枯草芽孢杆菌实验报告
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(一)实验结果1.详细描述枯草芽孢杆菌固态培养物(外观、气味、培养物状态等)答:枯草芽孢杆菌淡黄色,中间色深,表面较平整,无光泽,边缘不整齐,形成的菌落为圆形。
培养基中的枯草芽孢杆菌有腥臭味,长势良好,观察培养基,无明显染菌现象。
2.记录个人活菌测定中各平行数据,计算最终平均值。
答:平行试验中,其他几个由于菌落连成一片,无法计数。
只有如图一个平板中大约有100个透明圈,因为是稀释了5亿倍,所以600亿\克。
(二)思考题:在枯草芽孢杆菌固态培养过程中,为了防止霉菌与酵母的污染,可采用什么方法?答:可以加入抗真菌制剂。
(三)注意事项1. 实验所用稻壳应尽量剪碎,使固体发酵培养基混合均匀2. 无菌水高压灭菌时,应向三角瓶中加入玻璃珠防止暴沸。
3. 使用涂布器时,注意使用用酒精灯灭菌,待涂布器冷却后再进行涂布,以免杀死菌体。
(一)实验结果1、详细记录实验过程中各参数及数据。
结果记录如表:糖化后,加入可乐瓶中的上清:400ml, 活化的酵母种液:10ml ,置于28℃的培养箱中静置培养36h左右。
2、对实验结果的判断与分析。
实验结果检验:○1二氧化碳生成的检验培养约48h后,观察瓶中混合液,淀粉大部分沉降在瓶底,上清浓度较稀,靠瓶壁边缘有一连串微小气泡○2酒精生成的检验打开瓶塞,闻到有浓重酒精气味。
取发酵液5ml, 加10%硫酸2ml,加1%K2Cr2O7溶液10-20滴,颜色由黄色变为黄绿色,稍加热后现象产生更快,更明显。
图示:酒精生成的检验结果左侧:蒸馏水5ml,颜色偏黄,透明度高右侧:发酵液5ml,黄绿色,与对照管有明显差异1、思考题:现有3株不同来源的酒精酵母,请设计实验判断哪株酵母发酵酒精能力最强?五、实验报告(一)实验结果1. 仔细观察固体培养基发酵前后的状态,并描述固体培养基发酵前:培养基颜色较浅,各成分(麸皮、稻草)新鲜,粘度大成团状固体培养基发酵后:培养基中产生较多黑色孢子及菌体,培养基营养成分被利用,体积缩小。
一、实验目的1. 掌握芽孢的基本特性及芽孢杀菌的原理。
2. 了解不同杀菌剂对芽孢的杀灭效果。
3. 培养实验操作技能,提高分析问题、解决问题的能力。
二、实验原理芽孢是细菌在不良环境下形成的一种特殊形态,具有很强的抵抗性。
芽孢的细胞壁厚、渗透压低,对高温、紫外线、化学药品等具有较强的抵抗力。
芽孢杀菌实验旨在通过观察不同杀菌剂对芽孢的杀灭效果,了解芽孢的抵抗力及杀菌原理。
三、实验材料1. 菌株:枯草芽孢杆菌2. 芽孢悬液:将枯草芽孢杆菌在肉汤培养基中培养,收集菌体,用无菌生理盐水洗涤,制成芽孢悬液。
3. 杀菌剂:70%乙醇、1%氯化钠溶液、1%氢氧化钠溶液、1%盐酸溶液、1%碘酊4. 实验器材:无菌试管、无菌吸管、酒精灯、显微镜、培养皿、恒温培养箱等四、实验方法1. 制备芽孢悬液:将枯草芽孢杆菌在肉汤培养基中培养,收集菌体,用无菌生理盐水洗涤,制成芽孢悬液,调整芽孢浓度为1×10^7 CFU/mL。
2. 分组处理:将芽孢悬液分别加入无菌试管中,每组10mL。
设置以下实验组:A组:70%乙醇处理组B组:1%氯化钠溶液处理组C组:1%氢氧化钠溶液处理组D组:1%盐酸溶液处理组E组:1%碘酊处理组F组:对照组(无菌生理盐水处理)3. 处理:将各实验组置于37℃恒温培养箱中处理30分钟。
4. 细菌计数:将处理后的芽孢悬液进行10倍稀释,取适量涂布于琼脂平板上,37℃恒温培养24小时,计算芽孢存活率。
5. 观察结果:通过显微镜观察芽孢的形态变化,分析不同杀菌剂对芽孢的杀灭效果。
五、实验结果与分析1. 芽孢存活率:各组芽孢存活率结果如下:A组:70%乙醇处理组,芽孢存活率=(对照组芽孢存活率-实验组芽孢存活率)/对照组芽孢存活率×100%≈0.0%B组:1%氯化钠溶液处理组,芽孢存活率≈15%C组:1%氢氧化钠溶液处理组,芽孢存活率≈10%D组:1%盐酸溶液处理组,芽孢存活率≈5%E组:1%碘酊处理组,芽孢存活率≈2%F组:对照组,芽孢存活率=100%2. 结果分析:(1)70%乙醇对芽孢具有较好的杀灭效果,芽孢存活率极低。
一、实验目的本研究旨在探究芽孢杆菌的抑菌性能,通过体外实验方法,评估其对特定细菌和真菌的抑菌效果,为芽孢杆菌在生物防治、食品保鲜等领域的应用提供科学依据。
二、实验材料1. 实验菌株:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、白色念珠菌(Candida albicans)。
2. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基、沙堡培养基。
3. 实验仪器:恒温培养箱、电子天平、移液器、牛津杯、无菌水、无菌滤纸等。
三、实验方法1. 菌悬液的制备:将实验菌株分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和沙堡培养基中,37℃恒温培养24小时,然后用无菌水稀释至适宜浓度。
2. 抑菌实验:- 将牛肉膏蛋白胨培养基和沙堡培养基分别铺成平板。
- 在平板中央放置牛津杯,并加入适量实验菌株菌悬液。
- 将平板置于恒温培养箱中,37℃培养24小时。
- 观察并记录抑菌圈的大小。
四、实验结果1. 枯草芽孢杆菌对细菌的抑菌效果:- 对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果较好,抑菌圈直径分别为15mm和12mm。
- 对枯草芽孢杆菌自身菌株无抑菌作用。
2. 枯草芽孢杆菌对真菌的抑菌效果:- 对白色念珠菌的抑菌效果较好,抑菌圈直径为10mm。
- 对枯草芽孢杆菌自身菌株无抑菌作用。
五、讨论与分析1. 抑菌效果分析:- 本实验结果表明,枯草芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌具有一定的抑菌效果,说明其具有一定的生物防治潜力。
- 抑菌效果与菌株的种类和浓度有关,本实验中枯草芽孢杆菌的抑菌效果较好,可能与菌株本身的抑菌物质和代谢产物有关。
2. 实验局限性:- 本实验仅针对部分细菌和真菌进行了抑菌实验,未涉及更多菌株,实验结果可能存在局限性。
- 实验条件可能影响抑菌效果,如温度、pH值等。
六、结论本实验结果表明,枯草芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌具有一定的抑菌效果,为芽孢杆菌在生物防治、食品保鲜等领域的应用提供了理论依据。
微生物技术综合实验年级:13级生物工程(专升本)班级:2013011201学号:1301014026姓名:徐红贞指导老师:刘凤霞教授日期:二零一三十月五号目录1实验目的及原理 (1)1.1实验目的 (1)1.2实验原理 (1)2实验材料 (1)2.1实验仪器 (1)2.2实验试剂 (1)2.3培养基 (2)2.3.1 生长培养基 (2)2.3.2鉴定培养基 (2)2.3.3摇瓶培养基 (2)3试验方法 (2)3.1仪器的准备 (2)3.2培养基的配置 (2)3.3初步筛选及鉴定 (2)3.3.1采集土样 (3)3.3.2富集培养 (3)3.3.3稀释分离、纯化 (3)3.3.4初筛 (3)3.4复筛及鉴定 (4)3.4.1革兰染色 (4)3.5酶活力的测定 (4)3.5.1摇瓶培养 (4)3.5.2酶液稀释 (4)3.5.3酶液测定 (4)4结果分析 (5)4.1平板涂布分离 (5)4.2平板划线分离 (5)4.3初筛 (5)4.4复筛 (5)4.5摇瓶培养 (6)4.6酶活力测定 (6)5参考资料 (7)6附录 (8)微生物上游技术综合实验枯草芽孢杆菌的分离、纯化、筛选及鉴定1.实验目的及原理1.1实验目的(1)学习从土壤中分离、纯化枯草芽孢杆菌的原理和方法。
(2)学习掌握枯草芽孢杆菌的鉴定方法。
(3)掌握微生物的摇瓶培养方法及淀粉酶活力的测定的原理和方法。
(4)培养学生综合应用微生物实验方法的能力。
(5)培养学生自行设计实验流程、综合分析问题解决问题和判断实验结果的能力。
1.2实验原理选择合适与待分离微生物的生长条件,如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求,或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长,而抑制其他微生物的环境,从而淘汰一些不需要的微生物。
将土壤稀释液倒在不同类型的培养基平板上,在适宜的环境中培养几天,细菌或是其他的微生物便能在平板上生长繁殖,形成菌落。
将初次筛选得到的微生物接到淀粉培养基上培养,因为只有能够产生淀粉酶的细菌才能够利用培养基中的淀粉成分来完成自身的生命活动,才能够生存。
一、实验目的1. 通过紫外线诱变技术,提高微生物的产酶能力。
2. 筛选出具有较高酶活性的突变菌株。
二、实验原理紫外线诱变是一种物理诱变方法,通过紫外线照射微生物细胞,导致DNA分子发生突变,从而产生具有新的遗传特性的菌株。
本实验采用紫外线照射枯草芽孢杆菌,通过透明圈法初筛,筛选出具有较高淀粉酶活性的突变菌株。
三、实验材料1. 菌种:枯草芽孢杆菌2. 器材:紫外线灯、培养皿、涂布器、吸管、恒温摇床、培养箱、直尺、棉签、橡皮手套、洗耳球3. 培养基:可溶性淀粉培养基、牛肉膏培养基、0.5%碘液四、实验方法1. 紫外线照射:将枯草芽孢杆菌接种于牛肉膏培养基中,培养至对数生长期。
将培养好的菌液用无菌水稀释至一定浓度,取适量菌液均匀涂布于培养皿上,放入紫外灯照射箱中,照射距离为20-30cm,照射时间为1-3分钟。
照射过程中,严格控制死亡率在50%-80%。
2. 初筛:将照射后的菌落用无菌水洗涤,制成菌悬液。
取适量菌悬液涂布于可溶性淀粉培养基上,37℃培养24小时。
观察透明圈的大小,筛选出具有较大透明圈的突变菌株。
3. 酶活性测定:采用淀粉酶活力测定方法,测定筛选出的突变菌株的淀粉酶活性,并与原始菌株进行对比。
五、实验结果1. 紫外线照射后,部分菌株出现透明圈,且透明圈大小不一。
2. 经过初筛,筛选出10株具有较大透明圈的突变菌株。
3. 酶活性测定结果显示,筛选出的10株突变菌株的淀粉酶活性均高于原始菌株,其中菌株A的淀粉酶活性最高,达到原始菌株的1.8倍。
六、讨论与分析1. 紫外线照射能够有效诱导枯草芽孢杆菌产生淀粉酶活性突变菌株,且突变频率较高。
2. 初筛过程中,透明圈大小与淀粉酶活性具有一定的相关性,透明圈越大,酶活性越高。
3. 实验结果表明,通过紫外线诱变技术,可以有效地提高枯草芽孢杆菌的产酶能力,为微生物育种提供了一种新的方法。
七、结论1. 紫外线诱变技术是一种有效提高微生物产酶能力的方法。
2. 本实验筛选出的突变菌株具有较高淀粉酶活性,为后续的发酵生产和应用提供了有利条件。
微生物技术综合实验年级:13级生物工程(专升本)班级:2013011201学号:***********名:***指导老师:刘凤霞教授日期:二零一三十月五号目录1实验目的及原理 (1)1.1实验目的 (1)1.2实验原理 (1)2实验材料 (1)2.1实验仪器 (1)2.2实验试剂 (1)2.3培养基 (2)2.3.1 生长培养基 (2)2.3.2鉴定培养基 (2)2.3.3摇瓶培养基 (2)3试验方法 (2)3.1仪器的准备 (2)3.2培养基的配置 (2)3.3初步筛选及鉴定 (2)3.3.1采集土样 (3)3.3.2富集培养 (3)3.3.3稀释分离、纯化 (3)3.3.4初筛 (3)3.4复筛及鉴定 (4)3.4.1革兰染色 (4)3.5酶活力的测定 (4)3.5.1摇瓶培养 (4)3.5.2酶液稀释 (4)3.5.3酶液测定 (4)4结果分析 (5)4.1平板涂布分离 (5)4.2平板划线分离 (5)4.3初筛 (5)4.4复筛 (5)4.5摇瓶培养 (6)4.6酶活力测定 (6)5参考资料 (7)6附录 (8)微生物上游技术综合实验枯草芽孢杆菌的分离、纯化、筛选及鉴定1.实验目的及原理1.1实验目的(1)学习从土壤中分离、纯化枯草芽孢杆菌的原理和方法。
(2)学习掌握枯草芽孢杆菌的鉴定方法。
(3)掌握微生物的摇瓶培养方法及淀粉酶活力的测定的原理和方法。
(4)培养学生综合应用微生物实验方法的能力。
(5)培养学生自行设计实验流程、综合分析问题解决问题和判断实验结果的能力。
1.2实验原理选择合适与待分离微生物的生长条件,如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求,或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长,而抑制其他微生物的环境,从而淘汰一些不需要的微生物。
将土壤稀释液倒在不同类型的培养基平板上,在适宜的环境中培养几天,细菌或是其他的微生物便能在平板上生长繁殖,形成菌落。
将初次筛选得到的微生物接到淀粉培养基上培养,因为只有能够产生淀粉酶的细菌才能够利用培养基中的淀粉成分来完成自身的生命活动,才能够生存。