分离出冷沉淀和血浆

影响冷沉淀质量的关键因素分析冷沉淀（cryoprecipitate）是新鲜冰冻血浆（FFP）在低温（约0~4℃）解冻后沉淀的白色絮状物，是FFP的部分凝血因子浓集制品，其中主要成分有：Ⅷ因子、纤维蛋白原以及血管性血友病因子，纤维结合蛋白、ⅩⅢ因子等。

冷沉淀因其制作工艺简单、价格低廉，临床应用广泛。

适用于先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及Ⅷ因子缺乏症患者，血管性血友病（vWD）、儿童及成年人轻型甲型血友病患者，DIC及大出血患者的替代治疗等。

因冷沉淀中的Ⅷ因子为不稳定凝血因子，受多种因素影响，所以每袋冷沉淀Ⅷ因子含量各不相同，通过查阅相关资料及跟踪验证，对影响冷沉淀质量的关键因素分析，现报告如下：1 冷沉淀的制备方法冷沉淀制品是以新鲜冰冻血浆为原料，近年来因多联采血袋的广泛应用，冷沉淀的制作工艺更加简单，安全性更强，各地中心血站均能生产。

目前国内冷沉淀的制备常用两种方法[1]：1.1 离心法取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆（FFP），置室温中约5分钟，待双联袋导管（连接管）变软后，将血浆置入2～6℃水浴箱中融化。

当血浆基本融化时，取出血浆，在2±2℃的环境下重离心，使冷沉淀凝血因子下沉于塑料袋底部。

将上清分入空袋内，血袋底部的沉淀内大约含有20～30ml血浆，即为冷沉淀凝血因子。

1.2 虹吸法取出待制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆（FFP），置室温中约5分钟，待双联袋导管（连接管）变软后，将新鲜冰冻血浆袋置于2～6℃水浴箱中，另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋，两袋形成一定的高度落差。

新鲜冰冻血浆融化时，上清血浆随时被虹吸入空袋中，冷沉淀遗留在新鲜冰冻血浆袋中。

在融化过程中控制水浴温度在2～6℃。

待新鲜冰冻血浆融化至约40～50ml时，即为冷沉淀凝血因子。

以上两种方法制备好的冷沉淀需迅速放入速冻机中冷冻，于-20℃以下冰箱中保存，保存期不超过一年，输注前于37℃水浴融化，并于4小时内输注。

2 冷沉淀的质量标准根据《全血及成分血质量要求》GB18469-2001规定，冷沉淀外观：肉眼观察30℃~37℃融化的冷沉淀凝血因子无纤维蛋白析出、无黄疸、无气泡、无重度乳糜。

冷沉淀的制备及应用范围冷沉淀是新鲜冰冻血浆在1~6C条件下不溶解的白色沉淀物，它是POOI博士在1964-1965年期间发现的，被加热37C时呈溶解的液态，主要含有第忸因子、纤维蛋白原、血管性血友病因子（VWF）第X皿、以及纤连蛋白等成分。

现就冷沉淀的制备、临床应用及效果给大家介绍一下。

1 冷沉淀的制备与质量1.1 冷沉淀的制备选取健康无偿献血者, 各项检查指标合格,采集400 mL全血后6~8 h内经分离新鲜液体血浆于-50 C冻成型后的新鲜冰冻血浆放置-30 C保存。

制备冷沉淀时，将-30 C保存血浆放置于1~6C环境下溶解、分离出冷不溶物，放置-30 C冻存或直接应用于临床。

1.1.1 离心法（PooI）1.1.1.1 原料血浆的融化1.1.1.1.1 4 C冷藏箱法：将原料血浆从-30 C冰箱内取出，置于1~6C冷藏箱内缓慢融化。

1.1.1.1.2 水浴融化法：将原料血浆从-30 冰箱取出，值室温5 分钟，待双联袋间的塑料管变软后，放入15C水浴箱内，启动摇摆装置，约30分钟后温度调至4C,当原料血浆袋全部融化时（约60~90 分钟），然后把水温调至0~2C。

1.1.1.2融化后的原料浆于0~4C以离心力2000g离心10分钟，使冷沉淀下沉于塑料袋底部，快速去除上清液，剩20~30 mL左右即为冷沉淀。

1.1.2连续融化虹吸法（Mason）,将原料浆袋置于1~6C水浴装置中，另一空袋悬于水浴箱外且位置低于血浆袋，两袋之间形成一定的落差，血浆溶化后随时被虹吸至空袋内，当融化至剩下40~50ml时，闭合导管，阻断虹吸，将冰冻血浆袋和冷沉淀热和断离。

1.2 冷沉淀的质量冷沉淀质量受温度、时间以及其他各种因素影响。

从采血到制备过程中室温制备原料浆会使第忸因子含量偏低；说明温度对冷沉淀质量有影响。

经研究使用亚甲蓝光照法（MB）进行病毒灭活的冷沉淀与原血浆比较，忸因子和血管性血友病因子（Vwf）活性分别别下降30呀口11%纤维蛋白原浓度下降40%血液4C保存18 h 其忸因子含量与6C保存6~8 h相比下降23%冷沉淀制备时间对凝血因子含量有影响,FFP 一旦融化，忸因子活性随时间延长而明显降低,12 h 衰减41.17%,24 h 衰减42.82%,改良水浴融化虹吸法制备冷沉淀F忸含量明显高于Pool。

WS 399-2012 血液储存要求前言本标准按照GB/T 1.1 2009给出的规则起草。

本标准的4.1.7为推荐性条款，其余均为强制性条款。

本标准由卫生部血液标准专业委员会提出。

本标准主要起草单位：浙江省血液中心、上海市血液中心、福建省血液中心、北京市红十字血液中心。

本标准主要起草人：严力行、孟忠华、钱开诚、衣梅、郭永建、王鸿捷。

1 范围本标准规定了血液的储存要求。

本标准适用于一般血站和医疗机构的血液储存。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

WS/T 203 输血医学常用术语3 术语和定义WS/T 203界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1 储存设备storage device用于血液储存的仪器或装置。

3.2 保存期storage period血液在适宜条件下适合人体输注的最长储存期限。

3.3 隔离quarantine将不合格、待检、质检、报废等血液与合格血液区分，并储存于特定区域，置以清晰的提示标识（计算机信息和实物），杜绝实物与实物之间、实物与信息之间、信息与信息之间的混淆。

3.4 密闭系统closed system一次性塑料血袋系统，其内容物在分离、分装等处置过程中与系统外部环境完全阻隔。

无菌导管连接仪将数个密闭系统经无菌高频热合成新的系统，并经检查连接无误后，该新的系统仍为密闭系统。

3.5 开放系统open system密闭系统在血液分离等处置过程中被开放、暴露于局部100级洁净度的环境后再行密闭的一次性塑料血袋系统。

3.6 冰冻血浆frozen plasma采用物理的方法在全血的有效期内，将血浆分离出并冰冻呈固态的成分血，或从新鲜冰冻血浆中分离出冷沉淀凝血因子后将剩余部分冰冻呈固态的成分血，或新鲜冰冻血浆一年保存期满后的血浆。

4 血液储存设施4.1 血液存放区4.1.1 血液存放区连续储存血液≥24 h时，应有双路供电或应急发电设备。

去冷沉淀血浆的认知现状摘要】重点阐述了去冷沉淀血浆的组成、临床适应症及禁忌症，介绍了去冷沉淀血浆目前使用情况，并在此基础上，对去冷沉淀血浆的研究前景进行了展望。

【关键词】去冷沉淀血浆；冷上清；血栓性血小板减少性紫癜【中图分类号】R197.6 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）13-0381-02新鲜冰冻血浆（fresh frozen plasma，FFP）在2～6℃封闭状态融化后，在无菌条件下分离出沉淀在血浆中的冷不溶解物质并在1h内冻结而制成的成分血为冷沉淀[1]，剩余成分即为去冷沉淀血浆（cryoprecipitate-reduced plasma，CRP），也被称为冷上清。

随着临床上冷沉淀使用量的不断增加，CRP的使用量也呈明显的上升趋势，目前CRP常作为普通冰冻血浆（frozen plasma，FP）标识并使用。

实际上，CRP其组成成分与FP有差别，临床应用与疗效也不尽相同，故笔者对CRP进行深入阐述，从而激发读者进一步认识CRP。

1.去冷沉淀血浆组成根据血浆成分和临床应用差异，人们普遍把血浆分作FFP和FP两类，并把CRP归之于FP之列，发放至临床使用，却鲜少把CRP单独设置成第三类血浆。

对于FFP与FP之间的蛋白含量和凝血因子差异，国内外相关研究有很多，早在1992年肖星甫[2]就表明此两者的主要区别在于不稳定因子，FP中缺乏FⅤ和FⅧ，而CRP与FP之间的成分与含量差异的研究则起步较晚，导致现今临床医务工作者对于CRP的认识非常有限。

有研究[3]表明，CRP与FP的血浆蛋白和稳定因子存在明显差异，TP、ALB、FIB、F X:C，均差异有统计学意义（均P<0.01）。

研究者林昂[4]更是对比了FFP、FP、CRP中总蛋白、白蛋白、纤维蛋白原、FⅤ、FⅧ、FⅩ含量差异，实验结果表明各项指标均属CRP最低。

还有学者特别研究滤白CRP 与滤白FFP之间的差异，表明滤白CRP中FV、FⅦ、FⅧ、FⅨ活性及FIB、TP含量明显低于滤白FFP[5]。

冷沉淀凝血因子的临床应用及新进展发表时间：2014-07-17T09:04:00.093Z 来源：《中外健康文摘》2014年第16期供稿作者：孙志华[导读] 采用特定的方法将保存期内的新鲜冰冻血浆(FFP)在1℃ -6℃融化后，分离出大部分的血浆。

孙志华(济南市第五人民医院山东济南 250022)【中图分类号】R45 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）16-0095-021.概述1.1定义：采用特定的方法将保存期内的新鲜冰冻血浆(FFP)在1℃ -6℃融化后，分离出大部分的血浆，并将剩余的冷不溶解物质在1小时内速冻成固态的成分血（简称冷沉淀）。

冷沉淀含有新鲜血浆中全部的活性成分，如凝血因子Ⅷ、血管性血友病因子（vWF）、纤维蛋白原（Fg）及纤维结合蛋白(Fn)等成分。

1.2. 有效成分的主要作用：1.2.1 凝血因子Ⅷ：是凝血过程中的重要因子，其加速因子Ⅹ活化，促进内源性凝血系统激活。

1.2.2 纤维蛋白原（Fg）：是凝血公共途径上的效应分子，可以使内源性和外源性凝血途径加快，是血小板间的桥梁，含量增高可使血小板凝聚功能增强。

1.2.3纤维结合蛋白(Fn)：是一种粘性糖蛋白，具有促进纤维蛋白交联、细胞黏着、上皮细胞移行、修复和分化的作用，同时具有抑菌、抗感染和免疫调控作用。

1.2.4 血管性血友病因子（vWF）：可与胶原蛋白、血小板结合，当大血管出血时，以vWF为中介，粘附在胶原纤维上，形成血栓，得以止血。

1.3. 质量标准：1.3.1 Ⅷ因子含量200毫升全血制备：≥40IU300毫升全血制备：≥60IU400毫升全血制备：≥80IU1.3.2 纤维蛋白原200毫升全血制备：≥75mg300毫升全血制备：≥113mg400毫升全血制备：≥150mg1.3.3特别说明：国家标准中400毫升全血（200毫升血浆）制备的冷沉淀以每袋80IU标识，实际是标识的Ⅷ因子含量。

临床实际以400毫升全血（200毫升血浆）制备的冷沉淀标识为每袋1单位（U）更为科学。

冷沉淀凝血因子的制备及临床应用摘要】冷沉淀凝血因子是将保存期内的新鲜冰冻血浆在2℃～6℃融化后，经离心后分离出大部分血浆，将剩余不溶冷沉淀物质在1h内速冻呈固态的一种功能性血液成份，是新鲜冰冻血浆中大部分凝血因子的浓缩制品，富含纤维蛋白原(Fib)、纤维结合蛋白（Fn）、血管性血友病因子（vWF）、Ⅷ因子等。

近几年来本血站冷沉淀凝血因子的制备量和使用量也呈逐年增加趋势。

冷沉淀凝血因子主要用于因缺乏Ⅷ因子或纤维蛋白原而出血的病人及血友病患者[1]。

随着医疗输血技术的不断发展创新，冷沉淀凝血因子不再局限于血液病的治疗，而更多的用于各种手术、创伤引起的凝血机制障碍等出血性疾病，如深度烧伤、弥散性血管内凝血、肿瘤手术、多发伤和手术创伤，治疗效果显著。

【关键词】成分输血；成分制备；冷沉淀凝血因子；临床输注【中图分类号】R457 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）10-0100-011.冷沉淀凝血因子的制备与质量标准用于制备冷沉淀凝血因子的血液采集、制备过程和储存条件等，国家标准有严格的规定。

GB18469-2012《全血及成分血质量要求》中规定，冷沉淀凝血因子的原料为新鲜冰冻血浆，而新鲜冰冻血浆严格为离体6h（保养液为ACD）或8h （保养液为CPD或CPDA-1)内，不超过18h并储存于2～6℃的新鲜血液，将血浆分离出来并速冻呈固态的成份血，每400ml全血制备的200ml以上的新鲜冰冻血浆，制备的冷沉淀为2个单位；其中Ⅷ因子含量≥80IU,纤维蛋白原含量≥150mg，容量：20～30ml,同时还含有血管性血友病因子、纤维结合蛋白、各种免疫球蛋白等[2]。

1.1 冷沉淀凝血因子的制备冷沉淀凝血因子，制备方法：（1）取出符合制备冷沉淀条件的新鲜冰冻血浆，置于(4±2)℃冰箱中过夜融化(时间约为12～l5h)；（2）次日，当血浆基本融化时，其中尚有部分冰晶即从冰箱取出，配平后重离心，离心条件为：离心力2000g、(4±2)℃、10min。

去冷沉淀血浆和普通冰冻血浆的质量对比分析刘晓洋;李小阳【摘要】目的对去冷沉淀血浆和普通冰冻血浆的部分质量指标进行比对分析,为明确质量标准和提高临床疗效提供依据.方法抽取本站2010年6月采集的经检测合格的全血(CPDA保养液)25袋,严格按照国家标准制备新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆(从新鲜液体血浆中留取部分血浆制备)、去冷沉淀血浆,分别留取相应的血浆标本各25份.于血液采集后第10天检测留取标本的总蛋白、纤维蛋白原、凝血因子Ⅷ的含量以及测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT),根据检测结果进行对比分析.结果去冷沉淀血浆上述各项质量指标检测结果均明显低于普通冰冻血浆(P＜0.001).结论去冷沉淀血浆和普通冰冻血浆在临床上不能等同标识和使用.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2012(014)002【总页数】3页(P158-160)【关键词】去冷沉淀血浆;冷上清;普通冰冻血浆;凝血因子;血浆蛋白【作者】刘晓洋;李小阳【作者单位】417000 湖南省娄底市中心血站质管科;417000 湖南省娄底市中心血站质管科【正文语种】中文【中图分类】R457.1+4全血采集后 6 h(全血保养液为 ACD)或 8 h(全血保养液为 CPD、CPDA-1)内在全封闭条件下分离血浆并冻结制成新鲜冰冻血浆，将新鲜冰冻血浆在1℃～6℃无菌条件下分离出沉淀于血浆中的冷不溶解物质，并在1 h内冻结制成冷沉淀[1]。

普通冰冻血浆是全血采集后8 h至1周内在全封闭条件下分离血浆并冻结制成[2]。

根据《英国输血机构指南》规定，去冷沉淀血浆是新鲜冰冻血浆制备冷沉淀时分出的上层血浆，也称冷上清或少冷沉淀血浆。

随着临床上冷沉淀使用量的增加，去冷沉淀血浆逐渐成为普通冰冻血浆的主要来源之一。

由于没有明确的质量标准，目前两者在临床上常等同标识并使用，但由于制备方式明显不同，因此，笔者对去冷沉淀血浆和普通冰冻血浆的部分有效成分和含量进行检测和分析，为制定去冷沉淀血浆和普通冰冻血浆质量标准，提高临床疗效提供依据。

去冷沉淀血浆和普通冰冻血浆的质量对比分析[摘要]目的：探讨去冷沉淀血浆和普通冰冻血浆对献血者的血检结果差异。

方法：选取60例献血者，对其均采取血液检验，将去冷沉淀血浆检验结果作为实验组，普通冰冻血浆检验结果作为对比组，比较两组检验结果差异。

结果：两组总蛋白、白蛋白、Ⅷ因子、Ⅴ因子、纤维蛋白原检验结果差异显著（P＜0.05）。

结论：去冷沉淀血浆与普通冰冻血浆的检查结果存在较大的差异，无法将二者看作是等同标本进行检验和诊断，值得重视。

关键词：去冷沉淀血浆；普通冰冻血浆；检验结果差异血液检验是临床较为常用的检验技术，能够对患者的输血安全有较好的监控效果。

但不同的血液标本制备技术，对血液检验的结果有一定的影响，因此临床十分重视标本的采集、保存和制备效果[1-2]。

普通冰冻血浆与去冷沉淀血浆均属于临床较为常用的检验标本类型，两种血浆的冰冻时间、保存方法存在较大的差异，早期对两种血浆进行等同标识并在临床上应用，随着两种血浆应用报道的不断增多，越来越多的检验结果差异引起临床的重视。

本文对所选献血者开展去冷沉淀血浆和普通冰冻血浆干预，报告如下。

1 资料与方法1.1临床资料我院2022年1-12月60例献血者，其中男30例，女30例，年龄35-52岁，平均年龄（38.58±3.42）岁，献血年限4-8年，平均年限（6.25±1.75）年，体质量42-78kg，平均体质量（60.34±17.66）kg，所选献血者均符合献血的相关标准，且无传染性疾病，血液采集后保存方法符合临床标准，所选献血者一般资料无显著差异，具有可比性（P＞0.05）。

1.2 方法将去冷沉淀血浆检验结果作为实验组，普通冰冻血浆检验结果作为对比组，比较两组检验结果差异。

标本处理：对所选献血者进行血浆的标准化采集，并将血浆放置在封闭条件下待检，充分分离血浆后进行制备，对同一名献血者的血浆分别进行去冷沉淀血浆和普通冰冻血浆标本的制备，采集时间与处理时间间隔不可超过4小时。

临床探索表 2 两组治疗前后肘关节活动度的比较（±s，°）注:与同组治疗前比较，*P＜0.05；与对照组治疗后比较，#P＜0.05。

3讨论肘关节是人体较为复杂且重要的铰链式关节,具有屈伸、旋转等功能，出现肘关节功能障碍可对患者生活造成极大影响[1]。

目前临床上多采用手术松解配合术后康复功能锻炼治疗，康复治疗可有效提高肘关节功能，多用于手术松解术后的辅助治疗[2]。

康复训练可促进水肿液或血液回流，减轻关节周围肿胀，增加运动范围，防止再粘连，是肘关节僵硬松解术后康复的重要手段。

因此,选择合适有效的康复训练是目前临床亟待解决的问题。

综上所述,肘关节僵硬松解术后电针联合康复训练,能有效缓解患者疼痛,改善肘关节活动度与肌肉状态,在康复效果方面优于常规康复治疗。

参考文献[1] 刘芳,陶思攸,曾惠芬,等.针刀松解术对类风湿关节炎肘关节僵硬患者炎性反应递质和氧自由基的影响[J].世界中医药,2019,14(5):1310-1313.[2] 叶立亮,付保恩,史福全,等.肘关节创伤术后围手术期的系统康复治疗[J].河北联合大学学报(医学版),2008(4).制备冷沉淀的新鲜冰冻血浆分离时间质量控制黄洁雯，甘芳香 （茂名市中心血站，广东茂名 525000）摘要：目的：研究不同时间段分离的新鲜冰冻血浆对冷沉淀凝血因子Ⅷ的影响，最高限度地保障冷沉淀凝血因子Ⅷ治疗效果。

方法：选择安全性指标合格的血液48袋，按照全血采集后新鲜冰冻血浆不同分离时间分为3组，第1组是在采血后≤8 h，第2组是在采血后9~12 h，第3组是在采血后13~18 h，再制备成冷沉淀，检测冷沉淀凝血因子Ⅷ的含量，对冷沉淀凝血因子Ⅷ的含量进行分析比较。

结果：3组不同时间段分离的新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀凝血因子Ⅷ含量差异显著，组间差异存在统计学意义（P＜0.05）；3组冷沉淀凝血因子Ⅷ含量合格率呈递减趋势，差异存在统计学意义（P＜0.05）。