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子計畫八附件８-１生物實驗技術實驗手冊高雄醫學大學生物醫學暨環境生物學系張永福編著目錄實驗一: (1)顯微鏡的使用和顯微測量實驗目的世界上的生物類類繁多，有些種類微小到肉眼無法辨識，其他物種雖然個體較大，但其內部構造細微而肉眼無法觀察，因此可以利用顯微鏡去認識這些微小的生物及構造。
你將從本實驗中瞭解顯微鏡使用的正確方法，並學習如何正確使用顯微鏡來觀察及測量各種細胞大小。
實驗原理雙目鏡複式光學顯微鏡（Binocular compound microscope）(圖1)的各部名稱及功能:1.接目鏡(Ocular或Eyepiece)：裝在鏡筒的上端。
放大倍率通常為為10×、15x，兩個目鏡間的距離可因應各人的雙眼寬度來調整。
接目鏡上有焦距調節輪，可因應各人焦距來調整最佳呈像。
2.鏡筒(Body tube)：介於接目鏡與接物鏡之間，內有透鏡系統。
3.旋轉盤(Revolving nosepiece)：接於鏡臂末端下方，可360o旋轉。
可接不同倍數的接物鏡，以便更換不同倍數的接物鏡。
4.接物鏡(Objective)：裝於旋轉盤上，一般有scanning powerobjective (4X)、low power objective (10X)、high power objective(40X)、oil immersion objective (100X) 四種倍率，短者為低倍鏡，長者為高倍鏡。
5.載物台(Stage)：為放置標本玻片的平台，上面有玻片夾和調節鈕可固定及調整玻片位置。
中央有一圓孔，可供下方集光器聚集的光線通過。
6.集光器(Condenser)：位於載物台下方，由許多透鏡組合而成，用以集合反光鏡反射來的平行光線，增加標本的明暗對比。
7.光圈(虹膜)(Iris diaphragm)：連接於集光器下方，可用以調整集光器光圈孔徑大小，而調節標本上之光線強弱。
8.照明器(Illuminator)：位於鏡座上，內設光源為鎢絲燈，直接提供觀察所需之光源。
杀虫剂生物测定技术摘要：杀虫剂的生物测定是利用昆虫、螨类对杀虫剂的反应，来鉴别某种农药或化合物的生物活性。
是测定农药对昆虫、螨类毒力与药效的一种基本方法。
它涉及靶标生物、测试物质(药剂)、反应症状及强度、测试环境条件等多方面的因素。
一个好的生物测定技术或方法应具备易于操作、结果反应灵敏、重现性好、且使用物质的剂量与反应之间有良好的相关性。
关键词：杀虫剂测定农药生物测定技术随着农药科学及其农药工业的迅速发展，农药生物测定作为新农药创制和合理科学使用农药以及农药药理学、毒理学及环境毒理学等研究的重要手段，得到了极大的丰富和发展。
杀虫剂的生物测定是利用昆虫、螨类对杀虫剂的反应，来鉴别某种农药或化合物的生物活性。
是测定农药对昆虫、螨类毒力与药效的一种基本方法。
它涉及靶标生物、测试物质(药剂)、反应症状及强度、测试环境条件等多方面的因素。
一个好的生物测定技术或方法应具备易于操作、结果反应灵敏、重现性好、且使用物质的剂量与反应之间有良好的相关性[1、2]。
1、杀虫剂生物测定的基本原理和方法在杀虫剂生物测定研究中，靶标生物的种类、发育阶段和生理状态等对农药的毒力或药效影响很大；药剂本身的理化特性、加工剂型、助剂种类与含量等也影响药效；而测试环境条件对靶标生物以及靶标生物对药剂的反应程度也存在根大的影响。
环境条件、供试药剂、靶标生物三者之间相互作用，相互影响。
所以，在进行杀虫剂生物测定试验时，必须严格控制各种影响因子，以确保试验结果的可靠性，可比性以及重现性。
在设计和进行杀虫剂生物测定试验研究时，必须掌握和了解以下基本原则[3]：1.1标准化靶标试材的选择及繁育不同靶标生物对药剂的反应各不相同，原则上任何生物体或其活体器官、组织、细胞等均可以作为生测靶标选择或用于测试。
在杀虫剂生物测定研究中，靶标生物的选择应具备以下几个条件：①在分类学上，经济上或地域上有一定代表性的昆虫。
②对药剂敏感性符合要求，且对药剂的反应以及程度便于定性、定量测定，且与剂量有良好的相关性。
生长量测定法体积测量法：又称测菌丝浓度法。
通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。
方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。
菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。
这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。
称干重法：可用离心或过滤法测定。
一般干重为湿重的10-20%。
在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。
干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后称重。
如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40℃下进行真空干燥。
称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activity dry yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
比浊法：微生物的生长引起培养物混浊度的增高。
通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。
对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。
将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。
该法主要用于发酵工业菌体生长监测。
如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600nm 处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.Coli的生长及诱导时间。
菌丝长度测量法：对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。
