菌株产纤维素酶的活力

高效产纤维素酶菌株ZJW-6发酵条件优化

摘要:在筛选出纤维素酶高产菌株的基础上,对纤维素酶高产菌株ZJW-6采用单因素试验进行不同条件下的液体发酵培养,使用DNS法对发酵后的菌悬液进行酶活力测定从而获得其最优发酵条件｡结果表明,菌株ZJW-6产纤维素酶的最优发酵条件是以蛋白胨+(NH4)2SO4为氮源培养基,在30 ℃､pH 6下振荡培养48 h｡

关键词:纤维素分解菌;发酵条件;纤维素酶;酶活力

Research on the Optimum Fermentation Conditions of High-Yield Cellulolytic

Enzymes Strain ZJW-6

Abstract: The optimum fermentation conditions of high-yield cellulolytic

enzymes strain ZJW-6 were studied in this paper. The strain was cultured under

different liquid fermentation conditions and enzymes activity of bacteria suspension

was determined using DNS method. The results showed that the optimum

fermentation conditions of ZJW-6 was as follows: peptone and (NH4)2SO4 as

nitrogen source, shaking for 48h at 30℃ and pH 6.

Key words: cellulose-decomposing microorganisms; fermentation conditions;

cellulose; enzyme activity

产纤维素酶细菌的分离筛选与鉴定

吴自祥;张天亮;杨润霞;贾晓蕊;万学瑞;马亚茹;王艳;吴润;王川;魏姣;刘磊;张小丽

【摘 要】通过筛选获得高产纤维素酶细菌菌株,为纤维素酶制剂研制及纤维素酶工程菌构建提供试验材料.采用刚果红平板从牛羊粪便及腐败的玉米秸秆和木屑中分离产纤维素酶菌株,以DNS法测定酶活,根据酶活复筛产纤维素酶分离菌株;观察分离菌株的形态、染色与培养特性;应用16S rDNA通用引物扩增菌株基因组DNA,测序结果提交GenBank数据库进行Blast比对分析和相似性搜索,作出复筛菌株种的鉴定.结果表明:分离获得16株纤维素酶产量较高的细菌菌株,均为革兰氏阳性菌,菌体呈短杆状、具中央芽孢,经16S rDNA序列比对分析和相似性搜索,鉴定为10株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、6株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus

amyloliquefaciens).%In order to provide bacteria for development of

cellulase preparations and cellulase engineering,the high-yield cellulase

bacteria strains were screened.Separate cellulase producing strains isolated

from cow or sheep dung and putrid maize straws or wood chips with

Congo red plate to screen cellulase producing strains through the

determination of enzyme activity with DNS assay,and observe its

shape,dyeing and cultural characteristics.16S rDNA universal primers were

产纤维素酶芽孢杆菌的选育研究　

王振华　，潘康成　

（１．成都农业科技职业学院畜牧兽医分院，成都６１１１３０；２．四川农业大学动物科技学院，四川雅安６２５０１４）　

摘要：试验选用ｌＯ株芽孢杆茵，根据其分泌胞外纤维素酶的活力对茵株进行了初选和复选，初选均采用平　板培养、染色法；复选采用分光光度计比色法测定芽孢杆茵发酵培养液酶活力。筛选出胞外酶活性较高且连续发　酵酶活力相对稳定的枯草芽孢杆茵茵株，茵株编号为Ｐａｂ０２，其单位生物量纤维素酶活力为１　５８２．８５４　Ｕ。并进一　步对其发酵培养基的初始ｐＨ、发酵温度及时间进行了优化，结果显示该茵株在ｐＨ值７．５、温度３７℃、时问４８　ｈ　条件下单位生物量酶液酶活达到２　２００．９２５　Ｕ，是优化前酶活的１．３９倍。　关键词：纤维素酶；芽孢杆茵；发酵　中图分类号；Ｑ５５；￥８１６．７文献标识码：Ａ文章编号：１００１～００８４（２００８）０２～００４５－－０４　

自然界中存在着多种可以产生纤维素酶的微生　

物，包括真菌、细菌、放线菌等。近年来随着微生　

物酶技术的迅速发展，人们可以有效利用微生物分　

泌的纤维素酶处理一些含纤维素的物质，如饲料、　污物分解、废料利用、食品发酵、医药等。尤其在　

饲料行业颇受重视，在玉米、大麦、糠麸、饼粕等　植物性饲料中添加高产纤维素酶的有益菌，一方面　

有益菌在生长繁殖过程中分泌的纤维素酶可以使构　成植物细胞壁等不易利用的植物纤维素分解成能被　

吸收的葡萄糖，从而提高动物对高纤维饲料的消化　

吸收，提高饲料利用率，降低饲料成本；另一方面　有益菌本身可以提高动物生产性能，促进动物生　

长。近年来，在纤维素酶菌株的选育上取得了很大　的进步，由过去以霉菌为生产菌转到以细菌为生产　

主体，芽孢杆菌倍受欢迎，这不仅由于芽孢杆菌的　

适应性强、生长ｐＨ、温度范围广、能分解多种底　物、产酶活性高；而且从饲料添加剂角度考虑，有　些芽孢杆菌本身可作为益生菌，其通过调节肠道正　

食品与发酵科技　ＦｏｏｄａｎｄＦｅｒｍｅｎｔａ￣ｏｎ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　第４６卷（第１期）Ｖｏ１．４６，Ｎｏ．１　

高产纤维素酶生产茵的筛选及诱变育种　

方尚玲，杨丹丹，钱志伟，李小强，陈茂彬’　

（发酵工程省部共建教育部重点实验室，湖北工业大学生物工程学院，湖北武汉４３００６８）　

摘要：本研究分离筛选出１株产纤维素酶的木霉（ＣＭＣ酶活６０９．５１Ｕ／ｇ干曲、Ｆ队酶活１３３．８５Ｕ／ｇ干曲），以该木　霉为出发茵，经紫外线及原生质体紫外线复合诱变育种，获得一株纤维素酶活力较高生产性能稳定的茵株，其ＣＭＣ　酶活达到１３３２．９０Ｕ／ｇ干曲，Ｆ队酶活达到３０１．６１Ｕ／ｇ干曲，分别是原始茵株的２．１９倍，２．２５倍。　关键词：纤维素酶；原生质体；木霉　中圈分类号：ＴＳ２０１．３　ＴＳ２６１．１　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７４－５０６Ｘ（２０１０）０１－－００１３－０００５　

Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｆ　Ｈｉｇｈ　Ｃｅｌｌｕｌａｓｅ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ　Ｓｔｒａｉｎ　

ＦＡＮＧ　Ｓｈａｎｇ－ｌｉｎｇ，ＹＡＮＧ　Ｄａｎ－ｄａｎ，ＱＩＡＮ　Ｚｈｉ－ｗｅｉ，ＬＩ　Ｘｉａｏ－ｑｉａｎｇ，ＣＨＥＮ　Ｍａｏ－ｂｉｎ　（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，［Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈｕｂｅｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｗｕｈａｎ　４３００６８，Ｈｕｂｅｉ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｓｅ　ｔｈｅ　Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ（ＣＭＣ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ＷａＳ　６Ｏ９．５１ｕ／ｓ　ｄｒｙ　ｍｅｄｉｕｍ、ＦＰＡ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｗａｓ　１３３．８５ｕ／ｇ　ｄｒｙ　ｍｅｄｉｕｍ）ａＳ　ｔｈｅ　ｏｒｉ￣ｎａｌ　ｓｔｒａｉｎ，ａ　ｓｔｒａｉｎ　ｗｉｔｈ　ｓｔｅａｄｙ　ｈｉｇｈ　ａｅｔｉｖｉ￣ｃｅｌｌｕｌａｓｅ　ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ａｆｔｅｒ　ＵＶ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ　ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ．Ｔｈｅ　ＣＭＣ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　Ｗａｓ　１３３２．９ｏｕ／ｇ　ｄｒｙ　ｍｅｄｉｕｍ、ｔｈｅ　ＦＰＡ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉ￣Ｗａｓ　３０１．６１Ｕ／ｇ　ｄｒｙ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　２．１９　ｔｉｍｅｓ　ａｎｄ　２．２５　ｔｉｍｅｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｒａｗ　ｓｔｒａｉｎ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｅｅｌｌｕｌａｓｅ；ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ；Ｔｒ／ｃｈｏｄｅｒｍａ　ｄｏｉ：ｍ．３９６９／ｉ．ｉｓｓｎ．１６７４－５０６Ｘ．２０１０．０１－００５