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多发性骨髓瘤的细胞遗传学分析的开题报告一、选题背景多发性骨髓瘤是一种高度异质的血液系统恶性肿瘤，其恶性克隆细胞能够在骨髓中大量增生，最终引起骨质疏松、骨折等临床症状，是导致骨质疏松和非创伤性骨折的最主要原因之一。
尽管已有多种化疗方案和干细胞移植等治疗手段，但该病仍然具有高度致死性和易复发性。
而细胞遗传学变异是影响多发性骨髓瘤发生和转归的主要因素之一。
因此，对于多发性骨髓瘤的细胞遗传学分析具有重要的临床意义。
二、研究目的1.探究多发性骨髓瘤的基因突变、染色体畸变等遗传学变异。
2.研究不同遗传学变异的相关临床表现及转归。
3.为多发性骨髓瘤的个体化诊疗提供基础数据。
三、研究方法1.纵向病例研究：在多发性骨髓瘤患者中选择一定数量的病例进行长期随访，对其骨髓和外周血样本进行多组学分析，包括基因突变和染色体畸变等遗传学变异的检测。
2.基因编辑技术：利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术人为合成多发性骨髓瘤模型，模拟不同部位染色体的缺失、重复等遗传学变异，探究其对肿瘤的生长和发展的影响，为多发性骨髓瘤的个体化诊治提供基础研究支持。
四、预期结果通过对多发性骨髓瘤的基因遗传学分析和基因编辑技术的研究，预期能够筛选出多发性骨髓瘤发生和转归的关键基因和转录因子，揭示其在该病的发生和发展中的作用机制，进一步为该病的治疗和预防提供临床参考依据。
五、研究意义1.为多发性骨髓瘤个体化治疗提供理论支撑。
2.为该病的病因学研究提供新思路。
3.为多发性骨髓瘤的早期诊断和治疗提供新的生物标志物。
六、研究难点1.多发性骨髓瘤是一种高度异质性的肿瘤，不同病例的情况可能有很大的差异，需要进行充分的样本分层和分组。
2.基因编辑技术的使用需要充分的实验条件和技术支持，而且该技术仍然存在一定限制和局限性。
3.多发性骨髓瘤的病因学和遗传学机制仍然不明确，需要对该病进行更深入的研究。
七、预期进展本研究预期在探究多发性骨髓瘤遗传学分析方面获得一系列新进展，为多发性骨髓瘤的基因治疗、生物标志物诊断和新药研发等方面提供新的理论和技术支撑。
多发性骨髓瘤常见分子细胞遗传学异常及其意义作者：聂玉刘欣来源：《中国医药科学》2012年第07期[摘要] 多发性骨髓瘤是一种常见的浆细胞恶性肿瘤，重要的染色体与基因异常导致疾病的进展，在多发性骨髓瘤中具有独立的预后判断价值。
随着检测方法的更新及技术的进步，异常染色体与基因的检出率越来越高，主要包括13号染色体全部或部分缺失伴或不伴14q32/IGH 的重排等染色体异常。
异常染色体与基因的检测具有重要价值，可完善MM预后评估体系，指导临床个体化治疗并为新药开发提供新的靶点。
[关键词] 多发性骨髓瘤；分子细胞遗传学；预后[中图分类号] R733.3 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2012）07-50-04多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是以骨髓中克隆性浆细胞恶性增殖和异常积累为特征的肿瘤。
由于单克隆浆细胞恶性增生并广泛浸润，单克隆免疫球蛋白大量出现并沉积，正常多克隆浆细胞和多克隆免疫球蛋白分泌受到抑制，引起广泛骨质破坏、反复感染、贫血、高钙血症、高粘滞综合征、肾功能不全等一系列临床表现。
其自然病程差异较大，有明显的疾病异质性。
该病至今发病机制不明，随着检测技术的提高，发现几乎所有 MM患者均存在染色体与基因的改变。
而目前对染色体改变与MM发生、发展及预后的作用仍不甚明了，现就目前有关常见的染色体与基因异常及意义做一综述。
1 染色体数目异常1.1 超二倍体MM患者超二倍体主要表现为1、3、7、9、11、13、15、17、18、19、21、22三体型[1]；另外，近年来国内也有人发现MM患者8号染色体三体，王晓炜等[2]应用荧光免疫表型和间期细胞遗传学（FICTION）技术对MM骨髓涂片进行8号染色体检测，9例MM患者中，发现8号染色体三体1例，这可能与应用FICTION技术提高了检测效率有一定关系。
1.2 亚二倍体MM患者亚二倍体主要表现为6、8、13、14、X、Y单体型为特征；其中13号染色体单体缺失及其部分缺失是目前研究较为广泛的染色体异常之一。
多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是浆细胞恶性增殖性疾病。
其特征为骨髓中克隆性浆细胞异常增生，绝大部分病例存在单克隆免疫球蛋白或其片段（M蛋白）的分泌，导致相关器官或组织损害。
常见临床表现为骨痛、贫血、肾功能损害、血钙增高和感染等。
随着我国老龄人口的逐年增加，其发病率也逐年升高，现已达2/10万左右，低于西方国家（约5/10万）。
此病多发于中、老年人，男性多于女性，目前仍无法治愈。
病因和发病机制病因不明。
遗传、电离辐射、化学物质、病毒感染、抗原刺激等可能与骨髓瘤的发病有关。
尽管发病机制尚不清楚，但对MM分子机制的研究显示MM是一种由复杂的基因组改变和表观遗传学异常所驱动的恶性肿瘤。
遗传学的不稳定性是其主要特征，表现为明显多变的染色体异常核型，同时骨髓瘤细胞与骨髓微环境的相互作用进一步促进了骨髓瘤细胞的增殖和耐药的发生。
临床表现1.骨骼损害骨痛为主要症状，以腰骶部最多见，其次为胸部和下肢。
活动或扭伤后剧痛者有病理性骨折的可能。
MM骨病的发生主要是由于破骨细胞和成骨细胞活性失衡所致。
2.贫血贫血为本病的另一常见表现。
因贫血发生缓慢，贫血症状多不明显，多为轻、中度贫血。
贫血的发生主要为红细胞生成减少所致，与骨髓瘤细胞浸润抑制造血、肾功能不全等有关。
3.肾功能损害蛋白尿、血尿、管型尿和急慢性肾衰竭。
急性肾衰竭多因脱水、感染、静脉肾盂造影等引起。
慢性肾衰竭的病因是多方面的：①游离轻链（本周蛋白）被近曲小管重吸收后沉积在上皮细胞胞质内，使肾小管细胞变性，功能受损，如蛋白管型阻塞，则导致肾小管扩张；②高钙血症引起肾小管和集合管损害；③尿酸过多，沉积在肾小管，导致尿酸性肾病；④肾脏淀粉样变性，高黏滞综合征和骨髓瘤细胞浸润等。
4.高钙血症食欲缺乏、呕吐、乏力、意识模糊、多尿和便秘等，主要由广泛溶骨性改变和肾功能不全所致。
5.感染正常多克隆免疫球蛋白及中性粒细胞减少，免疫力下降，容易发生各种感染，如细菌性肺炎和尿路感染甚至败血症。
FISH技术检测多发性骨髓瘤的分子细胞遗传学异常的开题报告一、任务背景和研究意义多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma, MM）是一种由骨髓浆细胞（Plasma Cell）增生、浸润和分泌单克隆免疫球蛋白所导致的恶性肿瘤，在国内外普遍发生率逐年上升。
MM患者常常伴随有多种分子细胞遗传学异常，如染色体畸变、基因突变、易位和拷贝数改变等，这些异常对MM的诊断、预后和治疗具有重要的临床指导意义。
FISH(Fluorescence In Situ Hybridization)技术是检测细胞遗传学异常的一种有效的手段，其具有灵敏度高、特异性好、快速方便等特点。
FISH通过荧光标记的探针与待测细胞中的特定区域进行杂交，从而检测细胞的染色体畸变、易位等遗传学异常。
目前，FISH技术已广泛应用于多种恶性肿瘤的临床诊断、预后和治疗。
二、研究内容和方法1. 研究内容本研究旨在应用FISH技术检测MM患者的分子细胞遗传学异常，并分析其与MM的发生、预后和治疗的关系。
2. 研究方法（1）患者样本选取：收集60例MM患者的骨髓样本。
（2）FISH实验：采用商业化探针进行FISH实验，检测MM患者的染色体畸变、易位和拷贝数改变等分子细胞遗传学异常。
（3）结果分析：统计FISH结果，与MM的临床特点和治疗结果进行相关性分析。
三、主要研究成果（1）完成60例MM患者的FISH检测，并鉴定出其分子细胞遗传学异常；（2）分析MM患者的分子细胞遗传学异常与临床特点和治疗结果的相关性；（3）探讨FISH技术在MM的分子诊断和治疗中的应用价值。
四、研究展望本研究将进一步深入探究MM患者的分子细胞遗传学异常，探讨其与MM的发生、预后和治疗的关系，为MM的分子诊断和治疗提供更为可靠的依据。
同时，本研究还将探讨FISH技术在MM治疗中的应用价值，努力改善MM患者的临床预后。
·论著·多发性骨髓瘤患者IgH-MMSET基因的检测及其意义姜华 侯健 陈玉宝 丁思奇 【摘要】 目的 检测多发性骨髓瘤(MM)患者由于t(4;14)所形成的IgH-MMSET融合基因,探讨其在MM中的临床意义。
方法 采用RT-PCR法在25例MM患者骨髓标本和MM细胞系NCI-H929中检测IgH-MMSET融合基因,并且通过巢式PCR法提高反应的灵敏度。
PCR产物纯化后克隆到pGE M-T载体,并用引物M13Forward测序。
将PCR产物的序列与GenBank进行对照,进一步证实发生易位的基因。
结果 作为阳性对照的MM细胞系NCI-H929扩增出一明显条带,长度为438bp,经测序后证实为IgH基因与MMSET基因的融合产物。
14号染色体及4号染色体上的断裂点分别位于IgH基因的Cμ区及MMSET基因的第3内含子中。
25例MM患者的骨髓标本扩增后有3例(12.0%)呈现阳性,经分别测序后证实为IgH-MMSET融合基因,扩增产物的长度分别为237bp、239bp和239bp,三者第4染色体的断裂方式均与NCI-H929相同,其中1例缺失了MMSET基因的第4外显子的第74位碱基(A)和第75位碱基(T)。
结论 MM患者IgH-MMSET融合基因是由于t(4;14)所形成,其发生率为12.0%。
IgH-MMSET融合基因的出现可能是MM患者预后不良的指标之一。
【关键词】 多发性骨髓瘤; 基因融合,IgH-MMSET; 易位(遗传学)Detectio n of IgH-MMSET fusion gene in multiple myeloma patients and its significance JIA NG Hua,H O UJian,C HEN Yu-bao,DINGSi-qi.Department of Hematology,Chang zheng Ho spital,The Second Military M edicalUniversity,Shanghai 200003,China【Abstract】 Objective To detect the IgH-MMSE T fus ion gene resulted from t(4;14)translocation in mul-tiple myeloma and illuminate its significance.Methods IgH-MMSE T fusion gene was detected in bone marrowspecimens of25multiple myeloma(MM)patients and MM cell line NCI-H929using reverse-transcription PCR(RT-PCR)assay followed by nested PCR to increase the sensitivity.The purified PCR products were cloned into p GE M-Tvector and then sequenced usin g M13forward primers.The fragment sequences were compared with that in GenBankto find matched sequences.Results Only a438base pair long fragment was obtained after RT-PCR assay and wasconfirmed by sequencing to be a fusion gene product of IgH gene and MMSET gene in MM cell line NCI-H929.Thebreakpoints were located within the Cμregion of IgH gene on chromosome14and intron3of MMSET gene on chro-mosome4.IgH-MMSET hybrid transcripts were detected in3of25MM patients through nested PCR assay.The am-plified fragments of the3patients were237base pairs(bp),239bp and239bp in length,respectively.The break-points on chromosome4were identical to that of NCI-H929cell.Co nclusions The formation of IgH-MMSET fusiongene is resulted from t(4;14)translocation in MM.The incidence rate is12.0%.The presence of IgH-MMSET fu-sion gene may predict poor prognos is.【Key words】 Multiple myeloma; Gene fusion,IgH-MMSE T; Translocation(Genetics) 多发性骨髓瘤(MM)是浆细胞恶性增殖性疾病。
谈谈多发性骨髓瘤李志明副主任医师广东省第二中医院肿瘤科多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）是浆细胞异常增生的恶性肿瘤。
一种进行性的肿瘤性疾病.其特征为骨髓浆细胞瘤和一株完整性的单克隆免疫球蛋白(IgG,IgA,IgD或IgE)或Bence Jones蛋白质(游离的单克隆性κ或γ轻链)过度增生。
多发性骨髓瘤常伴有多发性溶骨性损害,高钙血症,贫血,肾脏损害,而且对细菌性感染的易感性增高,正常免疫球蛋白的生成受抑.发病率估计为2~3/10万,男女比例为1.6:1,大多患者年龄＞40岁.黑人患者是白人的2倍。
持续性的无法解释的骨骼疼痛(特别是在背部或胸廓),肾功能衰竭,反复发生细菌性感染(特别是肺炎球菌性肺炎)是最常出现的症状.病理性骨折和椎骨压缩常见,后者可能导致脊髓受压迫和截瘫.由于在肾小管广泛管型形成,肾小管上皮细胞萎缩和间质纤维化而发生肾衰(骨髓瘤肾病).有些病人以贫血,伴乏力和疲劳为主,少数病人有高粘滞综合征，淋巴结和肝脾肿大不常见.病因及发病机制病因不明.在骨髓瘤患者培养的树突状细胞中,发现了与卡波西肉瘤相关的疱疹病毒,这提示两者存在一定的联系.该病毒编码的白介素-6(IL-6)的同系物.人类IL-6可促进骨髓瘤生长,同时刺激骨的重吸收. 此种特殊的细胞来源尚不明了.通过免疫球蛋白的基因序列和细胞表面标志分析提示为后生发中心细胞恶性变而来.疾病诊断１、好发年龄多为４０岁以上，男多于女。
２、病变前期可无明显症状，仅存在血沉增快、贫血、蛋白尿等症状。
３、可有骨关节、腰背疼痛、颅骨、胸肋骨瘤形成，以胸肋、锁骨连接处发生串珠样结节及溶骨性钻凿样或鼠咬状圆形骨质缺损为特征，可出现病理性骨折、截瘫、肋间及坐骨神经痛等。
４、可损害肾脏而造成蛋白尿、肾小管病、肾病综合征、尿毒症等。
５、因血液粘稠度增高而引起头晕、头痛、视力障碍、胸闷、眩晕、出血等症状。
６、易引起肺部、泌尿系感染。
７、实验室检查（１）血清异常球蛋白增多而白蛋白正常或减少。
多发性骨髓瘤（MM）基因异常（FISH）检测——预后评估、风险分层及个体化治疗工具多发性骨髓瘤（multiple myeloma, MM）是一种最常见的恶性浆细胞病，占造血系统恶性肿瘤的10%，其特征是单克隆浆细胞恶性增生并分泌大量单克隆免疫球蛋白，引起骨痛、病理性骨折、造血异常、单克隆球蛋白血症及肾功能受损等一系列临床变化。
据美国癌症协会最新Cancer Statistics 2013的数据显示MM的发病率和死亡率较前均有明显增加，估计美国2013年将新增病例22350例，预计有10710例患者死亡。
MM的发生发展中伴随着多种特异的细胞遗传学层次上的相关基因数目或结构的改变。
细胞遗传学改变在 MM 发病机制中发挥重要作用，MM 常涉及多种染色体异常，主要为数目异常，染色体核型异常分为超二倍体和非超二倍体两大类，其中超二倍体常见染色体改变是+3、+5、+7、+9、+11、+15、+19、+2l。
非超二倍体主要累及-8、-13、-14、-17、-22 等。
在MM 染色体异常中结构改变较少见，主要有 1 号(1p、1q，部分缺失或 1q 三体)、13q-、14q (多为与 14q32 有关的几种互补易位)等。
临床上，MM患者的生存期差异很大，从数月到10余年不等，中位生存期一般为2~3年，染色体异常在MM中有很高的发生率，并且多为复杂异常，误诊率高达60%，需提高其异常检出率，因此迫切需要新的治疗方法。
NCCN 多发性骨髓瘤临床实践指南推荐：2013 年第1版MM NCCN首次将细胞遗传学检测写入指南，最新版的指南中延续了染色体异常的检测。
初始诊断中的骨髓检查应包括对骨髓穿刺所取细胞进行常规染色体核型分析和荧光原位杂交检测（FISH）。
用于预后评估的FISH标记物应包括t（4；14）、t（11；14）、t（14；16），17p13缺失，13号染色体缺失及1号染色体扩增。
MayoClinic依据msMART(the Mayostratification for Myeloma and Risk-adaptedTherapy,msMART)原则对骨髓瘤患者进行危险分层，而针对分层结果选择不同治疗方式。
多发性骨髓瘤常见分子细胞遗传学异常及其意义[摘要] 多发性骨髓瘤是一种常见的浆细胞恶性肿瘤，重要的染色体与基因异常导致疾病的进展，在多发性骨髓瘤中具有独立的预后判断价值。
随着检测方法的更新及技术的进步，异常染色体与基因的检出率越来越高，主要包括13号染色体全部或部分缺失伴或不伴14q32/igh的重排等染色体异常。
异常染色体与基因的检测具有重要价值，可完善mm预后评估体系，指导临床个体化治疗并为新药开发提供新的靶点。
[关键词] 多发性骨髓瘤；分子细胞遗传学；预后1染色体数目异常1.1超二倍体mm患者超二倍体主要表现为1、3、7、9、11、13、15、17、18、19、21、22三体型[1]；另外，近年来国内也有人发现mm患者8号染色体三体，王晓炜等[2]应用荧光免疫表型和间期细胞遗传学（fiction）技术对mm骨髓涂片进行8号染色体检测，9例mm患者中，发现8号染色体三体1例，这可能与应用fiction技术提高了检测效率有一定关系。
1.2亚二倍体mm患者亚二倍体主要表现为6、8、13、14、x、y单体型为特征；其中13号染色体单体缺失及其部分缺失是目前研究较为广泛的染色体异常之一。
2染色体结构异常2.113号染色体异常13 号染色体部分或完全缺失是mm 最早发现的染色体异常，mm 中较常见，而且是mm预后及生存期预测的指标之一。
13号染色体异常，特别是13单体（-13）和13号染色体长臂部分缺失（13q-）与mm预后的关系越来越受到重视。
目前认为13号染色体上存在 mm 抑癌基因，其缺失与疾病危重、疗效和预后密切相关。
pérez-simón等[3]采用荧光原位杂交（fish）方法分析了15 种不同染色体异常在常规剂量化疗患者中的预后价值，发现13号染色体缺失是最重要的预示生存期短的预后指标，但对治疗反应无影响。
由于13q-的断裂点范围在13q11~13q14，rb1基因正好也于这个区域，因此有人推测13号染色体完全或部分缺失所致mm预后不良可能与rb1基因改变有关。
多发性骨髓瘤常见分子细胞遗传学异常及其意义
聂玉
【期刊名称】《中国医药科学》
【年(卷),期】2012(2)7
【摘要】多发性骨髓瘤是一种常见的浆细胞恶性肿瘤,重要的染色体与基因异常导致疾病的进展,在多发性骨髓瘤中具有独立的预后判断价值.随着检测方法的更新及技术的进步,异常染色体与基因的检出率越来越高,主要包括13 号染色体全部或部分缺失伴或不伴14q32/IGH 的重排等染色体异常.异常染色体与基因的检测具有重要价值,可完善MM预后评估体系,指导临床个体化治疗并为新药开发提供新的靶点.
【总页数】4页(P50-53)
【作者】聂玉
【作者单位】安徽医科大学附属省立医院血液科,安徽合肥,230001
【正文语种】中文
【中图分类】R733.3
【相关文献】
1.检测多发性骨髓瘤分子细胞遗传学异常的两种方法比较分析 [J], 姚丽娜;姚玉华;顾建文
2.多发性骨髓瘤分子细胞遗传学异常相关性研究 [J], 史沛芹;王文婷;朱学涛;汪海清;杨艳
3.免疫组织化学联合荧光原位杂交技术检测多发性骨髓瘤分子细胞遗传学异常 [J],
杨璐璐;聂玉;刘欣;汪健;王晓秋;王志华;郑昌成;王兴兵;朱小玉
4.荧光原位杂交技术检测一例多发性骨髓瘤五类分子细胞遗传学异常 [J], 孙毅;刘静芸;
5.荧光原位杂交技术检测一例多发性骨髓瘤五类分子细胞遗传学异常 [J], 孙毅;刘静芸
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浅谈多发性骨髓瘤现在的中国进入了老龄化社会，老年人问题越来越得到重视，老年病也受到更多关注。
随着年龄增长，身体健康状况直线下降，更多的疾病找上门来。
老年人可能会因为肩关节、腰椎关节疼痛，认为患了骨质疏松，自行补钙也没有好转；也可能因为贫血头晕，休息后没有得到改善；还可能发现尿中有血有泡沫，怀疑泌尿系感染到医院就诊。
经多种检查才知道患上了近年来多发的的血液病-多发性骨髓瘤。
那么多发性骨髓瘤是什么呢？很陌生，听着好像是肿瘤。
是的，这是一种血液肿瘤，但并不是真长了一个实质性肿瘤。
一、多发性骨髓瘤的病因？多发性骨髓瘤好发于中老年人，特别是60岁以上的老年，男女比例为1.6：1。
病因现在还不明确，文献表明可能与细胞遗传学异常、电离辐射、化学接触以及病毒感染有关，具体机制还有待研究。
二、多发性骨髓瘤实质是什么?多发性骨髓瘤是一种来源于骨髓浆细胞的恶性肿瘤。
正常浆细胞是主导体液免疫的B淋巴细胞发育到终末阶段的细胞，在体内起者产生抗体、分泌细胞因子以及造血等功能。
骨髓瘤浆细胞异常增殖，会产生许多没有抗炎功能的异常免疫球蛋白。
这些免疫球蛋白聚积在骨骼、心脏、肾脏、肺等部位会造成相应器官的损害。
三、多发性骨髓瘤的症状有哪些？多发性骨髓瘤是一种发展很缓慢的疾病，有着一般肿瘤共同的特性：早期症状隐匿，有症状确诊时已经到了晚期。
即便得到治疗，预后也不是很好。
而多发性骨髓瘤的症状腰痛、骨折、泡沫尿、贫血、感染是很常见的症状，没有什么典型性。
患者觉着哪里不舒服就会去相应的科室，不一定会想到可能是血液病。
多发性骨髓瘤的四大核心症状，英文缩写连起来是CRAB，所以也被称为“螃蟹病”。
（1）高钙血症（Calcium elevation），是因为骨髓瘤恶性细胞造成溶骨性破坏使得血钙增高。
常会出现多尿、恶心、呕吐、嗜睡、意识障碍等，也可能出现心律不齐及肾功能衰竭等症状。
（2）肾功能不全（Renal insufficiency），也是较常见的症状。
多发性骨髓瘤研究进展1.遗传学研究：近年来，逐渐发现多发性骨髓瘤存在一系列的染色体异常，包括例行发生的13号染色体的缺失和双体及14号染色体的转位。
研究还发现了与多发性骨髓瘤相关的一些基因突变，例如KRAS、NRAS和BRAF等。
这些遗传异常的进一步研究为多发性骨髓瘤的发病机制提供了更深入的认识。
2.免疫学研究：多发性骨髓瘤是一种免疫相关的疾病，研究表明，多发性骨髓瘤患者的免疫系统存在异常。
例如，T细胞的活化和调节失衡，导致不正常的细胞增殖和免疫能力下降。
目前，针对这些异常的治疗策略正在研究中。
3.新型治疗方法：传统治疗方法包括化疗、放疗和造血干细胞移植。
然而，由于多发性骨髓瘤的异质性和复杂性，效果有限。
近年来，一些新的治疗方法被提出，例如靶向治疗、免疫治疗和基因治疗。
其中，蛋白酶体抑制剂和免疫调节剂等药物已经在临床中得到应用，并取得了一定的疗效。
4.预后评估：多发性骨髓瘤的预后评估有助于指导治疗方案的选择和疾病进展的监测。
目前，流式细胞术、基因组学和分子生物学等技术在预后评估中起到了重要作用。
通过检测多发性骨髓瘤的分子标志物和遗传变异，可以更准确地评估患者的预后，并根据评估结果制定个性化的治疗方案。
5.治疗耐药机制：多发性骨髓瘤的治疗耐药性是治疗失败和疾病复发的主要原因之一、目前，研究表明，多发性骨髓瘤患者存在多种与治疗耐药相关的机制，包括基因突变、异常信号通路激活和免疫逃逸等。
研究人员正在努力阐明这些机制，并寻找新的治疗策略来克服耐药性。
总的来说，多发性骨髓瘤的研究进展主要集中在遗传学、免疫学、新型治疗方法、预后评估和治疗耐药机制等方面。
随着研究的深入，相信会有更多的突破和进展，为多发性骨髓瘤的诊断和治疗提供更好的方法和策略。
doi：10.3969/j.issn.1009-4393.2021.09.077--综述--多发性骨髓瘤细胞分子遗传学为基础的预后分层与个体化治疗进展肖红（湖南省湘潭市第一人民医院血液科，湖南湘潭411101）摘要：多发性骨髓瘤（MM）是骨髓中浆细胞克隆性增殖的恶性疾病，其生物学异质特性较高，因患者个体之间具有明显差别，所以在治疗时，患者生存期存在明显差异，可为数月，也可为十多年。
采用合理预后分层评估方法，对于多发性骨髓瘤治疗具有重要意义。
细胞分子遗传学异常对多发性骨髓瘤预后具有重要影响，将分子遗传学作为基础，建立有效预后分层方法，可使得患者得到更为针对性的个体化治疗。
关键词：多发性骨髓瘤；细胞分子遗传学；预后分层；治疗Molecular genetics-based prognosis stratification and individualized treatment of multiple myeloma cellsXIAO Hong(Department of Hematology,The First People's Hospital of Xiangtan City,Hunan Province,Xiangtan,Hunan,411101,China) Abstract:Multiple myeloma(MM)is a malignant disease of clonal proliferation of plasma cells in the bone marrow.Its biological heterogeneity is high.Because there are obvious differences between individual patients,the survival time of patients is obvious during treatment.The difference can be months or more than ten ing a reasonable prognostic stratified assessment method is of great significance for the treatment of multi-ple myeloma.Cellular molecular genetic abnormalities have an important impact on the prognosis of multiple ing molecular genetics as the basis and establishing an effective prognostic stratification method can enable patients to receive more targeted individualized treatment.Key words:Multiple myeloma;Cell molecular genetics;Prognostic stratification;Treatment多发性骨髓瘤是一种恶性肿瘤疾病，主要是骨髓内浆细胞存在克隆性增生现象，而且分泌单克隆球蛋白[1]。
多发性骨髓瘤常见分子细胞遗传学异常及其意义多发性骨髓瘤是一种常见的浆细胞恶性肿瘤，重要的染色体与基因异常导致疾病的进展，在多发性骨髓瘤中具有独立的预后判断价值。
随着检测方法的更新及技术的进步，异常染色体与基因的检出率越来越高，主要包括13号染色体全部或部分缺失伴或不伴14q32/IGH的重排等染色体异常。
异常染色体与基因的检测具有重要价值，可完善MM预后评估体系，指导临床个体化治疗并为新药开发提供新的靶点。
标签：多发性骨髓瘤；分子细胞遗传学；预后1染色体数目异常1.1超二倍体MM患者超二倍体主要表现为1、3、7、9、11、13、15、17、18、19、21、22三体型[1]；另外，近年来国内也有人发现MM患者8号染色体三体，王晓炜等[2]应用荧光免疫表型和间期细胞遗传学（FICTION）技术对MM骨髓涂片进行8号染色体检测，9例MM患者中，发现8号染色体三体1例，这可能与应用FICTION技术提高了检测效率有一定关系。
1.2亚二倍体MM患者亚二倍体主要表现为6、8、13、14、X、Y单体型为特征；其中13号染色体单体缺失及其部分缺失是目前研究较为广泛的染色体异常之一。
2染色体结构异常2.113号染色体异常13 号染色体部分或完全缺失是MM 最早发现的染色体异常，MM 中较常见，而且是MM预后及生存期预测的指标之一。
13号染色体异常，特别是13单体（-13）和13号染色体长臂部分缺失（13q-）与MM预后的关系越来越受到重视。
目前认为13号染色体上存在MM 抑癌基因，其缺失与疾病危重、疗效和预后密切相关。
Pérez-Simón等[3]采用荧光原位杂交（FISH）方法分析了15 种不同染色体异常在常规剂量化疗患者中的预后价值，发现13号染色体缺失是最重要的预示生存期短的预后指标，但对治疗反应无影响。
由于13q-的断裂点范围在13q11~13q14，RB1基因正好也于这个区域，因此有人推测13号染色体完全或部分缺失所致MM预后不良可能与RB1基因改变有关。
Chiecchio等[4]通过FISH技术对400例新发MM患者染色体检测发现，至少有一种染色体数目或结构异常者达99%，其中13号染色体缺失：单体缺失及部分缺失约占47%。
Fonseca等[5]采用cig-FISH 技术在54%的MM患者中检测到del（13q14），所使用的探针为RB1和D13S319。
Shaughnessy等[6]采用11种探针涵盖13号染色体长臂以研究13号染色体缺失，发现86%的MM患者存在13号染色体缺失，最多的丢失位点是D13S272 （13q14.1，占76 %）和D13S31（13q14q21，占68%）两个13q14处不相连的片段。
而常见位点RB1和D13S319 的缺失频率分别是52%和70%。
目前认为丢失13号染色体整个长臂或13号染色体完全缺失最常见。
2.214号染色体异常14号染色体异常是MM最常见的结构异常，绝大多数是由于伙伴染色體与14号染色体交互易位造成；从而形成MM特殊的标记染色体14q+和14号染色体缺失即del（14）。
在MM中，应用FISH技术检测14号染色体易位，可发现约20%~60%浆细胞伴有14号染色体易位；其中，t（11；14）（q13；q32）是最常见的改变[7]，占14号染色体易位的30%，其肿瘤细胞形态多为小裂浆细胞。
其他还有t（8；14）（q24；q31），t（14；18）（q32；q21），t（4；14）（p16；q32），（q21；q32）等，染色体断裂点几乎都发生在14q32.3。
Madoka Takimoto[8]及t（6；14）等应用FISH技术检测23例MM患者，发现10例伴有14号染色体易位，约占43.5%，其中11q13/CCND1占5例、16q23/MAF4例、4p16/FGFR3仅1例。
2.2.1t（11；14）（q13；q32）Takimoto等[8]应用FISH技术检测23例MM 患者，发现5例11q13/CCND1易位，约占21.7%。
t（11；14）易位造成了cyclinD1的过度表达，断裂点位于11号着丝粒端距cyclinD1基因330kb处，无主要易位集簇区（MTC），其断裂点覆盖了整个cyclinD1基因。
cyclinD1蛋白与周期素依赖性激酶CDK4和CDK6联合作用可以使Rb磷酸化而使细胞由G1期进入到S 期，是B细胞增殖的重要因子，与MM 发生关系密切。
t（11；14）导致cyclin D1基因高度表达，则可能使细胞的增殖和分化出现异常。
由于人类骨髓瘤细胞系（HMCL）t（11；14）（q13；q32）的发生率明显增加，此易位可能造成MM 克隆增殖，从而使得疾病进展恶化。
临床发现有t（11；14）的MM细胞出现淋巴细胞样浆细胞的表型，且常规治疗效果较差。
研究发现有此易位的MM患者经大剂量化疗和干细胞支持后预后较好[9-11]。
2.2.2t（4；14）（p16.3；q32.3）这种染色体易位用常规细胞遗传学（CC）方法无法发现，然而用间期FISH技术可以在15%～20% MM患者中检出，目前尚未在其它B细胞肿瘤及其它非血液系肿瘤中发现t（4；14）异常，因此t（4；14）可能是MM特有的细胞遗传学改变。
4p16.3的断裂点位于染色体着丝粒端，距成纤维细胞生长因子3（FGFR3）基因50~100kb 处，易位到IgH 的调节元件区如转录增强子和位点控制区（LCR），引起FGFR3表达失控；同时该易位可引起4号染色体MM SET（multiple myeloma SET domain）基因的表达明显增强。
由此可见，t（4；14）可同时影响FGFR3和MM SET两个基因的表达，易位形成IgH-MMSET融合基因。
FGFR3的高表达引起瘤细胞的增殖，凋亡受抑，而在正常浆细胞未能检出FGFR3表达。
MM SET基因可编码具有32羟基232甲基戊二酸（32-hydroxy 232-methylglutariacid，HMG）功能域的核蛋白，该蛋白具有4个PHD-锌指和1个SET功能域；这几个功能域均编码与染色质重构有关的核蛋白，与细胞生长、分化的信号调控有关。
且经过对MM SET基因的DNA和蛋白质序列分析发现MM SET基因和HRX基因具有较高的同源性。
由此可以推测：t（4；14）（p16.3；q32.3）易位一方面引发FGFR3的高表达，使肿瘤细胞高速增殖，促进了肿瘤的进展；另一方面，MM SET基因的表达，影响着骨髓瘤细胞的生长、分化，在肿瘤的转化及转归过程中起重要作用[12]。
2.31号染色体异常2.3.11p-多数女性患者从冒烟型骨髓瘤发展为MM大约需4.5年时间。
在这个进程中，1p-及MYC基因重排在临床诊断MM一年前，通常只是很少部分患者浆细胞可检出；而在临床表现为MM的患者中，它们可以很快在大部分患者中检出，提示其可能直接参与疾病的进展。
Chiecchio等[13]针对1号染色体中1q21.1至1q31.3片段，予以PDZK1、CKS1B及ASPM基因监测，分别于2001年9月、2003年6月、2004年6月、2005年5月、2006年3月共取5份样本。
1p32.3-于前三份样本为阴性，而后两份分别为42%、82%；其中缺失主要在CDKN2C基因座周围。
该基因的缺失在MM患者中可检出15%，在MGUS/SMM 患者中则罕见，且伴随改基因缺失的MM患者预后较差。
这些都提示该基因缺失与MGUS/SMM向MM进展机制有很大关联。
2.3.21p31-32缺失WJ.Chng等[14]通过双中心131名MM患者进行检测染色体组的“得失”（gains and losses），发现1p31-32可能包括三个与预后相关的不连续的区域；而20p12.3-12.1可能包含两个。
经FISH检测分析，1p31-32缺失与患者生存期缩短具有相关性（24.5月比40月，p=0.01）；而20p12区缺失则患者亦有生存期缩短趋向（26.3月比40月，p=0.06）。
进一步的分析指出，1p31-32对生存期的影响主要是缩短复发后存活时间，而对完全缓解期及平台期（无进展期）患者没有影响。
2.49p21异常目前认为，9p21异常影响MM预后的主要因素为位于其上的p16基因，该基因有3个外显子，编码的蛋白质长15.8 kb，含156个氨基酸。
P16具有抑制CDK4、CDK6的活性，防止CDKs与CyclinD结合的功能，进而阻止Rb基因磷酸化及抑制转录因子E2F的解离，达到调控细胞增殖的目的。
p16失活的主要方式是5’CPG甲基化，约占40%～70%。
在MM S期中p16甲基化浆细胞（PC）计数常为无甲基化者的2倍；且p16甲基化水平通常与血浆β2-MG、C反应蛋白（CRP）呈正相关[15]。
2.517p13-异常抑癌基因p53可调控细胞周期，调节细胞凋亡与分化，而17p13的缺失导致P53基因的缺如，是浆细胞疾病进展的继发性改变。
该异常与侵袭性病程和短的生存期相关，其检出率各家报道不一。
Chang等[16]采用cig-FISH技术在20%的MM患者中检测到P53基因缺失，且在9例侵犯中枢神经系统的MM患者中检测到8例有p53基因的缺失。
Schop等[17]采用FISH技术在15%的MM患者中检测到了p53基因的缺失。
3复合染色体异常MM患者通常会出现多种染色体异常合并存在的情况，而并非仅单个染色体的缺失或易位。
常见的复合染色体异常主要有14q32/IGH基因重排伴13染色体的全部或部分缺失。
Madoka等[8]通过对23例患者FISH检测发现：14q23基因重排有10例（43.5%），其中11q13/CCND1 占5例、16q23/MAF 4例、4p16/FGFR3 仅1例；该10例中有9例伴随13-/13q-。
13号染色体异常包括-13 7例（70%）、13q14- 2例（20%）。
他们认为MM患者中14q32基因重排与13号染色体异常具有很大的相关性。
Laura Chiecchio等[4]通过FISH技术对400例新发MM患者染色体检测发现，至少有一种染色体数目或结构异常者达99%；其中13-占47%，IgH基因重排占46%，16q23-占21%，t（11；14）易位占14%，t（4；14）易位占13%，超二倍体为57%。
t（4；14）易位患者中约40%合并13-。
國内也有类似的报道，如王迪等[18]对MM患者骨髓单个核细胞滴片进行FICTION检测，结果20例患者检出t（4；14）4例，t（11；14）6例，t（14；16）1例，p53缺失3例，13q缺失8例；其中具有一种以上染色体异常占80%（仅4例未检测出上述5种异常），两种或两种以上改变的占6例（30%）。
