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环介导等温扩增技术在食品安全检测领域的应用研究进展范安妮;佘之蕴;张娟;周臣清;梁宇斌【摘要】环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是近年发展起来的一种新型核酸检测技术其采用特异识别靶序列上6个位点的4条引物和一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在等温条件下进行核酸扩增,与传统核酸检测技术(PCR法、实时荧光定量PCR法)相比,具有操作简单、特异性强、灵敏度高、可肉眼判读结果等优点核酸检测是食品安全检测技术的一个重要手段,本文综述了LAMP技术在食品微生物检测、转基因成分检测、过敏原成分检测和动物源性成分检测领域的应用研究进展,探讨了LAMP技术在食品检测领域的发展前景,以期为食品快速、高通量检测技术建立提供参考%loop-mediated isothermal amplification(LAMP) is a novel nucleic acid amplification method developed in recent years.The nucleic acid amplification is performed ender isothermal conditions by a set of four specially designed primers and a DNA polymerase with strand displacement pared with the traditional nucleic acid detection technology (PCR and real-time fluorescence quantitative PCR),it has the advantages of easy operation,high specificity,sensitivity and visual interpretation.Nucleic acid detectiou is an important means of food safety detection.This review summarized the application research progresses mainly focused on food safety detection,including food microorganisms testing,genetically modified organisms testing,food allergens testing and food derived ingredients testing.In addition,the perspectives of LAMP in food detectiou were discussed for better and high volume testing in food safety detection.【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2018(039)010【总页数】5页(P330-334)【关键词】环介导等温扩增技术(LAMP);食品安全;检测;核酸扩增【作者】范安妮;佘之蕴;张娟;周臣清;梁宇斌【作者单位】广东产品质量监督检验研究院,广东顺德528300;广东产品质量监督检验研究院,广东顺德528300;广东产品质量监督检验研究院,广东顺德528300;广东产品质量监督检验研究院,广东顺德528300;广东产品质量监督检验研究院,广东顺德528300【正文语种】中文【中图分类】TS207.3核酸扩增是分子生物学研究领域的一项重要技术,目前已广泛应用于医学诊断、食品检测、动植物检验检疫等行业中。
LAMP法和PCR法对阪崎肠杆菌快速检测的对比探究作者：颜学伟来源：《中外医学研究》2013年第05期【摘要】目的：研究LAMP法和PCR法在阪崎肠杆菌快速检测中的差异，指导临床在阪崎肠杆菌快速检测中方法的选择。
方法：针对阪崎肠杆菌的OmpA基因，设计相关特异性引物，分别建立LAMP法和PCR法两种检测方法体系对其进行检测，并对两种检测方法的灵敏度进行记录比较；分别采用两种方法对45株阪崎肠杆菌近源菌进行检测，分析比较两种方法的特异性；最后采用两种方法对60份商场奶粉样品进行检测，将检测结果与FDA检测结果进行比较分析。
结果：两种检测方法的灵敏度检测结果显示：LAMP法对阪崎肠杆菌快速检测的敏感度（101 cfu/ml）明显高于PCR法（102 cfu/ml），两者比较差异有统计学意义（P【关键词】 LAMP； PCR；阪崎肠杆菌中图分类号 R33 文献标识码 A 文章编号 1674-6805（2013）5-0001-02阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种，是奶粉（乳）制品中新发现的一种致病菌。
由其可引发婴儿各种疾病，致病机制可能与其侵入、诱导凋亡及肠毒素作用有关[1]。
对于阪崎肠杆菌的检测，最新研究发现LAMP法对阪崎肠杆菌快速检测，灵敏度高、特异性强[2]。
笔者所在医院应用LAMP法和PCR法对阪崎肠杆菌快速检测的进行对比探究，现报道如下。
1 资料与方法1.1 菌株标本所研究的菌株共60株，其中2株阪崎肠杆菌标准菌株是由广东省微生物研究所提供的ATCC51329和ATCC29544，8株阪崎肠杆菌野生菌株是采用FDA传统手段从商场奶粉或果汁中提取出来的；其余在试验中用到的菌株均为本实验室自己保存。
1.2 仪器细菌基因组DNA抽提试剂盒（上海生工生物工程技术服务有限公司），Bst DNA Polymerase（美国NEB公司），betaine（美国Sigma公司），agarose（Promega），DK28D型电热恒温水槽（上海一恒科技有限公司），PCR仪：PTC-200型；美国Bio-rad公司，EPS301电泳仪（瑞典Amersham公司）。
钦州市售婴幼儿食品中阪崎肠杆菌污染状况调查【摘要】目的：了解钦州市售婴幼儿食品阪崎肠杆菌的污染状况，为食品风险评估提供科学依据。
方法：对钦州市内销售的广西区内外生产的婴幼儿食品进行定期随机采购，应用食品安全国家标准食品微生物检验阪崎肠杆菌检验（gb4789.40 -2010）计数法进行检验。
结果：96件样品中共检出13株阪崎肠杆菌，检出率为（13.54%）。
其中24件适合6月龄以下段婴幼儿配方奶粉阪崎肠杆菌的检出率8.33%（2/24），36件适合6月龄以上婴幼儿配方奶粉检出率为11.11%（4/36），36件婴幼儿谷类辅助食品阪崎肠杆菌检出率为19.44%（7/36），阪崎肠杆菌定量结果为0.3～46mpn/100g 不等。
结论：婴幼儿食品中阪崎肠杆菌污染问题值得重视，存在严重安全隐患。
【关键词】市售；婴幼儿食品；阪崎肠杆菌；监测【中图分类号】r155.5 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2013）04-0832-02阪崎肠杆菌又名阴沟肠杆菌，为肠杆菌属的一个种，革兰氏阴性杆菌，有周鞭毛，能运动，无芽胞，氧化酶阴性[1]。
是近几年在乳制品中新发现并引起广泛关注的一种致病菌。
它是存在于自然环境中的一种“条件致病菌”，已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病茵。
由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的死亡率高达40%-80%。
研究表明，婴幼儿配方奶粉是阪崎肠杆菌的主要感染渠道，这已起世界各国的重视。
2004年fao/who在制定婴幼儿配方奶粉标准时，经过风险评估后，将阪崎肠杆菌与沙门氏菌列婴儿配方奶粉的列为a类致病菌[2]。
2004年中国安徽阜阳由阪崎肠杆菌污染的劣质婴儿配方奶粉事件引起了我国政府的高度重视[3]。
卫生部自2005年起，开始对全国婴幼儿配方奶粉进行监测。
为了解钦州市售婴幼儿配方奶粉及婴幼儿辅助食品中阪崎肠杆菌的污染情况，我们于2011年3月至2012年10月对钦州市售的96件婴幼儿食品进行了监测检验，现将结果报告如下：1 材料与方法1.1 材料3 计论阪崎肠杆菌可引起各年龄段人群患病，1岁以下婴儿是该菌感染的高危人群，特别是新出生婴儿，早婴产儿及出生体重偏低和免疫力下降等身体状况较差的婴幼儿易感[4]。
食安管理婴幼儿乳粉加工环境中克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）监控方案的构建陶文靖1，赵婷婷2，许冉冉2，张君超1，吴 萍2，董 彬3*（1.北京美正生物科技有限公司，北京 102200；2.光明乳业股份有限公司华东中心工厂，上海 201111；3.北京光明健能乳业有限公司，北京 101300）摘 要：克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）作为婴幼儿配方乳粉中的A类致病菌备受关注。
该菌耐干燥，可长期存在于婴儿奶粉生产环境中。
婴儿配方奶粉加工、运输及销售等环节都有可能污染克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌），因此控制婴幼乳粉加工环境中克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）的污染尤为重要。
本文结合标准法规要求和婴幼儿配方乳粉企业环境监测的经验，构建出加工过程环境中克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）监控基础方案，包括区域划分、采样方案、检测方法、预防措施和纠正措施等，可帮助企业科学有效地控制克罗诺杆菌属的污染风险。
关键词：克罗诺杆菌属；婴幼儿奶粉；加工环境Construction of Monitoring Program for Cronobacter(Enterobacter sakazakii) in Infant Formula ProcessingEnvironmentTAO Wenjing1, ZHAO Tingting2, XU Ranran2, ZHANG Junchao1, WU Ping2, DONG Bin3*(1.Beijing Meizheng Bio-Tech Co., Ltd., Beijing 102200, China; 2.Bright Dairy Co., Ltd., East China Center Factory,Shanghai 201111, China; 3.Beijing Guangming Jianneng Dairy Co., Ltd., Beijing 101300, China) Abstract:Cronobacter (Enterobacter sakazakii) has attracted much attention as a group A pathogenic bacteria in infant formula milk powder. The bacterium is resistant to desiccation and can persist for a long time in the environment of infant milk powder production. Cronobacter (Enterobacter sakazakii) may be contaminated in the processing, transportation and sales of infant formula milk powder. Therefore, the contamination control of Cronobacter (Enterobacter sakazakii) in the processing environment of infant milk powder is particularly important. This paper combines the requirements of standards and regulations and the experience of environmental monitoring in infant formula milk powder enterprises to construct a basic monitoring plan for Cronobacter (Enterobacter sakazakii) in the processing environment, including area division, sampling plan, detection method, preventive measures and corrective measures, etc., can help enterprises to control the risk of Cronobacter more scientifically and effectively.Keywords:Cronobacter; infant formula; processing environment克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）（以下简称“克罗诺杆菌属”）是婴幼儿乳粉中备受关注的食源性致病菌之一，严重危害婴幼儿的健康。
阪崎肠杆菌检测标准1. 引言阪崎肠杆菌〔Hafnia alvei〕是一种革兰氏阴性菌，属于肠杆菌科。
它在自然环境中广泛存在，也可以在人和动物的消化道内找到。
阪崎肠杆菌可以对人类和动物造成感染，引起各种疾病，如泌尿系统感染、呼吸道感染和胃肠道感染等。
为确保食品和饮用水的平安，阪崎肠杆菌的检测标准十分重要。
2. 检测方法2.1 阪崎肠杆菌的培养方法阪崎肠杆菌可以在一般细菌培养基上生长，常用的培养基包括MacConkey琼脂培养基和Eosin Methylene Blue〔EMB〕琼脂培养基。
培养时一般在37°C下孵育24-48小时。
2.2 阪崎肠杆菌的生化检测阪崎肠杆菌可以通过一系列的生化反响进行检测和鉴定。
常用的生化试验包括氧化/发酵葡萄糖试验〔O/F试验〕和酮糖酸盐〔Voges-Proskauer〕试验等。
2.3 阪崎肠杆菌的PCR检测PCR〔聚合酶链式反响〕是一种常用的分子生物学方法，可以快速、准确地检测阪崎肠杆菌。
通过特定的引物在PCR反响中扩增阪崎肠杆菌的DNA片段，然后通过凝胶电泳进行检测和鉴定。
3. 检测标准3.1 食品中阪崎肠杆菌的检测标准根据国家食品平安标准，食品中阪崎肠杆菌的检测标准如下： - 生肉制品：阪崎肠杆菌在每克样品中不得超过10 CFU； - 加工食品：阪崎肠杆菌在每克样品中不得超过100 CFU； - 饮用水：阪崎肠杆菌在每100毫升样品中不得检出。
3.2 环境中阪崎肠杆菌的检测标准根据环境保护标准，阪崎肠杆菌的检测标准如下： - 水质：阪崎肠杆菌在每升水样中不得超过100 CFU； - 空气：阪崎肠杆菌在每立方米空气中不得超过100 CFU； - 土壤：阪崎肠杆菌在每克土壤样品中不得超过1000 CFU。
4. 检测流程4.1 样品采集从食品、饮用水或环境样品中采集足够数量的样品。
使用无菌容器收集，并确保样品处于最正确的保存条件。
4.2 样品处理将采集的样品经过适当的处理，在无菌条件下进行前处理，如制备悬浮液或稀释样品。
