血小板假性减少原因探讨47

在输液的同一臂侧抽血。

这样不仅使血容量发生改变,而且输液中的成分直接影响检测的结果,如血糖、肾功异常增高、二氧化碳结合力降低等,这种情况在实际工作中并不少见。

⑤抽错标本,主要发生在住院病人,是由于医务人员的责任心不强所致。

这种情况在实际工作中也会发生,这是一个很危险的因数,而又不容易被实验室人员所发现。

3　血液的孵育①孵育的方式,常推荐的是恒温水浴法,该法不仅可以加快血液的凝固,还可以保持一定的湿度,使血液中的成分含量不会发生较大的变化;而恒温孵箱孵育法,可以加快血液的凝固,但它同时使血液中的一部分水份蒸发导致结果偏高,尤其是临界值的指标。

建议各实验室统一使用恒温水浴法。

②孵育的时间,未加抗凝剂的血液需要孵育30～60m in 才能析出血清,而在实际工作中往往未达到所要求的时间。

致使血清分离不完全,部分凝血因子散落其中,形成血清凝块,堵塞仪器的管道,影响测定结果。

4　血清的离心分离血清的离心条件是1500～2000rp m 10～15m in,血浆的离心条件是2000～2500rp m 10～15m in 。

而有的实验室往往未达到离心时间的要求,致使血清(浆)分离不完全,在其中存在一些微粒成分,除了影响检测结果外,还有可能堵塞仪器的管道,致使仪器无法正常工作。

5　标本的移取在大多基层实验室,由于仪器的原因,往往无法将离心的标本直接测定,需要人工移取血清(浆)标本。

在移取的过程中,有些实验室人员一个吸头多用,造成交叉污染影响测定结果;有的甚至加错标本,造成结果完全错误。

这些都是要引起大家所重视的。

此外有的实验室同时使用血清与血浆来作生化项目的测定,虽然对一些指标没有显著的差异,但两者的介质却存在差异,血浆中的一些微粒对测定项目的比色有干扰。

因此在选择标本前要先做对照实验,结果没有差异后再慎重选用。

综上所述,影响血标本准备的因数很多,需要医务人员尤其是基层的同志要全面了解影响的各个环节,规范自己的操作,保证血液标本的质量,才能得到一个准确的结果。

血细胞分析仪计数血小板假性减少原因分析摘要】目的总结血细胞分析仪计数假性血小板减少因素和解决办法。

方法重新抽静脉血分别用EDTA-K2和EDTA-K2#NaF抗凝, 1 h后用BC-5500全自动血细胞分析仪检测, 2次仪器检测值与人工显微镜计数值进行比较。

结果用仪器检测全血模式、预稀释模式和手工法比较,三者差异无统计学意义(均P>0.05)。

结论抽血不当和EDTA依赖性凝集是造成假性血小板减少的主要因素, EDTA依赖性凝集患者需用EDTA-K2#NaF抗凝血检测；有大血小板和小血小板干扰检测时，必须手工显微镜计数,同时还应加强血片的复检。

【关键词】血细胞分析仪血小板计数假性减少【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）03-0192-01随着全自动血细胞分析仪在医院临床实验室广泛使用,使血小板的检测常规的检测方法。

但由于受到采血等原因的影响，出现和造成血小板假性减少，造成错误的临床经验结果的出现,现将引起血小板假性减少的原因总结如下。

1 资料与方法1.1 一般资料收集2011年5月～2012年5月，我院住院患者血液分析中的标本共1558例。

采集患者静脉全血、血涂片复查。

凡人为差错、标本放置时间、仪器故障等因素所致均不计入在内。

1.2 仪器和仪剂深圳迈瑞BC-5500全自动血细胞分析仪,严格按照操作规程,每日用前在全血模式下测试,结果在质控范围内才能进行样本测试。

同时采用日本Olympus CX41型双目显微镜。

校准物、质控物、溶血剂由深圳迈瑞公司提供,均在有效期内使用。

1.3 检测方法(1)全血模式计数PLT。

(2)预稀释模式下计数PLT。

(3) 血涂片复核。

1.4 统计学处理以显微镜计数法为血小板计数的标准,结合血涂片情况,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果血小板真性减少用仪器检测全血模式、预稀释模式和手工法比较测定结果较一致的共1448例,三者差异无统计学意义(均P>0.05)。

假性血小板减少的原因分析目的：为假性血小板减少（pseudo thrombocytopenia，PTCP）探索几种可靠的检测或验证血小板数量的方法，为实验室工作提供依据。

探讨假性血小板（PLT）减少的原因。

方法：对血小板计数与临床症状明显不符的1例PLT减少患者，采集静脉血分别用EDTA-K2、枸橼酸钠抗凝后进行PLT计数，并做末梢血直接涂片及不同抗凝剂外周血涂片、瑞氏染色显微镜镜检。

结果：枸橼酸钠抗凝血PLT计数结果在正常范围内，与用EDTA-K2抗凝外周血多次PLT计数结果有明显差异。

瑞氏染色镜检显示：末梢血直接涂片、EDTA-K2抗凝血涂片有聚集的血小板出现，枸橼酸钠抗凝血涂片血小板散在均匀分布。

结论：日常工作中，对于不明原因的PLT计数减低，与临床严重不符的应改用其他检测方法复查，避免误诊。

标签：假性血小板减少；血细胞分析仪；血小板计数；抗凝剂假性血小板减少是由于某些原因使仪器测定结果低于血小板实际数量，如血小板与血小板之间相互黏附即血小板聚集时，会导致仪器测定血小板计数结果假性偏低。

我院发现1例，就此作分析探讨。

1 材料与方法1.1 临床资料患者，男，37岁。

因偏头疼半月来我院就诊。

行血常规检测，白细胞：11.40×109/L，血红蛋白153g/L，血小板：17×109/L，因单纯血小板异常，重复多次，血小板结果变化不大，但为慎重随即收住院进一步观察。

患者既往身体健康，无血液病史，肝脾不大，无出血倾向。

复查抗凝及纤溶功能正常，结缔组织疾病相关抗原、抗体均阴性。

颅脑磁共振检查未见异常，骨髓穿刺细胞学检查巨核细胞数量、分类正常，血小板成簇可见。

1.2 材料清洁干燥无尘无油脂载玻片75mm×25mm，厚度1.2mm；瑞氏染色液（天津市科密欧化学试剂开发中心）；全自动血细胞分析仪XE-2100（日本Sysmex公司）；光学显微镜CX41（日本Olympus公司）；EDTA-K2抗凝管、枸橼酸钠抗凝管（BD公司）。

浅析血细胞分析时血小板假性减少原因随着血液分析仪的推广和普及，血液分析仪越来越广泛地应用于临床血常规分析中。

血细胞分析仪具有快速、方便、重复性好、工作效率高等优点，但是由于自身检测原理的限制以及血小板易于粘附、聚集、破坏等特点，血细胞分析仪测定血小板时常常会出现假性减少现象，这是临床经常反映的问题。

为此，现将血细胞分析仪计数血小板出现假性减少的原因进行简单的探讨。

1．计数血小板方法学的缺陷造成：准确计数血小板实非易事。

迄今为止，所有计数血小板的方法，对于血小板减少的标本，其准确性都比较差，都存在不少缺陷。

自动化的血液分析仪，无论是阻抗法还是光散射法，对于血小板数及形态正常的标本，结果一般比较可靠，但是对于血小板明显减少和/或形态异常者，所得结果误差甚大，有时甚至难以计数。

其原因是：这些方法基本上都是依据细胞的大小进行区分和计数的，而正常人的血小板体积相差甚大，可自2fl至20fl以上，其体积分布直方图不是对称的，而是明显地向右延伸，即都存在一定数量的大血小板。

在病理情况下，大血小板会更多地增加。

由于大部分血液分析仪不能将大血小板与小红细胞等分开，致使许多大血小板被当成红细胞而未计入血小板总数中，从而使血小板计数结果偏低1。

2．血小板的生理特性造成：血小板为多功能的细胞，在生理止血及某些病理过程中起着重要作用。

由于血小板的特点易于粘附、聚集，当标本中血小板体积偏大和俄聚集成较大颗粒时，血小板被误认为小红细胞而未计入血小板总数中，从而使血小板计数结果偏低2。

3．采集血液标本不顺利造成：采血过程影响血小板计数的准确性，采血速度和出血是否顺利是保证血小板数目准确的关键。

手指采血时若方法掌握不当，如采血速度慢、出血不畅、挤压采血部位等，都会造成假性血小板减少3。

静脉经多次穿刺而引起的水肿及皮下出血时，因组织损伤，组织凝血因子混入血液标本中产生肉眼看不见的小凝块，是造成血细胞分析仪计数血小板出现假性减少的常见原因之一，所以对血小板减少患者应注意阅片，必要时重新采血4。

当代医学　2008年9月总第149期　C ont em pora ry M edi c i ne,Sept e m ber 2008,I ss ue N o.149临床医学C l i n i c a l M e d i c i n e 血细胞分析仪具有快速、方便、重复性好、工作效率高等优点。

在检验工作中广泛应用，但是我们每天的血细胞分析中都会遇到白细胞、红细胞直方图正常，但是血小板直方图异常且血小板数目减少的标本。

根据血小板直方图的提示，再次用分析仪进行复查并进行显微镜下计数。

我们发现有很多的标本是假性的血小板减少。

假性血小板减少如不及时纠正会给临床医生误导，有时会引起医疗纠纷。

因此，必须重视和纠正这样的情况。

现就血细胞分析仪计数血小板假性减少原因分析如下。

1采血是否顺利采血是否顺利是造成血小板偏低的一个重要因素。

静脉经多次穿刺而引起的水肿及皮下出血时，因组织损伤后，组织凝血因子易于混入血液标本产生肉眼看不见的小凝块，也就是造成测定结果偏低的常见因素。

对这样的标本应该涂片复检后建议重采血测定。

2标本的放置时间用乙二胺四乙酸（ED TA ）盐作为抗凝剂已被国际血液学标本化委员会（I CSH ）认定，并广泛应用。

ED TA K 2作抗凝剂时会使血小板形态发生变化，其外膜形成的微小管游离端向外伸展，从而在血小板周围形成丝状伪足，数个这样的伪足相互缠绕，形成血小板可逆聚集体。

此时测定血小板，结果偏低，直方图尾部抬高或成锯齿状。

但是随着时间的延长ED TA 使血小板变形，可逆聚集体破散，此时测定血小板，就可以避免血小板假性减少。

3大血小板的影响正常情况下血小板多分布在2～15fl 区域内。

仪器通常设定血小板阈值，且仪器只识别颗粒大小而不区别颗粒的性质血小板与红细胞在同一通道内计数。

当血小板体积大于24fl 时，血小板会被误认为是小红细胞而不纳入血小板的计数范围。

因此而使血小板计数降低的这种情况多见于肿瘤、白血病、肝病患者等。

血小板减少的假性之说有根据吗假性血小板减少,通过实验和科学分析，在血小板检测中偶有假性血小板减少发现并需澄清以下事实：1、使用血细胞分析仪时会有假性血小板减少发生，其原因：1) EDTA依赖性假性血小板减少(PTCT)。

由于用EDTA盐(EDTA盐干粉抗凝剂，乙二胺四乙酸)干粉抗凝剂，在作为免疫介导的血液中，可出现的冷抗血小板自身抗体，使血小板互相凝集现象。

这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体，直接作用于血小板膜糖蛋白IIb/IIIa 上。

同时，这种与血小板结合的自身抗体Fc端可与单核细胞或淋巴细胞膜上Fc受体结合，出现卫星现象。

引起血小板聚集卫星现象后，在全自动血细胞计数仪上检测时，发生假性血小板计数减少的现象。

2)EDTA诱导"血小板卫星现象"(platelet satellitism)，引起假性血小板减少。

EDTA依赖性血小板减少症(PTCP)应该受到广泛重视。

PTCP的临床发生率约为0.09%-0.21%-0.77%，血小板卫星现象3) 血小板体积偏大引起的血小板假性减少。

4) 高镁血症引起的血小板假性减少。

2、EDTA依赖性假性血小板减少(PTCP)的原因与血小板表面存在某种隐匿性抗原有关。

1)EDTA可引起血小板糖膜(GP)发生改变，即血小板形态发生变化，由正常的圆盘状变为圆球形，改变了血小板膜表面某种隐匿性抗原构象。

2)部分病人血浆中存在的某种自身抗体与这种改变构象的抗原结合后的抗原抗体复合物激活了细胞膜中的磷酯酶，使血小板膜水解并释放AA、ADP、5-TH、胶原、凝血酶原等血小板活性物质。

3)这些血小板活性物质都能不同程度的活化血小板纤维蛋白原受体(FIR-B)，促使血小板与纤维蛋白原受体结合后聚集成团，导致血小板假性减少。

3、高胆固醇和高甘油三酯血症时血小板聚集性增高，可引起假性血小板减少;糖尿病、高血压病患者由于血管内皮易损，致血小板容易聚集不容易解散，常导致机测血小板偏低。

假性血小板减少及原因分析摘要：目的：探讨假性血小板减少的相关因素，为提高测定结果的准确度提供参考。

方法：抽取同一患者当天静脉血，分别采用乙二胺四乙酸二钾（ethylenediaminetetraacetic acid-k2，edta-k2）抗凝，枸橼酸钠抗凝，edta-k2抗凝后转为枸橼酸钠抗凝处理的血液样本，三种方法处理后的血样均采用三分类和五分类法进行血小板测定，此外三种处理方法的血样均推血涂片，染色后置光学显微镜下观察血小板聚集情况。

查阅相关文献结合此次实验结果分析引起测定结果差异的可能原因。

结果：由于edta-k2导致血小板的聚集，使得依赖性假性血小板减少；经枸橼酸钠抗凝处理后，未见血小板聚集及假性血小板减少现象；自动化血细胞分析仪误将聚集的血小板判读为白细胞而使得白细胞假性增加。

结论：edta-k2抗凝可能会引起血小板聚集与血小板假性减少，对于此类情况应采取手工计数和涂片复检法进行复测，以保证结果的准确性及避免误诊。

关键词：edta 枸橼酸钠抗凝假性血小板减少血小板聚集doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.07.223【中图分类号】r4 【文献标识码】b 【文章编号】1671-8801（2013）07-0202-02血小板在人体内具有维护血管内皮完整性和粘附、聚集、释放、促凝及血块收缩等重要功能，对血小板进行检测已成为入院后的常规检查项目，对于诊断多种疾病有重要作用。

目前各大医院常用全自动血细胞分析仪对血小板进行测定，依据电阻抗或光散射原理推断血细胞的大小与数量，但有时血小板会以聚集状态存在，仪器误读为其它血细胞，最终出现血小板计数减少的假象，即假性血小板减少，故分析血小板假性减少的原因及应对策略就显得非常重要。

本文就工作中出现的1例血小板假性减少现象进行报道并对相关的影响因素进行分析。

1 资料与方法1.1 一般资料。

2013年1月15日来我院内科就诊的73岁女性患者，在体检中心抽取该患者的静脉血，进行血细胞分析。

实验室血小板检测假性减少的原因探讨摘要：目的：探讨假性血小板减少的影响因素及解决办法。

方法：重新抽静脉血分别用EDTAK2和EDTAK2·NaF抗凝，1 h后用Sysmex 800i血液分析仪检测，2次仪器检测值与人工显微镜计数值进行比较。

结论：抽血不当和EDTA依赖性凝集是造成假性血小板减少的主要因素，EDTA依赖性凝集患者需用EDTAK2·NaF抗凝血检测；有大血小板和小血小板干扰检测时，须手工显微镜计数，应加强血片的复检。

关键词：血小板；血小板计数；血细胞分析仪；假性血小板减少；原因分析目前，由于全自动血细胞分析仪的广泛使用，使血小板的检测常规化，具有快速、简便、重复性好的优点，但经常出现假性血小板减少的检测结果，造成错误的临床诊断，这是检验工作者一直关注的问题。

为了探讨假性血小板减少的形成原因，我们进行了系列的实验研究，现报告如下。

1 资料与方法1.1 器材 800i血液分析仪；EDTAK2抗凝管；CH2双目显微镜.1.2 试剂 800i血液分析仪配套试剂；草酸铵稀释液及瑞氏染液；氟化钠（NaF），分析纯AR，CHECK质控血。

1.3 EDTAK2·NaF抗凝管制备氟化钠6 g加100 ml蒸馏水，取100 μl置于EDTAK2抗凝管中，56 ℃烤干备用［1］。

1.4 试验标本的选择 2014年5月至2015年5月住院患者的血常规样本中（EDTAK2抗凝），将PLT<100×109/L的标本选出，涂血片复检，去除相符合的标本（血片中无聚集血小板、散在分布；与人工显微镜计数值相符，在±3 SD内），即为假性血小板减少，作为实验标本，共计306例，其中骨科24例，呼吸科36例，心血管44例，产科20例，肿瘤科32例，血液科26例，新生儿60例，老年科64例；其男性162例，女性144例；年龄范围3 h～86岁，平均年龄48.3岁。

其测定值作为第一次测定值列入结果统计。

摘要：目的：分析临床常见的血小板假性减少的原因，探讨针对不同的原因采取不同方法进行纠正处理。

方法：按照Beckman Coulter ACT 5diff 的分类原理及血小板（PLT）直方图，把PLT直方图异常且血小板数值小于100×109的标本采用血涂片镜检、手工计数和枸橼酸抗凝复检。

结果：不同原因的假性血小板减少与复检结果有显著性差异。

结论：血小板假性减少均应进行复检，以为临床提供准确可靠的数值。

关键词：血小板计数；血小板聚集；血细胞分析仪血细胞分析仪几乎已经在每个大中小医院广泛使用，由于仪器自身检测原理的限制以及血小板易于黏附聚集的特点，血小板检测经常出现假性减少，仪器往往提示PLT计数异常或PLT直方图异常，但有时提示的是白细胞或红细胞异常。

因此，必须综合分析血小板检测的影响因素，采取恰当的处理方法，回报临床客观准确的数值。

1 资料与方法1.1 一般资料：选取我院2010年3月～2011年8月住院患者48例，其中男20例，女28例，平均年龄52岁。

1.2 仪器：Beckman Coulter ACT 5diff 全自动血液分析仪；Olympus 显微镜。

1.3 试剂：上述血液分析仪的原装配套试剂；PLT草酸铵稀释液（参照《全国临床检验操作规程（第三版）》配置）[1]；瑞姬染液。

1.4 方法：首先所有标本按常规用EDTA-K2抗凝全血进行检测，PLT出现异常旗标且PLT＜100×109标本，进行涂片瑞氏染色镜检，根据镜检结果和PLT直方图结果分为4组：①PLT直方图出现无拟合曲线、翘尾等现象，镜下可见大量血小板凝块或小堆积，则要求临床重新采集标本，复检后正常，基本推测是采集原因造成血小板假性减少；②PLT直方图和初步镜检结果同第一组，如果两次采集过程均顺利，EDTA抗凝结果均不正常，标本中仍存在血小板聚集，则改用枸橼酸钠抗凝剂，结果正常则推断是EDTA抗凝剂原因造成，若仍不正常，则推断此患者对EDTA和枸橼酸钠均发生聚集，目前只能用手工法校正（本文6例标本，仅对血细胞分析仪初检、复检和手工计数检测结果比较（）原因例数初检（EDTA-K2抗凝）（×109）复检后（EDTA-K2抗凝）（×109）复检后（枸橼酸抗凝）（×109）手工法校正（×109）标本采集36 67±32 128±27①无需采用125±22①抗凝剂 6 58±28 61±29 148±34①142±41①大血小板5 65±25 无需采用无需采用114±22①其他（包括冷凝1 45±4 水浴后：110±12 无需采用108±10①集）3.4 其他影响：血小板冷凝集、异常蛋白血症、储存时间过长、高镁血症、脂类与蛋白的聚集的影响等[5]。