赤霉素(GA)的生物测定技术
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植物赤霉素(GA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定植物组织,细胞及其它相关样本中赤霉素(GA)含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物赤霉素(GA)水平。
用纯化的植物赤霉素(GA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入植物赤霉素(GA),再与HRP 标记的赤霉素(GA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。
TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的赤霉素(GA)呈正相关。
用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中植物赤霉素(GA)浓度。
试剂盒组成:标本要求:1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔 10 孔,在第一、第二孔中分别加标准品100µl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50µl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100µl 分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50µl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50µl 弃掉,再各取50µl 分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各1取50µl 分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50µl,混匀后从第七、第八孔中分别取50µl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50µl,混匀后从第九第十孔中各取50µl 弃掉。
2023年全国统一高考生物试卷(甲卷)一、选择题(共6小题,每小题6分,满分36分)1.(★)(6分)下列有关教材实验中颜色变化的叙述正确的是( )A.使用甲基绿吡罗红染色可将细胞大部分染成绿色B.加入酸性重铬酸钾,溶液出现灰绿色,说明溶液中含有CO2C.健那绿将细胞中特定结构染成绿色,说明该结构为线粒体D.在某溶液中加入斐林试剂,水浴加热后出现砖红色,说明该溶液中含有葡萄糖2.(★★)(6分)Na+-K+泵是存在于动物细胞膜上的一种载体蛋白,具有ATP酶活性,这种泵每消耗1分子的ATP,就逆浓度梯度将3分子的Na+泵出细胞外,将2分子的K+泵入细胞内.其具体过程如图所示,下列相关叙述错误的是( )A.该酶将Na+泵到细胞外的跨膜运输方式是主动运输B.该酶既能催化ATP的水解,又能催化ATP的合成C.若O2供应不足,将会影响图示过程的进行D.该酶的结构发生改变,有利于其与离子的结合和分离3.(★)(6分)如图表示果蝇精原细胞在分裂过程中细胞内染色体数目、核DNA分子含量等指标的变化情况,其中图1中的乙曲线表示减数分裂过程中染色体数目.有关分析错误的是( )A.图1中甲曲线表示减数分裂过程中每条染色体上DNA分子数目B.图2中AF段和图3均表示有丝分裂过程C.图1中EF段与图2中DE段下降的原因相同D.图2中的CD段与图3中的hj段细胞所处的分裂时期相同4.(★★)(6分)埃博拉病毒(EBV)是一种单链RNA病毒,其引起人类发生的埃博拉出血热(EBHF)是当今世界上最致命的病毒性出血热.EBV与宿主细胞结合后,将核酸-蛋白复合体释放到细胞质中,通过如图途径进行增殖.下列有关推断正确的是( )A.过程①所需嘌呤比例与过程③所需嘧啶比例相同B.将EBV的-RNA注入人体细胞中会引起人体EBHFC.EBV增殖过程需细胞提供RNA聚合酶、引物、脱氧核苷酸和ATPD.可用灭活病毒的RNA作为抗原免疫小鼠制备单抗诊断盒5.(★)(6分)某兴趣小组展开了对迷人杜鹃开花数量和花期的研究,分别用赤霉素(GA)和乙烯利(ET)溶液喷施在杜鹃叶片的上下表面,实验结果如图所示.下列叙述正确的是( )A.赤霉素和乙烯利都是植物激素B.喷施清水的对照组可以省略不做C.赤霉素和杜鹃的花期乙烯利都能延长D.浓度为200mg/L时,赤霉素对杜鹃开花数量的影响效果比乙烯利明显6.(★)(6分)某科研小组利用植物染色体杂交技术,将携带R(抗倒伏基因)和A(抗虫基因)的豌豆染色质片段直接导入玉米体细胞,两种染色质片段可随机与玉米染色质融合形成杂交细胞,将杂交细胞筛选分化培育成既抗虫又抗倒伏性状的可育植株(F1),过程如图.有光分析错误的是( )A.杂交细胞发生的可遗传变异类型是染色体结构变异B.杂交细胞在第一次有丝分裂中期时含有2个A基因C.植物染色体杂交育种具有克服远缘杂交不亲和障碍、目的性强等优点D.若杂交植物同源染色体正常分离,则杂交植物在F1代首次出现性状分离二、解答题(共3小题)7.(★★)(14分)研究发现,植物的Rubiso酶具有“两面性”,在CO2浓度较高时,该酶催化C5与CO2反应,完成光合作用;在O2浓度较高时,该酶催化C5与O2反应,产物经一系列变化最终在线粒体中产生CO2,上述植物在光下吸收O2产生CO2的现象称为光呼吸.回答下列问题:(1)Rubiso 酶存在的具体场所为叶绿体基质,其“两面性”与酶的专一性并不矛盾,因为该酶作用的底物相同.(2)在较高CO2浓度环境中,Rubiso酶所催化反应的产物是三碳化合物,该物质完成光合作用还需要ATP和[H](物质).(3)研究表明,光呼吸会消耗光合产物,因此,降低光呼吸能提高农作物产量.小李同学提出了两项措施:①适当降低温度;②适当提高CO2浓度;其中不能达到目的措施是①(填①、②),理由是温度降低,酶活性降低,光呼吸减弱的同时光合作用也减弱.(4)与光呼吸相区别,人们把细胞呼吸称为“暗呼吸”,请完成二者部分比较表:光呼吸暗呼吸8.(★★★)(18分)Ⅰ、如图为小鼠下丘脑对多种腺体的分泌调节作用示意图,字母表示激素.回答下列问题:(1)当受到寒冷刺激时,下丘脑和垂体通过激素a、b调节甲状腺的分泌活动,这种调节方式称为分级调节.激素a和c对垂体生理功能的调节作用互为拮抗.(2)某些神经元也能分泌肾上腺素.进入突触间隙的肾上腺素,可以与突触后膜受体结合,引发突触后膜电位变化;也可以与突触前膜受体结合,抑制肾上腺素继续分泌,实现(负)反馈调节;多数最终又被突触前膜摄取,并贮存在突触小泡中,实现重复利用.(3)胰岛素可通过作用于下丘脑神经元抑制胰高血糖素的分泌,验证此现象的实验思路是:将小鼠随机分成两组,一组在其下丘脑神经元周围施加适量的胰岛素溶液,另一组施加等体积生理盐水.该实验的检测指标是血液中胰高血糖素的浓度.为使实验结果更明显,实验前应使实验小鼠处于空腹状态.Ⅱ、如图甲中Ⅰ是布氏田鼠迁入某草原后的种群数量变化曲线.图乙是布氏田鼠从迁入该草原到图中的a时期出生率与死亡率变化曲线.请据图回答:(1)在图甲中,DE段鼠群的年龄组成为稳定型.(2)布氏田鼠种群的最大净补充量在图乙中的G点,该点与甲图中的C点相对应.(3)图甲a时期引入某种生物,鼠群数量明显下降后保持新的动态平衡,引入的生物与布氏田鼠之间最可能是捕食关系.(4)从图甲给予启示是:对于外来物种的引入要遵循协调与平衡原理,还要考虑环境的承载力.9.(★★★★★)(22分)牛(XY型)的有角和无角是一对相对性状,黑毛和棕毛是另一对相对性状,两对性状各由一对等位基因控制.回答下列问题:(1)如果牛有N对同源染色体,研究牛的基因组碱基序列,需要测定N+1条染色体.(2)已知控制牛有角(H A)和无角(H B)的等位基因位于常染色体上,公牛体内H A对H B为显性,母牛体内H B对H A为显性.①有角公牛和有角母牛的基因型分别为H A H A、H A H为和H A H A.②杂合有角公牛与有角母牛交配,求子代的表现型及比例,请用遗传图解表示.(3)已知M与m这对完全显隐性的等位基因分别控制牛的黑毛和棕毛.①若牛毛色对应的基因型5种,则该对基因位于X(填X、常)染色体上;②若多对纯合黑毛母牛与纯合棕毛公牛交配,子一代均表现为黑毛,子一代雌雄个体间随机交配,子二代的性状分离比为3:1,由此不能(能否)推出该对基因一定位于常染色体上;③要检测有角黑毛公牛的基因型,可让该公牛与多只有角棕毛母牛交配,如果子代中均有角,且母牛均为黑毛、公牛均为棕毛,则该有角黑毛公牛的基因型为H A H A X M Y.(4)牛的繁殖能力偏低,若要加快牛的繁殖速率,可采用胚胎工程的相关技术.首先,体外受精获得受精卵,只有获得的精子与发育到减数第二次分裂中期时期的卵子才能完成受精作用;其次,将受精卵进行体外培养,培养条件有无菌无毒环境、营养、适宜的温度和PH、气体环境等;最后,将培育至桑葚胚或囊胚胚的早期胚胎进行移植.。
《农药生物活性测定》课后复习题1.简述农药生物测定的概念、意义。
度量农药对生物群体、个体、活体组织或细胞产生效应大小的生物测定技术。
通常采用不同药剂剂量或浓度对测定对象产生的效应强度,来评价两种或两种以上药剂的相对效力。
2.简述农药生物测定的原理、原则。
原理:研究药剂与生物的相关性原则控制影响因素尽可能一致:温度、湿度、光照等外界环境条件 ;农药的理化性状;供试生物的生理状态 ;处理方法及处理部位设立对照:空白对照、溶剂对照、标准药剂对照重复测定运用生物统计分析试验结果供试生物应尽量选择农作物害虫、病原菌和农田主要杂草3.何为高通量筛选,其组成部分有哪些?以玻璃片、膜片或培养板为载体,用高密度、微量自动化加样的方法,实现短时间内分析大量样本。
高通量筛选方法通常一次可以测定384~1536个点,现在还有3456个点的超高通量筛选方法(ultra-high-throughput screening, UHTS)。
主要组成部分:自动化操作系统;高灵敏度检测系统;分子、细胞水平的高特异性体外筛选模型;被筛样品管理库(即样品库);数据采集传输处理系统4.何为杀虫剂生物测定?度量杀虫剂对昆虫(包括螨类和昆虫纲以外的小动物)产生效应大小的农药生物测定。
通过比较不同杀虫剂的剂量或浓度对供测昆虫产生效应强度的方法,来评价两种或两种以上杀虫剂的相对效力。
5.什么是标准目标昆虫?简述目标昆虫室内饲养定向控制的条件?标准目标昆虫:是指被普遍采用的,具有一定代表性和经济意义,以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。
6.杀虫剂生物测定中移取试虫的方法有哪些?(1)一般移取法:对于活动强度不大或具有假死习性的试虫(棉铃虫等),可用镊子移取。
体型小,软体或易碰伤的试虫(蚜虫、红蜘蛛等),用毛笔移取,注意刺吸式口器的口针。
沾药未干的试虫,必须等药干后才能移取。
(2)趋光法:利用昆虫的趋光性来移取试虫(如家蝇)。
(3)吸虫法:适用于活动强度不大,微小的或易受机械伤害的目标昆虫(拟谷盗、米象等),用真空或喉管空气注射吸虫法移取。
GA植物赤霉素测定方法,GA代检测 ELISA KitPlant ga3 determination method, GA GA generation detection ELISA KitGA植物赤霉素测定方法,GA代检测 ELISA Kit的清洗操作注意事项:(1)试剂应按标签说明储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃。
(2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存。
(3)不用的其它试剂应包装好或盖好。
(4)使用一次性的吸头以免交叉污染(5)用干净的塑料容器配置洗涤液。
用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
(6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
(7)底物A应挥发避免长时间打开盖。
底物B对光敏感避免长时间暴露于光下。
GA植物赤霉素测定方法,GA代检测 ELISA Kit试验原理:TRAb试剂盒是间接法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TRAb浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将TRAb和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中TRAb 的浓度呈比例关系。
服务优势:全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测样本储存:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。
避免反复冻融。
标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。
-70℃可保存6个月。
部分激素类标本需添加抑肽酶。
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2024-2025学年外研版(2024)选择性必修1生物下册月考试卷807考试试卷考试范围:全部知识点;考试时间:120分钟学校:______ 姓名:______ 班级:______ 考号:______总分栏一、选择题(共6题,共12分)1、研究人员为研究哺乳动物垂体对糖代谢的影响,首先切除动物的胰腺,使动物患糖尿病,之后摘除动物垂体,结果发现动物的糖尿病得到缓解,但再注射垂体提取液则又会引发糖尿病症状。
下列相关叙述正确的是()A. 胰腺切除动物血浆中胰高血糖素含量较高B. 垂体中可能有与胰岛素相拮抗的调节糖代谢的激素C. 胰腺切除动物会出现多尿、多饮和体重增加的现象D. 保留胰腺但摘除垂体的动物会发生血糖水平过高的现象2、下面是与促胰液素发现过程有关的四个实验。
①稀盐酸→小肠肠腔→胰腺分泌胰液②稀盐酸→静脉血液→胰腺不分泌胰液③稀盐酸→小肠肠腔(去除小肠部位的神经)→胰腺分泌胰液④小肠黏膜+稀盐酸+砂子制成提取液→静脉血液→胰腺分泌胰液下列有关分析不正确的是()A. ①②④对比说明胰液分泌不是稀盐酸直接作用的结果B. 促胰液素是人们发现的第一种激素,其分泌方式为胞吐C. ①与③对比说明胰液分泌不受神经的调节D. ①②③④对比说明胰液分泌受小肠黏膜产生的某种物质的调节3、下列关于人体激素调节的叙述,错误的是()A. 1mg甲状腺激素能使人体产热增加4200kJ,体现了激素调节的微量、高效B. 食物中缺碘,可能导人体内甲状激素含量减少C. 激素分子虽然弥散在全身的体液中,但只对特定的器官、细胞起作用D. 一些糖尿病人常用胰岛素控制血糖含量,他们需要在饭前口服少量胰岛素4、当果实成熟到一定程度时,呼吸速率突然升高,然后又下降,这个呼吸高峰称为呼吸骤变;随后果实便完全成熟。
出现呼吸骤变时果实内还原糖含量明显升高。
下图是香蕉成熟过程中的相关变化,下列说法正确的是()A. 呼吸骤变标志着果实成熟到了可食用的程度B. 适当降低环境中CO2浓度,可延迟果实成熟C. 呼吸骤变可能与乙烯有关,且只有成熟果实中含有乙烯D. 在植物体内,乙烯通过极性运输从产生部位运输到作用部位5、据科技部2022年5月19日消息,我国科学家成功利用二氧化碳人工合成葡萄糖和脂肪酸。
2023年湖南省名校联盟高考生物第二次联考试卷1. 从1895年欧文顿实验发现细胞膜由脂质组成开始,到1935年丹尼利和戴维森通过研究细胞膜的张力,推测细胞膜除含脂质分子外,可能还附有蛋白质,科学家们对细胞膜的成分进行了长达40年的探索过程。
下列有关细胞膜成分的说法错误的是()A. 细胞膜主要由脂质和蛋白质组成,还有少量糖类B. 一般来说,功能越复杂的细胞膜,其蛋白质种类和含量越多C. 提取动物细胞中磷脂分子,在空气一水界面上铺成单分子层,其面积恰为细胞表面积的2倍D. 探索膜成分的实验,相比使用植物细胞作实验材料,动物细胞的优势是没有细胞壁2. 内共生起源学说认为,线粒体起源于原始真核细胞(体积巨大、不需氧、具有吞噬能力的一类细胞)内共生的能进行有氧呼吸的细菌。
下列证据不支持内共生起源学说的是()A. 线粒体的蛋白质合成机制类似于细菌,而有别于真核生物B. 线粒体以分裂的方式繁殖,类似于细菌C. 线粒体内膜的蛋白质与脂质的比值远大于外膜,接近于细菌的细胞膜成分D. 线粒体的外膜可与内质网膜和高尔基体膜融合沟通3. 受精作用是卵细胞和精子相互识别、融合成为受精卵的过程。
在受精作用进行时,通常是精子的头部进入卵细胞,尾部留在外面。
与此同时,卵细胞的细胞膜会发生复杂的生理反应,以阻止其他精子进入。
下列有关受精作用的说法错误的是()A. 卵细胞和精子相互识别、融合体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能B. 卵细胞的细胞膜发生复杂的生理反应阻止其他精子进入,有利于亲子代染色体数目的稳定C. 精子的头部包含了父方细胞核和线粒体中的DNAD. 卵细胞和精子的随机结合,是遗传多样性的原因之一4. 影响种群数量变化的因素有很多,有些因素的作用强度是随种群密度而变化的,这些因素称为密度制约因素。
而另一些因素对种群数量起限制作用,但是作用的强度与种群密度无关,这些因素称为非密度制约因素。
下列有关说法正确的是()A. 气温和干旱等气候因素属于密度制约因素B. 密度制约因素对种群数量的影响可能是通过反馈调节来实现的C. 传染病与病毒、细菌的传播能力有关,属于非密度制约因素D. 种群数量的“S”形增长与种群密度无关5. 某种脑啡肽具有镇痛作用,可以作为药物来使用,它的基本组成单位是氨基酸。
第29讲植物的激素调节一、单项选择题(每题给出的四个选项中,只有一个选项是最符合题目要求的)1.(2019·昆明模拟)下列关于生长素的叙述,正确的是( )A.温特实验证明了胚芽鞘弯曲生长是由吲哚乙酸引起的B.植物茎的向光性和根的向地性都体现了生长素生理作用的两重性C.生长素既不组成细胞结构,也不直接参与细胞代谢D.用生长素处理二倍体番茄幼苗可获得四倍体番茄答案 C解析温特实验证明了胚芽鞘弯曲生长是尖端产生的某种化学物质引起的,并将该物质命名为生长素,但没有证明该物质就是吲哚乙酸,A错误;茎的向光性只体现了生长素的促进作用,B错误;植物激素既不组成细胞结构,也不直接参与细胞代谢,而是调节植物的生命活动,C正确;用秋水仙素处理二倍体番茄幼苗可获得四倍体番茄,D错误。
2.(2019·福州质检)如图所示为对燕麦胚芽鞘做不同处理的实验,胚芽鞘生长情况相同的一组是( )A.a与b B.c与dC.a与e D.c与e答案 B解析据图逐一分析,图a中胚芽鞘尖端与尖端以下被玻璃片隔开,生长素无法向下运输,故胚芽鞘不生长也不弯曲;图b中胚芽鞘尖端与尖端以下被琼脂片隔开,生长素可以向下运输,在单侧光的照射下会向光弯曲生长,即向左弯曲生长;图c中胚芽鞘尖端已被含适宜浓度生长素的琼脂块替代,由于琼脂块中生长素不受单侧光的影响,生长素在胚芽鞘尖端以下均匀分布,故胚芽鞘直立生长;图d中胚芽鞘尖端被不透光的锡箔套覆盖,其生长素在胚芽鞘尖端以下均匀分布,故胚芽鞘直立生长;图e中胚芽鞘尖端以下被不透光的锡箔套覆盖,但尖端的生长素受单侧光影响会发生横向运输,故胚芽鞘向光弯曲生长,即向右弯曲生长。
3.取生长状态一致的燕麦胚芽鞘,分为a、b、c、d四组。
将a、b两组胚芽鞘尖端下方的一段切除,再从c、d两组胚芽鞘中的相应位置分别切取等长的一段,并按图中所示分别接入a、b两组胚芽鞘被切除的位置,得到a′、b′两组胚芽鞘。
然后用单侧光照射,发现a′组胚芽鞘向光弯曲生长,b′组胚芽鞘无弯曲生长,其原因是( )A.c组尖端能合成生长素,d组尖端不能B.a′组尖端能合成生长素,b′组尖端不能C.c组尖端的生长素能向胚芽鞘基部运输,d组尖端的生长素不能D.a′组尖端的生长素能向胚芽鞘基部运输,b′组尖端的生长素不能答案 D解析正常情况下,胚芽鞘尖端都能合成生长素,A、B错误;在幼嫩组织中,生长素进行极性运输,能从胚芽鞘尖端向基部运输,C错误,D正确。
植物中的赤霉素测定原理赤霉素是一种重要的植物生长素,对植物的生长、发育和生理代谢有着重要的影响。
测定赤霉素含量对于了解植物的生长状态、深入研究其生理代谢机制以及引导植物的农艺栽培具有重要的意义。
赤霉素的测定原理主要包括提取赤霉素、分离纯化、测定浓度三个步骤。
首先是赤霉素的提取。
赤霉素的提取主要通过溶剂法和生化法两种方法来实现。
溶剂法主要是将植物样品研磨成粉末,然后使用有机溶剂(如乙酸乙酯、甲醇等)进行提取。
在提取过程中,还可以加入一些辅助提取剂,如氢氧化钠、二氯甲烷等。
生化法是将植物材料经过一系列的生物化学反应,如酶解、水解、酶抑制等,来提取植物中的赤霉素。
无论是溶剂法还是生化法,提取过程中需要控制一些条件,如温度、时间、溶剂比例等,以保证提取的赤霉素的纯度和稳定性。
接下来是赤霉素的分离纯化。
提取出的赤霉素在种子、叶片、茎等植物组织中的含量相对较低,需要进行分离纯化才能实现精确的测定。
常用的方法有液体色谱法、气相色谱法、薄层层析法等。
液体色谱法是最常用的方法,它可以通过改变移动相的组成、调整流速和温度等参数,来实现赤霉素分离的选择性。
气相色谱法则将提取出的赤霉素转化为易挥发的衍生物,通过气相色谱柱进行分离。
薄层层析法是一种简单经济的分离方法,通过在薄层板上进行层析,利用固定相和流动相的相互作用,实现赤霉素的分离。
最后是赤霉素浓度的测定。
常用的测定方法有免疫分析法、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)等。
免疫分析法是一种通过抗体与赤霉素结合来进行测定的方法,可以通过比色、荧光强度等信号来得出赤霉素的含量。
ELISA是一种常用的免疫分析方法,它可以通过特异性的抗体与赤霉素结合,再通过酶的作用,来产生比色或荧光信号,从而间接测定赤霉素的含量。
HPLC是一种高效液相色谱方法,常用于对赤霉素进行定量分析,通过调节流动相、控制流速和检测器等参数,可以实现赤霉素的分离和定量。
总的来说,赤霉素的测定原理包括提取赤霉素、分离纯化和测定浓度三个步骤。
液相色谱法测定香蕉中赤霉素残留摘要:本文介绍了利用液相色谱法测定香蕉中赤霉素残留的方法。
为此,先采用已知液相色谱柱和流动相配置条件,将赤霉素从浆果提取物中分离出来,再用可见光检测器进行定量分析,并且通过模型校正和精密度验证这种测定方法的准确性和稳定性。
结果表明,在2.0-20 ng/mL的测定范围内,液相色谱法的线性关系R2大于0.99,定量精密度为2.2%,定量准确度CV为1.8%,回收率为90.0%~103.7%。
该方法简便、灵敏、准确、快速,可用于香蕉中赤霉素残留的定量测定。
关键词:液相色谱法;赤霉素;香蕉正文:本研究使用液相色谱法对香蕉中的赤霉素残留进行定量分析,以了解香蕉食品安全情况,为农产品检验提供技术支持。
1 测试材料和仪器1.1 测试材料湖南省某商店购买的香蕉样品,保存在4℃冰箱内。
1.2 仪器和设备型号为Agilent 1100的高效液相色谱系统,包括色谱柱(天然氨基聚丙烯酰胺,4.6mm × 150mm,5μm)、检测器(可见光检测器)、柱温恒温器、色谱柱箱、色谱泵等。
2 实验方法2.1 样品的制备以50 mL的乙醇为溶剂,遵照标准程序,将10 g的香蕉磨成细末进行提取,提取液经过离心沉淀后,再用酒精洗涤,把液体调至pH7,离心脱水,得到样品浆果提取液。
2.2 色谱条件搭建以乙腈–0.1%甲酸盐((v/v), 70∶30为流动相, 流速0.3㎡/min,柱温25°C,检测器波长为280 nm。
2.3 模型校正和精密度验证将样品分别按2.2中的色谱条件实验,定量分析检测器的peak area与赤霉素浓度的关系,用线性回归方程,得到模型校正曲线;检查定量精密度,重复实验6次,计算定量精密度CV,检查定量准确度CV,实验6次,计算定量准确度CV。
3 结果分析在2.0-20 ng/mL的测定范围内,液相色谱法的线性关系R2大于0.99,定量精密度为2.2%,定量准确度CV为1.8%,回收率为90.0%~103.7%,说明本方法精确、可靠(见表1)。