黄粉虫抗菌肽的分离纯化及生物活性研究

经济昆虫黄粉虫初探摘要：本文对我国黄粉虫Tenebrio m olitor (L. )的养殖历史，形态鉴定特征，生物学习性，饲养方法以及实用价值做了初步的归纳和总结，并在此基础上预测了该种资源昆虫的发展前景。

关键词：黄粉虫养殖实用价值发展前景黄粉虫T enebrio m olitor (L. )属鞘翅目、拟步甲科,别名面包虫、高蛋白虫等,世界性分布,原产于美洲, 20世纪50年代由前苏联传入我国。

原为贮藏物害虫,国内于1963年开始研究与描述,为分类鉴定提供了依据。

黄粉虫的人工饲养已有100余年历史,国内外均有民间饲养的记载,是一种传统活体饵料。

目前主要作为新型动物蛋白来源、科学研究材料,在饲料、食品和医药保健品以及抗菌蛋白等方面具有很高的综合利用价值。

进入新世纪,黄粉虫的资源价值越来越被社会所发掘和重视, 2001～2003年国家农业部将“黄粉虫工厂化生产技术的示范推广”列入丰收计划项目,使黄粉虫的人工生产养殖技术向高效标准化规模养殖模式发展,并且涌现出许多专业化的公司和企业,带动了产业化发展,极大地推动了这一珍贵昆虫蛋白资源的利用[1]。

1.形态特征黄粉虫属于全变态类昆虫，其整个生长发育过程分为成虫、卵、幼虫、蛹4个阶段。

1.1 成虫体长约15～20毫米，虫体为长椭圆形，体色初羽化时为乳白色，后逐渐变为黄白色、黄褐色、黑褐色，最后呈黑赤褐色即为性成熟期，开始进行交配。

体面多密集黑斑点，无毛，有光泽。

黄粉虫成虫食性杂。

不能飞行，爬行速度快。

喜黑暗，怕光，夜间活动较多。

在一定条件下，成虫有自相残杀习性，但比幼虫要轻得多。

初羽化的成虫为乳白色，隔2天后逐渐变为坚硬的黄褐、红褐，4～5天后变为黑色，开始交配、产卵。

成虫的寿命在50～160天，一般寿命为60～90天，平均寿命达50天以上。

1.2 卵卵长1～1.5毫米，长圆形，乳白色，卵壳较脆软，易破裂。

黄粉虫成虫在产卵的同时分泌大量黏液，包裹于卵壳外，粘附食物碎屑及粪便，可以起到保护卵的作用，同时可以保证幼虫孵化后及时直接食用饲料和卵壳。

黄粉虫(Tenebrio molitor 拉丁学名)( Yellow mealworm 英文名)是一种高蛋白高钙高营养的食用昆虫。

黄粉虫，又名黄金虾、汉虾又叫面包虫，是鸟、龟、蝎、蛇、鱼、林蛙等的饲料，也是具有高蛋白、低脂肪和奇香特点的绿色昆虫食品，目前主要以出口为主，在国际市场供不应求。

属最新研究开发的新品种，在“全国特种养殖种殖交流会”上评为金奖养殖项目是旱地养殖虾类新品种，属高蛋白、个体不大营养很高，它所含的营养是牛奶的10倍，含有人体必须的十八种氨基酸、多种微量元素、维生素、靶式定向补充体内所需各种营养。

黄粉虫原产南美洲，因其蛋白营养成分高居各类活体动物蛋白饲料之首，国内外著名动物园都用其作为繁殖名贵珍禽、水产的肉食饲料之一。

我国20世纪50年代引进养殖，以后不断向社会扩散并被应用于各种特种经济动物养殖的活体饲料，通过长期的人工饲养可以高密度集约化繁育饲养，并被誉为“蛋白质饲料宝库”，大力促进了林蛙、蛤蚧、鳖、蟮鱼、蜗牛、壁虎和蛇等特种经济动物饲养业的发展。

昆虫活性蛋白被誉为21世纪人类的全营养食品！黄粉虫工厂化养殖因其投资少、技术简单易学、易于工厂化和家庭养殖等特点，据有关专家研究表明，昆虫活性蛋白不仅含有大量对人体有着特殊作用的几丁质、抗菌肽防御素和外源性凝集素；还富含人体必需的九种氨基酸和蛋白质、游离氨基酸、维生素、矿物质元素、不饱和脂肪酸等多种营养成分，且与人体的正常比例一致，很容易被吸收和利用，被昆虫专家称为是继家蚕和蜜蜂之后的第三大昆虫产业，其蛋白质含量为46.8~54。

蛋白质中必需氨基酸的比值与人体需要相适应。

脂肪含量为36.8。

其中不饱和脂肪酸（P）占24.8，饱和脂肪酸（S）占27.6。

不饱和脂肪酸中人体必需的亚油酸占23.1。

每100克黄粉虫含维生素B20.52MG，维生素E0.44mg，铁6.5mg,锌12.2mg，硒46.2mg，从营养的总体来看，黄粉虫其蛋白质、脂肪含量高，质量好为主要特点，同时锌、硒、维生素E，以及我国人民膳食结构中普遍缺乏的维生素B2含量亦较高。

经济昆虫黄粉虫初探摘要：本文对我国黄粉虫Tenebrio m olitor (L. )的养殖历史，形态鉴定特征，生物学习性，饲养方法以及实用价值做了初步的归纳和总结，并在此基础上预测了该种资源昆虫的发展前景。

关键词：黄粉虫养殖实用价值发展前景黄粉虫Tenebrio m olitor (L. )属鞘翅目、拟步甲科,别名面包虫、高蛋白虫等,世界性分布,原产于美洲, 20世纪50年代由前苏联传入我国。

原为贮藏物害虫,国内于1963年开始研究与描述,为分类鉴定提供了依据。

黄粉虫的人工饲养已有100余年历史,国内外均有民间饲养的记载,是一种传统活体饵料。

目前主要作为新型动物蛋白来源、科学研究材料,在饲料、食品和医药保健品以及抗菌蛋白等方面具有很高的综合利用价值。

进入新世纪,黄粉虫的资源价值越来越被社会所发掘和重视, 2001～2003年国家农业部将“黄粉虫工厂化生产技术的示范推广”列入丰收计划项目,使黄粉虫的人工生产养殖技术向高效标准化规模养殖模式发展,并且涌现出许多专业化的公司和企业,带动了产业化发展,极大地推动了这一珍贵昆虫蛋白资源的利用[1]。

1.形态特征黄粉虫属于全变态类昆虫，其整个生长发育过程分为成虫、卵、幼虫、蛹4个阶段。

1.1 成虫体长约15～20毫米，虫体为长椭圆形，体色初羽化时为乳白色，后逐渐变为黄白色、黄褐色、黑褐色，最后呈黑赤褐色即为性成熟期，开始进行交配。

体面多密集黑斑点，无毛，有光泽。

黄粉虫成虫食性杂。

不能飞行，爬行速度快。

喜黑暗，怕光，夜间活动较多。

在一定条件下，成虫有自相残杀习性，但比幼虫要轻得多。

初羽化的成虫为乳白色，隔2天后逐渐变为坚硬的黄褐、红褐，4～5天后变为黑色，开始交配、产卵。

成虫的寿命在50～160天，一般寿命为60～90天，平均寿命达50天以上。

1.2 卵卵长1～1.5毫米，长圆形，乳白色，卵壳较脆软，易破裂。

黄粉虫成虫在产卵的同时分泌大量黏液，包裹于卵壳外，粘附食物碎屑及粪便，可以起到保护卵的作用，同时可以保证幼虫孵化后及时直接食用饲料和卵壳。

几种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞(K562)的作用研究杨晓红;张庆华;段希玲;董建臻;侯玉英;赵瑞君【期刊名称】《热带医学杂志》【年(卷),期】2006(6)6【摘要】目的研究各种昆虫抗菌肽对肿瘤细胞的作用效果。

方法对家蝇(Muscadomestica)幼虫、蛹及德国蜚蠊(Blattellagermanica)、美洲蜚蠊(Periplanetaamericana)若虫采用针刺感染大肠杆菌诱导产生抗菌肽,经研磨、层析提取其抗菌肽,并通过流式细胞仪测定各种抗菌肽对人髓样白血病细胞(K562)的作用。

结果①抑菌圈显示所提取的各种抗菌肽均有一定的抑菌作用。

所提抗菌肽浓度:家蝇幼虫6.51mg/ml,家蝇蛹4.08mg/ml,美洲大蠊6.93mg/ml,德国小蠊6.71mg/ml。

②家蝇幼虫和蛹的抗菌肽对K562有一定的杀伤作用,而美洲蜚蠊和德国蜚蠊不仅不能杀伤K562,在某种程度上还有减少其死亡和促进其生长的作用。

结论各种昆虫抗菌肽由于结构不同,因而功能也太不同。

【总页数】3页(P669-671)【关键词】抗菌肽;抗肿瘤作用;结构和功能【作者】杨晓红;张庆华;段希玲;董建臻;侯玉英;赵瑞君【作者单位】山西职工医学院寄生虫教研室;山西医科大学寄生虫教研室;河北农业大学植物保护学院【正文语种】中文【中图分类】R730.5【相关文献】1.黄粉虫抗菌肽促K562细胞凋亡作用及其机制的研究 [J], 樊宏英;刘颜岗;赵瑞君;乔丛静;申金雁2.家蝇胚胎细胞抗菌肽对人髓样白血病细胞K562生长抑制作用的研究 [J], 张金花;贺莉芳;杨霞霞;万启惠3.抗菌肽CM4组分对K562癌细胞染色质DNA断裂作用的SCGE研究 [J], 王芳;张双全;戴祝英4.昆虫抗菌肽的分子结构、作用机理及其在抗肿瘤细胞方面的应用 [J], 强承魁;杨兆芬;赵万勇5.家蝇幼虫抗菌肽对肿瘤细胞K562作用的扫描电镜观察 [J], 程璟侠;代培芳;罗景星;张庆华;赵瑞君因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

昆虫抗菌肽的分离纯化技术Technical standard for isolation and purification of insect antimicrobial peptides昆虫抗菌肽的分离纯化技术标准1范围本标准规定了昆虫抗菌肽的分离纯化技术要求，本标准以家蝇作为材料提纯血淋巴的抗菌肽。

本标准适用于以家蝇为材料的抗菌肽分离纯化，对于其他昆虫等作为材料纯化抗菌肽可参照执行。

本规程规定了抗菌肽的提取方法、Tricine-SDS-PAGE电泳、抗菌肽活性测定方法等技术要求。

本规程适用于抗菌肽的快速分离。

2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注明日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版本）适用于本文件。

GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》GB/T6682-2016《分析实验室用水规格和试验方法》GB4789.2-2016食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定3术语下列术语和定义适用于本文件：3.1抗菌肽（antimicrobial peptides）抗菌肽（antimicrobial peptide，AMPs）是一种基因编码的、在体内诱导的、具有抗菌活性的碱性多肽物质，强碱性、热稳定性、对细菌、真菌、病毒等微生物与寄生虫有抑杀活性。

某些抗菌肽还具有抑杀肿瘤、中和内毒素、促进伤口愈合、调节免疫等多种生物学功能。

3.2家蝇（Musca domestica）在25℃，相对湿度60%～70%的实验室内饲养家蝇，成蝇喂以白糖和奶粉，每日更换饮水。

幼虫以人工饲料（发酵麦麸）喂养。

3.3多肽（polypeptides）介于氨基酸与蛋白质之间，有2个或2个以上氨基酸通过肽键连接形成的一类化合物。

3.4多肽活力（antimicrobial activity）抑制微生物的能力，以抑菌圈直径（mm）来表示。

黄粉虫对幼刺参生长、消化和免疫力的影响刺参是中国海产经济资源的重要海珍品，目前随着养殖规模的不断增大，出现了成参免疫力下降、幼参生长慢和成活率低等一些问题，严重制约了刺参养殖业的发展。

而黄粉虫幼虫粉不仅蛋白质含量高，而且脂肪和各种微量元素也很丰富，尤其是含有甲壳素和天然抗菌肽等物质对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和猪链球菌等具有较强的抑制作用，且黄粉虫具有饲养投资小、食性杂、抗病力强、生长周期短和随时随地即可养殖等优点，有效地弥补了鱼粉的缺乏。

因此将黄粉虫粉作为新型的具有免疫增强效果的饲料添加剂对从根本上提高刺参免疫力、降低生产成本、减少病害和经济损失及促进刺参养殖业可持续发展具有重大的现实意义。

据研究，在畜禽饲料中添加一定量的黄粉虫粉能显著提高动物的生产性能及健康水平，而将黄粉虫粉作为饲料添加剂或鱼粉的替代物应用于刺参养殖的饲喂效果目前罕有报道，尤其是黄粉虫粉对刺参免疫酶与消化酶活性的影响尚未见研究。

试验尝试在幼刺参饲料中用黄粉虫粉替代鱼粉，通过观测淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)与溶菌酶(LSZ)的活性等评价指标，初步研究黄粉虫粉对幼刺参生长性能、消化功能与免疫机能的影响，旨在为黄粉虫粉在刺参健康生态养殖中的合理应用提供科学依据。

参考行情：海参市场行情一、材料与方法1、饲料的制作用马尾藻、鼠尾藻、海泥、豆粕、小麦粉、谷物调和鱼油、优质鱼粉及刺参专用复合多维制成粗蛋白含量为18．60％的均匀粉末状基础饲料，所有饲料原料均通过80目标准筛。

在等氮的基础上将黄粉虫粉以20％、4O％、60％和80％的比例代替基础饲料中的鱼粉，制成4种试验饲料。

黄粉虫幼虫购自锦州市花鸟鱼虫市场，于7O℃烘干研粉备用。

5种试验饲料配方见表1。

2、饲养试验试验用幼刺参取白辽宁省锦州市金域刺参良种场，将225头质量(平均体质量为2.62g)和大小相似的健康幼参随机均匀放人15个(试验饲料即为5种处理，每处理设3个重复)塑料整理箱中(50cmX40cmX30cm)，每箱养15头参，每箱放12L水。

3. 使用布尔逻辑组配算符，列出以下课题的检索表达式：（1）唐代历史或经济（2）中国金融管理（3）海湾战争及世界和平答：（1）唐代AND(历史OR经济)；（2）中国AND金融AND管理（3）海湾战争AND世界和平4. 对您选定的课题并经过加工的检索词，布尔逻辑组配检索提问式，检索并记录检索文献数量。

课题：黄粉虫的利用价值检索提问式：黄粉虫AND应用研究文献数量：488 CNKI所属学科：蚕蜂与野生动物保护希望解决的问题：1.黄粉虫的成分分析2.黄粉虫的生长发育阶段3.黄粉虫的饲养价值4.黄粉虫的营养价值5.黄粉虫的利用现状文献论文：1.黄粉虫粪的营养价值分析关键词：黄粉虫粪；蛋白质饲料资源；营养成分；天然抗菌物质；小麦麸；无污染；限制因子；动物性；蛋白质含量；饲料工业发展；2.黄粉虫主要营养成分的分析和评价关键词：黄粉虫；昆虫食品；营养分析；3.黄粉虫幼虫富硒研究【关键词】黄粉虫；硒；锌；生物富集；4.黄粉虫中油脂和壳聚糖的提取工艺研究【关键词】黄粉虫；油脂；甲壳素；壳聚糖；提取；5.黄粉虫抗菌物质的提取、活性测定及应用研究【关键词】黄粉虫；抗菌物质；提取；抗菌活性；防腐；6.中国黄粉虫产品开发利用的现状及其对策【关键词】黄粉虫；开发利用；产品；抗菌肽；策略；7. 黄粉虫纤溶活性蛋白的酶学性质和抑癌作用研究【关键词】黄粉虫；纤溶活性蛋白；酶学性质；米氏常数Km；丝氨酸蛋白酶；抑癌作用；8.黄粉虫幼虫饲养及其加工利用效果研究【关键词】黄粉虫；饲养；利用；9.黄粉虫幼虫对城市污泥重金属的积累作用【关键词】黄粉虫幼虫；城市污泥；重金属；生物积累；饲养条件；10.日粮中添加黄粉虫粪对蛋鸡产蛋性能及蛋品质的影响【关键词】黄粉虫粪；产蛋性能；蛋品质；试验组；海兰褐商品蛋鸡；生物活性物质；日粮；产蛋率；添加量；蛋黄颜色；。

黄粉虫的利用价值及开发前景2012级动特2班吴贵辉（20120732）摘要：黄粉虫，也叫面包虫，是鸟、龟、蝎、蛇、鱼、林蛙等的饲料，也是具有高蛋白、低脂肪和奇香特点的绿色昆虫食品，目前主要以出口为主，在国际市场供不应求。

昆虫活性蛋白被誉为21世纪人类的全营养食品！据有关专家研究表明，昆虫活性蛋白不仅含有大量对人体有着特殊作用的几丁质、抗菌肽防御素和外源性凝集素；还富含人体必需的九种氨基酸和蛋白质、游离氨基酸、维生素、矿物质元素、不饱和脂肪酸等多种营养成分，且与人体的正常比例一致，很容易被吸收和利用，被昆虫专家称为是继家蚕和蜜蜂之后的第三大昆虫产业，发展前景极为光明。

关键词：黄粉虫；价值；前景前言：黄粉虫在昆虫分类学上隶属于鞘翅目，拟步行科，粉虫甲属。

为多汁软体昆虫，脂肪含量30%，蛋白质含量高达50％以上，鞘翅目的几种幼虫粗蛋白质含量在23%-66%之间[12] ，此外还含有磷、钾、铁、钠、铝等常量元素和多种微量元素及动物生长所必需的16种氨基酸，每100克干品含氨基酸高达847.91毫克，其各种营养成份居各类饲料之首。

而且其具有食性杂、适应能力强、生长快、生命力强、繁殖率高等特点，其主要食物为麦麸、玉米面、农作物秸秆、蔬菜等。

是一类非常值得开发的食品资源【1】。

人类食用价值黄粉虫富含蛋白质、维生素、矿物质等营养成分，蛋白质的含量大大高于鸡蛋、牛肉、羊肉等常规动物性食品，且有易于消化吸收，是优良的蛋白食品。

黄粉虫也是口感好、风味独特、易于被消费者接受的一种食品昆虫。

可以烘烤、煎炸、加工成具有果仁味的蛋白饮品、精制蛋白粉、酒精饮品、氨基酸口服液等多种形式的食品。

黄粉虫不仅蛋白质含量丰富，且所含氨基酸的种类齐全，可以作为人体必需氨基酸的来源；此外，黄粉虫还含有丰富的不饱和脂肪酸，其中亚油酸的含量高达24.1%；黄粉虫的矿质元素含量也很丰富，除钾、钙、镁、磷的含量明显高于一般的动物食品外，铁、锌、铜、硒等微量元素也远远高于一般动物食品，特别是通过黄粉虫的生物富积作用使锌、硒等元素的含量大大增加，从而使黄粉虫具有更高的保健价值。

抗菌肽的研究进展摘要：由于细菌对抗生素耐药性不断出现, 研发新型抗菌物质已迫在眉睫。

而抗菌肽是广泛存在于自然界生物中的具有广谱抗菌、抗病毒、抑制杀伤肿瘤细胞等作用的多肽。

本文介绍了抗菌肽的结构，抗菌肽的生物学活性，抗菌肽的作用机理和作用机制，以及抗菌肽的应用和前景。

关键词：耐药性，抗菌肽；作用机理；前景抗菌肽，简称ABP,是由宿主产生的一类能够抵抗外界病原体感染的小分子多肽。

广泛存在于各种生物体内。

1980 年，瑞典科学家Boman 等从天蚕蛹的血淋巴中分离得到天蚕素( cecropin ) 抗菌肽，使人们对抗菌肽的作用机理和应用有了一个崭新的认识。

目前世界上已知的抗菌肽共有1 700余种。

由于热稳定性强，且对较高离子强度环境有较强的适应性，不仅有广谱抗细菌能力, 而且有的对真菌、病毒及癌细胞也有一定的抑杀作用，最重要的是可以杀伤动物体内的肿瘤细胞，却又极少破坏动物体内的正常细胞，因此，抗菌肽的开发和应用研究已成为国内外昆虫学、生理学、药理学研究热点，在动植物转基因工程及药物开发领域及农业、食品等领域具有广阔的应用前景。

1 .抗菌肽的结构1 .1 一级结构据报道，已分离并测定其氨基酸序列一级结构的抗菌肽达几十种，且一级结构都比较相似，具有以下典型的特征：由20~70多个氨基酸残基组成的肽链，其N 端富含赖氨酸和精氨酸等阳离子型氨基酸，C 端富含丙氨酸、缬氨酸、甘氨酸等非极性氨基酸，中间部分则富含脯氨酸，且在许多特定位置都有一些较保守的氨基酸残基，这些高度保守的氨基酸残基是一些抗菌肽分子具有抗菌活性所不可缺少的，1. 2 二级结构通过圆二色性分析、二维核磁共振谱法及脂质体模拟实验研究抗菌肽的二级结构特征，结果表明，抗菌肽在一定条件下形成a-螺旋和β-折叠结构。

a-螺旋是一个近乎完美的水脂两亲结构,即圆柱形分子的纵轴一边为带正电-的亲水区，而对称面为疏水区。

这种两亲性结构是抗菌肽杀菌的关键，改变a-螺旋的螺旋度会影响抗菌肽的活性。

抗菌肽的分离纯化方法
抗菌肽的分离纯化方法通常包括以下步骤：
1. 提取：从生物样品中提取抗菌肽，可以使用不同的提取方法，如溶剂提取、离子交换、凝胶过滤等。

2. 分离：使用不同的分离技术将抗菌肽与其他组分分离，常见的分离技术包括层析（如逆相层析、离子交换层析、凝胶层析等）、电泳（如凝胶电泳、等电聚焦电泳等）和超滤等。

3. 纯化：通过进一步的分离和纯化步骤，除去杂质和其他蛋白质，使目标抗菌肽得到纯化。

常见的纯化技术包括高效液相色谱（HPLC）、凝胶过滤和透析等。

4. 洗脱：将纯化的抗菌肽从分离材料中洗脱出来，一般使用适当的洗脱缓冲液（如酸性溶液、有机溶液等）。

5. 鉴定：通过质谱分析、氨基酸测序等方法对纯化的抗菌肽进行鉴定和表征，确定其结构和属性。

总的来说，抗菌肽的分离纯化方法需要根据具体实验目标和条件选择合适的提取、分离和纯化技术，以获得高纯度的抗菌肽样品。

一、摘要抗菌肽是一类具有广谱抗菌活性的小分子肽，具有高效、低毒、不易产生耐药性等优点。

本实验旨在通过高效液相色谱（HPLC）技术分离纯化抗菌肽，并通过抑菌圈法测定其抗菌活性。

实验结果表明，成功分离纯化了抗菌肽，并测定了其最小抑菌浓度（MIC）。

二、引言抗菌肽是一类具有广谱抗菌活性的小分子肽，广泛存在于各种生物体内，如昆虫、鱼类、两栖动物和哺乳动物等。

抗菌肽具有高效、低毒、不易产生耐药性等优点，因此在抗菌药物的研究和开发中具有广阔的应用前景。

本实验通过HPLC技术分离纯化抗菌肽，并对其抗菌活性进行测定。

三、实验材料与方法1. 实验材料抗菌肽粗提物：购自某生物科技公司；金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌：购自某微生物研究所；甲醇、乙腈：色谱纯；其他试剂：分析纯。

2. 实验仪器高效液相色谱仪（HPLC）：某品牌；细菌培养箱：某品牌；无菌操作台：某品牌；电子天平：某品牌；抑菌圈测定仪：某品牌。

3. 实验方法（1）抗菌肽的分离纯化将抗菌肽粗提物溶解于适量甲醇中，采用反相高效液相色谱法进行分离纯化。

色谱柱：C18柱（4.6×250mm，5μm）；流动相：乙腈-水（梯度洗脱）；流速：1.0mL/min；检测波长：215nm。

（2）抗菌活性的测定采用抑菌圈法测定抗菌肽的抗菌活性。

将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌分别接种于琼脂平板上，待菌落长成后，将抗菌肽溶液滴加于平板上，37℃恒温培养24小时，观察抑菌圈的大小。

四、实验结果与分析1. 抗菌肽的分离纯化通过HPLC技术分离纯化抗菌肽，得到单一峰，证明抗菌肽已成功分离纯化。

2. 抗菌活性的测定（1）金黄色葡萄球菌抗菌肽对金黄色葡萄球菌的MIC为10-7mol/L，抑菌圈直径为16mm。

（2）大肠杆菌抗菌肽对大肠杆菌的MIC为10-6mol/L，抑菌圈直径为15mm。

（3）白色念珠菌抗菌肽对白色念珠菌的MIC为10-6mol/L，抑菌圈直径为14mm。

黄粉虫幼虫抗菌肽诱导方法及其抗菌活性的研究的
开题报告
题目：
黄粉虫幼虫抗菌肽诱导方法及其抗菌活性的研究
研究背景和意义：
抗菌肽是一种广泛存在于动物、植物和微生物中的抗菌物质，具有较强的抗菌活性和广谱性，同时也具有低毒性和不易产生药物耐药性等优点。

因此，抗菌肽在食品、畜牧业、医疗卫生等领域具有重要的应用价值。

黄粉虫是一种大型昆虫，其幼虫体内富含多种抗菌肽，具有很高的抗菌活性。

因此，研究黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导方法和抗菌活性，将有助于开发新的天然抗菌剂和提高我国畜牧业和食品安全水平。

研究内容和方法：
本研究计划从黄粉虫的幼虫中提取抗菌肽，并通过对抗菌肽的基因序列和分子结构分析，探讨幼虫皮肤和免疫系统对抗菌肽的产生和调控机制。

同时，比较不同诱导剂对黄粉虫幼虫抗菌肽产量的影响，探究有效的抗菌肽诱导方法。

最后，采用薄层扩散法、微量滴定法和碟拍法等方法，探究黄粉虫幼虫抗菌肽的抗菌活性。

研究预期目标：
1. 探究黄粉虫幼虫抗菌肽产生和调控机制；
2. 比较不同诱导剂对抗菌肽产量的影响，探究有效的抗菌肽诱导方法；
3. 研究黄粉虫幼虫抗菌肽的抗菌活性和抗菌机制，为开发天然抗菌剂提供理论基础和技术支持。

黄粉虫的主要功能成分及其应用研究进展朱琳;王向誉;聂磊;王安皆;张凤林;施新琴;娄齐年【摘要】黄粉虫是一种珍贵的资源昆虫,作为蛋白质饲料应用于养殖业具有悠久历史.黄粉虫主要成分有蛋白质、脂肪、壳聚糖、维生素和黄酮类化合物.对黄粉虫主要功能成分及其在饲料、食用、生物医药、环境保护、工业等领域的应用研究进展进行了综述.%Tenebrio molitor is one kind of valuable resource insects.It has been used as a kind of protein feed in breeding industry for a long history.The main components of Tenebrio molitor includedprotein,fat,chitosan,vitamins and flavonoids.We reviewed the research progresses on the main functional components in T.molitor and its applications in feed,food,biological medicine,environmental protection,industry and other fields.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2018(046)003【总页数】4页(P10-12,14)【关键词】黄粉虫;环境昆虫;功能成分;应用【作者】朱琳;王向誉;聂磊;王安皆;张凤林;施新琴;娄齐年【作者单位】山东省蚕业研究所,山东省农业科学院特种经济动物与昆虫资源研究中心,山东烟台264002;山东省蚕业研究所,山东省农业科学院特种经济动物与昆虫资源研究中心,山东烟台264002;山东省蚕业研究所,山东省农业科学院特种经济动物与昆虫资源研究中心,山东烟台264002;山东省蚕业研究所,山东省农业科学院特种经济动物与昆虫资源研究中心,山东烟台264002;山东省蚕业研究所,山东省农业科学院特种经济动物与昆虫资源研究中心,山东烟台264002;山东省蚕业研究所,山东省农业科学院特种经济动物与昆虫资源研究中心,山东烟台264002;山东省蚕业研究所,山东省农业科学院特种经济动物与昆虫资源研究中心,山东烟台264002【正文语种】中文【中图分类】S899黄粉虫(Tenebrio molitor L)别名黄粉甲，俗称面包虫,隶属昆虫纲(Insect)鞘翅目( Coleopter)拟步甲科(Tenebrionide)粉甲属(Tenebrionini)，原产于南美洲，20世纪50年代由原苏联传入我国，本属于仓库和贮藏害虫，但因其营养成分高，营养含量居各类活体动物蛋白饲料之首，所以被誉为蛋白质饲料宝库[1]。

黄粉虫营养价值及其在畜禽生产中的应用黄粉虫又名黄粉甲，面包虫等，是仓库中的主要害虫之一。

在分类学中，属于鞘翅目，拟步甲科，粉虫属，全变态类昆虫.整个生长发育过程分为成虫、卵、幼虫和蛹4个生命阶段。

黄粉虫分布范围广。

资源丰富，在适宜的温度条件下每年可繁殖三代，具有容易饲养、繁殖量大、饲料成本低等特点。

相关阅读：黄粉虫粪代替麦麸栽培香菇试验一、黄粉虫的营养价值1、黄粉虫的蛋白质及氨基酸鲜黄粉虫的蛋白质含量高于鸡蛋、牛奶、猪、牛、羊肉。

在幼虫时期。

蛋白质含量占干重的47.70％～54.25％，蛹蛋白质含量占干重的55.23％～58.70％，成虫蛋白质含量占干重的63.19％-64.29％(赵大军，2003)。

黄粉虫中含有18种氨基酸，包括人体所需的8种必需氨基酸，其中蛋氨酸含量较低，其余氨基酸含量均较高，超过猪肉、牛肉和羊肉中氨基酸含量。

宋志峰等(2008)用高效液相色谱法测定了黄粉虫成熟幼虫氨基酸含量，结果见表1。

2、脂肪及脂肪酸黄粉虫的脂肪含量很高。

研究表明.黄粉虫在不同发育期的脂肪含量变化较大，幼虫期含量最高，达33.27％，其次是幼虫时期为28.6l％.成虫时期脂肪含量最低，但也达到18.2％(葛春华，1995)。

黄粉虫的脂肪含量虽高，但是其不饱和脂肪酸较多，饱和脂肪酸只占27.26％。

且黄粉虫脂肪含固醇类物质很少，在一定程度上脂肪酸组成接近鱼油(霍建聪和欧丽兰，2005)。

3、矿物质和维生素黄粉虫含有大量矿物质，其中钾、钙、镁、磷含量明显高于猪、牛、羊等动物食品。

此外，黄粉虫含有丰富的铁、铜、锌、锰和硒；维生素B1、维生素B2、维生素E、维生素D含量也很高。

研究表明，每100g黄粉虫含K1370mg、N65.6mgC138mg、P683mg、Mg194mg、Fe6.5mg、Zn12.2mgCu2.5mg、Mn1.3mg、Se462mg(王文亮和孙爱东，2005)。

研究表明，黄粉虫含维生素A337ug/100g、维生素E898ug/l00g、硫胺素65ug/100mg、核黄素520ug/100g(陈彤，1998)。

抗菌肽的提取分离及抑菌机理研究进展一、本文概述抗菌肽，又称抗菌蛋白质或抗菌因子，是一类具有抗菌活性的多肽或蛋白质。

自20世纪80年代以来，抗菌肽因其独特的抗菌机制和广泛的应用前景，受到了全球科研人员的广泛关注。

本文旨在综述抗菌肽的提取分离技术以及其抑菌机理的最新研究进展。

文章首先对抗菌肽的定义、分类及其抗菌特性进行概述，接着详细介绍抗菌肽的提取分离方法，包括传统提取方法、现代生物技术提取方法以及新兴的纳米技术提取方法等。

随后，文章对抗菌肽的抑菌机理进行深入探讨，包括其直接杀菌作用、免疫调节功能以及与其他抗菌剂的协同作用等。

文章对抗菌肽的研究前景和应用领域进行展望，以期为抗菌肽的研究和开发提供有益的参考和启示。

二、抗菌肽的提取方法抗菌肽的提取和分离是抗菌肽研究的重要环节，其方法的选择和优化直接影响到最终产物的纯度和活性。

抗菌肽的提取方法主要包括物理法、化学法、生物酶解法以及近年来兴起的基因工程技术等。

物理法主要利用温度、压力、溶剂等因素对抗菌肽进行提取。

例如，通过控制温度和压力，利用超临界流体萃取技术可以从生物组织中提取抗菌肽。

这种方法具有提取效率高、对原料破坏小等优点，但设备成本较高，操作复杂。

化学法主要利用化学试剂对抗菌肽进行提取。

常用的化学试剂包括酸、碱、有机溶剂等。

酸碱提取法通过改变溶液的酸碱度，使抗菌肽从组织中溶解出来。

有机溶剂提取法则利用有机溶剂对目标物质的溶解能力，将抗菌肽从原料中提取出来。

化学法提取效率高，但可能引入杂质，影响产物的纯度。

生物酶解法利用特定的酶对原料进行水解，从而释放出抗菌肽。

这种方法具有条件温和、产物纯度高等优点，但酶的选择和酶解条件的优化是关键。

常用的酶包括蛋白酶、纤维素酶等。

近年来，随着基因工程技术的发展，越来越多的研究者开始利用基因工程手段提取抗菌肽。

通过基因克隆和表达，可以在体外大量合成抗菌肽，从而实现对抗菌肽的高效提取。

这种方法具有产物纯度高、产量大等优点，但技术难度较大，需要较高的研究水平。

《黄粉虫养殖200问》史树森毕锐编著第一章黄粉虫基础知识篇第一节、黄粉虫养殖历史1、黄粉虫是一种什么动物？黄粉虫（Temibio molitor Linne）是一种昆虫类动物，也叫大黄粉虫、面包虫，通称黄粉甲。

属于昆虫纲，鞘翅目，拟步甲科，粉虫属。

在粮食仓库、药材仓库及各种农副产品仓库中，是一种重要的害虫，由于其生长对环境要求不高，比较容易人工饲养，目前已发展成为新兴的特种养殖动物。

2、人工养殖黄粉虫的历史有多长？黄粉虫原产于南美洲，约有100余年的饲养历史，国内外著名动物园都用其作为繁殖名贵珍禽、水产动物的肉质饲料之一。

在我国，20世纪50年代由北京动物园从前苏联引进驯养，以后不断向社会扩散，大量繁殖后并被应用于林蛙、蝎子等特种经济动物养殖的活体饲料。

3、养殖黄粉虫有什么用途？黄粉虫可用于科学研究生物、生物教学中，如昆虫生理生化、生物解剖及生物学、生态学等方面的试验材料，是农药药效检测与毒性试验的良好材料，更为普遍和重要的是作为民间观赏禽鸟、养蝎业等特种经济动物的活体动物蛋白饵料。

目前全国各地都在大力发展，有效促进了林蛙、蛤蚧、鳖、鳝鱼、蜗牛、壁虎和蛇等特种经济动物饲养业的发展。

在商业上，黄粉虫具有以下用途：（1）、原形食品直接用黄粉虫幼虫、蛹烹制成各种菜肴或膨化加工成小食品等。

（2）、深加工食品经提取、发酵、酿造等加工工艺，将黄粉虫加工酱油、氨基酸口服液、营养保健酒等功能食品；也可精制成蛋白粉、营养调味粉等食品添加剂。

（3）、畜禽饲料用作特种动物养殖的饵料，如饲养蝎子、林蛙、蛇、黄鳝、珍禽和观赏动物等；替代鱼骨粉、肉骨粉作畜禽蛋白质饲料。

（4）、其它黄粉虫油脂可制备降低血液胆固醇的药物、人造奶油、表面活性剂中间体等，也可用于制作肥皂、太古油及增塑剂等；虫蜕、成虫壳可用于提取甲壳素、生产壳聚糖；虫粪可作高校生物有机肥、诱食剂、高效化肥等。

随着昆虫蛋白质、脂肪及生物多糖（几丁质及其衍生物）提取、加工技术的不断完善，黄粉虫资源的用途范围将进一步扩大。