卡因1ml；B组经导管注入等量生理盐水，1次/日；C组不予任何处理。

于股骨头坏死模型制备前，三组兔各取8只行右后肢血流图测定，A、B于术后3日、注药后3、5周末分别于注药15分钟后再次测定, C组于相应的时间行上述操作。

A、B组兔于2、4、6周末，C组于相应的时间各取8只，摄双侧髋关节正位片，并进行评分。

随即将兔处死,取右侧股骨头，沿冠状面切开，前半部分HE染色，光学显微镜下观察；后半部分置于万能力学试验机上进行生物力学测定。

将上述石蜡切片脱腊至水，第八因子相关抗原免疫组织化学染色，光镜下行微血管计数。

结果：与LSNB前相比，A组各期Ma、Mi均有显著性增快（P<0.01），VRI显著减小（P<0.01）。

与B、C组无显著性变化。

与C组相比，2、4、6周末A、B组评分均显著增高（P<0.01），2周末A与B组之间无差别（P>0.05），而到4、6周末B组评分明显高于A组（P<0.01）。

与C组相比，2、4、6周末A、B组空骨陷窝数均显著增多（P<0.01），A组在各期均显著性少于B组（P<0.05）。

此外，注药2周末，A、B组镜下均见骨髓腔内脂肪细胞裂解，血细胞减少；4周末骨髓腔内B组可见少量的成纤维细胞和成骨细胞，骨小梁有缺损，A组可见大量的成纤维细胞和成骨细胞，并有钙盐沉积，6周末B 组骨小梁部分断裂，部分变纤细；A组骨髓腔内有大量新骨形成，骨小梁明显增宽。

电穿孔介导的基因治疗兔下颌骨牵引成骨模型建立与鉴定的开题报告一、研究背景与意义下颌骨成骨不足是一种常见的疾病，它会导致牙齿不齐、咬合不准、颌面不对称等问题。

针对这种疾病，传统的治疗方法是使用下颌骨牵引器进行牵引，但是该方法存在一些问题，如牵引过程中的疼痛和不适、佩戴面具的不便等。

因此，研究基因治疗的方法具有重要的临床意义。

电穿孔介导的基因治疗是一种新型的技术，可以有效地传递基因到细胞内引起生长。

本研究旨在建立一种兔下颌骨牵引成骨模型，并利用电穿孔介导的基因治疗方法进行治疗，以期实现快速而有效的治疗下颌骨成骨不足的目的。

二、研究内容和方法1.研究内容（1）建立兔下颌骨牵引成骨模型，并通过X线和CT检查进行鉴定。

（2）制备pSNAV2.0-GFP表达载体，并对其进行电穿孔转染。

（3）观察pSNAV2.0-GFP表达载体对兔下颌骨牵引成骨模型的治疗效果，并通过显微镜、组织切片和分子生物学方法进行评价。

2.研究方法（1）建立兔下颌骨牵引成骨模型：选取12只健康成年雄性兔子，其中6只为实验组，6只为对照组。

实验组使用下颌骨牵引器进行牵引，对照组不进行任何干预。

两组动物均按照相同的饲养方式和时间进行饲养，每周进行1次X线和CT检查以评价下颌骨成骨情况。

（2）制备pSNAV2.0-GFP表达载体：将EGFP序列和SNAV2.0载体连接后扩增，经过酶切、凝胶回收、PCR纯化、真核表达载体的重组、质粒扩增、制备纯化等步骤制备pSNAV2.0-GFP表达载体。

（3）观察pSNAV2.0-GFP表达载体对兔下颌骨牵引成骨模型的治疗效果：将制备好的pSNAV2.0-GFP表达载体转化到实验组兔子的下颌骨中，观察其治疗效果，并通过显微镜、组织切片和分子生物学方法进行评价。

三、预期成果和意义本研究预计能够建立一种可靠的兔下颌骨牵引成骨模型，并证实电穿孔介导的基因治疗方法对该模型的有效性。

该研究的成果具有以下意义：（1）为进一步了解基因治疗技术在治疗下颌骨成骨不足方面的作用提供了实验基础。