鱼鳞胶原蛋白的酸法提取及性质研究

将 收集 来 的新 鲜 鱼鳞 用 清 水洗 净 ， ３ 在 ７℃条 件 下 烘
干 。 碎 备 用 。 同时 由于 杂 蛋 白的 去 除 和 钙 质 脱 除 直 接 粉 影 响着 胶 原 蛋 白 的提 取效 果 ， 试 验 拟 采 用 ０ １ｍ ｌ 本 ． ｏ／ Ｌ的
Ｎａ Ｈ 浸 泡 （ 液 比 １１ ） 鳞 ２ 以 去 除 杂 蛋 白 ， 用 Ｏ 固 ：０ 鱼 ４ｈ 再 ０６ｍ ｌ ． ｏ／ Ｌ的 盐 酸 浸 泡 （ 液 比 １１ ） 鳞 ２ 固 ：０ 鱼 ４ｈ以 达 到 脱 钙
酸 性 环 境 下 进 行 酶 解 提 取 ＿］ 本 试 验 拟 分 别 采 用 不 同 浓 ｌ。 ０
新 鲜 鱼 鳞 ： 自当地 市 场 ， 清 水 洗净 ， ３ 取 用 在 ７℃条 件
下烘干。
１２ 试 剂 ．
度 的乙 酸 、 檬酸 和 盐酸 作 为提 取 介 质进 行 酶 解 ， 过单 柠 通 因素 试 验 和 正 交 实验 确 定 最 佳 的提 取 工 艺 参 数 ， 计 因 设 素分别 为 酸 的浓度 、 提取 时 间 、 提取 温 度 、 液 比 。由于搅 料 拌有 利 于胶 原 蛋 白溶 于 提取 液 ， 胃 蛋 白 酶 的 最 适 温 度 且 为 ３ ７℃左 右 ， 此 在 提取 过程 中 ， 提 取 液 置 于 恒 温槽 因 将 中 ， 用搅 拌器 连 续搅 拌 。 并 ２４ 单因 素影 响试 验 ．
干燥 箱 ， 碎 机 ， 速 组 织捣 碎 机 ， 速离 心 机 ， 子 粉 高 高 电 天平 ． 光 光度 计 ， 冻干 燥机 等 。 分 冷
２ 试 验 方 案
２ １ 鱼 鳞 胶 原 蛋 白 提 取 工 艺 流 程 ．
新鲜 鱼 鳞一 洗 净一 预处 理一 烘 干 备 用一 粉 碎一 调 节 ｐ 一 胃蛋 白酶 酶 解 一 提 取 液一 离 心 得 胶 原 蛋 白 粗 提 取 Ｈ
解时 间、 解温度 及料 液 比对提取 率的影 响 ， 酶 并对酶 解得 到的胶 原蛋 白冷 冻干燥提 纯进 行性 质研 究。 验结 果表 明 ： 率 试 提取 高低依 次 为 乙酸＞ 檬 酸＞ 柠 盐酸 ， 中乙酸提 取 各 因素 影响 效应 为 乙酸 浓度 口提 取 温度 口料 液 比口提 取 时间。 其 最佳 试验 方案
２３ 胃 蛋 白 酶 酶 解 ．
将 预处 理后 的鱼鳞进 行分 组处理 （ 每组准 确称 取 ５ ） ， ｇ
１ 试 验 材 料
１１ 试 验 原 料 ．
提 取 过 程 中所 用 酶量 均 为 １ ０ｍｇ ０ ／ ｇ胃蛋 白酶 （ 比活 为 １ ： ３ ０） ０ ０ 。 由于 胃蛋 白酶 的最 适 ｐ 范 围在 ２ ３ 故 需要 在 Ｈ ～，
型胶 原 和 羟基 据 有 关报 道 ． 以胶 原蛋 白为原 料所 制 成 的生 物 医 用 材 料 ， 全球 市 场年 销售 额 已超 过 ４ 其 ０亿 美 元 ＿。日本 等 ６ ＿
国 家 以 １１美 元 ／ｇ左 右 的低 廉 价 格 从 我 国 大 量 进 口干 制 ． ｋ 的 鱼 鳞 本 试 验 以淡 水 鱼 加 工 的 下脚 料 —— 鱼 鳞 为 原 料 。 采 用 胃蛋 白 酶 在 酸 性 （ 酸 、 酸 、 檬 酸 ） 件 下 进 行 酶 解 乙 盐 柠 条
得 到 的胶 原 蛋 白进 行 冷冻 干 燥 提纯 ，进一 步 对 其性 质 进 行研究 ， 旨在 为鱼 鳞 胶原 蛋 白在 医药 、 健 、 品 加工 、 保 食 化 妆 品 等众 多领 域 的广 泛 开发 利用 提供 科 学依 据 。
目的＿． 后用 蒸 馏水 将 鱼鳞 反 复 冲洗 至 中性 ， 在 ３ ８最 ＿ 并 ７℃ 条件 下烘 干 备用 。
第 ３ ７卷 第 ３期 ２ ２ 年 ６ 月 ０１
Ｖｏ １３ ． ｏ． ７ Ｎ ３ ：
Ｊｕｎ ． ２０１ ２
鱼 鳞胶 原 蛋 白的酸 法提 取及 性 质研 究
胡建 平
（ 昌学 院 轻化 工 程学 院 ， 西 四川 西 昌 ６ ５ １ ） １０ ３
［ 摘要 ］ 以鱼鳞为对象， 采用胃蛋 白酶在酸性（ 乙酸、 盐酸、 柠檬酸） 条件下酶解得到胶原蛋白进行性质研 究。探讨酸浓度、 酶
液 一 纯 化 粗 提 液 一 测 定 羟 脯 氨 酸 的 含 量 一 胶 原 蛋 白 提 取 液一 冷 冻干 燥一 成 品 。
２ ２ 预 处 理 ．
用 于 制 造 饲料 鱼 粉外 。 部分 都 被废 弃 ， 仅严 重 污 染 了 大 不
环 境 ， 且 还 造 成 资源 的极 大 浪 费 。鱼鳞 中主要 成 分 是 Ｉ 而
为 乙酸浓度 ０６ｍｏ Ｌ， 取 温度 ３ ． ｌ 提 ／ ６℃， 取 时间 ６ｈ料 液 比 １ ０ 此 时羟脯氨 酸含 量为 ２７ ２ ｇｍＬ 提 取率 ７ ．２ 性质 提 ， ：， ３ ．５ ２ｍ ／ ， ３ ％。 ３
研 究结果 表 明 ： 原 蛋 白的溶 解性 很 好 ， 化性 则是 盐 酸提取 最 高 ５ ． 乳 化稳 定性 都 较好 ， 胶 乳 ９ ％， ６ 而吸 油性 、 泡性 则为 乙酸 起
酸 和 羟赖 氨酸 在其 他 蛋 白中很 少 发现 ， ］胶原 蛋 白中含 有 大 量 的羟 脯 氨 酸 ，由羟脯 氨 酸 的含 量 乘 以相 应 的 系数 就 可 以得到 胶 原蛋 白的含量 。我 国淡 水鱼 产 量 丰富 ， 世 居 界 首位 Ｅ。据统 计 ， 年淡 水 鱼加 工 业 的废 弃物 总 量就 达 ３ ］ 每 ２ ０万 ｔ以上 ， 中鱼鳞 约 占 １ ％Ｅ 这 些下 脚 料 除少部 分 ０ 其 ５ ，
提 取 最佳 ， 别为 ３ｍＩｇ ９ ％。 分 Ｊ ，０
［ 键词 ］ 关 鱼鳞 ； 原 蛋 白 ； ； 取 ； 质 胶 酸 提 性
胶 原 蛋 白是 鱼鳞 主 要 成分 之 一 ， 含有 大 量 的 甘氨 酸 、
１３ 主 要 仪 器 设 备 ．
脯 氨 酸 、 脯 氨 酸 （ ｐ 、 赖 氨 酸 （ ｙ ） ， 中羟 脯 氨 羟 Ｈｙ ） 羟 Ｈ ｄ等 其