LCMS-IT-TOF 调谐液配置方法

LC/MS的SOPStep 1：使用LC/MS前的准备工作1．查阅文献，获得目标分析物质或相近物质的液质条件。

2．检查线路是否连接完好。

检查流动相和洗针液是否充足，不足则根据要求添加。

3．有机流动相必须为HPLC级别，水相可使用纯水机出水或娃哈哈纯净水。

流动相中添加的酸或胺类物质必须为色谱纯，其中水相需每天更换以保持新鲜。

4．标样和样品在使用前必须用0.45μm的针头式滤器过滤。

5．在做LC/MS之前，需将样品放置在样品托盘上，并记录相应的位置。

且第一个或最后一个样品为空白采用不含盐或酸的流动相做样，用于清洗进样系统及管路。

Step 2：开机、关机方法Step 2.1：开机方法1．打开质谱电源，即打开质谱主电源开关（Main Power Switch）至On（/）位置；2．打开真空泵开关；真空泵开关开启约一小时后，打开电子开关（Electronics Switch）在Operational状态；3．打开计算机；4．双击桌面LCQ Tune图标，打开Tune Plus界面；5．查看Tune Plus界面右边质谱参数，确认Ion Gauge Pressure小于5×10-6 Torr；6．打开LC部分各模块电源。

Step 2.2：关机方法1．关闭电子开关（Electronics Switch）；2．5~6分钟后关闭质谱主电源开关(Main Power Switch)至Off (O) 位置；3．关闭LC部分各模块电源。

Step 3：LC /MS分析方法建立1．双击桌面Xcalibur图标，打开Xcalibur 工作站；2．在Xcalibur Roadmap 主页上, 点击Instrument Setup按钮, 建立LC/MS方法；3．设置LC部分参数；A.Accela pump的参数设置；1）点击Instrument Setup窗口中Accela pump图标；2）点击Gradient Program标签；3）设置流动相条件（时间、流动相比例、流速等）。

岛津 LCMS-IT-TOF 技术介绍岛津公司作为综合开发，生产，销售GC/MS、LC/MS、LC/MS/MS、TOF-MS/MS的质谱分析仪器专业厂家，拥有世界最先进的质谱技术。

自20世纪70年代开始，岛津公司就涉足质谱研发领域，与瑞典LKB公司共同开发出世界第一台GC/MS(扇形磁场)。

1982年推出日本第一台用于有机化合物分析的四极杆质谱GCMS-QP1000，1988年开发的LAMS-50K 是世界第一台MALDI-TOF飞行时间质谱，由此获得了2002年的诺贝尔化学奖。

1989年成功并购英国著名质谱厂家Kratos（克雷托斯）集团后，在大型质谱仪的技术上日臻完善，形成了独具特色的质谱全系列产品线。

LCMS-IT-TOF是岛津公司最新推出的高端质谱仪，并于2005年3月获得了全球著名分析仪器匹兹堡展会的银奖，这是该年度质谱仪整机产品得到的最高奖项。

而后，又获得了国际权威的分析仪器杂志R&D 的2006年新产品大奖，2007年底被中国仪器信息网评为最佳质谱产品奖，这些奖项充分表明分析仪器行业对该仪器的优越性能的充分认可。

LCMS-IT-TOF的设计理念是根据现有各厂家质谱仪不能同时实现多级质谱功能和精确质量测定，即二者不可兼得的行业现状下，独创一系列关键的专利技术，实现了离子阱质谱和飞行时间质谱的完美结合。

从而实现既可以做多级质谱，又能达到高质量精度的强大功能。

岛津LCMS-IT-TOF是全球唯一的连接离子阱和飞行时间质谱的串级质谱技术的仪器。

岛津LCMS-IT-TOF可以广泛应用在有机小分子的结构分析，中药成分鉴定，食品，香料，农残兽残，药物代谢物鉴定, 生物大分子的蛋白质组研究，包括多肽的一级从头测序，蛋白质鉴定，转录后修饰，复杂糖蛋白的分析等，其中未知化合物分子式预测是其最有特色的功能。

岛津LCMS-IT-TOF具有以下几点独特优势：1.每级的质谱都能保证高质量精确度LCMS-IT-TOF是世界上唯一的一台能保证每级MS高质量精确度的质谱仪器，这对传统的Q-TOF和离子阱质谱来说是完全不可能的。

调谐和校正目标: 熟悉DuoSpray离子源在正离子模式下TOF的调谐和校正，包括仪器优化、手动校正和自动校正用户也可以用合适的溶液校正TOF MS和MS/MS的负离子模式，以及Q1的正离子和负离子模式。

由于篇幅限制，我们以正离子为例。

1.Analyst® TF软件和仪器硬件设置A.双击桌面上的图标打开Analyst® TF软件1.在导航栏（Navigation bar）中的Configure模块上双击Hardware Configuration2.点击LC + MS profile，选择Edit Profile编辑，然后选择MassSpectrometer TripleTOF 5600，点击Setup Device，保证Use calibrantdelivery system (CDS)是选上的3.点击OK，激活LC + MS profile，关闭窗口B.针设置（probe setting）1.APCI和ESI探针的位置取决于流速。

这些参数不是自动设置的，用户需每次使用前确认该位置2.在校正和调谐的练习中，ESI针的垂直和水平位置可以设置到5微米，APCI源的针也是5，并保证电晕针的位置是朝向APCI探针（Probe）的C.保证CDS校正管路在APCI正离子校正溶液瓶中的，没入溶液中；保证CDS的Peek管是与APCI源相连的D. 保证液相流路是从ESI针进入2.使用LC + CDS手动校正A.选择API Instrument项目B.在工具栏中点击红色的T按钮使仪器进入tuning模式C.双击导航栏中的Manual TuningD.点击Source/Gas栏，填入适合500 µL/min流速的适当参数，这些参数不是自动生成的，因此用户需要根据流速设置离子源的参数，推荐值如下所示：Field ValueGS1 50GS2 50CUR 30TEM 600ISFV 5500E.点击Ramp按钮右侧的下拉菜单，选择LC method1.选择A和B相的溶剂，50:50，等度，流速为500 µL/min。

液相色谱质谱仪LCMS-IT-TOF操作指南空白页前言请在使用本产品前仔细阅读本指南。

感谢您购买本产品。

LCMS-IT-TOF控制软件LCMSsolution功能丰富。

本指南将对软件的基本功能进行说明。

首次使用LCMSsolution进行分析的用户，也可通过阅读本指南，掌握基本操作的分析流程。

有关具体功能请参考以下使用说明书：• 硬件《Shimadzu High-Performance Liquid Chromatograph/Mass Spectrometer LCMS-IT-TOF Operation Manual》(225-18046)• 软件《Shimadzu High Performance Liquid Chromatography / Mass Spectrometry Workstation [LabSolutions/LCMSsolution] Operation Manual》(225-18036)免责声明•本说明书内容如有改动恕不另行通知。

•本说明书内容力求准确，如有错误或遗漏敬请谅解。

•本说明书版权归株式会社岛津制作所所有。

未经本公司许可不得转载、复制部分或全部内容。

•Windows是美国Microsoft Corporation在美国及其他国家的注册商标。

在本说明书中记载的其他公司名及产品名是各公司的商标及注册商标。

此外，本说明书中不对TM、®标记做明确说明。

© 2011Shimadzu Corporation. All rights reserved.本说明书是日文版《液相色谱质谱仪LCMS-IT-TOF系列操作指南》(225-18407) (修订版B 2011年5月) 的译文。

i目录前言_____________________________________________________________ i1.仪器及LCMSsolution的启动 ___________________________________ 12.自动调谐____________________________________________________ 33.方法文件的创建______________________________________________ 54.开始分析___________________________________________________ 175.批处理分析_________________________________________________ 196.结束分析___________________________________________________ 237.后处理_____________________________________________________ 258.打印结果___________________________________________________ 379.附录_______________________________________________________ 39 9.1MS参数指南 __________________________________________________________ 39 9.2LC参数指南 __________________________________________________________ 42 9.3维护 _________________________________________________________________ 53 9.4后处理质量校准_______________________________________________________ 54 9.5质量校正 _____________________________________________________________ 68 9.6LCMS-IT-TOF系列基本构成图 __________________________________________ 77ii1. 仪器及LCMSsolution的启动1. 请确认氮气、氩气的供给。

1液相色谱/质谱 LCMS-IT-TOF 操作指南岛 津 公 司此页空白2iLCMS-IT-TOF 的控制软件LCMSsolution 的功能非常强大，因此我们可能会产生诸如怎样才能完成某一特定分析，某一特定的操作过程是否能够为我们带来期望的结果之类的疑问。

此指南将不介绍LCMSsolution 的所有功能，而是针对分析过程中用到LCMSsolution 的分析流程加以介绍。

首次应用LCMSsolution 时，此指南不但能使您了解到此软件所能提供的功能，还将能使您了解到如何运用这些功能提高您的工作效率。

这些功能的具体描述请您参考以下的操作说明。

仪器硬件的介绍，请您参考“Shimadzu High-Performance Liquid Chromatograph/Mass Spectrometer LCMS-IT-TOF Operation Manual ”（225-18046）。

仪器软件的介绍，请您参考“Shimadzu High-Performance Liquid Chromatograph/Mass Spectrometry Workstation [LabSolutions /LCMSsolution] Operation Manual ”（225-18036）。

注意© 2008 岛津公司。

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● Microsoft 和Windows 是微软公司在美国和/或其它国家的商标。

本说明书中其它公司名或产品名是各自公司的商标或注册商标。

TM 和®在本说明书中省略介绍-----------------------------------------------------------------------------------------------------------ⅰ内容-----------------------------------------------------------------------------------------------------------ⅱ1. 启动系统及LCMSsolution ----------------------------------------------------------------------------12. 自动调谐--------------------------------------------------------------------------------------------------33. 创建方法文件--------------------------------------------------------------------------------------------54. 开始分析-------------------------------------------------------------------------------------------------155. 批处理----------------------------------------------------------------------------------------------------176. 结束分析-------------------------------------------------------------------------------------------------217. 再解析---------------------------- -----------------------------------------------------------------------228. 输出结果-------------------------------------------------------------------------------------------------349. 附录-------------------------------------------------------------------------------------------------------359.1 MS参数指南------------------------------------------------------------------------------------359.2 LC参数指南-------------------------------------------------------------------------------------389.3 维护------------------------ -----------------------------------------------------------------------499.4 后处理质量数校准------------------------------------------------------------------------------509.5 质量数补偿---------------------------------------------------------------------------------------639.6 LCMS –IT-TOF基本配置图-----------------------------------------------------------------72 ii1.启动系统及LCMSsolution1.确保氮气及氩气开启打开LC单元电源，对泵及自动进样器进行排液操作2.双击桌面上的（LCMSsolution）图标，启动软件（见图1-1）图1-13.双击[Analysis]中的将使用仪器的图标（通常是仪器1）。

Labsolutions (LCMSMS)简单操作流程1. Labsolution 联机设置(CBM-20A/Alite PC IP 地址设定):1.1进入PC的网络“本地连接” “属性”。

1.2按如下设定局域网IP地址2. LabSolution 软件设置:绿色。

【注：如果该图标为黄色，说明系统正在启动，请稍等片刻。

如果该图标为红色，表示有错误产生，请重启电脑。

】2.1 Labsolutions 软件启动：Lab solutions 状态确认：电脑开机完毕后，确认电脑右下方的相关图标1:36 PM 2/25/2010双击电脑桌面上的图标 LabSolutions ,等待，直到出现下面的界面:2.2LCMSMS 系统配置设置：2.2.1点击"Adminitration"进入管理员界面:2.2.2 点击“Instrument administration"进入仪器管理界面: 223点击“add”添加仪器名称:2.2.4在如下界面中输入“仪器名称”选择“仪器类型”:3.联机设置:3.1 LC联机设置：3.1.1双击需要运行的“仪器名称”3.1.2点击快捷菜单栏的“main”主快捷菜单栏:3.1.3 点击“system configuration"进入系统配置窗口:& Realtime Analysis (LCMS8O5O-System Administrator) - [Data Acquisition - teit.lcm)I 怯 Kle Edit View Method Initrument Acquiiition Dau Tools Window Help L 3曰■ Bl『民囘反词副？I画* J3丄4双击右侧窗口的“Instrument (communication settings)进入系统连接设置界面: 3.1.5在LC项中选择相应的“CBM”类型，进入settings中刷新CBM的IP地址:3.1.6选择链接类型为“Ethernet”,点击“list”进入IP地址刷新:3.1.7确认如下界面中能够刷新出链接状态条:3.2MS链接设置：3.2.1选择相应的MS类型后点击“Setting”Instrument3.2.2选择链接类型为“USB",然后点击” List “：3.3.3确认如下界面中能够刷新出相应的仪器类型和系统设备号:3.2.4点击“OK”退出系统联机设置:3.2.5点击如下界面中的：“Auto Confiuration”进行系统自动配置:System ConfigurationModules Used for Analysis:3 LCMS:Au^o ConfigurationReset4.1真空系统启动: 4.1.1 Labsolution 主窗口中点击“instrument “双击需要进入的仪器系统:点击“OK”，启动实时分析程序。

LCMS 簡易操作流程(一) 為提升分析數據品質，請依下列方式進行樣品前處理1、純化。

鹽類會干擾質譜訊號，故樣品含有鹽類請先去除。

2、樣品應適用溶於水、Methanol及Acetonitrile等溶劑之高極性樣品，並控制濃度為0.5-10μM。

(1m g樣品以20-60μl相容溶劑溶解後以50%ACN +0.1%FA水溶液稀釋50×300倍) 。

3、無法全溶且有懸浮固體時應過濾或離心取澄清液以免阻塞管路。

(二) 測樣流程1、以syringe取100μl 80%ACN手動推針沖洗管路。

再以syringe取150μl配樣溶液並將syringe固定在樣品推送台上。

2、質譜儀參數設定。

(1) Capillary voltages: 2.5-3.5kV。

(2) Cone voltage:10-60V。

3、開氮氣，啟動氮氣供應系統(選按Gas)，穩定後按操作按鈕(operate)。

4、設定注射速度(50μl/min)啟動樣品注射(syringe pump)，推針50μl後將流速緩降至10μl後按(Acqu)。

5、設定存檔參數：file name、tex t、range) ，按(Start)開始測background。

6、樣品測定時可即時監看。

測樣完成按(Standby)並停止樣品注射。

7、取150μl濃度0.5-10μM之樣品。

質量監測得穩定peak或推針50μl後將流速緩降至10μl，按下(Acqu) 設定存檔參數後按(Start)。

8、測樣完成後取150μl配樣溶液沖洗管路至無樣品殘留。

9、降溫至100℃以下時按停氣體供應系統，關氮氣，簽使用記錄本。

10、印出質譜圖。

關螢幕。