第九章非发酵革兰阴性杆菌 - 苛养菌是指对营养要求苛刻.
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苛养菌嗜血杆菌属鲍特菌属军团菌形态染色1)格兰阴性短小球杆菌,具有多形性2)无芽孢,无鞭毛,无动力,多数菌株有荚膜,有荚膜菌株毒力较强1)格兰阴性短小杆菌,两端浓燃,单个或成对,短链状排列2)无芽孢,光滑型有荚膜,支气管败血和鸟鲍特菌有鞭毛1)格兰阴性杆菌2)一端鞭毛/侧生鞭毛培养特征1)需氧或兼性厌氧2)营养要求高,需要X或/和V因子才能生长。
新鲜血液含X/V因子,但V因子处于抑制状态,必须加热80~90度,故巧克力琼脂适于生长,灰白圆形、光滑、半透明小菌落3)与金葡共培养,有卫星现象,阴金葡能合成较多V因子,靠近其周围的嗜血生长旺盛1)专性需氧,不需CO22)对营养要求高,血平板和巧克力琼脂板均不生长,需要用鲍-金培养基或CCBA琼脂平板1)需氧菌2)营养要求苛刻,且生长慢3)专业培养基:F-G琼脂培养基,CYE,BCYE4)在F-G上:3到5天针尖大小菌落,紫外灯照射下发黄色荧光5)BCYE 有光泽的刻花玻璃样菌落生化反应1)氧化酶(+/-)、触酶(+/-),葡,乳,蔗糖(+/-)2)根据产生吲哚、尿素酶及鸟胺脱羧酶,不同流感、副流感可分为8个生物型触酶试验阳性,不发酵糖1)氧化酶(+/-)不分解糖类,硝酸盐还原(-)脲酶(-)2)液化明胶(+)多数菌产生β内酰胺酶抗原结构荚膜多糖抗原,又可分为6个血清型H抗原无特异性,O抗原有特异性,根据O进行血清学分型致病性一.致病物质:荚膜、菌毛、酶类、内毒素二.所致疾病:呼吸道感染、急慢性化脓性感染、继发感染一.致病物质:菌毛、荚膜、内外毒素二.所致疾病:百日咳轻症:仅流感样症状重症:以肺部感染为主,全身多器官严重损伤。
微生物的鉴定基础革兰氏染色初步分类一。
非苛养菌鉴定:苛养菌鉴定 真菌的鉴定革兰氏染色[原理]革兰氏染色目前有三种观点:等电点学说、化学学说和渗透学说。
[标本处理]1.有菌部位的标本,如痰液、粪便、各种拭子、创面等可直接涂片。
2.无菌部位的标本,如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等,应取适量标本(最高可达5-7ml),经3000rpm 离心10min.,取沉渣涂片染色。
[报告方式]:革兰氏染色:检出G+球菌;G-球菌检出G+杆菌;G-性杆菌革兰氏染色[注意事项]1.标本涂片不能太厚,严格按操作要求进行。
2.玻片通过火焰温度不能太高。
3.若涂片较厚,应延长脱色时间,直至不在出现紫色为止。
[临床意义]通过革兰氏染色,将细菌分初步为革兰氏阳性和革兰氏阴性,便于临床治疗细菌的初步分类1、细菌的分离与纯化:自血平板挑出待检菌株的单菌落进行初步的鉴定。
如果混有杂菌,应该重新转种分纯。
2、染色与镜检:首先通过革兰氏染色确定基本的分类:(1)G+球菌(2)G-球菌(3)G-杆菌(4)G+杆菌。
此外,如果镜下发现革兰氏染色阳性、椭圆形、有芽孢状的较大菌体,可能是真菌。
临床标本中分离出较多的是G-杆菌中的肠杆菌、非发酵菌和G+球菌中的葡萄球菌、链球菌、肠球菌。
G-球菌中的奈瑟氏菌亦常分离出,尤其在泌尿生殖系统标本中常见。
细菌的初步分类1.触酶试验主要用于G+球菌的分类。
葡萄球菌属:触酶(+)链球菌属及肠球菌:触酶(-)2.氧化发酵试验(O-F试验)根据细菌在无氧环境中能否利用碳源将细菌分为非发酵菌(氧化型或产碱型)和发酵菌(兼性厌氧菌)。
G(-)杆菌中的肠杆菌O-F试验阳性,非发酵菌O-F试验阴性3.氧化酶试验主要用于G-杆菌的分类。
肠杆菌的氧化酶(-),非发酵菌多数氧化酶(+),但嗜麦芽窄食单胞菌和不动杆菌的氧化酶(-)。
非苛养菌的鉴定:主要有G+球菌、G+杆菌、G-球菌和G-杆菌这些细菌培养的条件不苛刻,这也是标本分离常见的细菌苛养菌的鉴定也相对比较简单,只要根据初步的分类,遵循其鉴定的途径,就可以做出完整的鉴定结果G+球菌的鉴定途径1.首先根据菌落特点和革兰氏染色判断是否为G+球菌。