BD流式细胞仪
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BD流式细胞仪在生物学中的应用流式细胞仪是一种生物学实验仪器,用于分离、分析和计数细胞。
它的原理是将细胞悬浮液通过高速流动,通过透过与侧向散射光的反射来将不同种类、不同形态的细胞进行分类。
目前最新的流式细胞仪是BD流式细胞仪。
这种流式细胞仪由美国生物技术公司BD公司于1970年开发,是目前市场上最普遍使用的一种流式细胞仪。
BD流式细胞仪在生物学中有着广泛的应用。
它不仅能够用于细胞质、细胞核和细胞表面受体的研究,还可以用于染色体分离和单细胞测序。
下面将详细介绍BD流式细胞仪在生物学中的应用。
一、免疫细胞测定BD流式细胞仪可以快速、精确地检测细胞表面受体的表达情况,从而帮助科学家了解免疫系统的功能。
通过检测表面标志物可以识别不同类型的细胞,如T细胞、B细胞、自然杀伤细胞和巨噬细胞。
此外,还可以检测细胞的活性和亚群表达,这对于研究免疫细胞的功能和机制非常重要。
二、研究癌症BD流式细胞仪可以指导癌症研究。
它可以检测和分析肿瘤细胞的生物学属性,如抗原表达、染色体异常和膜蛋白的结构。
此外,它还可以帮助发现肿瘤细胞中新的标记和指示物,有助于研究人类癌症的发生和发展机制。
三、细胞分选BD流式细胞仪可以准确地测量细胞大小和复杂性,并根据细胞的大小、颜色、细胞内分子的多形性等属性对单个或多个目标细胞进行分选。
这种方法可以产生相当纯的单细胞悬液,比传统的手动淘汰细胞要更为简便、快速。
四、细胞增殖测定BD流式细胞仪可以帮助科学家研究细胞增殖,这对于癌症研究和其他疾病的研究非常重要。
通过测定DNA合成、蛋白质合成或细胞的生长状态,可以精确地测定细胞的增殖速率,进而分析细胞周期和有关疾病的分子标志物等。
以上是对BD流式细胞仪在生物学中的应用进行的一些简要介绍。
可以看出,BD流式细胞仪在现代生命科学中有着广泛的应用,它已成为研究细胞和生物分子的标准技术之一。
一、概述BD流式细胞仪是一种用于细胞分析及检测的高级仪器,其在医学、生物学和临床诊断等领域有着广泛的应用。
然而,随着使用的不断增加,对BD流式细胞仪的仪器比对偏倚标准也越来越受到关注。
二、BD流式细胞仪的仪器比对1. 仪器比对的概念仪器比对是指通过使用标准物质,对实验室内的仪器进行检验,以验证仪器的准确性和可靠性。
对于BD流式细胞仪来说,仪器比对是非常重要的,因为它直接关系到实验结果的准确性。
2. BD流式细胞仪的仪器比对的重要性BD流式细胞仪是一种高灵敏度的仪器,对于细胞的检测和分析具有极高的要求。
如果仪器本身存在偏倚,那么将会对实验结果产生误差,从而影响到科研结果和临床诊断的准确性。
对BD流式细胞仪的仪器比对非常关键,它能够及时发现仪器是否存在偏倚,并及时对仪器进行校正,以确保实验结果的准确性和可靠性。
三、BD流式细胞仪的仪器比对偏倚标准1. 标准物质的选择对于BD流式细胞仪的仪器比对,选择合适的标准物质非常重要。
通常会选择稳定、易于保存、易于制备、成本低廉的标准物质,如彩色微珠、DNA标准物质等。
2. 比对的频率对于BD流式细胞仪的仪器比对,比对的频率通常是根据仪器的稳定性和使用频率来确定的。
一般来说,如果仪器非常稳定,使用频率较低,可以每季度进行一次比对;如果仪器使用频率较高,可以每月进行一次比对,以确保仪器的准确性和可靠性。
3. 比对的步骤BD流式细胞仪的仪器比对通常包括以下步骤:(1)选择标准物质,并按照相关操作规程进行制备和保存;(2)在同一条件下,使用同一批标准物质进行多次测试,得到均值和标准偏差;(3)将得到的均值和标准偏差与仪器内部标准或已知值进行比对,判断仪器是否存在偏倚。
四、结语BD流式细胞仪的仪器比对偏倚标准对于保证实验结果的准确性和可靠性非常重要。
通过选择合适的标准物质、确定比对的频率和严格按照比对的步骤进行操作,可以及时发现仪器的偏倚,并及时对仪器进行校正,以确保实验结果的准确性和可靠性。
bd facsduet技术参数BD FACSDuet是一款流式细胞分析仪,其技术参数如下:1.流速:BD FACSDuet流速可以达到每秒2000个事件,使得样本可以快速地通过仪器进行分析。
2.激光器:BD FACSDuet配备了多种激光器,可以使用不同的激光波长进行细胞分析。
常见的波长包括488nm、561nm、405nm和640nm 等。
3.探测器:BD FACSDuet具有多通道的探测器系统,可以同时检测多种细胞标记物。
常用的探测器包括前向散射、侧向散射和多个荧光通道等。
4.参数:BD FACSDuet可以同时获得多个细胞特征参数,包括细胞大小、形态复杂度、表面标记物的表达水平、细胞数量统计等。
5.支持的样本类型:BD FACSDuet适用于多种类型的细胞样本,包括悬浮细胞、固定细胞、细胞培养液等。
6.自动补偿:BD FACSDuet具有自动补偿功能,能够对荧光信号之间的重叠进行补偿,减少误差。
7.数据分析软件:BD FACSDuet配备了专业的数据分析软件,可以对获得的细胞数据进行进一步的分析和可视化。
8.样本处理:BD FACSDuet除了进行流式细胞分析外,还支持样本的排序、提取和储存,满足不同实验需求。
9.操作界面:BD FACSDuet拥有友好的操作界面,易于操作和学习,即使对于新手也能够快速上手使用。
10.应用领域:BD FACSDuet广泛应用于生命科学研究、医学诊断、药物研发等领域,可以帮助科研人员更好地理解细胞的结构和功能。
总结起来,BD FACSDuet是一款功能强大的流式细胞分析仪,具有快速流速、多种激光器、多通道探测器、多个细胞特征参数等优点。
它适用于不同类型的细胞样本,具有自动补偿功能和专业的数据分析软件。
BD FACSDuet操作简便,广泛应用于生命科学研究和医学诊断等领域。
一、产品介绍
BDFACSCalibur流式细胞仪
ACSCalibur是世界上第一台双激光、四色台式流式细胞仪,可同时应用于细胞分析和分选。
从FACSCalibur诞生至今,经过多次改进和升级,已经广泛应用于各个临床和科研用户,由于其稳定全面的性能,FACSCalibur已经成为全球销售量最大的流式细胞仪。
二仪器配置
主机
进样器
工作站
1)性能指标:标准激光器:15mw,488nm,气冷氩离子激光。
用于3色荧光分析。
第二激光器:636nm,红色二极管激光,用于第四色色荧光分析。
2)测定参数:FSC,SSC,FL1,FL2,FL3,FL4
3)光电倍增管:光谱检测范围300nm-1100nm,电压150v-990v
4)最小检测颗粒大小:0.2um-50um
5)荧光检测灵敏度:<750MESF
6)检测分辨率:全峰高CV<2%
7)样品获取速度:10000个/秒。
四、相关二手产品图片
五、二手产品信息
商品名称:BDFACSCalibur流式细胞仪仪器种类:生化仪器价格:32万
年限:1年内
仪器状态:无故障正常运行
仪器发布:仪器无忧网&司马缸APP
仪器来源:企业。
目录简介流式细胞仪 (3)流式细胞仪的临床检验项目淋巴细胞亚群分析 (4)肿瘤细胞DNA检测分析 (5)白血病及淋巴瘤免疫分型 (6)残余白血病检测……………………………………………………………、、6网织红细胞计数……………………………………………………………、、7造血干细胞计数……………………………………………………………、、7血小板疾病及活化血小板检测……………………………………………、、8HLA-B27检测 (8)器官移植的配型及免疫状态监控…………………………………………、、9AIDS诊断及治疗监控………………………………………………………、9流式细胞仪的临床/医学研究 (10)流式细胞技术的发展及国内现况………………………………、10建议流式细胞仪之机型----BD公司FACSCalibur仪器主要特点……………………………………………………………、、11配套设施(计算机、软件、试剂、样本制备仪、售后服务)………、、12仪器主要技术参数 (15)BD公司全球及中国业务介绍BD公司流式细胞仪培训计划BD公司推荐配置单BD公司仪器与其她厂家仪器比较表一、简介流式细胞仪(一)流式细胞仪概念流式细胞术(Flow Cytometry ,FCM)就是一种对处在液流中的细胞或其它生物微粒(如细菌)逐个进行多参数的快速定量分析与分选的技术。
简言之,流式细胞仪就是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪,就是在单个细胞分析与分选基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质,如大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测量并可分类收集的高技术,FCM以其快速、灵活、大量、灵敏与定量的特色,广泛应用于基础研究与临床实践各个方面,包括细胞生物学、肿瘤学、血液学、免疫学、药理学、遗传学及临床检验学等,在各学科领域发挥着重要的作用。
(二)原理待测样本的细胞悬液,在鞘液的包围与约束下,细胞排成单列高速由流动室喷嘴喷出,形成细胞液柱。
主题:BD流式细胞仪培训证书学分1. 引言BD流式细胞仪是一种高效的细胞分析技术,在生物医药研究领域得到了广泛应用。
为了提升使用者的技能和专业水平,许多机构和培训机构提供了相关的培训课程,并颁发相应的培训证书和学分。
本文将讨论BD流式细胞仪培训证书对个人职业发展的意义,以及如何获得这些证书所代表的学分。
2. BD流式细胞仪培训证书的意义BD流式细胞仪是一种用于分析细胞的仪器,具有高灵敏度、快速、准确等特点,被广泛应用于生物医学研究和临床诊断。
对于这项高精密的技术,合格的操作技能和专业知识是必不可少的。
获得BD流式细胞仪培训证书可以证明个人具备了相应的操作技能和专业知识,是参与者专业素养的一种有力证明。
3. 如何获得BD流式细胞仪培训证书获得BD流式细胞仪培训证书需要参加相应的培训课程,并通过相关的考核。
一般来说,这些培训课程会包括理论课程、实验操作和考核。
参与者需要学习流式细胞仪的基本原理、操作方法、实验设计以及数据分析等内容,并进行实际操作,通过考核评定是否具备了相应的操作技能和专业知识。
通过培训课程和考核后,合格的参与者将获得相应的培训证书和学分。
4. BD流式细胞仪培训证书的学分之意义获得BD流式细胞仪培训证书所代表的学分具有重要的意义。
这些学分可以作为个人职业发展的资质证明,证实个人具备了相应的技能和知识水平。
这些学分可以作为在职培训的证明,证明个人在相关领域接受过系统的培训和考核。
这些学分也可以作为学术或职业资格的一部分,被公认的学术和专业机构所接受和认可。
5. 结语通过参加BD流式细胞仪培训课程并获得相应的培训证书和学分,个人可以提升自己在相关领域的职业素养和竞争力。
获得这些证书所代表的学分对于个人的职业发展和学术成就具有重要的意义,值得重视和努力。
希望本文对于BD流式细胞仪培训证书与学分相关内容能够对读者有所帮助。
BD流式细胞仪培训证书和学分是参与者在这一领域取得的重要资格认证和学术成就。
bd facsduet技术参数BD FACSDuet是一款流式细胞术分析仪,具有先进的技术参数和功能。
下面是对其技术参数的详细描述。
1.高灵敏度:BD FACSDuet具有高灵敏度的激光系统,能够检测低浓度的细胞和微粒,实现精确的细胞计数和分析。
其激光器输出功率达到100 mW,激发光源包括488 nm蓝光激光器和640 nm红光激光器,满足多种特定荧光标记的细胞和微粒的检测需求。
2.多参数分析:BD FACSDuet能够同时检测多个参数,可使用3或4参数的光散射分析,以及4色或6色的荧光标记分析。
可根据实验需要选择合适的参数和波长,如前体细胞分析、T细胞测定等。
3.自动装载和自动排液:BD FACSDuet配备了智能装载和排液系统,能够自动完成样本的装载和排液操作,提高工作效率和减少操作失误。
4.高速分析:BD FACSDuet采用先进的流式分析技术,能够实现高速、高通量的细胞分析。
其最高分析速度可达1500个事件/秒,能够快速获取大量数据,提供详尽的细胞分析结果。
5.数据分析软件:BD FACSDuet配备了专业的数据分析软件,可以对采集到的数据进行快速、准确的分析和解读。
软件具有友好的界面和丰富的分析工具,支持数据导出、打印和共享等功能。
6.多种样本适应性:BD FACSDuet适用于各种类型的样本,包括细胞悬液、血液、体液等。
其高灵敏度和多参数分析功能,使得它在各种科研和临床应用中都能够发挥重要作用。
7.低噪声和短采集时间:BD FACSDuet具有低噪声的感应器和高速采集系统,能够在短时间内快速准确地获取细胞信息,提高实验效率。
8.多重实验配置:BD FACSDuet支持多种不同的实验配置,包括细胞分类、细胞表型分析、细胞周期分析等。
可根据实验需要选择合适的实验配置模式,实现多样化的细胞分析需求。
总结起来,BD FACSDuet具有高灵敏度、多参数分析、自动装载和排液、高速分析、数据分析软件、多种样本适应性、低噪声和短采集时间,以及多重实验配置等先进的技术参数。
美国BD公司流式细胞仪FACSCalibur基本型FACSCalibur分析功能强大,配置灵活,极宽的试剂选择范围、便捷的计算机和软件系统,绝对配合今天高效多能的实验室需要。
FACSCalibur性能卓越,不仅通过其用户友好的整体设计帮助临床医生快速实现常规免疫表型,CD4T细胞计数、DNA、网织红细胞、血小板等临床分析,FACSCalibur更以其完美的三色分析功能成为遗传、肿瘤、血液、免疫功能等诸多研究不可或缺的重要工具。
(一)FACSCalibur(基本型)仪器主要特点•完美的三色分析系统可全自动实现CD4T细胞亚群的百分比和绝对计数的检测,满足HIV筛查和治疗监测的全程需要。
•自动化程度高FACSCalibur以用户为中心的系统设计,从自动化样本处理、自动上样,到按钮式液流控制、自动化软件获取和分析,每个环节操作都保证简便快捷, 并提供准确客观的实验结果,重复性极好。
•分析速度快FACSCalibur荧光检测全部采用大型流式细胞仪国际通用的光电倍增管以保证最快的分析速度10000个细胞/秒。
FACSCalibur是目前世界上分析速度最快的台式机之一。
•DNA分析的解决之道DDM (Doublet Discrimination Module)双粘体辨别模式通过专利技术检测分析区别实体组织标本中的粘连细胞群体,最大程度的减少假阳性,是实体组织标本DNA分析不可缺少的工具之一。
•唯一的双参数阈值设定最大程度减少无关噪音,增加获取分析速度,从而使含量极微的细胞检测成为可能。
•开机无需等待开机后即可检测样本。
机器无噪音。
•设计灵活,提供多种配置供用户选择第二根激光、分选及其浓缩系统、自动进样系统等都可以由用户根据实际需要和资金情况自由选配,进行功能扩展升级。
(二)配套设施1、FACStation数据处理系统采用最先进的Macintoshi苹果计算机系统,用户友好MacOS界面设计,易学易操作;与PC兼容性好,数据可在PC机上分析;网络功能强大,可与Internet 和Intranet连接;不易感染病毒超强图形处理功能,可进行多维多色分析,是处理流式数据最佳的选择。
bd流式细胞仪原理
BD流式细胞仪是一种常用的细胞分析仪器,原理主要包括荧
光信号的激发、细胞悬浮液的传递和荧光信号的检测三个部分。
1. 荧光信号的激发:通过激光器(通常为氩离子激光器)产生高能的激光束,通过透镜系统将激光束汇聚到待测样品(细胞)上。
激光束与细胞接触后的发生相互作用,激发细胞内所标记的荧光染料或表达的荧光蛋白,使其发出荧光信号。
2. 细胞悬浮液的传递:细胞悬浮液通过压力或重力传递到流动池中,并按单个细胞顺序通过激光束的焦点区域。
为了使细胞单独通过,可通过流速控制或产生涡流效应避免细胞之间的相互干扰。
3. 荧光信号的检测:细胞通过激光束的焦点时,荧光信号被收集和分析。
通常通过使用多个荧光滤光片或光栅分光器将发射光分成不同的波长范围,然后由光电倍增管或光电二极管(PMT或APD)接收并将荧光信号转化为电信号。
电信号经
放大和转换后,可以由计算机进行数字化处理和分析。
综上所述,BD流式细胞仪通过激发荧光信号、传递细胞悬浮
液和检测荧光信号的方式,实现对细胞的多参数分析,如细胞数量、大小、表面标记物的表达水平等。
该原理在免疫学、细胞生物学等领域具有广泛的应用。
bd流式细胞仪的仪器比对偏倚标准bd流式细胞仪是一种常用的实验仪器,用于分析和计数细胞数目并获得细胞的荧光表达。
在实际操作中,为了保证检测结果的准确性和可靠性,仪器比对偏倚标准非常重要。
本文将深入探讨bd流式细胞仪的仪器比对偏倚标准。
仪器比对是指将待测仪器与参考标准仪器进行比对,通过对比两者的结果差异来判断待测仪器的准确性和误差水平。
在bd流式细胞仪的使用中,常见的仪器比对偏倚标准包括:计数偏差、故障率、灵敏度和线性范围。
首先,仪器比对偏倚标准中的计数偏差是指流式细胞仪在不同样本中进行计数时的误差。
在实际操作中,我们通常会使用标准微粒或已知细胞浓度的样本来进行比对。
通过对比待测仪器和参考标准仪器的结果差异,可以评估待测仪器的计数偏差。
计数偏差越小,说明待测仪器的计数结果越准确。
其次,仪器比对偏倚标准中的故障率是指流式细胞仪在长时间运行中的故障率。
在使用流式细胞仪时,我们希望能够稳定地获取准确的结果。
因此,仪器比对偏倚标准中的故障率非常重要。
通过长时间的运行和比对,可以评估流式细胞仪的故障率。
故障率越低,说明流式细胞仪的稳定性越好。
灵敏度也是仪器比对偏倚标准中非常重要的参数之一。
流式细胞仪的灵敏度是指能够检测到的最低浓度或最低表达量。
在流式细胞仪的使用中,我们通常会使用标准样本来测试流式细胞仪的灵敏度。
通过比对待测仪器和参考标准仪器的灵敏度,可以评估待测仪器的检测能力。
灵敏度越高,说明待测仪器对低浓度或低表达量样本的检测能力越好。
最后,仪器比对偏倚标准中的线性范围是指流式细胞仪在不同浓度或表达量范围内的线性关系。
在实际样本检测中,我们往往需要检测不同浓度或表达量的样本。
如果流式细胞仪的线性范围较小,那么在高浓度或高表达量范围内的结果可能会失真。
因此,线性范围也是仪器比对偏倚标准中需要考虑的重要因素之一。
综上所述,bd流式细胞仪的仪器比对偏倚标准包括计数偏差、故障率、灵敏度和线性范围。
在实际操作中,我们需要使用标准样本或已知浓度的样本来进行比对。
bd流式细胞仪操作步骤
嘿,咱今儿就来讲讲 bd 流式细胞仪的操作步骤。
这玩意儿啊,就
像是一个神奇的魔法盒子,能帮咱解开细胞的好多秘密呢!
首先呢,你得把这个宝贝仪器给准备好,就像战士上战场得先把武
器擦亮一样。
确保它干净整洁,各个部件都乖乖待在自己的位置上。
然后啊,就是样本的制备啦。
这可不能马虎,就好比做菜,食材不好,那菜能好吃吗?得精心处理样本,让细胞们都能以最好的状态去
接受检测。
接下来,把样本小心翼翼地放进流式细胞仪里。
这时候你可得轻点儿,别把细胞们给吓着咯。
启动仪器后,就看着那些细胞一个个地通过检测通道,就好像一群
小精灵在欢快地跳舞。
在这个过程中,你得时刻盯着数据和图像,这可关系到你能不能得
到准确的结果呢。
这就跟看比赛一样,得全神贯注,不能走神。
分析数据的时候可得细心再细心,要从那些密密麻麻的数据里找出
有用的信息,可不是一件容易的事儿呢,就像在大海里捞针。
操作bd 流式细胞仪就像是一场冒险,每一步都充满了挑战和惊喜。
你得有耐心,还得有细心,更要有那份探索的好奇心。
要是操作不当,那可就糟糕啦,就像走路走偏了一样,可能就达不到目的地啦。
所以啊,每一步都得稳稳当当的。
咱得把这个 bd 流式细胞仪当成咱的好伙伴,好好对待它,它才能好好给咱干活呀!它能帮咱发现细胞世界里那么多神奇的事情,难道不是很厉害吗?大家在操作的时候可别马虎哟,不然怎么能发现那些隐藏的秘密呢?加油吧,让我们一起在细胞的海洋里尽情遨游!。
bd流式细胞仪培训证书学分-回复什么是bd流式细胞仪培训证书以及它的学分情况。
BD流式细胞仪是一种先进的生物医学检测仪器,广泛应用于生命科学和医学研究领域。
随着流式细胞仪技术的不断发展,对流式细胞仪操作和数据分析的专业人员需求也逐渐增加。
为了提高流式细胞仪操作人员的专业水平,BD公司推出了BD流式细胞仪培训证书,以帮助有意向从事流式细胞仪相关工作的人员提升技能,并证明其在该领域具备专业知识和操作经验。
BD流式细胞仪培训证书包括两个级别,分别为初级培训证书和高级培训证书。
根据BD公司的规定,学员需要依次完成初级培训和高级培训,并通过相应的考试才能获得相应级别的证书。
初级培训证书是为初学者设计的,旨在让学员了解流式细胞仪的基本原理、操作流程和常见应用。
该培训内容通常包括流式细胞仪的基础知识、样本准备技巧、细胞染色方法、数据获取与分析等。
初级培训一般需要15-20个小时的学习时间。
学员可以参加BD公司组织的线上或线下培训课程,并根据培训课程要求完成相关作业和考试。
高级培训证书是初级培训证书的进阶课程,适合那些已经熟悉流式细胞仪基础知识并有一定实践经验的人员。
高级培训的内容更加深入和复杂,包括高级细胞染色技术、多参数分析方法、质量控制和数据解读等。
高级培训一般需要40-50个小时的学习时间。
学员需要完成一定数量的实验操作和数据分析,并通过考试才能获得高级培训证书。
BD流式细胞仪培训证书具有一定的学分。
根据BD公司的规定,初级培训证书可以获得1个学分,高级培训证书可以获得2个学分。
这些学分可以用于个人继续教育或者申请相关职称评定。
获得BD流式细胞仪培训证书不仅可以提高操作人员的技能水平,还能够增加其在流式细胞仪领域的竞争力。
同时,学习过程中的作业和考试也能帮助学员检验自己的学习成果,以及发现和弥补自己的不足之处。
因此,BD流式细胞仪培训证书是对流式细胞仪操作人员进行专业认证和技能提升的重要途径。
总而言之,BD流式细胞仪培训证书是BD公司为提高流式细胞仪操作人员专业水平而推出的认证计划。
bd流式细胞仪荧光对应通道
BD流式细胞仪是一种常用的实验仪器,用于分析和分类细胞。
在流式细胞仪中,荧光对应通道是指不同荧光染料所发出的荧光信号被检测的通道。
不同的荧光染料对应不同的通道,以便对细胞进行多参数分析。
一般而言,BD流式细胞仪的荧光对应通道可以根据实验需要进行设置和调整。
常见的荧光染料及其对应的通道包括:
1. FITC(荧光素异硫氰酸酯)染料通常对应488nm激发激光和530/30nm检测滤波器。
2. PE(phycoerythrin)染料通常对应488nm激发激光和
585/42nm检测滤波器。
3. APC(allophycocyanin)染料通常对应633nm激发激光和660/20nm检测滤波器。
4. PerCP(peridinin-chlorophyll-protein complex)染料通常对应488nm激发激光和675/30nm检测滤波器。
5. PE-Cy7染料通常对应488nm激发激光和780/60nm检测滤波器。
6. APC-Cy7染料通常对应633nm激发激光和780/60nm检测滤波器。
除了上述常见的荧光染料外,还有许多其他荧光染料以及对应的检测通道,可以根据实验需要进行设置。
此外,一些高端的流式细胞仪还具有更多的荧光激发和检测通道,以支持更复杂的多参数分析。
总的来说,荧光对应通道的设置需要根据实验所用的荧光染料和流式细胞仪的配置来确定,合理的设置可以确保准确的数据采集和分析。
希望这些信息能够帮助你更好地理解BD流式细胞仪荧光对应通道的相关知识。
bd流式细胞仪补偿调节步骤嘿,朋友们!今天咱就来讲讲bd 流式细胞仪补偿调节那点儿事儿。
这玩意儿啊,就像是给细胞们画画,得把颜色调得恰到好处才行。
你看啊,这补偿调节就好比是给一场细胞的大派对做布置。
首先呢,咱得把各种颜色的标记都准备好,就像给派对准备不同颜色的气球一样。
然后,启动流式细胞仪,这就好比打开了派对的大门。
接下来,就是关键的一步啦!咱得先设置好对照管,这对照管就像是派对上的标准模板,让我们知道啥是正常的颜色搭配。
如果对照管没设置好,那可就乱套啦,就好比派对上的灯光一会儿红一会儿绿,让人眼花缭乱。
然后呢,我们要在仪器上找到补偿调节的选项,这就像是在派对现场找到调节灯光颜色的按钮。
这时候,可不能马虎,得仔细盯着屏幕,看着那些细胞信号的变化,就像看着派对上人们的表情一样。
哎呀,要是调得不好,那结果可就不准确啦!就跟派对上灯光颜色不对,大家都没了兴致一样。
所以得慢慢来,一点点地调整,直到那些细胞信号变得清晰、准确。
这过程中,可别嫌麻烦呀!就像给一幅画精心上色一样,需要耐心和细心。
有时候可能会觉得怎么调都不太对,别着急,就再试试,多尝试几次总能找到最佳的状态。
等把补偿调节好了,哇塞,那就像是看到了一幅完美的画作呈现在眼前,或者是一场精彩的派对圆满成功。
这时候,你就能得到准确可靠的数据啦,就像派对结束后大家留下的美好回忆一样珍贵。
总之呢,bd 流式细胞仪补偿调节虽然有点复杂,但只要咱用心去做,就一定能调好。
就像办一场成功的派对一样,需要我们认真对待每一个细节。
大家加油哦,相信你们一定能掌握这个技能!让我们的细胞研究之路更加顺畅!。
目录简介流式细胞仪 (3)流式细胞仪的临床检验项目淋巴细胞亚群分析 (4)肿瘤细胞DNA检测分析 (5)白血病及淋巴瘤免疫分型 (6)残余白血病检测 (6)网织红细胞计数 (7)造血干细胞计数 (7)血小板疾病及活化血小板检测 (8)HLA-B27检测 (8)器官移植的配型及免疫状态监控 (9)AIDS诊断及治疗监控 (9)流式细胞仪的临床/医学研究 (10)流式细胞技术的发展及国内现况 (10)建议流式细胞仪之机型----BD公司FACSCalibur仪器主要特点 (11)配套设施(计算机、软件、试剂、样本制备仪、售后服务) (12)仪器主要技术参数 (15)BD公司全球及中国业务介绍BD公司流式细胞仪培训计划BD公司推荐配置单BD公司仪器与其他厂家仪器比较表一、简介流式细胞仪(一)流式细胞仪概念流式细胞术(Flow Cytometry ,FCM)是一种对处在液流中的细胞或其它生物微粒(如细菌)逐个进行多参数的快速定量分析和分选的技术。
简言之,流式细胞仪是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪,是在单个细胞分析和分选基础上发展起来的对细胞的物理或化学性质,如大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测量并可分类收集的高技术,FCM以其快速、灵活、大量、灵敏和定量的特色,广泛应用于基础研究和临床实践各个方面,包括细胞生物学、肿瘤学、血液学、免疫学、药理学、遗传学及临床检验学等,在各学科领域发挥着重要的作用。
(二)原理待测样本的细胞悬液,在鞘液的包围和约束下,细胞排成单列高速由流动室喷嘴喷出,形成细胞液柱。
当液柱通过检测区,在入射的激光束照射下产生前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC),它们分别反映细胞大小和颗粒度,根据这些特性可以将细胞分类。
经一种或几种特殊荧光标记的样本,在激光束的激发下所产生的特定荧光,可被光学系统检测并输送到计算机进行分析,得到细胞相应的各种特性。
(三)流式细胞仪检测的细胞特性二、流式细胞仪的临床检验项目目前在国内最常见的临床应用有两大类:一为肿瘤细胞的DNA含量析;另一为细胞表面的表型测定,包括淋巴细胞亚型分析、免疫功能监测、白血病和淋巴瘤免疫分型、残余白血病检测、以及HLA-B27组织抗原检测等等。
1、淋巴细胞亚群分析淋巴细胞亚群分析可以通过相对计数、绝对计数与率的变化监控疾病状态下的免疫状况(如肿瘤、感染性疾病、免疫性疾病等),以此辅助诊断、追踪病情发展及决定用药时机。
检测原理:利用各种单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合,再配合多色荧光染料,即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来,进而得到各亚群的相对比例。
最常检测的亚群包括T细胞(CD3)、B细胞(CD19)、NK细胞(CD16+56)、辅助性T细胞(CD3+CD4+)和抑制性T细胞(CD3+CD8+)等。
应用实例:S i m u l S E T系统利用C D14/C D45设门技术精确检测淋巴细胞亚群比例。
*其中绿色细胞群体为淋巴细胞,红色为单核细胞,蓝色为粒细胞。
2、DNA分析肿瘤细胞的DNA倍体分析是流式技术另一重要应用,临床上可对一些恶性肿瘤进行早期诊断,跟踪随访和早期治疗,大大提高一些肿瘤的治愈率和生存率。
检测原理:正常人体细胞的DNA含量是二倍体,细胞群体具有特定的增殖比例。
通过检测细胞的DNA含量和增殖比例,可以了解细胞群体的倍体性和增殖能力。
具体操作时,先将实体组织制备成单细胞悬液,用固定或去污剂在细胞膜上打孔,使DNA特异的荧光染料如PI(碘化丙啶)导入细胞核,PI和DNA缄基对特异结合后上机检测PI的荧光强度,并进行数据分析。
应用实例:乳腺癌病人的手术标本分析图。
*其中红色群体为二倍体,黄色群体为异倍体。
3、白血病和淋巴瘤免疫分型正常白细胞在其分化过程中,随着系列的不同、成熟阶段的差异,会在细胞膜表面表达不同的分化抗原。
白血病细胞则在癌变的过程中,丧失了正常细胞底系列专一性和分化阶段规律性,在本质上有别于正常骨髓细胞。
应用此特点可进行免疫表型分析,以鉴别各种白血病和淋巴瘤,辅助临床诊断、评估疗效和预后。
常用的抗原包括:CD3、CD5、CD7、CD19、CD20、CD22、CD10、HLA-DR、CD13、CD14、CD33、CD34、GLY-A、MPO等等。
应用实例:利用CD45三色分析急性髓性白血病。
* 左图为正常骨髓,绿色为正常淋巴细胞,深红为单核细胞,玫瑰红为成熟粒细胞,浅蓝为有核红细胞,深蓝为未成熟细胞;右图为急性髓性白血病图形,可见与正常明显的差别。
4、残余白血病检测残余白血病是指经过适当的治疗、疾病缓解后仍残留在病人血中的极少量白血病细胞。
通常白血病病人经过化疗后的疾病复发率为60-80%,经过自体或异体骨髓移植后的复发率仍偏高(20-50%)。
所以如果能早期检测到复发的迹象,即白血病细胞的再增生,则可以提前给予病人及时恰当的治疗。
依照不同的白血病,选用不同的抗体组合(如下表)来检测残余白血病。
流式细胞术可在一万个骨髓细胞中检测到一个白血病细胞;尤其是TdT的应用大大提高了检测灵敏度。
白血病种类可选择的抗体组合T-ALL cyto CD3/TdTB-ALL CD13/TdT,CD33/TdTPre-B-ALL cyto μ/TdTAML CD13/TdT, CD33/TdT,CD7/TdT5、网织红细胞分析网织红细胞计数是骨髓红细胞造血功能的重要指标。
传统手工计数耗时耗力,缺乏准确性。
流式细胞仪网织红细胞计数系统由于采用系统试剂与全自动软件,可在短时内分析大量细胞,低水平网织红细胞也可达到统计分析精度,省时省力,结果正确可靠。
* 左图中红色群体为红细胞,右图利用RNA染料噻唑橙(TO)区分成熟红细胞和网织红细胞。
6、造血干祖细胞检测在治疗恶性血液病时,大剂量化疗或放疗摧毁有病的骨髓后,干细胞移植保证了健康的干祖细胞重建骨髓,产生正常的血细胞,实体肿瘤病人亦可通过干细胞移植抗衡大剂量化疗导致的致死性血液毒性。
与大剂量化疗相配合的干细胞移植已在临床大大提高了某些肿瘤病人的长期存活率,如乳腺癌、儿童神经母细胞瘤、卵巢癌等。
另外,干细胞移植与再生障碍想贫血、免疫缺隐、血红蛋白病等非恶性造血系统疾病治疗的相关性也正在研究中。
* 上图中红色群体是经过多参数设门后精确设定的CD34阳性细胞群体,绿色部分是进行定量计数的标准微球。
7、血小板疾病及活化血小板检测通过血小板膜糖蛋白的检测可以诊断先天性或获得性血小板疾病如Bernard-Soulier 综合征(CD42b-42a),血小板无力症(CD41-CD61),免疫性血小板减少等等。
评价血小板活化程度的应用领域包括:缺血性冠状动脉疾病如心绞痛、心肌梗死、血管成形术、心肺旁路术等;缺血性脑血管病如脑梗塞、TIA、脑动脉硬化等;糖尿病;恶性肿瘤;高血压病;高脂蛋白血症;高粘滞血症;抗血小板药物机制研究与疗效监测;吸烟;情绪性应急等。
应用实例:CD61/CD62P/PAC-1三色标记分析血小板活化。
8、HLA-B27检测由流行病学统计结果显示,HLA-B27基因型阳性的人患数个遗传性免疫疾病的机率,比一般人要高很多,以强直性脊柱炎为例,约为87倍。
因此HLA-B27检测可以有效帮助临床鉴别诊断强直性脊柱炎等血清阴性骨关节疾病。
其他相关性疾病有:遗传性关节炎如Reiter’s综合征, 反应性关节炎,肠性关节炎等。
检测时选用CD3/HLA-B27双标记抗体,圈定T淋巴细胞亚群,再分析其细胞表面是否表现HLA-B27组织抗原。
因为T细胞表面只表达ClassⅠ型HLA抗原,可避免ClassⅡ型HLA抗原引起的误差。
应用此法无需分离细胞,比传统的微量细胞毒实验节约时间,且检测结果更敏感、客观、容易判读。
9、器官移植的配型及免疫状态监控以流式细胞仪进行器官移植前配对(Flow Cytometry Cross Match,FCCM)的优势在于抗体检测的特异性、敏感度以及检测结果和手术成功率之相关一致性。
利用多参数测定,可了解受者血中是否有抗供者抗体,此抗体与供者的哪种白细胞反应,以及该抗体是否会造成细胞毒性。
移植前的评估包括HLA配型及混合淋巴细胞反应,移植后的评估包括外周血淋巴细胞亚群测定、抗供者抗体检测等等。
移植后定期检查外周血淋巴细胞亚群,可以预估排异反应,以及病毒感染等问题。
10、AIDS诊断及治疗监控由于特定细胞群体的绝对计数在临床诊断与治疗上具有极大意义,如CD4+细胞绝对计数可辅助HIV监控治疗,也可通过定量标准微球得到亚群的绝对数值。
应用实例:检测艾滋病人血中辅助T细胞和抑制T细胞的比例及绝对数。
三、流式细胞仪的临床/医学研究流式细胞仪应用的灵活性允许临床医生科学家们充分发挥想象,满足他们的临床研究需要:细胞免疫功能、细胞凋亡、胞内细胞因子、胞内Ca2+及 PH值、多药耐药性、寄生虫、细菌、病毒、环境科学等等。
流式细胞仪多参数分析配合细胞分选,可以提供样本的更多有效信息。
细胞分选是确认细胞形态、进行后续分子生物学研究(如FISH、PCR等)或细胞功能性研究的理想手段。
四、流式细胞技术应用的发展及国内现况从1930年,Caspersson 和Thorell以细胞的计数开始,试图寻找研究细胞的新工具,到1973年,BD公司与美国斯坦福大学合作,研制开发并生产了世界第一台商用流式细胞仪FACS I,流式细胞术进入了一个空前飞速发展的时代。
进入九十年代,流式细胞术作为一门生物检测技术已经日臻完善,仪器的硬件平台也已达到稳定的技术状态,科学家们、仪器制造商们又纷纷将研究焦点转向荧光染料的开发、单克隆抗体技术、细胞的制备方法和提高电子信号的处理能力上来,以拓展日趋广泛的应用领域。
流式细胞技术的强大生命力植根于生物学、医学的各个领域,正是无数日新月异、变化多样的应用项目在全球范围内推动了流式细胞技术的发展。
自1981年,北京师范大学生物系引进中国第一台流式细胞仪(FACS Ⅲ, BDIS)至今,各种型号的流式细胞仪在国内安装使用已超过300台,其中BD公司的流式细胞仪近230台(FACSCalibur已超过140台,详见附录2“BD公司国内流式细胞仪用户名单”)。
从仪器引入中国二十年的发展历史来看,最早的流式细胞仪大都应用在纯科研领域。
随着流式技术的发展,方法学的成熟,尤其是越来越多的用于临床的试剂推出,流式细胞仪已成为国内各大教学医院和医学中心重要的诊断工具,被广泛地应用于新的临床实验上。
五、建议流式细胞仪之机型----BD公司FACSCalibur:FDA通过的世界唯一全自动四色台式分选机FACSCalibur集分析和分选功能为一身,配置灵活,结合自动化的样本处理系统、极宽的试剂选择范围、强大的计算机和软件系统,绝对配合今天高效多能的实验室需要。