食品检验工之食品饮料中总糖的 测定(还原糖法)

待测样品旳OD540平均值在原则曲线上 查出相应旳糖含量。
朗伯－比尔（Lambert-Beer）定律
朗伯－比尔定律是比色分析旳基本原理， 这个定律是有色溶液对单色光旳吸收程度与 溶液及液层厚度间旳定量关系。此定律是由 朗伯定律和比尔定律归纳而得。
A或D=㏒I0/I
A或D＝光吸收或光密度
I0 ＝入射光强度 I ＝透射光强度
三、试剂和器材
试剂：
DNS试剂 葡萄糖原则溶液 ； 6M HCl；碘－碘化钾溶液； 6M NaOH；0.1% 酚酞指示剂。
材料
藕粉，玉米淀粉
器材
容量瓶,试管，移液管，量 筒，胶头滴管，漏斗
50℃水浴，沸水浴，分光 光度计等。
四、操作环节
1.葡萄糖原则曲线制作 2.还原糖旳提取
藕粉改为称1.0克，50℃水浴20min浸出， 水浴锅中进行 3.总糖旳水解及提取 玉米淀粉测总糖，沸水浴20min酸水解，电 磁炉中进行 4.样品含糖量旳测定
试验三 总糖和还原糖旳测定
——3,5二硝基水杨酸(DNS)法
一、目 旳
掌握还原糖和总糖旳测定原理 掌握分光光度计旳使用
二、原 理
还原糖：指具有自由醛基或酮基旳糖类
单糖: 不能被水解成更小分子旳糖,单糖都是还原糖 葡萄糖, 果糖
寡糖: 最主要旳是双糖：Maltose（麦芽糖 ）,Sucrose（蔗糖） Lactose（乳糖 ） 但Sucrose不是还原糖 多糖: 能水解成多种单糖分子,如淀粉,糖原和纤 维素
样品旳透射比或吸光度值。样品读数三遍，取平均值。 7).使用分光光度计时带测定样品、洗瓶、废液杯、笔和本。
移液器旳使用手法，两档位
吸液
放液
八、思索题
1.比色时为何要设计空白管？

总糖和还原糖的测定实验报告1. 引言总糖是指在食品和饮料中存在的所有糖类的总量，包括单糖、双糖和多糖。

而还原糖是其中可被还原剂还原为对应醛或酮的糖类的量。

测定总糖和还原糖的含量对食品工业以及食品安全监管有着重要的意义。

本实验旨在探究测定总糖和还原糖的方法，并对不同样品中的总糖和还原糖进行定量分析。

2. 实验步骤2.1 样品准备1.收集不同类型的食品样品，如果酱、蜂蜜、糖果等。

2.将收集到的样品进行标记，记录样品名称和来源。

2.2 总糖测定方法1.取适量的样品，加入适量的去离子水，使样品溶解。

2.将溶解后的样品经过滤，得到无悬浮物的溶液。

3.取一定体积的溶液，加入邻苯二甲酸溶液，制备还原糖试剂。

4.将还原糖试剂与溶液混合，加入含硫酸的试剂，进行硫酸铜法测定。

5.根据产生的蓝色沉淀的量，用标准曲线确定总糖的含量。

2.3 还原糖测定方法1.取适量的样品，加入适量的去离子水，使样品溶解。

2.将溶解后的样品经过滤，得到无悬浮物的溶液。

3.取一定体积的溶液，加入费林试剂，制备还原糖试剂。

4.将还原糖试剂与溶液混合，加热反应一段时间。

5.根据试剂的吸收光谱，用比色法测定还原糖的含量。

3. 结果与讨论3.1 总糖测定结果样品A：果酱样品B：蜂蜜样品C：糖果样品总糖含量（g/100g）样品A 50样品B 70样品C 803.2 还原糖测定结果样品A：果酱样品B：蜂蜜样品C：糖果样品还原糖含量（g/100g）样品A 30样品B 40样品C 50根据测定结果可以看出，不同样品的总糖和还原糖含量存在差异。

糖果样品的总糖和还原糖含量均高于果酱和蜂蜜样品。

这可能是因为糖果中添加了大量的糖分，而果酱和蜂蜜中含有的糖分相对较少。

4. 结论本实验使用了硫酸铜法和比色法测定了不同样品中的总糖和还原糖的含量，并得出了相应的测定结果。

通过此实验，我们可以了解食品样品中总糖和还原糖的测定方法，并获得样品中总糖和还原糖的定量分析结果。

5. 延伸应用1.此方法可以应用于食品行业的质量控制，帮助饮料、甜品等生产企业控制产品中糖分的含量。

还原糖的测定方法还原糖和总糖的测定还原糖和总糖的测定3,5-二硝基水杨酸比色法一、目的掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。

二、原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。

利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。

还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关1系，利用分光光度计，在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。

由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

三、实验材料、主要仪器和试剂1( 实验材料小麦面粉;精密pH 试纸。

2( 主要仪器(1)具塞玻璃刻度试管:20mL×11(2)大离心管:50mL×2(3)烧杯:100mL×1(4)三角瓶:100mL×1(5)容量瓶:100mL×3(6)刻度吸管:1mL×1;2mL×2;10mL×1(7)恒温水浴锅(8)沸水浴(9)离心机(10)扭力天平(11)分光光度计3( 试剂(1)1mg/mL 葡萄糖标准液2准确称取80?烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100mL 容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，混匀，4?冰箱中保存备用。

(2)3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂将6.3g DNS 和262mL 2M NaOH 溶液，加到500mL 含有185g 酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g 结晶酚和5g 亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。

还原糖和总糖的测定实验报告还原糖和总糖的测定实验报告导言：糖是我们日常生活中常见的食品成分之一，它不仅为我们提供能量，还赋予食物甜味。

然而，不同类型的糖对人体的影响是不同的。

为了更好地了解糖的含量和类型，我们进行了还原糖和总糖的测定实验。

实验目的：1. 学习使用化学方法测定食品中的还原糖和总糖含量；2. 了解不同类型糖的含量及其对人体的影响。

实验原理：还原糖是指能够还原氧化剂的糖类物质，如葡萄糖、果糖等。

总糖则包括还原糖和非还原糖，如蔗糖、乳糖等。

在实验中，我们将使用菲林试剂对还原糖进行定量分析，使用硫酸对总糖进行水解，然后再用菲林试剂进行测定。

实验步骤：1. 准备食品样品：我们选择了三种常见的食品作为样品，分别是苹果、饼干和牛奶；2. 进行还原糖测定：将样品研磨成粉末状，称取适量样品，加入适量的菲林试剂，加热反应，待溶液冷却后，用水稀释至一定体积，通过分光光度计测定溶液的吸光度，计算还原糖的含量；3. 进行总糖测定：将样品称取适量，加入适量的硫酸，用水稀释至一定体积，加热水浴进行水解，待溶液冷却后，用菲林试剂进行测定，计算总糖的含量。

实验结果：经过实验测定，我们得到了三种食品样品中还原糖和总糖的含量数据。

苹果中还原糖含量为X%，总糖含量为X%；饼干中还原糖含量为X%，总糖含量为X%；牛奶中还原糖含量为X%，总糖含量为X%。

讨论与分析：通过对实验结果的分析，我们可以得出以下结论：1. 不同食品中的糖含量差异较大，苹果中的糖含量较高，而饼干和牛奶中的糖含量较低；2. 还原糖和总糖的含量也存在差异，苹果中的还原糖含量较高，而饼干和牛奶中的还原糖含量较低；3. 总糖的含量比还原糖的含量高，这是因为总糖包括了还原糖和非还原糖的含量。

结论：通过本次实验，我们成功测定了苹果、饼干和牛奶中的还原糖和总糖的含量。

实验结果表明，不同食品中的糖含量存在差异，而总糖的含量比还原糖的含量更高。

这些数据对我们了解食品的营养成分和糖的类型具有重要意义。

总糖量测定1.检验项目糕点中总糖量的测定2.检验目的：碳水化合物，亦称糖类或糖，是由碳、氢、氧三种元素组成一亦大类有机化合物，是人体必需的重要营养之一，食品中的糖除具有还原性的单糖、双糖外，所采用的糖一般都是优质蔗糖，属非还原糖，在生产过程中蔗糖被水解后部分生成还原糖。

因此，在食品的生产，常规分析及成品质量中，通常都有“总糖”这一指标，即测定食品中还原糖分与蔗糖分的总量。

还原糖与蔗糖分总量俗称总糖量，蔗糖经水解生成等量葡萄糖的混合物，俗称转化糖。

3.检验原理样品经除去蛋白质后，其中蔗糖经酸水解转化为还原糖。

在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液，还原糖将二甲酮还原为氧化亚铜。

以次甲基蓝为指示剂，当达到终点时，稍过量的还原糖立即把蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝，根据样品液的消耗的体积，计算还原糖含量。

4.检验依据乳及乳制品P252-255 GB/5009.8-20035.检验条件室温下进行。

1.碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4.5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水并定容至1000ml。

2.碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH，溶于水，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，储存于橡胶塞玻璃瓶中。

3.乙酸锌溶液:称取21.9g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加入溶解并稀释至100ml。

4.亚铁氰化钾（10.6%）：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100ml。

5.盐酸（1:1）。

6.甲基红乙醇溶液（1g/L）。

7.NaOH（200g/L）。

8.葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g。

9.盐酸。

10.经98℃-100℃干燥至恒重的葡萄糖，加水溶解后，加入5ml盐酸，并以水并稀释至1000ml，此溶液1ml相当于1mg葡萄糖。

11.仪器：锥型瓶150ml 3只容量瓶250ml 1只容量瓶100ml 1只胖度吸管5ml 2支刻度吸管5ml 4支电炉500w 1台水浴锅1台6.操作步骤1.样品的处理：称取2.5-5.0g以粉粹的样品，置于250ml容量瓶中，加50ml水，摇匀后慢慢加入5ml 乙酸锌溶液及5ml亚铁氰化钾（10.6%），加水至刻度，混匀，静止30min,用干燥滤纸过滤，滤液备用。

总糖和还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在通过测定总糖和还原糖的含量，了解不同食品中糖分的含量及其对人体健康的影响。

二、实验原理总糖是指食品中所有可溶性糖类的总和，包括单糖、双糖和多糖。

还原糖是指具有还原性的单糖和部分双糖。

测定总糖和还原糖的方法主要有蒸发法、显色法、高效液相色谱法等，本实验采用显色法测定。

三、实验步骤1.样品制备：将待测样品粉碎并过筛，取2g样品加入100ml锥形瓶中，加入40ml去离子水，振荡混合均匀。

2.制备还原剂：称取0.5g氢氧化钠加入50ml去离子水中，加温搅拌至完全溶解。

3.蒸发：将步骤1中制备好的样品放入沸水浴中加温蒸发至干固。

4.水解：将步骤3中得到的干固样品加入10ml 0.5mol/L盐酸中，加温水解30min。

5.冷却：将步骤4中的样品冷却至室温，加入50ml去离子水稀释。

6.显色：取10ml样品溶液加入试管中，加入2ml酚酞指示剂溶液和2ml还原剂溶液，振荡混合均匀后静置10min。

7.测定：用1mol/L氢氧化钠滴定至颜色变为淡粉色，记录滴定体积V1。

同时进行空白试验并记录滴定体积V0。

8.计算：总糖含量=（V1-V0）×0.01×1000/2g（mg/g），还原糖含量=（V1-V0）×0.01×1000/2g（mg/g）。

四、实验结果本次实验测得样品A的总糖含量为24.5mg/g，还原糖含量为8.7mg/g；样品B的总糖含量为18.3mg/g，还原糖含量为6.9mg/g；样品C的总糖含量为31.7mg/g，还原糖含量为12.4mg/g。

五、实验分析通过本次实验可以发现不同食品中的总糖和还原糖含量存在较大差异。

其中，样品C的总糖和还原糖含量均较高，而样品B的含量最低。

这提示我们在饮食中应该注意控制糖分的摄入，避免过多摄入对身体健康造成影响。

六、实验感想本次实验通过测定总糖和还原糖含量，让我对不同食品中糖分的含量有了更深入的了解。

总糖和还原糖的测定实验报告一、实验目的1、掌握总糖和还原糖含量测定的基本原理和方法。

2、熟练使用分光光度计进行比色分析。

3、培养实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理1、总糖的测定总糖是指样品中所有能够还原斐林试剂的糖类物质的总和，包括还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖等）和非还原糖（如蔗糖）。

在本实验中，首先将非还原糖通过酸水解转化为还原糖，然后利用还原糖与斐林试剂反应生成氧化亚铜沉淀的特性，通过比色法测定总糖的含量。

2、还原糖的测定还原糖能够直接与斐林试剂反应，生成氧化亚铜沉淀。

在碱性条件下，氧化亚铜沉淀与酒石酸钾钠反应，形成蓝色的络合物。

通过分光光度计测量溶液在特定波长下的吸光度，与标准曲线对比，即可计算出还原糖的含量。

三、实验材料与仪器1、实验材料（1）葡萄糖标准溶液（1mg/mL）：准确称取 100mg 无水葡萄糖，用蒸馏水溶解并定容至 100mL。

（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取 63g DNS 和 262mL2mol/L NaOH 溶液，加到500mL 含有185g 酒石酸钾钠的热水溶液中，再加 5g 结晶酚和 5g 亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。

（3）6mol/L HCl 溶液。

（4）10% NaOH 溶液。

（5）待测样品：如水果汁、蔬菜汁等。

2、实验仪器（1）分光光度计。

（2）恒温水浴锅。

（3）电子天平。

（4）移液器。

（5）容量瓶（100mL、500mL）。

（6）具塞刻度试管（25mL）。

四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的绘制（1）分别吸取 00、02、04、06、08、10、12mL 葡萄糖标准溶液（1mg/mL）于 25mL 具塞刻度试管中，用蒸馏水补足至 20mL。

（2）向各试管中加入 20mL DNS 试剂，摇匀后在沸水浴中加热5min，取出后立即用冷水冷却至室温。

（3）用蒸馏水定容至 25mL，摇匀。

（4）以空白管（00mL 葡萄糖标准溶液）为参比，在 540nm 波长下测定各管溶液的吸光度。

实验二还原糖及总糖的测定（3、5——二硝水杨酸比色法）目的和要求：1．掌握3、5-二硝基水杨酸比色法测定糖量的原理及方法。

2．熟悉722分光光度计基本工作原理和操作方法。

原理：各种单糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。

利用溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，再用酸水解法使没有还原性的双糖和多糖彻底水解成有还原性的单糖。

在碱性条件下，还原糖与3、5—二硝基水杨酸共热，3、5—二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色物质），还原糖则被氧化成糖酸及其它物质。

在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度成一定的比例关系，可在分光光度计540nm波长测定棕红色物质的吸光值。

查标准曲线计算，便可分别求出样品中还原糖和总糖的含量。

多糖水解时，在单糖残基上加了一分子水，因而在计算中须扣除已加入的水量，测得所得到的总糖量乘以0.9即为实际的总糖量。

该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰较少。

试剂和材料：1．试剂（1）1mg/ml葡萄糖标准液：准确称取100ml分析纯葡萄糖（预先在105℃烘至恒重），置于小烧杯中，用少量蒸馏水溶解后，定量转移到100ml容量瓶中，以蒸馏水定容到刻度，摇匀，冰箱中保存备用。

（2）3、5—二硝基水杨酸试剂（又称DNS试剂）甲液——溶解6.9g结晶酚（苯酚）于15.2ml 10%NaOH中，并稀释至69ml，在此溶液中加入6.9g亚硫酸氢钠。

乙液——称取22.5g酒石酸钾钠，加到300ml 10% NaOH中，再加入880ml 1%的3、5—二硝基水杨酸溶液。

将甲液和乙液相混合即得黄色试剂，贮于棕色试剂瓶中，放置7—10天使用。

（3）碘—碘化钾溶液（碘试剂）：称取5g碘和10g碘化钾，研匀后溶于100ml蒸馏水中。

（4）酚酞指示剂：称取0.1g酚酞溶于70%乙醇中。

（5）6 mol·L-1 HCl（6）6 mol·L-1NaOH（7）面粉2．器材比色管、离心管、量筒、三角瓶、容量瓶、刻度吸管、玻璃漏斗、滤纸、白瓷板、电热恒温水浴槽、离心机、天平、分光光度计。

食品中转化糖（总糖）、还原糖的测定1安全性评估谨防试剂灼伤：加入碱性酒石酸铜甲乙液、20%氢氧化钠和2%盐酸试剂时，需佩戴一次性乳胶手套。

谨防玻璃割伤：使用前检查玻璃仪器外观完好无损，使用时注意轻拿轻放，清洗时，需佩戴防割手套。

谨防高温烫伤：滴定时，调节滴定管滴定速度的手需佩戴涂脂手套/一次性乳胶手套，且不裸露手腕皮肤，双手不碰及电陶炉表面。

2 目的规范食品中转化糖（总糖）、还原糖的检测流程，确保检测结果的准确性。

3 范围适用于各类食品中转化糖（总糖）、还原糖的测定。

4 依据参照GB 5009.7 - 2016食品安全国家标准食品中还原糖的测定、GB 5009.8 - 2016食品安全国家标准食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定。

5 检测原理还原糖（直接滴定法）：试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以亚甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液（用葡萄糖标准溶液标定），根据样品液消耗体积计算还原糖含量。

转化糖（总糖）（酸水解-莱茵-埃农氏法）：试样经除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖，再按还原糖测定，根据样品液消耗体积计算转化糖（总糖）含量。

注：①为消除氧化亚铜沉淀对滴定终点观察的干扰，在碱性酒石酸铜乙液中加入少量亚铁氰化钾，使之与Cu2O生成可溶性的无色络合物，而不再析出红色沉淀，其反应如下：Cu2O↓+K4Fe(CN)6+H2O=K2Cu2Fe(CN)6+2KOH②碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。

6 试剂和仪器：实验室三级用水6.1 试剂2 %盐酸溶液，20 %氢氧化钠溶液，碱性酒石酸铜溶液：碱性酒石酸铜甲液（以下简称A 液）（硫酸铜+亚甲基蓝）+碱性酒石酸铜乙液（以下简称B液）（酒石酸钾钠+氢氧化钠+亚铁氰化钾），乙酸锌溶液（219 g/L），亚铁氰化钾溶液（106 g/L），葡萄糖标准溶液。

实验一还原糖和总糖含量的测定一、实验目的1、了解还原糖和总糖含量的测定原理，熟悉实验步骤。

2、掌握还原糖和总糖含量的测定方法。

二、实验项目及所用仪器1、还原糖：Benedict试剂，烧杯，伏安电极，示波器，旋涡振荡仪；2、总糖：滤纸、热板、氧化棉芯，旋涡振荡仪。

三、实验原理1、还原糖：Benedict试剂由碳酸锰盐溶液、碳酸铵溶液、氯化钠溶液和抗上皮染料橙Ⅲ组成。

当还原糖作用于Benedict试剂时，会与其中的锰离子发生反应，生成蓝色配体，从而使抗上皮染料橙Ⅲ发生变色；2、总糖：将样品与氧化棉芯一起置于热板中，加热到900℃时，碳水化合物在此温度条件下完全分解为糖和水，糖与热板表面发生热反应而分解，引起氧化棉芯之上有显著黑色浓缩形成，即糖皿现象，根据糖皿质量来推算样品中碳水化合物的质量。

四、实验步骤1、还原糖测定：（1）将1ml Benedict溶液放至烧杯中；（2）向烧杯中加入1ml样品液体，根据不同液体不同加入2-3滴 (液体较稠时) 或1-2滴 (液体较洁时) 酸碱度调节液；（3）将伏安电极组件放入烧杯中，并选取示波器连接；（4）加热26℃下水浴加热，取示波器时加热过程中的电势；（5）检测峰面上的电势，来比较是否有变色；（6）如果有变色，就用旋涡振荡仪对发生变色的液体测定样品含有的还原糖含量。

（1）将样品5ml液体流入滤纸中，滤取液体；（2）将滤取的液体均匀的淋洒在氧化棉芯之上，并将其置于热板之上；（3）将热板加热，观察过程中糖皿现象的变化，双环现象表示反应完成；五、结果计算还原糖：检测变色后用旋涡振荡仪测定吸光度值，用标准曲线求出浓度；总糖：使用朱诺重量比法称取峰面上的焦灰，根据标准曲线求出浓度，以重量比计算样品中碳水合物的含量。

六、安全措施1、食品分析实验中，需要遵守实验室安全规章制度，具体包括：实验前应安全检查仪器，按要求穿防护服、佩戴护目镜，使用专用工具等；2、使用热源时，需要注意：电源线耐热、工作在室内，不能离开，保持室内通风；3、使用化学试剂时，应具备良好的操作习惯，佩戴护手镯、护目镜，禁止吞咽及外用，实验结束后将试剂放回原位，实验结束后要做好清洗工作。

总糖和还原糖的测定实验报告实验目的，通过对食品中总糖和还原糖的测定，了解食品中糖的含量，为食品质量的控制提供依据。

实验原理，总糖是指食品中所有可被酶解的糖的总和，包括还原糖和非还原糖。

还原糖是指具有还原性的糖，如葡萄糖、果糖等。

本实验采用菲林试剂法测定总糖含量，采用费林试剂还原糖法测定还原糖含量。

实验仪器，分光光度计、恒温水浴器、移液器、比色皿等。

实验步骤：1. 样品制备，将食品样品加入适量蒸馏水中，搅拌均匀后，过滤得到样品溶液。

2. 总糖测定，取一定量样品溶液，加入菲林试剂，放入恒温水浴器中加热，使其发生显色反应。

待溶液冷却至室温后，用分光光度计测定吸光度，计算出总糖含量。

3. 还原糖测定，取一定量样品溶液，加入费林试剂，放入恒温水浴器中加热，使其发生显色反应。

待溶液冷却至室温后，用分光光度计测定吸光度，计算出还原糖含量。

实验结果：经过实验测定，样品A总糖含量为10g/100g，还原糖含量为8g/100g；样品B总糖含量为15g/100g，还原糖含量为12g/100g。

实验结论：通过本次实验，我们成功测定了食品样品中的总糖和还原糖含量。

可以看出，样品B的总糖和还原糖含量均高于样品A，说明样品B中的糖分含量较高。

这对于食品生产企业来说，可以根据实验结果进行产品质量的控制和调整，确保产品符合标准。

总结：本实验通过菲林试剂法和费林试剂还原糖法测定了食品样品中的总糖和还原糖含量，为食品质量控制提供了重要依据。

同时，本实验还展示了分光光度计在食品分析中的重要应用，为食品科学研究提供了参考。

通过本次实验，我们对总糖和还原糖的测定方法有了更深入的了解，也为今后的实验研究提供了宝贵的经验。

希望在今后的实验中能够继续努力，不断提高实验技能，为科学研究贡献自己的力量。

还原糖和总糖的测定实验报告一、实验目的1、掌握还原糖和总糖的测定原理和方法。

2、学会使用分光光度计进行定量分析。

3、熟悉实验操作过程，提高实验技能和数据处理能力。

二、实验原理1、还原糖的测定还原糖含有游离的醛基或酮基，在碱性条件下，能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀，而斐林试剂是由质量浓度为 01g/mL 的NaOH 溶液和质量浓度为 005g/mL 的 CuSO₄溶液混合而成。

产生的Cu₂O 沉淀的量与还原糖的含量成正比。

通过用标准葡萄糖溶液标定斐林试剂，再用标定后的斐林试剂测定样品中的还原糖含量。

2、总糖的测定总糖包括还原糖和非还原糖。

先将非还原糖通过酸水解的方法转化为还原糖，再用斐林试剂法测定总糖含量。

水解后测定的总还原糖量减去水解前样品中还原糖的含量，即可得到样品中非还原糖的含量。

三、实验材料与仪器1、材料苹果、葡萄糖标准溶液（1mg/mL）、3mol/L HCl 溶液、10% NaOH 溶液、斐林试剂甲液（质量浓度为 01g/mL 的 NaOH 溶液）、斐林试剂乙液（质量浓度为 005g/mL 的 CuSO₄溶液）。

2、仪器电子天平、恒温水浴锅、容量瓶（100mL、500mL）、移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）、锥形瓶（250mL）、碱式滴定管、分光光度计。

四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的绘制（1）取 6 支 25mL 具塞刻度试管，编号 0、1、2、3、4、5，分别加入 0、02、04、06、08、10mL 葡萄糖标准溶液。

（2）向各试管中分别加入蒸馏水，使总体积均为 10mL。

（3）在各试管中分别加入 2mL 斐林试剂甲液，摇匀，再加入 2mL 斐林试剂乙液，摇匀。

（4）将试管置于沸水浴中加热 2min，取出后用流水冷却至室温。

（5）以 0 号试管为空白对照，在 590nm 波长下，用分光光度计测定各试管中溶液的吸光度值。

（6）以葡萄糖含量（mg）为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。

总糖测定的原理和方法一、糕点、糖果中还原糖的测定1、直接滴定法1）原理：样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定经标定的碱性酒石酸铜溶液，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。

以亚甲基蓝为指示剂，在终点稍过量的还原糖将蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝，依据试样所消耗的体积计算还原糖的含量。

直接滴定法已经过多次改进，只要严格遵守试验条件，分析结果的精确度和重现性是能够满意定量分析的要求。

2）试剂①费林氏剂甲液：称取15g硫酸铜（CuSO〔（1000mv〕＝m二、糕点、糖果中总糖的测定测定总糖通常以还原糖的测定方法为基础，将食品中的非还原性双糖，经酸水解成还原性单糖，再按还原糖的测定法测定，测出以转化糖计的总糖量。

若需要单纯测定食品中的蔗糖量，可分别测定样品水解前的还原糖量及水解后的还原糖量，两者之差再乘以校正系数0.95即为蔗糖量，即1g转化糖量相当于0.95g蔗糖量。

在食品加工生产过程中，也常用相对密度法、折光法等简易的物理方法测定总糖量。

1、原理样品除去蛋白质后，加入稀HCl，在加热条件下使蔗糖水解转化为还原糖，再以直接滴定法或高锰酸钾法测定。

2、仪器1）恒温水浴箱2）其他仪器同还原糖的测定3、试剂1）6mol/LHCl溶液2）甲基红指示剂：称取0.1g甲基红溶于100ml60%（体积分数）乙醇中3）200g/LNaOH溶液4）转化糖标准溶液：精确称取1.0526g纯蔗糖用100ml水溶解，置于具塞三角瓶中加5mlHCl（1：1），在68~70℃水浴中加热15min。

冷却至室温后定容至1000ml。

此溶液每ml标准溶液相当于1.0mg转化糖。

5）其他试剂同还原糖的测定4、测定方法1）样品处理：按还原糖测定法中的方法进行。

2）样品中总糖量的测定：吸取50ml样品处理液置于100ml容量瓶中，加6mol/LHCl溶液5ml，在68~70℃水浴中加热15min，冷却后加2滴甲基红指示剂，用200g/LNaOH溶液中和至中性，加水至刻度线，混匀，按还原糖测定法中直接滴定法或高锰酸钾法进行测定。

饮料中总糖的测定测定总糖通常以还原糖的测定方法为基础，将食品中的非还原性双糖，经酸水解成还原性单糖，再按还原糖的测定法测定，测出以转化糖的总糖量。

若需要单纯测定食品中的蔗糖量，可分别测定样品水解前的还原糖量及水接后的还原糖量，两者的差再乘以校正系数0.95就是蔗糖量，即1g转化糖量相当于0.95g蔗糖量。

1.原理样品除去蛋白质后，加入稀盐酸，在加热条件下使蔗糖水解转化为还原糖，再以直接滴定法或高锰酸钾法测定。

还原糖测定原理是根据还原糖可以还原碱性酒石酸铜，生成氧化亚铜这一特性来决定的。

碱性酒石酸铜溶液时有甲乙液混合而成。

试剂甲为硫酸铜溶液，试剂乙为氢氧化钠与酒石酸钾钠的混合液。

甲乙两中溶液的混合液与还原糖作用，在加热滴定时产生红色氧化亚铜，滴定终点可以借助次甲基兰做指示剂。

次甲基兰在碱性溶液中（加热至沸腾）可被还原成无色。

2.仪器！）恒温水浴箱2）其他仪器同还原糖的测定3试剂1）6mol/L盐酸溶液2）甲基红指示剂：称取0.1g甲基红溶于100Ml60%(体积分数)乙醇中。

3）200g/L氢氧化钠溶液4）1mg/ml葡萄糖标准溶液：精密称取1.0000 g经过99℃士l℃干燥至恒量的纯葡萄糖，加水溶后移入1000 mL容量瓶中，加入5 mL盐酸 (防止微生物生长)，用水稀释到1000 mL。

5）碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000毫升6）碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000毫升，贮存于橡胶塞玻璃瓶中。

7）乙酸锌溶液：称取乙酸锌结晶21.9g，加3毫升冰醋酸，加水溶解至100毫升8）106g/L亚铁氰化钾溶液4测定方法（1）样品处理(对于无蛋白质的饮料此处理步骤可以省略)吸取果汁饮料样品10毫升于250毫升容量瓶中，加少量水摇匀，摇匀后加入5毫升乙酸锌溶液，混匀后放置2min,再加入5毫升亚铁氰化钾溶液，震摇，加水定容并摇匀后静置30min，用干滤纸过滤，弃去初滤液，过滤液备用.（2）标定碱性酒石酸铜溶液：标定碱性酒石酸铜溶液：准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5 mL于锥形瓶中，加水l0 mL和玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9 mL葡萄糖标准溶液，加热使其在2min内沸腾 (严格控制)，趁沸以先快后慢的速度滴加样品溶液，滴定时始终保持溶液呈沸腾状态，待溶液蓝色变浅，以0.5滴/s的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。

饮料中总糖的测定总糖的测定一、实验原理样品经处理去除蛋白质等杂质后，加入盐酸，在加热条件下使蔗糖水解为还原性单糖以直接滴定法测定水解后样品中的还原糖总量。

二、试剂6mol/L HCL、20% NaOH、甲基红指示剂（称取0.1g甲基红，用60%乙醇溶液溶解定容至100ml。

）、碱性酒石酸铜甲液（称取15g硫酸铜及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000ml）、碱性酒石酸铜乙液（称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH，溶于水中再加4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，储存与橡皮塞玻璃瓶中。

）、0.1%葡萄糖标液（精密称取1.000g经过99℃±1℃干燥至恒重的分析纯葡萄糖，加水溶解后移入1000ml容量瓶中，加入5mlHCL，用水稀释至1000ml。

）三、实验步骤1、标定碱性酒石酸溶液⒈预测准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中，加水10ml 和玻璃珠两粒，从滴定管滴加约9ml葡萄糖标液，加热使其在两分钟内沸腾，维持沸腾两分钟，趁沸腾以以先快后慢的速度滴加样品溶液，测定时始终保持沸腾，待溶液蓝色变浅，以0.5滴/min的速度继续滴加葡萄糖标液，直至溶液蓝色退去为终点。

⒉精密滴定准去吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中，加水10ml 和玻璃珠两粒，从滴定管滴加葡萄糖标液，其用量比预测定少约0.5~1ml，加热使其在两分钟内沸腾，维持沸腾两分钟，趁沸腾逐滴加入葡萄糖标液，直至溶液蓝色退去为终点。

2、测定果珍中总糖⒈样品预处理吸取饮料5ml，后转入250ml容量瓶，向其中加入5ml6mol/LHCL，放入70℃水浴中水解15min，取出用20%的NaOH调节PH至中性，用甲基红做指示剂（颜色由红至黄），定容备用，测定时根据浓度做适当稀释。

⒉测定①预测准去吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中，加水10ml 和玻璃珠两粒，从滴定管滴加约5ml上述转化液，加热使其在两分钟内沸腾，，维持沸腾两分钟，趁沸腾以以先快后慢的速度滴加样品溶液，测定时始终保持沸腾，待溶液蓝色变浅，以0.5滴/min的速度继续滴加转化液，直至溶液蓝色退去为终点。

饮料中总糖‎的测定测定总糖通‎常以还原糖‎的测定方法‎为基础，将食品中的‎非还原性双‎糖，经酸水解成‎还原性单糖‎，再按还原糖‎的测定法测‎定，测出以转化‎糖的总糖量‎。

若需要单纯‎测定食品中‎的蔗糖量，可分别测定‎样品水解前‎的还原糖量‎及水接后的‎还原糖量，两者的差再‎乘以校正系‎数0.95就是蔗‎糖量，即1g转化‎糖量相当于‎0.95g蔗糖‎量。

1.原理样品除去蛋‎白质后，加入稀盐酸‎，在加热条件‎下使蔗糖水‎解转化为还‎原糖，再以直接滴‎定法或高锰‎酸钾法测定‎。

还原糖测定‎原理是根据‎还原糖可以‎还原碱性酒‎石酸铜，生成氧化亚‎铜这一特性‎来决定的。

碱性酒石酸‎铜溶液时有‎甲乙液混合‎而成。

试剂甲为硫‎酸铜溶液，试剂乙为氢‎氧化钠与酒‎石酸钾钠的‎混合液。

甲乙两中溶‎液的混合液‎与还原糖作‎用，在加热滴定‎时产生红色‎氧化亚铜，滴定终点可‎以借助次甲‎基兰做指示‎剂。

次甲基兰在‎碱性溶液中‎（加热至沸腾‎）可被还原成‎无色。

2.仪器！）恒温水浴箱‎2）其他仪器同‎还原糖的测‎定3试剂1）6mol/L盐酸溶液‎2）甲基红指示‎剂：称取0.1g甲基红‎溶于100‎M l60%(体积分数)乙醇中。

3）200g/L氢氧化钠‎溶液4）水解后的蔗‎糖标准溶液‎配制：(A)称取105‎度烘干至恒‎重的纯蔗糖‎1.0000g‎，用蒸馏水溶‎解，转移入50‎0毫升容量‎瓶中，稀释至刻度‎，摇匀。

此标准液1‎毫升相当于‎纯蔗糖2m‎g.（B）吸取蔗糖标‎准液50毫‎升置于10‎0毫升容量‎瓶中，加6mol‎/L5毫升在‎68---70度水浴‎中加热15‎m i n,冷去后加2‎滴甲基红指‎示剂，用200g ‎/L的氢氧化‎钠中和至中‎性，加水至刻度‎，摇匀，此标准液1‎毫升相当于‎蔗糖1mg‎.5）碱性酒石酸‎铜甲液：称取15g‎硫酸铜及0‎.05g次甲‎基蓝，溶于水中并‎稀释至10‎00毫升6）碱性酒石酸‎铜乙液：称取50g‎酒石酸钾钠‎及75g氢‎氧化钠，溶于水中，再加入4g‎亚铁氰化钾‎，完全溶解后‎，用水稀释至‎1000毫‎升，贮存于橡胶‎塞玻璃瓶中‎。

总糖和还原糖的测定（3,5—二硝基水杨酸法）实验报告前言糖在我们日常生活中随处可见，我们吃的米饭、水果、零食中或多或少都含有一些糖类。

同时，糖也是我们维持机体运动所必不可少的物质，没有了它，就没有了能量的来源。

我们这次便走进实验室探索糖类的奥秘。

本次实验我们将用3,5—二硝基水杨酸法测定总糖和还原糖中的含糖量。

本次实验中，我们除了要掌握还原糖和总糖的测定基本原理还要学习比色法测定还原糖的操作方法以及分光度法测定的原理和方法。

首先，让我们一起来了解一下它们的测定方法吧。

还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。

利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。

还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。

在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。

由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

一、实验目的1、掌握还原糖和总糖的测定的基本原理2、学习比色法测定还原糖的操作方法3、学习分光光度法测定的原理和方法二、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。

利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（还原糖以葡萄糖含量计）。