鱼鳞胶原蛋白的提取方法

格式：doc
大小：23.00 KB
文档页数：3

下载文档原格式

/ 3

鱼鳞胶原蛋白多肽的制备

鱼鳞胶原蛋白多肽的制备
鱼鳞胶原蛋白多肽是一种天然的高品质蛋白质营养素，它具有很高的生物活性和吸收性，被广泛应用于食品、保健品和医药等领域。

本文将介绍鱼鳞胶原蛋白多肽的制备过
程。

1. 鱼鳞的选择与处理
首先，选择优质的鲜活鱼，并将其去皮、去骨、清洗干净，然后将其切成小块。

接着，将鱼肉放入破碎机中，加入一定量的水，打成鱼浆。

2. 鱼鳞的水解
将鱼浆进行水解，加入一定量的酸或酶类药物，使鱼鳞中的胶原蛋白分子链断裂，形
成小分子肽链。

水解后的鱼鳞浆经过过滤后，得到肽液，然后通过进一步的渗透、离心和浓缩等步骤，得到胶原蛋白多肽。

通过离子交换色谱、凝胶过滤等技术，对鱼鳞胶原蛋白多肽进行进一步的纯化处理，
去除杂质和无关物质，提高纯度。

将纯化后的胶原蛋白多肽进行喷雾干燥或凝固干燥等处理，将其转化为粉末状，并进
行包装和贮存。

总结：鱼鳞胶原蛋白多肽的制备过程相对简单，但需要严格控制水解条件和提取纯化
过程中的多种参数，以保证制备出的产品质量优良，且保持其生物活性和营养价值。

鱼鳞胶原蛋白的酸法提取及性质研究

将收集来的新鲜鱼鳞用清水洗净，３在７℃条件下烘
干。碎备用。同时由于杂蛋白的去除和钙质脱除直接粉影响着胶原蛋白的提取效果，试验拟采用０１ｍｌ本．ｏ／Ｌ的
ＮａＨ浸泡（液比１１）鳞２以去除杂蛋白，用Ｏ固：０鱼４ｈ再０６ｍｌ．ｏ／Ｌ的盐酸浸泡（液比１１）鳞２固：０鱼４ｈ以达到脱钙
酸性环境下进行酶解提取＿］本试验拟分别采用不同浓ｌ。０
新鲜鱼鳞：自当地市场，清水洗净，３取用在７℃条件
下烘干。
１２试剂．
度的乙酸、檬酸和盐酸作为提取介质进行酶解，过单柠通因素试验和正交实验确定最佳的提取工艺参数，计因设素分别为酸的浓度、提取时间、提取温度、液比。由于搅料拌有利于胶原蛋白溶于提取液，胃蛋白酶的最适温度且为３７℃左右，此在提取过程中，提取液置于恒温槽因将中，用搅拌器连续搅拌。并２４单因素影响试验．
干燥箱，碎机，速组织捣碎机，速离心机，子粉高高电天平．光光度计，冻干燥机等。分冷
２试验方案
２１鱼鳞胶原蛋白提取工艺流程．
新鲜鱼鳞一洗净一预处理一烘干备用一粉碎一调节ｐ一胃蛋白酶酶解一提取液一离心得胶原蛋白粗提取Ｈ

鱼鳞胶原蛋白的酶法提取工艺研究

２１实验材料．
草鱼鱼鳞：采用鄱阳湖地区胃蛋白酶：无锡酶制剂厂，比活为１３０：００
风味蛋白酶：元锡酶制剂厂，比活为ｌ２０：４０
其它试剂：为分析纯均
２２试验仪器．
明显提高，时由于粉碎可以增加鱼鳞表面面积，高酸同提
１前言
２３工艺流程－
我国淡水鱼产量居世界首位。近年来，水鱼加业淡亡
鱼鳞‘ 碎～酶解一离心清液一冷冻干燥一鱼一破寸一上
随着淡水鱼产量的增长而得到了较快的发展。是，多鳞胶原蛋白但许．淡水鱼加工过程仅局限于对鱼体肌肉的利用，而对鱼鳞２４操作方法鱼鳞清洗烘十，碎后于１切％盐酸中浸泡２ｈ不断４，等下脚料的加工利用甚少。每年淡水鱼加工业的废弃物中间换盐酸液一次。清水漂洗３次后于饱和石灰水总量达到２０万吨以上，中鱼鳞约占５，１０其％即０万吨。搅拌，４，若能合理利用，可有效减少环境污染，又可提高企业效中浸２ｈ中问换石灰水一次。用自来水洗涤后再用蒸馏水洗涤，Ｐ值７８５ｃ，别加入胃蛋白酶０１，调Ｈ～，０【分＝．％风益。鱼鳞含有丰富的蛋白质和钙、等矿物质，磷主要由蛋味蛋白酶００％。酶解６小时。．３
原蛋白生产原料。同时，鳞含有脂肪（鱼卵磷脂、多种脂肪２５质量标准．

淡水鱼鱼皮胶原蛋白的提取

淡水鱼鱼皮胶原蛋白的提取在当今的生物科技领域，胶原蛋白的研究和应用越来越受到关注。

胶原蛋白作为一种重要的结构蛋白，广泛存在于动物的结缔组织中，如皮肤、骨骼、肌腱等。

而淡水鱼鱼皮作为一种丰富且廉价的原料，其胶原蛋白的提取具有重要的经济价值和应用前景。

淡水鱼鱼皮胶原蛋白的来源丰富多样，常见的淡水鱼如草鱼、鲤鱼、鲫鱼等的鱼皮都可以作为提取胶原蛋白的原料。

这些鱼皮中含有大量的胶原蛋白纤维，经过适当的处理和提取工艺，可以获得高质量的胶原蛋白。

提取淡水鱼鱼皮胶原蛋白的第一步是原料的预处理。

首先，要将新鲜的鱼皮进行清洗，去除表面的杂质、鱼鳞和残留的鱼肉。

这一步骤通常需要使用清水多次冲洗，以确保鱼皮的清洁。

接下来，将清洗后的鱼皮进行脱脂处理。

常用的脱脂方法有溶剂萃取法和酶解法。

溶剂萃取法通常使用有机溶剂如乙醚、石油醚等，通过浸泡鱼皮来去除其中的脂肪。

酶解法则是利用脂肪酶分解脂肪，这种方法相对温和，对胶原蛋白的结构破坏较小。

完成脱脂处理后，下一步是去除鱼皮中的非胶原蛋白成分。

这主要包括多糖和一些杂蛋白。

常用的方法有酸法和碱法。

酸法一般使用稀盐酸溶液浸泡鱼皮，使多糖等物质溶解并被去除。

碱法则是使用氢氧化钠溶液处理鱼皮，以去除杂蛋白。

但需要注意的是，酸法和碱法处理的时间和浓度都需要严格控制，否则可能会导致胶原蛋白的结构和性质发生变化。

经过上述预处理后，就可以进行胶原蛋白的提取了。

目前，常用的提取方法主要有热水提取法、酸提取法和酶提取法。

热水提取法是将预处理后的鱼皮置于热水中加热，使胶原蛋白溶解出来。

这种方法操作简单，但提取效率相对较低，且得到的胶原蛋白纯度不高。

酸提取法通常使用醋酸、柠檬酸等有机酸溶液来提取胶原蛋白。

在一定的酸度和温度条件下，胶原蛋白会逐渐溶解到溶液中。

酸提取法的提取效率较高，但酸溶液可能会对胶原蛋白的结构产生一定的影响。

酶提取法是利用蛋白酶对鱼皮中的胶原蛋白进行水解，使其释放出来。

这种方法具有提取条件温和、提取效率高、对胶原蛋白的结构和性质影响小等优点。

两种提取草鱼鱼鳞胶原蛋白工艺比较

ｌｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓａｍｐｌｅ，ａｎｄｔｈｅｔｅｃｈｎｉｑｕｅｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｗｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｗｅｒｅｃａｒ —
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ７０￣Ｃ，ｓｏｌｉｄ — ｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏ１：４０（ｇ：ｍＬ），ｒｅａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ２０ａｒｉｎ；ａｎｄｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔＣＯＤ－一
ｄｉｔｉｏｎｓｏｆｐｅｐｓｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗｅｒｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ２５ ℃ ，ｅｎｚｙｍｅｔｏｓｕｂｓｔｒａｔｅｒａｔｉｏ３％，ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｔｉｍｅ１２０ｍｉｎ，
ＴｅｃｈｎｉｑｕｅＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｂｅｔｗｅｅｎＴｗｏＭｅｔｈｏｄｓｏｆＣｏｌｌａｇｅｎＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｆｒｏｍＧｒａｓｓＣａｒｐＳｃａｌｅ
ａｎｄｐＨ３．Ａｓａｒｅｓｕｌｔ，ｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｙｐｅｐｓｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｆｒｏｍｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｃｏｓｔｏｆｔｈｅｆｏｒｍｅｒｗａｓａｌｓｏｈｉｇｈｅｒ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｏｌｌａｇｅｎｏｆｇｒａｓｓｃａｒｐｓｃａｌｅ；ｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｐｅｐｓｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅ

鱼鳞粗胶原蛋白提取工艺研究

白质，多种生物活性，具有可参与细胞的迁移、化分
唯一养殖量大于捕捞量的国家。鱼体在加工过程中会产生３％＿４％的下脚料，鳞约占其中的０＿０鱼５ ¨ 。鱼鳞中含有６％的有机物和４％的无机％００物。有机物中约７％为胶原蛋白，５另外约２％左右５为硬朊蛋白、粘液质、脂肪、色素等。而无机物主要成分为磷酸钙，还含有极少量的碳酸钙、碳酸镁、碳酸钠等。胶原蛋白是一种白色不透明的无支链纤维型蛋
的浸酸浓度、液比、酸时间进行了优化。同时对浸碱处理过程中的浸碱浓度、料浸料液比、浸碱时间进行了优化。从而得到了最佳的酸碱处理条件为浸酸过程：酸浓度０４、液比浸．％料
１２、：０浸酸时间２ｈ可得到较高的提取率；浸碱过程：ａＨ浓度０１％、ＮＯ．５料液比１２、：０浸碱时
ＡｂｔａｔＣｏｌｇｎＷ８ｅｔｃｅｒｍａｓｃｒｃｌｙｔｅｃｍｂｎｔｎｔｏｆａｉｌｋｉｒｃｓｉｇＴｅｓｒｃ：ｌｅ８ｘｒｔｄｆａａｏＧｒｓａｐｓａｅｂｏｉａｉａｍｅｈｄｏｃｄ—ａａｏｅｓ．ｈｈｏｌｌｐｎ
间１０ｈ可得到品质最佳的鱼鳞胶原蛋白。
关键词：酸碱法：鱼鳞胶原蛋白；取提
中图分类号：Ｓ２４９Ｔ５．
文献标识码：Ａ
ＣｏｌｇｎｘｆｃｉｎｏｒｄｒｍｉｈｓａｅｌｅｅｅｔａｔｆｃｕｅｆａｏＯｆｃｌｓ

鱼鳞胶原蛋白肽工艺流程

鱼鳞胶原蛋白肽工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!揭秘鱼鳞胶原蛋白肽的精细工艺流程胶原蛋白肽，作为现代健康保健领域的热门成分，因其强大的美容养颜和保健功效而备受关注。

胶原蛋白生产工艺流程是怎样的

胶原蛋白生产工艺流程是怎样的?胶原蛋白是如何
制造出来的呢?
胶原蛋白的提取技术主要有:水解胶原蛋白法、酶解法等,现在流行的是酶解法,其工艺过程如下(以生产鱼鳞为例):
酶解法生产鱼鳞胶原蛋白必需生产环节和工序如下:
生产过程包括:清洗、酶解、过滤、灌装、浓缩、喷雾干燥等几道重要的生产环节,分述各个工序所用的设备的情况。

1、清洗:这个工序中所用原料如果从原料供应商处直接购买脱灰鱼鳞的话,可不考虑建设,但是如果购买新鲜的湿鱼鳞自行脱灰脱脂处理的话,需有建设地面清洗槽。

清洗槽应设计有一个即可,用来酸、碱脱脂脱灰处理。

此工序无特殊设备,只做好土建即可。

清洗过程中所用的水应为去离子水,需配套双级反渗透纯化水(公用)。

2、酶解:脱脂脱灰处理后的鱼鳞投入酶解反应罐中,进行保温酶解。

所用设备和配套设施有双层保温耐压酶解罐、操作平台、燃油蒸汽锅炉。

(注:与物料直接接触的生产设备材质均为304以上不锈钢,物料运送过程中使用卫生软管和不锈钢材质的管道。

)
3、过滤:此工序利用立式硅藻土过滤机将酶解液进行精滤,以达到下道工序的使用要求。

所用设备和配套设施有两套单层耐压储液罐造价、立式硅藻土过滤机,车间10万级空调净化设备(公用)。

4、灌装:如果产品需使用液体状,则过滤后的液体可直接分装成标准小桶的包装。

检验合格后入库保存。

需使用单层耐压储液罐,包装桶烘干灭菌室。

5、浓缩、喷雾干燥:过滤后的液体在进喷雾塔前需浓缩达到一定浓度后才可以喷雾干燥,这对提高经济效益和生产效率的意义很大。

此工序所用设备和配套设施有单层耐压储液罐、单效降膜式浓缩、离心式喷雾干燥塔。

鱼鳞胶原蛋白提取工艺的研究现状及应用

鱼鳞胶原蛋白提取工艺的研究现状及应用摘要：简述了胶原蛋白的作用，提取鱼鳞胶原蛋白的重要性，结合鱼鳞胶原蛋白研发的相关背景和现状,列举了鱼鳞胶原蛋白的多种提取方法，简述鱼鳞胶原蛋白的应用。

关键词：鱼鳞；胶原蛋白；提取方法；应用1 前言胶原蛋白在鱼类的真皮、骨、键、鳞等处含量丰富。

通常胶原由三条多肽链构成三股螺旋结构，分子量约30万道尔顿，主要组成氨基酸为脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸，而且脯氨酸为其特征氨基酸。

胶原蛋白一级结构的特征是含有甘氨酸的三联体（Gly-X-Y）重复排列着，其中，X，Y经常为亚氨基酸的脯氨酸和羟脯氨酸。

胶原蛋白(Collagen)是一种白色、不透明、无支链的纤维蛋白质，为重要的功能性蛋白质，主要存在于动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腱、韧带和血管中，是结缔组织极重要的结构蛋白质，起着支撑器官、保护机体的功能。

由于胶原蛋白的特殊功能，其提取物已被广泛应用于医药、食品、日用化工、生物合成等工业领域，如医用胶囊、外科手术材料、食用明胶、化妆品等。

鱼鳞中含有丰富的胶原蛋白，占20%~ 40%，这对提取鱼鳞胶十分有利。

海水鱼鳞中含有较为丰富的磷脂，占7%左右，具有提高机体免疫力、延缓衰老、增强骨细胞和神经细胞功能的作用，还与机体的生殖生理和激素的代谢密切相关。

鱼鳞灰分含量高，约占30%，主要成分是羟基磷灰石，绝大部分集中在骨质层；脂质含量少，相对目前生产胶原蛋白的主要原料猪皮和牛皮而言，这更有利于胶原的提取和纯化。

2 本课题研究的目的和意义近年来，随着养殖规模的日益扩大和养殖技术的不断完善，养殖鱼类的产量提高很快。

中国的水产品产量一直保持着高速增长势头，水产品产量2011年已经达到5611万t，占世界水产品产量35%，位居世界第一位。

随着我国水产业的发展，水产加工也越来越受到人们的重视，加工的同时产生出大量下脚料，占鱼体总重的30%～50％，其中约5％是鱼鳞。

然而，这些鱼鳞没有被充分利用，大部分作为废弃物丢弃了。

从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法[发明专利]

(10)申请公布号 (43)申请公布日 2014.05.07C N 103773828A (21)申请号 201210407366.1(22)申请日 2012.10.23C12P 21/06(2006.01)C07K 1/36(2006.01)C07K 1/34(2006.01)C07K 1/16(2006.01)(71)申请人李丹榕地址541004 广西壮族自治区桂林市骖鸾路5号桂林一中(72)发明人李丹榕(74)专利代理机构桂林市持衡专利商标事务所有限公司 45107代理人石晓玲(54)发明名称从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法(57)摘要本发明提供了一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法，按以下步骤进行：将鱼鳞进破碎、热挤压，加水稀释成鱼鳞浆后，加入鱼鳞重量1～3%的蛋白酶酶进行酶解，在酶解过程中利用超声波辅助酶解，酶解完成后灭酶；将灭酶后的鱼鳞浆过滤，将滤液上大孔树脂柱，依次用乙醇溶液和氨水洗脱，收集氨水洗脱液经超滤膜除杂、纳滤膜浓缩、喷雾干燥后，即为胶原蛋白。

本发明无需酸碱预处理，不会对环境造成污染，分离提纯效果好且不会影响胶原蛋白的生物活性。

(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书3页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页说明书3页(10)申请公布号CN 103773828 A1/1页1.从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）将洗净后的鱼鳞进行机械破碎处理；2）将破碎后的鱼鳞加水置于双螺杆蒸煮热挤压机中，在100～121℃、螺杆转速为50～80转/min 条件下热挤压0.5～1小时，得到鱼鳞浓浆；3）加水稀释鱼鳞浓浆得到鱼鳞浆，往鱼鳞浆中加入鱼鳞重量1%～3%的蛋白酶，在45～60℃下进行酶解2～4小时，酶解完毕后加热至90℃，保温10～30min 进行酶灭活；在酶解过程中，利用超声波辅助酶解，其作用时间为20～30min ，其功率为200～700w ；4）将灭活后的鱼鳞浆降温至50～55℃，静置沉淀，过滤，得滤液；5）将滤液上大孔树脂柱，依次用乙醇溶液和氨水洗脱，收集氨水洗脱液；所述的乙醇体积浓度为10～40%，氨水的pH 值为7.2～7.6；6）将氨水洗脱液经超滤膜除杂、纳滤膜浓缩、喷雾干燥后，即为胶原蛋白。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

2.2鱼鳞胶原蛋白的提取方法
2.2.1传统提取方法
传统的提取方法是酸碱处理法，
制备胶原蛋白的工艺是：
原料→预处理→酸处理→碱处理→熬胶→胶液过滤→浓缩→切片→干燥→成品。将鱼鳞洗净，必要时要进行脱脂脱色，然后用盐酸(pH在4～5)浸泡进行脱钙处理，直到鳞片柔软透明，时间大约为2～3周；取出洗净后浸灰15～20d，主要是使得原料组织疏松。洗净后放在60～70℃夹层锅中加热2～3h熬2～5次，提尽为止。趁热转盘，凝固成胶冻，干燥后使含水量＜15%，即得成品。然而，传统的提取方法步骤繁多，耗时长且在提取过程中胶原蛋白流失较大，不适于大规模的生产。
浓度>0.1mol/L时，胶原的溶出与酸度呈负相关，盐酸浓度越大，鱼鳞中胶原蛋白的水解越少，这点对提取胶原蛋白非常有利。但总的来说，用盐酸进行前处理的方法欠佳，原因是其前处理时间过长且由大量的腐蚀性物质被介入，不利于后期的加工生产。钟朝辉等在鱼鳞胶原蛋白提取工艺的优化中采用微波辅助10%柠檬酸脱钙的方法对鱼鳞进行前处理，缩短了处理时间，对胶原蛋白破坏较小，且整个过程中没有毒害或腐蚀性物质的介入，提高了胶原蛋白的安全性。但实验没有进一步的探讨微波处理提高脱钙能力的原因，未对比直接用柠檬酸脱钙和微波辅助10%柠檬酸脱钙的效果差异，从而说明是微波对脱钙由促进作用。EDTA脱钙一般用0.5mol/L
2.2.5
热水处理法
热水提取就是原料经过各种前处理后在一定条件下用热水浸提，从而得到水溶性胶原蛋白的方法。李闻欣等在研究鱼鳞水法制胶的实验中得到鱼鳞水法制胶的最佳温度在60～70℃。温度高些有助于提胶，但温度过高抽提率还有所下降。超过70℃后，所制得的鱼鳞胶的固含量反而会有降低的现象，随着固含量的降低，鱼鳞胶的折光率和增比黏度都会降低，导致鱼鳞胶的质量有所下降。液比(鱼鳞与水的质量比)越小，所制得的胶黏度越高，鱼鳞胶的质量也相对好；可是液比太小抽提胶困难，抽提率小。因此抽提鱼鳞胶的液比以1∶1～1∶1.5为最好。钱曼[14]等在比较热力法和酶解法提取鱼鳞胶原蛋白中发现，热力法的提取率比酶解法高，鱼鳞∶水＝1∶20(w/v)、121℃提取15min，得率可达到45.47%，并且热力法提取的胶原蛋白有较高的保水性、乳化能力和乳化稳定性及泡沫稳定性。但此实验存在一个问题，由于目前胶原蛋白特异性的定量比较困难，因此常采用蛋白质总量测定方法或总氮量测定方法，而胶原蛋白对热比较敏感，在40℃以上的变性过程中，胶原蛋白的三螺旋结构被破坏，其中的氢键和疏水键断裂；温度升高到60℃以上，某些共价键被破坏，发生降解；到125～127℃以上，蛋氨酸、丝氨酸以及酪氨酸等氨基酸残基被破坏，脱氨、脱水[2]。因此，在实验中多所提到的几种提取方法需要经过生产现场验证方法的实用性，从中选择成本相对低，污水处理难度小，生产工艺技术成熟度高的方法。
2.2.4
微生物发酵提取法
此法以枯草芽孢杆菌CICC10071出发菌株，接种于发酵种子培养基中，而发酵种子培养基由1%大豆蛋白胨，0.5%牛肉粉，0.5%葡萄糖，0.1%氯化钠，0.01%磷酸二氢钾，其余为蒸馏水，然后121℃高温灭菌20min，培养基在35℃摇床180r/min，培养48h，发酵液中枯草芽孢杆菌＞108cfu/mL的条件下，再将新鲜鱼鳞洗净、除杂，加入8倍鱼鳞质量的纯净水，经100℃蒸煮30min，冷却至45～50℃，进入胶体磨超微粉碎，浆液透过60目筛网，然后进入发酵罐121℃高温灭菌30min，冷却至35℃等待接种发酵，然后要确定接种量，发酵温度，发酵时间，再将上清液经膜系统分离，将分子量5000u以上的大分子截留，取分子量5000u以下的小分子液体，最后将精制液进行真空浓缩至浓度40%，然后喷雾干燥得鱼鳞胶原蛋白肽粉末成品，此法技术上尚不成熟，但有研究前景，微生物发酵方法是现代提取方法的热门话题。
的EDTA溶液(料液比1∶25)处理2d，期间要加强机械搅动，使金属离子充分络合。张俊杰等在鲤鱼鳞酸溶性胶原蛋白提取的研究中，发现在对鲤鱼鱼鳞前处理前先用Na2CO3其进行处理可以提高胶原蛋白的提取率。主要是因为碱性物质可以起疏松胶原纤维致密结构的作用，从而增大胶原蛋白的提取率。但Na2CO3处理需要浸泡48h，时间太长，不利于实际生产。
2.2.2
酸提取法：
酸提取法即是利用酸在一定的外界环境条件下提取胶原蛋白，使用的酸有盐
酸、柠檬酸、乳酸、醋酸等。张俊杰等利用乙酸从鲤鱼鱼鳞中提取胶原蛋白，经过响应面分析实验得到最佳提取工艺。
在提取过程中发现，乙酸浓度过高反而会使胶原蛋白的提取率有下降的趋势，主要原因是较高的乙酸浓度会增加胶原蛋白的溶解速率，使提取液的黏度迅速增大，反而不利于后期的提取。刘晓宁等用0.5mol/L的醋酸提取鱼鳞胶原蛋白，实验后的样品进行电泳时发现几乎没有条带。王信苏等分别用醋酸、柠檬酸、乳酸来提取草鱼鱼鳞的胶原蛋白，结果表明柠檬酸提取胶原蛋白的得率最高，乳酸次之，醋酸最低。总体上说，酸提取胶原蛋白在前处理中不能用酸进行处理，因而有部分杂蛋白难以去除，在后续提取得到的胶原蛋白含杂蛋白较多，从而就增大了胶原蛋白纯化的工作量。
酸提取方法步骤过于繁琐，在常温下提取，大量胶原蛋白损失。
2.2.3
酶提取法
酶法制备即是利用各种不同的酶在一定的外界环境条件下提取胶原蛋白，
常采用的酶有中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶等。原料经过前处理后加入不同的酶提取得到酶促溶性胶原蛋白。李春美等采用碱性蛋白酶2709酶解鱼鳞，结果表明，酶解最佳温度为50℃，酶量宜采用3.0%，酶解的最佳时间为5h，底物浓度宜选择10%。得到的鱼鳞水解蛋白有很好的吸水性、乳化性、起泡性和溶解性。实验中用茚三酮显色法判定各因素对鱼鳞胶原蛋白水解的影响，但以显色反应的颜色深浅来判定水解液中游离氨基酸的总量，此方法准确性需进一步的考证。张俊杰等以乙酸为胃蛋白酶的溶剂酶解鱼鳞提取胶原蛋白，最佳提取条件是温度为16.59℃，时间28.18h，酶用量396.21μ/g。由于乙酸也可以水解胶原蛋白，因此，此方法提取得到的胶原蛋白既有酶溶性的也有酸溶性的。但是实验的提取的时间太长，不适于工业生产。涂宗财等比较了多种酶(枯草杆菌1389蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶)在其各自的最佳条件下对胶原蛋白的水解情况，得到其中经稀释后鱼鳞胶蛋白溶液的总氮量为37.30mg/mL，酶用量为2000μ/mL，水解时间为5h，而利用混合酶水解在相同的时间内水解度较高。虽然多酶的水解度高，但成本太高，同样不利于大规模的生产加工。在酶水解提取中，还存在一个问题，随着酶的水解作用，在水解产物中容易有苦肽的出现。并且研究发现水解度与苦味肽的生成呈线性关系，因此不难推想，选择合适的水解度可有效控制苦味肽的生成。因而，在酶法提取胶原蛋白中找到一个鱼鳞胶原蛋白的提取方法水解度又高，苦肽生成量又少的点是至关重要的。
鱼鳞胶原蛋白提取方法
钙主要是利用酸和钙盐反应，从而将钙盐以Ca2+形式溶出。EDTA脱钙是由于Ca2+、Mg2+等金属离子能够与EDTA发生络合，而达到脱出金属离子的目的。在
酸脱钙中酸的选择也较多，现在主要应用的是盐酸、柠檬酸、醋酸、乳酸等。张俊杰等曾研究过盐酸法脱钙过程中胶原蛋白的变化情况。在实验中发现当HCl浓度<0.1mol/L时，胶原蛋白的溶出随酸度的增加而增加；当HCl