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近年来，由于抗生素的滥用，在食品中抗生素、药物残留及防腐剂添加超标而导致的出口损失，已成为畜牧业发展的瓶颈。
人们迫切需要探寻一种能取代抗生素的抗菌剂，于是细菌素成为近年来研究的热点。
细菌素是细菌代谢过程产生的蛋白质或多肽，具有抑制某些微生物生长活性的作用[1-2]。
细菌素是一种蛋白类物质，可以被蛋白酶所降解，具有无抗药性、无残留、能够抑制或杀死某些致病菌等优点[3-4]。
枯草芽孢杆菌作为公认的益生菌，其产生的细菌素在养殖业和畜牧业中作为绿色饲料添加剂使用有着巨大的开发潜力。
为此，本文初步分析了枯草芽孢杆菌Nxc6所产细菌素的理化性质及其抑菌谱，以期为该细菌素在养殖业和其他领域的开发应用提供科学依据。
1材料与方法1.1菌株枯草芽孢杆菌Nxc6由山东宝来利来生物研究院从牛粪中分离，经数次传代，抗菌活性稳定。
指示菌：大肠杆菌O 1、金黄色葡萄球菌等，由山东宝来利来生物工程股份有限公司生物研究院保存。
1.2培养基细菌指示菌培养基：葡萄糖0.5%、蛋白胨1%、牛肉膏0.5%、氯化钠0.5%、进口琼脂1.5%、pH 7.0。
真菌指示菌培养基：PDA 培养基。
枯草芽孢杆菌Nxc6种子培养基：肉汤培养基。
枯草芽孢杆菌Nxc6发酵培养基：葡萄糖0.5%、蛋白胨1%、牛肉膏0.3%、pH 6.5。
1.3芽孢杆菌发酵液的制备从枯草芽孢杆菌Nxc6斜面上挑取一环至液体种子培养基中，37℃振荡培养24h ，然后以1%的接种量接种到发酵培养基中，置500mL 三角瓶中，装液量为100mL ，37℃振荡培养30h ，得到发酵液，待用。
1.4产细菌素的鉴定将发酵液3000rpm 离心15min ，去除菌体得上清液，首先测定上清液中pH 的变化，排除酸的影响，采用过氧化氢酶法进行过氧化氢的检测，以排除过氧化氢的干扰。
然后缓慢的向上清液中加入终质量分数为60%的硫酸铵进行盐析，4℃放置12h 使蛋白质充分沉淀，5000rpm 离心20min ，弃上清，将沉淀溶于原体积1/10的蒸馏水中，制成抗菌液，进行抗菌活性的测定。
枯草芽孢杆菌BSD-2一种抗菌肽的分离纯化与鉴定胡瑞萍;张铎;张丽萍;张根伟;张蕾;赵宝华【摘要】为了分离纯化及鉴定枯草芽孢杆菌BSD-2代谢产物中抗菌肽,采用盐酸沉淀、Sephadex G-50层析以及反相HPLC对其进行分离纯化,并利用Tricine-SDS-PAGE、MAIDL-TOF-MS、红外光谱和核磁共振技术对其分子量、氨基酸序列以及结构进行初步解析.结果显示该抗菌肽是由29个氨基酸组成,分子量为3 514 Da,等电点为10.46.红外光谱和核磁共振分析其结构中含有-CH2-、- CH3、- OH、- NH2、-CH、- CO -以及苯环等官能团.%In order to purify and identify an Antimicrobial peptides from the metabolic products of the Bacillus subtilis BSD-2. It was purified by Hydrochloric acid precipitation, Sephadex G-50 Chromatography and RT-HPLC. And the molecular weight was determined by Tricine-SDS-PAGE and Bioautography. The amino acid sequence and structure were preliminary analysised by MAIDL-TOF-MS, Infrared spectrum and nuclear magnetic resonance. The result indicated that the antimicrobial substance was composed of 29 amino acids. The molecular weight and PI were 3 514 Da and 10. 46 respectively. The structure contained a lot of functional groups by infrared spectrum and NMR, such as - CH2 - , - CH3, - OH , - NH2, - CH , - CO - and so on.【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2011(026)006【总页数】6页(P201-206)【关键词】枯草芽孢杆菌;抗菌肽;生物自显影;红外光谱;核磁共振【作者】胡瑞萍;张铎;张丽萍;张根伟;张蕾;赵宝华【作者单位】河北省科学院生物研究所,河北石家庄050081;河北师范大学生命科学学院,河北石家庄050016;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄050081;河北化工医药职业技术学院,河北石家庄050062;河北省科学院生物研究所,河北石家庄050081;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄050081;河北省科学院生物研究所,河北石家庄050081;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄050081;河北省科学院生物研究所,河北石家庄050081;河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心,河北石家庄050081;河北师范大学生命科学学院,河北石家庄050016【正文语种】中文【中图分类】Q939.95枯草芽孢杆菌作为一种有益土壤细菌,其代谢产物能够对黄瓜枯萎病菌、番茄灰霉病菌、茄子黄萎病菌、梨黑星病菌等多种植物病原菌产生拮抗作用 [1,2]。
枯草芽孢杆菌的特征与生物活性研究进展枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种常见的芽孢杆菌，广泛存在于自然环境中，也是一种常见的土壤细菌。
它是一种致病性极低的细菌，并且具有许多有益的特点和生物活性。
本文将对枯草芽孢杆菌的特征和生物活性进行全面介绍。
一、枯草芽孢杆菌的特征枯草芽孢杆菌具有以下特征：1. 芽孢形成能力：枯草芽孢杆菌具有良好的芽孢形成能力，能够在不利环境条件下进入休眠状态并在适宜条件下重新发芽，这使得它具有很强的生存能力。
2. 广泛分布：枯草芽孢杆菌广泛分布于土壤、水体、空气等自然环境中，也可以存在于植物和动物的表面。
它具有良好的适应性和竞争能力，能够在各种环境中存活和繁殖。
3. 菌株多样性：枯草芽孢杆菌具有多个菌株，不同菌株具有不同的特性和功能。
这种多样性为其在农业、医药等领域的应用提供了更多的选择。
4. 高效产孢：枯草芽孢杆菌有很强的产孢能力，能够迅速形成大量芽孢。
这使得它在工业生产中大规模培养更加容易，并提供了源源不断的芽孢供应。
二、枯草芽孢杆菌的生物活性枯草芽孢杆菌具有多种生物活性，被广泛研究和应用于不同领域，下面将重点介绍其在农业、医药和环境修复方面的研究进展。
1. 农业应用枯草芽孢杆菌被广泛应用于农业生产中，主要有以下几个方面的作用：- 生物防治：枯草芽孢杆菌产生多种抗生素和抗真菌物质，对多种农作物病原菌有很强的抑制作用，可以作为生物防治剂使用，有效控制植物病害。
- 促进生长：枯草芽孢杆菌可以产生植物生长激素和相关酶类，可以促进植物的生长和发育，增强植物的抗逆性和产量。
- 土壤改良：枯草芽孢杆菌具有分解有机物、固氮和解磷等功能，可以促进土壤的富集和改良，提高土壤肥力和可持续农业发展。
2. 医药应用枯草芽孢杆菌在医药领域也有重要的应用价值，主要有以下方面：- 产生抗生素：枯草芽孢杆菌能够产生多种抗生素，如枯草芽孢杆菌素等，对多种致病菌具有抑制作用，被广泛应用于医药领域。
枯草芽孢杆菌的分类与鉴定方法探析枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种广泛存在于自然环境中的革兰氏阳性细菌，属于芽孢杆菌属。
它具有广谱的抗菌活性和植物增长促进作用，被广泛应用于农业、生物防治等领域。
本文将探讨枯草芽孢杆菌的分类以及常用的鉴定方法。
一、枯草芽孢杆菌的分类枯草芽孢杆菌属于革兰氏阳性细菌，具有较大的细胞形态和芽孢结构特征。
根据研究发现，不同产地和环境中分离到的枯草芽孢杆菌菌株，其形态、生理生化指标和分子特征存在一定的差异。
目前，对枯草芽孢杆菌的分类主要依据16S rRNA基因序列分析以及生理生化特征。
根据16S rRNA基因序列分析，枯草芽孢杆菌属于芽孢杆菌属（Bacillus），并可进一步细分为亚种（subspecies）和菌系（lineage）。
不同亚种和菌系的枯草芽孢杆菌在菌种间具有不同的生物学功能和代谢特征。
目前已报道的亚种主要有B. subtilis subsp. subtilis、B. subtilis subsp. spizizenii等，菌系主要有B. subtilis group、B. amyloliquefaciens group和B. licheniformis group等。
另外，枯草芽孢杆菌的分类也可以通过生理生化特征进行初步鉴定。
例如，枯草芽孢杆菌能在常规培养基上生长，并产生明亮的白色菌落；它是一种革兰氏阳性细菌，其细胞壁由肽聚糖和乙酰化肽聚糖构成；它具有耐盐、耐热、耐酸等特性，适应广泛的生存环境。
此外，枯草芽孢杆菌还能产生多种酶和代谢产物，如蛋白酶、纤维素酶、抗生素等。
二、枯草芽孢杆菌的鉴定方法为了准确鉴定枯草芽孢杆菌，科学家们发展了多种鉴定方法，包括传统的生理生化鉴定方法和分子生物学鉴定方法。
1. 传统的生理生化鉴定方法：该方法通过对枯草芽孢杆菌的生理生化特性进行检测和比较，辨别其差异和相似性，从而判断是否为枯草芽孢杆菌。
这些方法包括形态观察、生长特性、酶活性检测、代谢产物分析等。
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910238642.8(22)申请日 2019.03.27(71)申请人 山东泓达生物科技有限公司地址 276400 山东省临沂市沂水县工业园申请人 山东昆达生物科技有限公司(72)发明人 张彩霞 马杰希 刘伟 刘瑞艳 寇凤雨 韩龙 (51)Int.Cl.C12P 25/00(2006.01)C12R 1/15(2006.01)(54)发明名称一种利用枯草芽孢杆菌生产维生素B2的简易发酵培养基(57)摘要本发明涉及生物工程技术领域，尤其是一种利用枯草芽孢杆菌生产维生素B2的简易发酵培养基。
该种利用枯草芽孢杆菌生产维生素B2的简易发酵培养基包括：尿素、酵母浸粉、氯化钠、蔗糖、硫酸镁和硫酸铵，各组分按重量百分数计为：尿素0.3-1.0%，酵母浸粉1-3%，氯化钠0.2-1.0%，蔗糖5-20%，硫酸镁0.05-0.5%，硫酸铵0.1-0.5%。
本发明的一种利用枯草芽孢杆菌生产维生素B2的简易发酵培养基，通过对发酵培养基中的碳源、氮源进行优化，设计了一种简易的发酵培养基，该培养基能够缩短维生素B2发酵周期并快速验证枯草芽孢杆菌合成维生素B2的能力，极大地简化了选育高产维生素B2菌种的过程。
权利要求书1页 说明书2页CN 109837322 A 2019.06.04C N 109837322A权 利 要 求 书1/1页CN 109837322 A1.一种利用枯草芽孢杆菌生产维生素B2的简易发酵培养基，其特征在于：所述培养基包括：尿素、酵母浸粉、氯化钠、蔗糖、硫酸镁和硫酸铵。
2.根据权利要求1所述的一种利用枯草芽孢杆菌生产维生素B2的简易发酵培养基，其特征在于：所述各组分按重量百分数计为：尿素0.3-1.0%，酵母浸粉1-3%，氯化钠0.2-1.0%，蔗糖5-20%，硫酸镁0.05-0.5%，硫酸铵0.1-0.5%。
枯草芽孢杆菌B1、B2对几种植物病原真菌的抗菌机理及其抗菌物质的分离与鉴定枯草芽孢杆菌B1、B2对几种植物病原真菌的抗菌机理及其抗菌物质的分离与鉴定植物病原真菌是造成农作物疾病的主要因素之一，给农业生产带来严重的经济损失。
针对这一问题，研究者们通过分离和筛选出具有抑制植物病原真菌的微生物菌株，其中包括枯草芽孢杆菌B1和B2。
为了进一步了解枯草芽孢杆菌B1、B2对几种植物病原真菌的抗菌机理及其抗菌物质的分离与鉴定，本研究进行了一系列实验。
首先，我们分离了枯草芽孢杆菌B1和B2，并进行了形态学和生理学鉴定。
结果显示，这两株菌株均为芽孢杆菌属，具有较高的抗菌活性。
接着，我们进一步探究了枯草芽孢杆菌B1、B2的抗菌机理。
实验结果表明，这两株菌株通过产生抗菌物质来抑制植物病原真菌的生长。
进一步的研究发现，枯草芽孢杆菌B1、B2产生的抗菌物质对多种植物病原真菌具有广谱抑菌作用，包括立枯病菌、稻瘟病菌和苹果腐烂病菌等。
这些抗菌物质可以有效抑制植物病原真菌的生长繁殖，从而降低疾病的发生。
为了进一步研究枯草芽孢杆菌B1、B2产生的抗菌物质的化学特性，我们进行了抗菌物质的分离和鉴定实验。
首先，我们通过培养物提取得到了菌株B1、B2产生的抗菌物质。
然后，我们利用层析技术将抗菌物质从提取液中分离出来。
最后，通过质谱技术对分离出的抗菌物质进行了鉴定。
实验结果显示，这些抗菌物质主要由脂肪酸和多肽类物质组成，其中，多肽类物质是其主要的抗菌成分。
总结来说，枯草芽孢杆菌B1、B2通过产生多种脂肪酸和多肽类抗菌物质，对几种植物病原真菌具有广谱抑菌作用。
这些抗菌物质能够有效地抑制植物病原真菌的生长繁殖，从而降低植物病害的发生和传播。
进一步的研究将有助于深入了解枯草芽孢杆菌B1、B2的抗菌机制，并为开发新型农药和生物防治剂提供理论依据综上所述，枯草芽孢杆菌B1、B2通过产生多种脂肪酸和多肽类抗菌物质，展现出广谱抑菌作用，对多种植物病原真菌具有抑制作用。
枯草芽孢杆菌B1、B2抗菌活性物质研究及其防病促生田间试验枯草芽孢杆菌B1、B2抗菌活性物质研究及其防病促生田间试验摘要：枯草芽孢杆菌是一种重要的生防菌，其通过产生抗菌活性物质为作物提供抗病保护。
本研究旨在探索枯草芽孢杆菌B1、B2的抗菌活性物质，并评估其在田间试验中的防病促生效果。
通过纯培养、摇瓶发酵和高效液相色谱技术，我们从B1、B2的代谢产物中分离出9种抗菌活性物质，并初步测定了其抑菌效力。
进一步，选择其中效果良好的活性物质进行室内和田间的防病促生试验。
结果显示，枯草芽孢杆菌B1、B2的抗菌活性物质在一定程度上对多种病原菌具有抑制作用，并且在田间试验中展示出明显的防病促生效果，使作物的生长状况得到显著改善。
关键词：枯草芽孢杆菌；抗菌活性物质；防病促生；田间试验1. 引言枯草芽孢杆菌是一种广泛存在于自然环境中的益生菌，被广泛应用于农业生防领域。
其主要通过产生抗菌活性物质来抑制病原菌的生长，从而达到防治植物病害的目的。
然而，尽管已经有大量的研究报道了枯草芽孢杆菌的抗菌活性，但仍然有很多未知的抗菌活性物质有待探索。
因此，本研究选取枯草芽孢杆菌B1、B2进行深入研究，以期找到更多有效的抗菌活性物质。
2. 材料与方法2.1 枯草芽孢杆菌的分离与筛选从不同来源的土壤样品中分离得到枯草芽孢杆菌，并通过薄板筛选法初步判断其抗病活性。
2.2 抗菌活性物质的分离与纯化通过摇瓶发酵培养的方式产生枯草芽孢杆菌B1、B2的代谢产物，利用溶剂提取、萃取和高效液相色谱技术分离纯化抗菌活性物质。
2.3 抗菌活性的初步测定通过琼脂扩散法和对照组的比较，测定得到的抗菌活性物质对不同病原菌的抑制效果。
2.4 室内和田间试验选择具有较好抗菌活性的物质进行室内盆栽试验和相应的田间试验，考察其在生长环境中的防病促生效果。
3. 结果与讨论3.1 枯草芽孢杆菌B1、B2的分离与筛选从多个土壤样品中分离得到了具有抗菌活性的枯草芽孢杆菌B1、B2，并在后续的试验中进行了深入的研究。
枯草芽孢杆菌的分离纯化与鉴定枯草芽孢杆菌的分离纯化与鉴定一、目的：掌握芽孢杆菌属常见种的分离，鉴定方法和技术。
将土壤样品中分离的芽孢杆菌属未知种鉴定到属。
二、原理：芽孢杆菌能产生芽孢，在沸水中加热不会失去生理活性，但是不能产生芽孢的细菌会失去活性。
，因而得到芽孢菌属，经过进一步分离及生理生化鉴定得到枯草芽孢杆菌。
三、材料和器皿：显微镜、培养皿（12个）、试管（12个）、三角瓶（5个）、烧杯、移液管（）、涂布棒（6个）、载玻片、接种环、接种针、试管架、灭菌锅、培养箱培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、淀粉培养基、v.p.实验培养基、肉汤琼脂培养基孔雀绿溶液、番红复染液、NaOH溶液、草酸铵溶液、碘液、乙醇四、操作步骤菌种的分离和纯化（1）土壤的采集：取土壤表层5~10厘米下的肥土100g左右，把采得的土壤放入纸袋中带回实验室分离。
（2）平板的制备：融化三角瓶中的牛肉膏蛋白胨培养基，以每皿20ml左右倒入6个平板上。
（3）稀释分离法：秤取土壤5g放入含有45ml水的三角瓶中，摇动片刻，然后将此瓶用小火加热至悬浊液沸腾，维持15分钟，而后静止5分钟。
吸取上层液0.5ml加入到含有4.5ml的无菌水的试管中，制成1:100浓度的悬液，然后分别吸取10-2和10-3土壤悬浊液个0.1ml滴加到上述牛肉膏蛋白胨培养基平板上，每种稀释2皿，用涂布棒均匀涂布，并将培养基倒置于37℃恒温培养1~2天。
（4）挑菌及纯化：从上述分离的平板上分别挑取2个单菌落中部分菌落，然后在牛肉膏蛋白胨培养基上划线纯化，经菌落特征的观察和镜检，确定是否是芽孢杆菌纯种后，从中选择一株转接于牛肉膏蛋白胨培养基斜面上，置37℃培养1~2天备用。
菌种的鉴定1、形态的观察（形状、颜色、质地、透明度等）（1）单个菌种的形态（2）菌种形态的观察2.革兰氏染色3.芽孢染色4.菌体大小测验5.枯草芽孢杆菌的生理生化鉴定一、淀粉水解一、原理许多芽孢杆菌产生淀粉酶，能将淀粉培养基中的淀粉水解成无色糊精等小分子物质或进一步水解为麦芽糖或葡萄糖，淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。
枯草芽孢杆菌的鉴定方法与应用研究枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种广泛存在于自然环境中的革兰氏阳性细菌，以其多样化的应用领域而闻名。
本文将介绍枯草芽孢杆菌的鉴定方法和多种应用研究。
1. 枯草芽孢杆菌的鉴定方法枯草芽孢杆菌的鉴定方法主要包括形态学特征、生化特性、分子生物学和基因测序。
（1）形态学鉴定：枯草芽孢杆菌的菌落呈乳白色或灰白色，为分生孢子培养后常规培养16-24小时的结果。
其菌落呈圆形或稍长形，边缘光滑，透明无色，质地润滑，生长迅速。
观察其孢子形态，可见到位于菌落中心的芽孢具有椭圆形或圆柱形的形态。
（2）生化特性鉴定：通过对枯草芽孢杆菌的生化反应进行测试，可以鉴别其对不同营养和生长环境的适应性。
常用的生化测试包括培养基变色试验、利用不同糖类的发酵试验、氧化酶试验等。
（3）分子生物学鉴定：通过PCR扩增和测序目标基因，如16S rRNA、gyrB 和recA基因，可以检测和鉴定枯草芽孢杆菌。
这种方法有效地解决了形态和生化特性鉴定的局限性。
2. 枯草芽孢杆菌的应用研究枯草芽孢杆菌作为一种常见的土壤细菌，具有许多重要的应用领域。
（1）农业应用：枯草芽孢杆菌可以作为一种植物生长促进剂，通过提高植物的营养吸收和增强植物的抗病能力，提高作物的产量和质量。
同时，该菌还可以分解土壤中的有机物质，促进土壤微生物的活动，改善土壤的肥力。
（2）环境应用：枯草芽孢杆菌可以降解和去除各种污染物，如油污、有机废弃物和重金属离子等。
它具有良好的降解能力和耐受性，可以在环境修复和污染治理中发挥重要作用。
（3）生物农药：枯草芽孢杆菌产生的杀菌物质和杀虫物质可以用于生物农药的开发和应用。
这些物质对某些植物病原菌和害虫有很强的抑制和杀灭作用，具有广泛的潜力。
（4）食品添加剂：枯草芽孢杆菌产生的抗菌物质可以用于食品保鲜和防腐。
它可以抑制食品中的常见细菌和真菌的生长，延长食品的保质期和品质。
（5）生物制药：枯草芽孢杆菌可以作为表达重组蛋白和抗生素的生产宿主。
2018年第11期中国伺料一35 一D O I：10.15906/11-2975/s.20181106一株枯草芽孢杆菌的鉴定及胞外多糖活性研究张玲秀，白建华，郝瑞林，董社琴(忻州师范学院生物系，山西忻州034000)[摘要]为开发更多新型微生物源生物活性物质，从家蝇体内分离筛选出一株芽孢杆细菌，其高产多糖，经形态学 和16SrDNA序列比对，鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus DQ)，采用水溶醇沉法、层析法获得较纯多糖物质，并对其进行 多项活性检测：小鼠抗疲劳能力试验、免疫活性研究和Hela细胞生长抑制率；此多糖不仅可以提高小鼠运动性抗疲劳，而且具有较强的提高多项免疫指标的能力，另外在体外具有较强的抑制Hela细胞的能力，因此在动物和人体具 有潜在的实用价值。
[关键词]枯草芽孢杆菌；胞外多糖；生物活性;免疫调节；抗肿瘤[中图分类号]S816.3 [文献标识码]A[文章编号]1004-3314(2018)11-0035-04多糖是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而 成的天然高分子聚合物，广泛存在于植物、真菌、藻类和细菌中。
细菌胞外多糖是细菌产生的一类 重要的生物大分子(赵霞等，2016)，由于其具有抗 菌、抗氧化性、免疫调节和抗癌等功能而备受关注 (Zhang等，2016)。
研究表明，从家蝇体内筛选出 的枯草芽孢杆菌，其所产胞外多糖具有很强的清 除氧自由基能力和抑真菌能力（张玲秀等，2013)，因而本研究进一步对其所产胞外多糖进行多项活 性检测，以期在食品、药物等方面提供可用活性物 质，从而对枯草芽孢杆菌多糖的开发奠定理论基 础，也为有益微生物的资源进一步开发提供思路。
1材料与方法1.1试验材料1.1.1菌种来源前期家蝇体内筛选所得，低温 保存。
1.1.2培养基L B固体和液体培养基（周德庆，2006)。
1.1.3试剂及仪器L B固体和液体培养基购于北 京奥博;引物1492r■及27f和葡聚糖G-75购于So-larbio;小鼠白细胞介素-2 (IL-2)酶联免疫分析 (ELISA)试剂盒购于Biovision，其余均为国产分析基金项目：山西省回国留学人员重点科研资助项目 (2015-098)纯。
抗MRSA活性菌株B2的理化特性和抑菌效果研究张小艳;刘玉焕【摘要】[目的]确定既适合B2菌株生长又能产生较强活性物质的培养条件.[方法]在不同的温度、pH值、NaCl浓度和各种碳源培养条件下,进行菌体生长状况研究和抑菌活性检测.[结果]菌株B2在4～37 ℃、pH值2.0～11.0、NaCl浓度为1%～6%,以葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、淀粉为碳源时都能生长,其最适生长温度为28 ℃,最适pH值为7.0,最适NaCl浓度为1%,最适生长碳源为麦芽糖.[结论]当pH值为5.0、温度为28 ℃,以麦芽糖作唯一碳源时,产生的拮抗物质活性最强.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2010(038)014【总页数】3页(P7204-7205,7222)【关键词】MRSA;菌株B2;生长条件;拮抗作用【作者】张小艳;刘玉焕【作者单位】电子科技大学中山学院,广东中山,528400;电子科技大学中山学院,广东中山,528400【正文语种】中文【中图分类】Q93枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)被认为是一种具有较强抑菌能力的有益菌种。
据报道，洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia)、丁香假单胞菌(Pseudomonassyringae)、成团泛菌(Pantoea glomerans)、枯草芽孢杆菌等拮抗细菌对果实青霉病有一定抑制作用［1－7］。
Teresa Florianowicz发现枯草芽孢杆菌的抑菌效果良好［1］。
枯草芽孢杆菌可以抑制多种细菌及真菌的生长，无毒性，可用于食品加工［8］。
目前，已陆续从不同的枯草芽孢杆菌菌株中分离得到具有抑制植物病原真菌生长的脂肽类物质，包括表面活性素、伊枯草菌素和芬枯草菌素［9］。
因此，芽孢杆菌产生的拮抗物质主要有抗生素、细菌素、细胞壁降解酶类和其他抗菌蛋白及挥发性抗菌物质［10］。
但是芽孢杆菌用于抑制医院致病菌的研究却为数不多，而实验室分离得到的菌株B2具有与芽孢杆菌高度同源性，且能够抑制被称为“超级细菌”的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA。
甘肃农业大学硕士学位论文枯草芽孢杆菌B1、B2对几种植物病原真菌的抗菌机理及其抗菌物质的分离与鉴定姓名：王艳申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：陈秀蓉20040601计肃农业大学硕ｊ：学位论文致谢Ｙ６７５８４２ＡＣＫＮｏＷＬＥＧＭＥＮＴ本论文是在导师陈秀蓉教授的悉心指导下完成的．三年来。
导师在学业和生活上给予了极大的鼓励和关心．导师孜孜不倦的敬业精神，严谨求实的治掌态度，乐观进取的品格．丰富扎实的理论反实践经验使残受益终生。
值此论文完成之际。
谨向导师致以最诚挚的谢意。
本实验和论文的顺利完成还得力于魏勇良教授的悉心指导。
魏老师严谨的治掌态度和渊博的知识使我受益非浅．在此表示衷心的感谢！病理实验室的薛莉老师、张舒蓉老师、杨成德师兄在实验技术、方法等方面、给予了大力的支持和帮助：在抗菌物质的分析过程中得到中科院兰州分院分析测试中心地球－Ｉｖ．，掌测试部孟仟详研究员和杜丽研究员的指导和帮助：此外．本实验室马爽、甘丽萍、辛中尧、汤春梅、李亚利，杨顺义、－Ｍ－亚东、薛应钰、许红霞、郭冬艳、粱巧兰、杨冬梅及２００１级毕业生徐强簪同掌的帮助．瞢都曾在掌习和生活上给了瑟无私的帮助。
谨此。
向这些曾帮助过我的良师益友表示由衷的感谢ｆ最后，向所有关心、爱护、支持过我的父母、亲人致以无上的感谢和敬意ｌ王艳二零零四年六月摘要１．Ｂ１、Ｂ２等几株芽孢杆菌（Ｂａｃ，ＩｌｕｓＳｐｐ．）的生长动态及其抑菌机理Ｂｌ、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４、Ｂ６的菌体生长量（ＯＤ６００）及其拮抗活性物质产生最佳时间为：Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３菌体生长量（ＯＤ６０。
）在２４ｈ达到最大值，抑菌活性分别在７２ｈ，４８ｈ、４８ｈ达到最大：Ｂ４、Ｂ６菌体生长量在４８ｈ达到最大值，而抑菌活性在６０ｈ时达到最大。
随培养时间的延长，不同菌的抑菌活性增至最高后，持续到１２０ｈ时，仍保持最高抑菌活性，表明抑菌活性的稳定性。
枯草芽孢杆菌Ｂ１、Ｂ２及其混配菌Ｂ１＋２、Ｂ１４６、Ｂ２３４６对番茄灰霉病菌（ＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａＰｅｒｓ．）、辣椒立枯病菌（ＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉＫＵｈｎ）、茄子菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｓｃｔｅｒｏｔｉｏｒｕｍ（Ｌｉｂ。
枯草芽孢杆菌的分离与鉴定枯草芽孢杆菌是一种常见的芽孢杆菌，广泛分布于土壤、水体等环境中。
该菌具有极强的抗逆性，可以在高温、低温、酸碱等各种恶劣环境下存活和繁殖。
此外，枯草芽孢杆菌还具有很高的代谢活性和生物学特性，被广泛应用于食品、医药、化工等领域。
枯草芽孢杆菌的分离和鉴定是研究其生物学特性和应用价值的重要步骤。
下面介绍一种常规的分离和鉴定方法。
1. 选择适宜的培养基和培养条件枯草芽孢杆菌是一种厌氧菌，通常需要选择富含营养物质和适宜的pH、温度等培养条件的培养基来进行分离和培养。
常用的培养基包括厌氧培养基、肉汤培养基、营养琼脂培养基等。
在选用培养基时，需根据研究对象和实验要求进行选择。
2. 样品处理和接种将样品收集到无菌容器中，并在避光下尽快送到实验室进行处理。
将样品加入适量的生理盐水或其他缓冲液中，进行适当的稀释后，从中取出一定量的液体或固体，接种到培养基上。
3. 培养和观察将接种好的培养基放置在适当的环境中进行培养，观察菌落的生长情况、形态特征等。
枯草芽孢杆菌通常在48小时内开始生长，生长后的菌落大小通常为1-3mm，形态呈不规则的肉眼可见点状或细菌丝状，表面为平滑或粗糙，颜色从白色到灰色等不等。
根据菌落的形态特征和大小、颜色等可初步判断是否为枯草芽孢杆菌。
4. 鉴定针对初步判断为枯草芽孢杆菌的菌株，需进行进一步的鉴定和鉴别。
常用的鉴定方法包括生理生化检测、生化反应检测、DNA序列分析等。
其中，生物化学检测可通过对菌落的形态、营养物质的利用情况、代谢产物等进行分析来进行鉴定。
在实验设计过程中，应该根据样品来源、实验需求来设计相应的检测方式，保证分离和鉴定的可靠性和准确性。
综上所述，枯草芽孢杆菌的分离与鉴定是菌类学研究和应用中的重要步骤。
只有凭借可靠的实验方法和技术流程，才能保证研究成果的准确性和可靠性。
