冷沉淀的临床应用和注意事项 ppt课件

临床应用冷沉淀的注意事项及研究20世纪60年代冷沉淀被pool博士发现，1964年首先应用冻融沉淀法从血浆中提取出来白色沉淀物。

因富含FⅧ、Fg、Fn等凝血因子，而用于HA、Fg缺乏、凝血因子ⅩⅢ缺乏和vWD等出血性疾病治疗，是现代成分输血的一部分。

因其纯度不高，在生物体内半衰期短，在发达国家，除非无可先择或紧急情况，并不考虑应用冷沉淀治疗HA、vWD和FⅩⅢ缺乏等疾病。

近年来，随着临床输血技术快速发展，该项技术突破传统，得到更广泛的应用。

除用于手术后出血、严重外伤及DIC的治疗，还有报道应用于深度烧伤、手术创伤、恶性肿瘤激发的口腔溃疡等病的替代治疗。

现将冷沉淀组成和作用机制，制备方法，规格与储存，在临床中的应用，输注剂量及注意事项等研究进展综述如下，以便冷沉淀制品能更好地服务与临床。

1冷沉淀的组成和作用机制抗血友病球蛋白（FⅧ）是由FⅧ促凝活性、FⅧ促凝抗原、FⅧ有关抗原和FⅧ有关的瑞斯托霉素辅因子（vWF：Rco）等组成的大分子复合物。

可加速FⅩ活化，促进血小板聚集、血小板FⅢ的释放和形成内源性凝血活酶，促进内源性凝血系统激活加快。

生物体内半衰期在8～12h，变化较大。

纤维蛋白原（Fg）由肝脏合成的，在凝血过程中，由凝血酶切除血纤蛋白原中的血纤肽A和B而生成的单体蛋白质。

其含量增多可使内源性和外源性凝血途径都加快。

还可使血小板聚集功能增强，起到加快止血、改善微循环、防止出血的作用。

纤维结合蛋白（Fn）又称纤维连接蛋白，1974年国外开始研究发现的，广泛存在于动物组织和组织液中，分子量约450KD，由两条相似的A链和B链组成的二聚体高分子糖蛋白。

有促进细胞粘着、上皮细胞移行、纤维蛋白交联，抗感染、抑制细菌促进肉芽组织增生、提高白细胞活性、增强单核-巨噬细胞免疫调控功能，为上皮修复营造环境条件等多种生物活性。

纤维蛋白稳定因子（FSF）即Ⅲ因子存在于血小板及血浆中，经凝血酶切除部分肽段后被激活Ⅲa。

冷沉淀的临床应用和注意事项冷沉淀是一种常用的分离和提取生物大分子的方法，它利用低温条件下使大分子凝聚结晶沉降于溶液底部的原理进行分离。

在临床实践中，冷沉淀技术被广泛应用于蛋白质分离、病毒扩增、药物提取等领域。

以下将就冷沉淀的临床应用和注意事项进行详细介绍。

一、冷沉淀的临床应用1.蛋白质分离：冷沉淀可用于将溶液中的蛋白质从其他成分中分离出来。

通过在低温条件下使蛋白质凝聚结晶沉降，可以得到较为纯净的蛋白质提取物，用于后续的实验分析或药物研究。

2.病毒扩增：在病毒制备和扩增过程中，常常需要对病毒进行纯化和分离。

冷沉淀技术可以用来沉淀和提取病毒颗粒，通过离心等方法将病毒分离出来，用于制备疫苗或进行病毒学研究。

3.药物提取：在药物研发和质量控制中，常常需要通过提取和分离的方法得到目标药物。

冷沉淀可以用来沉淀和提取药物中的活性成分，使其得到纯净的提取物，确保药物的有效性和安全性。

4.生化实验：在分子生物学和生物化学实验中，冷沉淀可以用来分离和提取目标蛋白质、核酸等生物大分子，用于研究其结构和功能，从而推动科学研究的进展。

二、冷沉淀的注意事项1.操作条件：冷沉淀的操作条件一般在4摄氏度以下。

在操作过程中必须保持低温，以确保蛋白质或其他大分子的沉淀和分离效果。

同时，需要注意避免结晶的形成和溶液的冻结。

2.离心速度和时间：在进行冷沉淀后，需要通过离心等方法将沉淀物分离出来。

离心速度和时间的选择需根据具体实验目的和材料的不同而有所差异，操作时应仔细控制参数，以确保分离效果。

3.沉淀物的收集和处理：在冷沉淀后得到的沉淀物需要正确收集和处理。

为避免细菌或其他污染物的污染，收集器皿和操作工具应提前消毒，同时保持操作环境的清洁，并避免过度搅拌或振荡。

4.沉淀物的保存和稳定性：冷沉淀后得到的沉淀物可能存在降解或失活的情况，需要存储在适当的条件下，避免温度变化或长时间暴露在空气中。

如果需要长时间保存，可以考虑冷冻保存或加入保护剂以增加稳定性。

冷沉淀凝血因子的临床应用输血治疗是不可替代的临床治疗方法之一，成分输血作为一种输血手段，被广泛应用于临床，可减少不良反应、提高治疗效果。

冷沉淀凝血因子作为血液成分的一种，在临床输血治疗中也起到重要作用。

一、什么是冷沉淀凝血因子？冷沉淀凝血因子，也称冷沉淀，是采用特定的方法将保存期内的新鲜冰冻血浆置于2~6℃冰箱中过夜融化或在1~6℃水浴装置中融化，分离出大部分血浆，并将剩余的冷不溶物质在1小时内速冻成固态的成分血。

冷沉淀凝血因子富含五种成分：Ⅷ因子、XⅢ因子、vWF、纤维蛋白原和纤维结合蛋白。

来自200ml全血分离的冷沉淀Ⅷ因子≥40U、纤维蛋白原≥75mg；来自400ml全血分离的冷沉淀Ⅷ因子≥80U、纤维蛋白原≥150mg。

二、主要功能补充Ⅷ因子、XⅢ因子、vWF、纤维蛋白原和纤维结合蛋白。

(1)Ⅷ因子又称抗血友病因子，是一种大分子复合物，可加速XⅢ因子活化，促进血小板聚集，有助于血小板第Ⅲ因子的释放和形成内源性凝血活酶，其含量增加可促进内源凝血系统激活加快。

Ⅷ因子缺乏症又称血友病A，是一种遗传性疾病，患者常见自发性出血或外伤出血后止血困难等症状。

(2)XⅢ因子是纤维蛋白稳定因子，催化可溶性纤维蛋白单体分子间的交联反应，促使纤维蛋白凝块更加紧密、坚固，增加纤溶抵抗。

因此，XⅢ因子对形成稳固的纤维蛋白凝块有重要作用。

XⅢ因子半衰期长，且因子活性5%以下也可以维持机体正常凝血功能。

XⅢ因子缺乏时只能生成不稳定的可溶性纤维蛋白单体聚合物(SFM)，患者常见延迟性出血，创面愈合不佳等症状。

(3)血管性血友病因子(vWF)是一种重要的血浆成分，作为载体具有稳定Ⅷ因子的作用，参与构成Ⅷ因子复合物，且能与血小板相关位点结合，介导血小板的黏附和聚集过程。

先天性或获得性vWF缺乏或功能异常时，可出现凝血障碍。

(4)纤维蛋白原是凝血途径的效应分子，其含量增多可使内源性和外源性凝血途径加快，同时纤维蛋白原作为血小板间的桥梁，可使血小板聚集功能增强。