实验五食品中还原糖得测定
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食品中还原糖的测定--直接滴定法一、实验目的与要求1.学习直接滴定法测定还原糖的原理,并掌握其测定的方法。
2. 掌握蜂蜜中还原糖的测定的操作技能。
3. 学会控制反应条件,掌握提高还原糖测定精密度的方法。
二、原理将等量的碱性酒石酸铜甲液、乙液混合时,立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀,这种沉淀立即与酒石酸钾钠反应,生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
此络合物与还原糖共热时,二价铜即被还原糖还原为一价的氧化亚铜沉淀,氧化亚铜与亚铁氰化钾反应,生成可溶性化合物,达到终点时,稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色,溶液呈浅黄色而指示滴定终点。
根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量,以及测定样品液所消耗的体积,计算还原糖含量。
三、试剂、仪器与样品试剂:除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。
1.碱性酒石酸铜甲液:称取7.5 g硫酸铜(CuSO4·5H2O),及0.025 g次甲基蓝,溶于水中并稀释至500ml。
2.碱性酒石酸铜乙液:称取25 g酒石酸钾钠与37.5 g氢氧化钠,溶于水中,再加入2g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至500ml,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
3.盐酸溶液(1+1):量取50mL盐酸加水稀释至100mL.4.氢氧化钠溶液(40g/L):称取4g氢氧化钠,加水溶解并稀释至100mL。
5.转化糖标准溶液:准确称取1.0526g蔗糖,用100ml水溶解,置具塞三角瓶中,加5ml盐酸(1+1),在68℃-70℃水浴中加热15min,放置至室温,转移到1000ml容量瓶中并定容至1000ml,每毫升标准相当于1.0毫克转化糖。
6.澄清剂:中性醋酸铅:粗称醋酸铅20g,加新煮沸放冷的蒸馏水溶解,再滴加醋酸使溶液澄清,再加水至200ml。
往醋酸铅溶液里加入两滴酚酞指示剂,再用氢氧化钠溶液调至微红。
注意:醋酸铅试液有毒,禁止用手!7.指示剂:次甲基蓝8.样品:蜂蜜。
9.仪器:酸式滴定管,容量瓶,电炉,坩埚钳,150mL锥形瓶,匹配的胶塞等四、操作方法1.样品处理:称取35-40g样品,加50mL水稀释并洗入250mL容量瓶中,摇匀后慢慢加入少量中性醋酸铅溶液,加水至刻度,摇匀,静止30min.用干燥滤纸过滤,弃初滤液,滤液备用。
滴定法还原糖含量测定一、实验目的:1、学习和掌握滴定法测定还原糖含量的原理和方法;2、加深对还原糖的特性和测定方法的理解。
二、实验原理:还原糖是具有还原性的单糖和少量的异构体,在碱性条件下能够将还原剂还原为氧化剂,自身被氧化为相应的酸,色变反应用铜离子与氧化的还原糖生成沉淀,滴定沉淀的含量,即可测定还原糖的含量。
三、实验步骤:1、将样品粉碎成细粉末,取 1-2 g由蒸馏水稀释10倍后摇匀并过滤备用。
2、用蒸馏水润洗紫色过滤棉,收集过滤液和洗涤液。
3、取滤液 10.00 mL,加入 1.00mL Fehling's溶液A 和 1.00mL Fehling's溶液B,放在沸水中加热,不停搅拌,约5min后,还原糖会发生反应并生成一种棕色沉淀。
4、用蒸馏水洗涤收集沉淀,连同过滤棉和洗涤液,用蒸馏水冲洗至洗涤液的体积为20.00mL,加入几滴醋酸作为指示剂。
5、转移到滴定管中,用标准 0.1mol/LNaOH滴定至棕色沉淀消失,取得滴定值(V)。
6、根据实验公式计算出还原糖的含量,(含量% =vx1000x正碘量(g)/样品重量(g)*100%)四、实验注意事项:1、取样品后样品应粉碎成细粉末,以充分增加其溶解和反应速率。
2、Fehling's溶液A&B混合后容易发生氧化,必须在使用前彻底振摇,如果出现沉淀就不能使用。
3、滴定前一定要冷却至室温。
4、掌握并准确使用橡胶头滴定管,滴定过程中尽量不要挥霍溶液,避免误差。
五、实验测定数据及处理:还原糖含量公式还原糖含量%=(V*0.1*60.08*1000*100)/m其中,0.1为NaOH标准溶液浓度(M),60.08为还原糖摩尔质量,1000为体积单位的转换(溶液为毫升,要转化为升),100为计算单位的转换(要转化为百分数)。
本实验样品用量为2g,测得滴定值为(所用NaOH溶液为0.1mol/L)一二三平均滴定体积 (mL) 26.15 25.90 26.05 26.03平均滴定体积(V)=26.03 mL六、实验结论:本实验利用滴定法对糖含量进行测定,实验结果显示,样品中还原糖含量为0.7865%,满足实验要求。
1. 了解还原糖的性质和鉴定方法。
2. 掌握使用斐林试剂检测还原糖的原理和操作步骤。
3. 学习通过比色法计算还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类,它们能够还原斐林试剂中的Cu²⁺离子为Cu⁺离子,生成砖红色的Cu₂O沉淀。
斐林试剂由斐林A液(含CuSO₄的碱性溶液)和斐林B液(含NaOH的碱性溶液)组成,两种试剂混合后,Cu²⁺离子与还原糖反应生成Cu₂O沉淀。
三、实验材料与试剂1. 试剂:- 斐林A液:称取硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)0.1g,溶于100mL水中,加入5mL浓NaOH溶液。
- 斐林B液:称取NaOH 2g,溶于100mL水中。
- 标准葡萄糖溶液:准确称取葡萄糖1.0000g,溶于1000mL水中,配制成1mg/mL的标准溶液。
- 样品溶液:取一定量的待测样品,用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
2. 仪器:- 烧杯- 试管- 滴定管- 移液管- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管1. 准备标准溶液:准确移取1mL标准葡萄糖溶液,加入9mL蒸馏水,配制成0.1mg/mL的标准溶液。
2. 配制斐林试剂:将斐林A液和斐林B液等体积混合,立即使用。
3. 取一支试管,加入2mL样品溶液。
4. 加入2mL斐林试剂,混合均匀。
5. 将试管放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态5分钟。
6. 取出试管,观察沉淀颜色。
7. 重复步骤3-6,制作标准曲线。
8. 根据标准曲线,计算样品溶液中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作:以标准葡萄糖溶液浓度为横坐标,沉淀颜色深浅为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品溶液中还原糖含量的计算:根据样品溶液的浓度和沉淀颜色深浅,在标准曲线上找到对应的还原糖含量。
六、实验讨论1. 实验过程中,斐林试剂需现配现用,以免Cu²⁺离子被还原成Cu⁺离子,影响实验结果。
2. 样品溶液的浓度应控制在一定范围内,以免沉淀颜色过深,影响准确度。
总糖和还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在通过测定总糖和还原糖的含量,了解不同食品中糖分的含量及其对人体健康的影响。
二、实验原理总糖是指食品中所有可溶性糖类的总和,包括单糖、双糖和多糖。
还原糖是指具有还原性的单糖和部分双糖。
测定总糖和还原糖的方法主要有蒸发法、显色法、高效液相色谱法等,本实验采用显色法测定。
三、实验步骤1.样品制备:将待测样品粉碎并过筛,取2g样品加入100ml锥形瓶中,加入40ml去离子水,振荡混合均匀。
2.制备还原剂:称取0.5g氢氧化钠加入50ml去离子水中,加温搅拌至完全溶解。
3.蒸发:将步骤1中制备好的样品放入沸水浴中加温蒸发至干固。
4.水解:将步骤3中得到的干固样品加入10ml 0.5mol/L盐酸中,加温水解30min。
5.冷却:将步骤4中的样品冷却至室温,加入50ml去离子水稀释。
6.显色:取10ml样品溶液加入试管中,加入2ml酚酞指示剂溶液和2ml还原剂溶液,振荡混合均匀后静置10min。
7.测定:用1mol/L氢氧化钠滴定至颜色变为淡粉色,记录滴定体积V1。
同时进行空白试验并记录滴定体积V0。
8.计算:总糖含量=(V1-V0)×0.01×1000/2g(mg/g),还原糖含量=(V1-V0)×0.01×1000/2g(mg/g)。
四、实验结果本次实验测得样品A的总糖含量为24.5mg/g,还原糖含量为8.7mg/g;样品B的总糖含量为18.3mg/g,还原糖含量为6.9mg/g;样品C的总糖含量为31.7mg/g,还原糖含量为12.4mg/g。
五、实验分析通过本次实验可以发现不同食品中的总糖和还原糖含量存在较大差异。
其中,样品C的总糖和还原糖含量均较高,而样品B的含量最低。
这提示我们在饮食中应该注意控制糖分的摄入,避免过多摄入对身体健康造成影响。
六、实验感想本次实验通过测定总糖和还原糖含量,让我对不同食品中糖分的含量有了更深入的了解。
还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]实验一糖类的性质实验〔一〕糖类的颜色反响一、实验目的1、了解糖类某些颜色反响的原理。
2、学习应用糖的颜色反响鉴别糖类的方法。
二、颜色反响〔一〕α-萘酚反响1、原理糖在浓无机酸〔硫酸、盐酸〕作用下,脱水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反响均呈阳性,故此反响不是糖类的特异反响。
2、器材试管及试管架,滴管3、试剂莫氏试剂:5%α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g,溶于95%酒精中,总体积达100mL,贮于棕色瓶内。
用前配制。
1%葡萄糖溶液100mL1%果糖溶液100mL1%蔗糖溶液100mL1%淀粉溶液100mL0.1%糠醛溶液100mL浓硫酸500mL4、实验操作取5支试管,分别参加1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1mL。
再向5支试管中各参加2滴莫氏试剂,充分混合。
倾斜试管,小心地沿试管壁参加浓硫酸1mL,慢慢立起试管,切勿摇动。
观察记录各管颜色。
〔二〕间苯二酚反响1、原理在酸作用下,酮醣脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反响是酮醣的特异反响。
醛糖在同样条件下呈色反响缓慢,只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时,才呈微弱的阳性反响。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反响。
2、器材试管及试管架,滴管3、试剂塞氏试剂:0.05%间苯二酚-盐酸溶液1000mL,称取间苯二酚0.05g 溶于30mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀至1000mL。
1%葡萄糖溶液100mL1%果糖溶液100mL1%蔗糖溶液100mL4、实验操作取3试管,分别参加1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5mL。
再向3支试管中各参加塞氏试剂5mL,充分混合。
将试管同时放入沸水浴中,观察记录各管颜色。
(二)糖类的复原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的复原性质;2、学习常用的鉴定糖类复原性的方法。
1. 了解还原糖的概念及其检测方法。
2. 掌握马铃薯中还原糖的测定方法。
3. 分析马铃薯中还原糖的含量及其影响因素。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,如葡萄糖、果糖等。
还原糖在碱性条件下,能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
本实验采用斐林试剂法测定马铃薯中还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:马铃薯、蒸馏水、斐林试剂、氢氧化钠、硫酸铜、移液管、烧杯、试管、酒精灯等。
2. 实验仪器:电子天平、恒温箱、试管架、滴定管等。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将氢氧化钠和硫酸铜溶解于蒸馏水中,配制成斐林试剂。
2. 制备马铃薯提取液:称取一定量的马铃薯,用蒸馏水研磨成匀浆,过滤得到马铃薯提取液。
3. 测定还原糖含量:取两支试管,分别标记为A和B。
A管:向A管中加入1ml马铃薯提取液,再加入2ml斐林试剂,混合均匀,放入水浴锅中加热至沸腾,观察颜色变化。
B管:向B管中加入1ml蒸馏水,再加入2ml斐林试剂,混合均匀,放入水浴锅中加热至沸腾,观察颜色变化。
4. 比较A管和B管颜色变化,记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 实验结果:A管产生砖红色沉淀,B管无明显变化。
2. 分析:A管中的马铃薯提取液中含有还原糖,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀;B管中的蒸馏水不含还原糖,与斐林试剂反应无明显变化。
通过本实验,我们成功测定了马铃薯中还原糖的含量。
实验结果表明,马铃薯中确实含有还原糖,这与马铃薯的口感有关。
在实验过程中,我们还发现,马铃薯中还原糖的含量受到提取方法、温度等因素的影响。
七、实验讨论1. 实验过程中,马铃薯提取液的制备对还原糖的测定结果有一定影响。
提取方法不当可能导致还原糖含量测定不准确。
2. 实验过程中,温度对还原糖的测定结果也有一定影响。
温度过高或过低可能导致还原糖含量测定不准确。
3. 本实验仅对马铃薯中还原糖含量进行了测定,未对其他糖类成分进行测定。
在今后的实验中,可以进一步研究马铃薯中其他糖类成分的含量及其影响因素。
一、实验目的1. 掌握食品中还原糖的测定方法。
2. 了解还原糖在食品中的分布和作用。
3. 通过实验,提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
在碱性条件下,还原糖能够将斐林试剂中的铜离子还原成氧化亚铜,生成砖红色的沉淀。
根据沉淀颜色的深浅,可以判断食品中还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 食品样品(如水果、蔬菜、糖果等)- 斐林试剂- 氢氧化钠溶液- 硫酸铜溶液- 蒸馏水- 试管- 烧杯- 滴管- 移液器- 电子天平2. 实验仪器:- 紫外可见分光光度计- 恒温水浴锅- 移液器- 试管架四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液按比例混合,配制成斐林试剂。
2. 称取一定量的食品样品,加入蒸馏水,充分溶解。
3. 取少量溶液,加入斐林试剂,混合均匀。
4. 将混合溶液放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态5分钟。
5. 取出混合溶液,观察沉淀颜色,并与标准比色卡进行对比。
6. 记录食品样品中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果:| 食品样品 | 还原糖含量(%) || :-------: | :-------------: || 甜橙 | 6.5 || 苹果 | 4.2 || 红糖 | 99.8 || 白砂糖 | 0.2 |2. 结果分析:从实验结果可以看出,甜橙和苹果中含有一定量的还原糖,而红糖和白砂糖中的还原糖含量较高。
这可能与食品的来源和加工过程有关。
六、实验讨论1. 实验过程中,应注意控制实验条件,如温度、时间等,以保证实验结果的准确性。
2. 斐林试剂的配制和使用过程中,应注意避免交叉污染,以保证实验结果的可靠性。
3. 实验结果受多种因素影响,如食品样品的来源、处理方法等,因此在实际应用中,应结合具体情况进行分析。
七、实验结论通过本次实验,我们掌握了食品中还原糖的测定方法,了解了还原糖在食品中的分布和作用。
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液,在加热条件下,Cu2+被还原成Cu2O,形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂:斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合,现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液:准确称取1.0g葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100ml,配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理:准确称取待测样品0.1g,用蒸馏水溶解并定容至10ml,配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤:a. 取一支试管,加入1ml斐林试剂;b. 取另一支试管,加入1ml样品溶液;c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟;d. 观察颜色变化,记录结果。
5. 结果处理:a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照;b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果:样品溶液加入斐林试剂后,加热至沸腾,观察到样品溶液变为浅蓝色,随后逐渐变为棕色,最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析:根据实验结果,样品溶液中加入斐林试剂后,发生了还原反应,生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖,且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中,样品溶液加热至沸腾时,需保持沸腾状态2分钟,以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中,样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀,说明还原糖在加热条件下,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
还原糖的含量测定一、背景介绍糖是人们日常饮食中常见的一种营养物质,但过量摄入糖会导致肥胖、糖尿病等健康问题。
因此,了解食品中糖的含量对于人们合理膳食非常重要。
还原糖是指具有还原性的单糖和部分双糖,如葡萄糖、果糖等,其测定方法较为简便。
二、实验原理还原糖含量测定采用间接法,即先将样品中的多余物质去除,然后将还原糖转化为葡萄糖,并利用酶法或化学法测定葡萄糖含量。
其中,去除多余物质的方法有酸水解法、酶解法和乙醇沉淀法等;将还原糖转化为葡萄糖的方法有硫酸水解法和硝酸钠氧化法等;测定葡萄糖含量的方法有显色滴定法和比色法等。
三、实验步骤1. 样品制备:取适量待测样品,如果汁、奶制品等。
2. 样品预处理:根据样品的特点选择合适的去除多余物质的方法,如果汁可用酸水解法,奶制品可用乙醇沉淀法。
3. 还原糖转化:将经过预处理的样品加入硫酸或硝酸钠溶液中,在加热条件下将还原糖转化为葡萄糖。
4. 葡萄糖含量测定:根据实验需要选择合适的测定方法,如显色滴定法或比色法等。
四、实验注意事项1. 实验过程中要注意安全,避免接触有毒有害物质。
2. 样品预处理和还原糖转化过程要严格控制温度和时间,避免对样品产生影响。
3. 测定葡萄糖含量时要准确称量试剂和标准物质,并按照操作规程进行操作。
4. 实验前应对仪器进行检查和校准,保证实验结果的准确性。
五、实验结果分析通过测定样品中葡萄糖含量可以得到还原糖的含量。
不同食品中还原糖含量不同,其中果汁、甜点等含糖量较高的食品中还原糖含量也相对较高,而蔬菜、豆类等含糖量较低的食品中还原糖含量也相对较低。
通过对不同食品中还原糖含量的测定可以为人们制定合理膳食提供科学依据。
六、实验应用1. 食品生产:测定不同食品中还原糖含量,可以为生产厂家提供产品质量控制和改进方案。
2. 膳食指导:了解不同食品中的还原糖含量,可以帮助人们制定合理的膳食计划,避免过度摄入糖分。
3. 学术研究:测定不同食品中的还原糖含量,可以为相关学科领域提供数据支持。
总糖和还原糖的测定实验报告
实验目的,通过对食品中总糖和还原糖的测定,掌握测定方法和原理,了解不同食品中糖的含量。
实验原理,总糖是指食品中所有可溶解于水的糖的总和,包括葡萄糖、果糖、蔗糖等;还原糖是指具有还原性的糖,如葡萄糖、果糖等。
测定总糖的方法一般采用硫酸酚法,而测定还原糖的方法则是费林试剂法。
实验步骤:
1. 样品制备,将食品样品研磨成细粉,称取适量样品置于烘干器中,使其干燥后称取一定质量的样品备用。
2. 总糖的测定,取一定质量的样品,加入硫酸酚溶液,放入水浴中加热,再加入苯酚,用硫酸铜溶液滴定,记录滴定消耗的体积。
3. 还原糖的测定,取一定质量的样品,加入水和费林试剂,加热沸腾后立即加入硫酸,冷却后用蒸馏水定容至刻度线,用紫外分光光度计测定吸光度。
实验结果:
经过实验测定,得出样品中总糖的含量为10.5g/100g,还原糖的含量为
8.3g/100g。
实验分析:
通过对样品中总糖和还原糖的测定,可以了解到样品中糖的含量,为食品质量的评定提供了重要依据。
总糖的含量反映了食品的甜度,而还原糖的含量则反映了食品中具有还原性的糖的含量,对于不同类型的食品,其糖的含量也会有所不同。
实验总结:
通过本次实验,我们掌握了总糖和还原糖的测定方法和原理,了解了不同食品中糖的含量。
在实际生活中,我们可以通过这些方法对食品进行质量检测,保障食品安全和营养健康。
总糖和还原糖的测定实验报告到此结束。
还原糖和总糖的测定实验报告一、实验目的1、掌握还原糖和总糖的测定原理和方法。
2、学会使用分光光度计进行定量分析。
3、熟悉实验操作过程,提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理1、还原糖的测定还原糖含有游离的醛基或酮基,在碱性条件下,能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀,而斐林试剂是由质量浓度为 01g/mL 的NaOH 溶液和质量浓度为 005g/mL 的 CuSO₄溶液混合而成。
产生的Cu₂O 沉淀的量与还原糖的含量成正比。
通过用标准葡萄糖溶液标定斐林试剂,再用标定后的斐林试剂测定样品中的还原糖含量。
2、总糖的测定总糖包括还原糖和非还原糖。
先将非还原糖通过酸水解的方法转化为还原糖,再用斐林试剂法测定总糖含量。
水解后测定的总还原糖量减去水解前样品中还原糖的含量,即可得到样品中非还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1、材料苹果、葡萄糖标准溶液(1mg/mL)、3mol/L HCl 溶液、10% NaOH 溶液、斐林试剂甲液(质量浓度为 01g/mL 的 NaOH 溶液)、斐林试剂乙液(质量浓度为 005g/mL 的 CuSO₄溶液)。
2、仪器电子天平、恒温水浴锅、容量瓶(100mL、500mL)、移液管(1mL、2mL、5mL、10mL)、锥形瓶(250mL)、碱式滴定管、分光光度计。
四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的绘制(1)取 6 支 25mL 具塞刻度试管,编号 0、1、2、3、4、5,分别加入 0、02、04、06、08、10mL 葡萄糖标准溶液。
(2)向各试管中分别加入蒸馏水,使总体积均为 10mL。
(3)在各试管中分别加入 2mL 斐林试剂甲液,摇匀,再加入 2mL 斐林试剂乙液,摇匀。
(4)将试管置于沸水浴中加热 2min,取出后用流水冷却至室温。
(5)以 0 号试管为空白对照,在 590nm 波长下,用分光光度计测定各试管中溶液的吸光度值。
(6)以葡萄糖含量(mg)为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
食品中还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在掌握食品中还原糖含量的测定方法,了解还原糖在食品中的重要性,并通过实际操作提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,在碱性条件下,能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀。
斐林试剂由甲液(硫酸铜溶液)和乙液(氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液)组成,使用时将甲液和乙液等量混合。
反应式如下:2Cu(OH)₂+RCHO → RCOOH + Cu₂O↓ + 2H₂O生成的氧化亚铜沉淀呈砖红色,通过比色法或重量法可以测定还原糖的含量。
三、实验材料与仪器(一)实验材料1、葡萄糖标准溶液:准确称取 1000g 经过 98 100℃干燥至恒重的无水葡萄糖,加水溶解后定容至 1000mL,浓度为 1mg/mL。
2、待测食品样品:苹果汁、橙汁、蜂蜜等。
(二)实验仪器1、电子天平:精度为 0001g。
2、容量瓶:100mL、500mL。
3、移液管:1mL、5mL、10mL。
4、锥形瓶:250mL。
5、电炉。
6、石棉网。
7、酸式滴定管:50mL。
8、比色皿。
9、分光光度计。
四、实验步骤(一)样品处理1、液体样品(如苹果汁、橙汁):准确吸取 1000mL 样品于100mL 容量瓶中,加 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液,定容至刻度,摇匀,静置 30 分钟,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,收集滤液备用。
2、粘稠液体样品(如蜂蜜):称取 500 1000g 样品于 100mL 容量瓶中,加水约 50mL 溶解,慢慢加入 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液,定容至刻度,摇匀,静置 30 分钟,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,收集滤液备用。
(二)斐林试剂的标定1、准确吸取 500mL 葡萄糖标准溶液于 250mL 锥形瓶中,加入25mL 水和 5mL 斐林试剂甲液、5mL 斐林试剂乙液,摇匀,在电炉上加热至沸腾,保持沸腾 2 分钟,趁热用 01%葡萄糖标准溶液滴定至蓝色刚好消失,记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。
还原糖的测定方法蔗糖, 光度计, 葡萄糖, 测定, 样品大家测定还原糖一般用什么方法啊?谢谢.我用的是以下的方法,怎么标准曲线很差,R2最大值是0.922.还敢用吗?一、原理植物组织中的可溶性糖可分为还原糖(主要是葡萄糖和果糖)和非还原糖(主要是蔗糖)两类。
还原糖具有醛基和酮基,在碱性溶液中煮沸,能把斐林试剂中的Cu2+还原成Cu+,使蓝色的斐林试剂脱色,脱色的程度与溶液中含糖量成正比。
二、材料、仪器设备及试剂(一)材料:新鲜植物样品或烘干粉碎过的植物样品。
(二)仪器设备:1. 分光光度计;2. 分析天平(感量1/10000);3. 水浴锅;4. 具塞刻度试管;5. 刻度吸管;6. 容量瓶;7. 研钵;8. 离心机。
(三)试剂:1. 斐林试剂A液:40gCuSO4.5H2O溶解于蒸馏水定容至1L。
2. 斐林试剂B液:200g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6.5H2O)与150g NaOH溶于蒸馏水中,并定容至1升。
A、B两液分别贮存,使用前等体积混合。
3. 0.1%葡萄糖标准液:取80℃下烘至恒重的葡萄糖0.1000g,加蒸馏水溶解,定容至100ml。
4. 0.1NNaOH。
5. 甲基红指示剂:0.1g甲基红溶于250ml 60%乙醇中。
6. 10%Pb(Ac)2。
7.饱和Na2SO4。
三、实验步骤1. 标准曲线的制:各管混合后加塞,于沸水浴中加热15min。
取出后自来水冷却,1500rpm离心15min。
取上清液,用分光光度计在590nm波长下比色,以蒸馏水作对照,读取吸光度用空白管的吸光度与不同浓度糖的各管的吸光度之差为横坐标,对应的糖含量为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品中还原糖的提取:取新鲜的植物样品洗净、擦干、剪碎,称取10.00g,放入研钵中研磨至糊状,用水洗入250ml容量瓶中。
当体积近150ml左右时,加2~3滴甲基红指示剂,如呈红色,可用0.1mol/L 的NaOH中和至微黄色。
还原糖鉴定实验报告简介还原糖是一类具有还原性的糖类物质,在食品和医药工业中具有广泛应用。
为了确保食品和药物的质量和安全性,对还原糖的鉴定非常重要。
本实验旨在通过一系列步骤,对未知样品中的还原糖进行鉴定。
实验步骤第一步:样品制备1.将未知样品取适量置于试管中。
2.加入足够的蒸馏水溶解样品,搅拌均匀。
第二步:还原糖检测1.取一部分样品溶液放入试管中。
2.加入苏丹红溶液,观察颜色变化。
苏丹红会在还原糖存在的情况下由红色转变为蓝色。
第三步:巴氏试剂检测1.取另一部分样品溶液放入试管中。
2.加入巴氏试剂,轻轻摇晃试管。
3.观察是否出现黄色沉淀。
如果出现黄色沉淀,表示样品中存在还原糖。
第四步:费林试剂检测1.取剩余样品溶液放入试管中。
2.加入费林试剂,摇晃试管。
3.观察是否出现深蓝色沉淀。
深蓝色沉淀的出现表明样品中含有还原糖。
第五步:参比试验1.准备一系列已知浓度的还原糖溶液。
2.重复以上步骤,对已知浓度的样品进行测试。
3.记录每种浓度下的颜色变化和沉淀情况。
结果与讨论根据实验结果,我们可以得出以下结论:1.颜色变化观察:苏丹红试剂的颜色由红色转变为蓝色,巴氏试剂和费林试剂出现黄色和深蓝色沉淀。
2.样品中含有还原糖:根据巴氏试剂和费林试剂的检测结果,可以确定样品中含有还原糖。
3.参比试验:通过参比试验,我们可以建立还原糖浓度与颜色变化、沉淀情况的对应关系,从而可以根据颜色变化和沉淀情况对未知样品中的还原糖进行浓度估计。
结论本实验通过苏丹红试剂、巴氏试剂和费林试剂的检测,成功鉴定出未知样品中的还原糖。
实验结果表明样品中含有还原糖,并为进一步的浓度估计提供了参考。
这对于保证食品和药物的质量和安全性具有重要意义。
参考文献[1] 李明, 张三. 食品分析实验教程[M]. 北京:化学工业出版社, 2015. [2] 张四, 王五. 实验室手册[M]. 上海:科学出版社, 2018.。
直接滴定法测食品中还原糖实验报告4页
一、实验目的
1、熟悉还原糖的滴定法。
2、掌握抽样、分装、滴定步骤以及相关仪器的操作。
二、实验原理
还原糖类属于酚类物质,能够被高锰酸钾还原酶氧化成酒石酸,其它组分不受干扰。
置于高锰酸钾溶液,引入溴乙醇并加热来加速反应,将还原糖转化为酒石酸,按一定体积
用0.02mol/L甘油酸标准溶液滴定至淡棕色终点,这是还原糖滴定法的基础原理。
三、实验前准备
1、 1.0mol/L 烧碱溶液、0.1mol/L 高锰酸钾溶液、溴乙醇、标准甘油酸溶液。
2、实验仪器:100mL 滴定瓶、Vacu-Sea 隔膜泵、泡沫防爆电热控制器及玻璃管、
立式烧杯、水浴锅、恒温沐浴器、倒角镊、口服瓶、直立式搅拌机等。
四、实验步骤
1. 采样:从指定食品中抽取相应量样品,用Vacu-Sea 隔膜泵进行过滤,放入烧杯中。
2. 分装:将10000ml的溶液分装为1000ml,用净水稀释,溴乙醇滴入分装管中。
3. 滴定:向滴定瓶中加入体积指定的高锰酸钾溶液,放入电热管加热,温度控制在
60 ~ 70。
4. 酒石酸滴定:加入稀释的标准甘油酸溶液,滴定至淡棕色终点,结果为ml标准甘
油酸溶液消耗量。
五、实验结果
实践结果:加标法滴定结果为20ml
六、实验结论
通过还原糖滴定法测定试样中还原糖含量为xx g/100g。
实验八食品(炼乳)中还原糖含量得测定
一、实验目得
1、了解食品中还原糖得含量;
2、学习直接滴定法测定还原糖得原理,并掌握其定糖方法。
3、通过对实验结果得分析,了解影响测定准确性得因素。
二、原理,
食品中得还原糖主要指具有还原性得葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖、麦芽糖等,还原糖之所以具有还原性,就是由于其分子中含有游离醛基(-CHO)或酮基(>C=O)。
测定还原糖得经典化学方法都就是以其能被多种试剂氧化为基础得。
在这些方法中,以各种根据碱性酒石酸铜溶液氧化作用改进方法得应用最广。
本实验就就是采用使用碱性酒石酸铜作为氧化剂得直接滴定法。
碱性酒石酸铜溶液A、B二液等体积混合时生成得天蓝色Cu(OH)2沉淀后,立即与酒石酸钾钠起反应生成深蓝色得酒石酸钾钠铜络合物。
此络合物与还原糖共热时,二价铜即被还原糖还原为一价得红色氧化亚铜沉淀,氧化亚铜沉淀与亚铁氰化钾反应,生成可溶性化合物,达到终点时,稍微过量得还原糖将蓝色得次甲基蓝还原成无色,溶液呈淡黄色而指示滴定终点,根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖得质量,以及测定样品液所消耗得体积,计算还原糖含量。
反应式如下:
CuSO4+2NaOH→Cu(OH)2↓+Na2SO4
COOK COOK
││
CHOH CHO
│+Cu(OH)2→│Cu+2H2O
CHOH CHO
││
COONa COONa
COOK COOK
│CHO COOH │
CHO ││CHOH
│Cu+(CHOH)4 →(CHOH)4 +│+Cu2O↓
CHO ││CHOH
│CH2OH CH2OH │
COONa COONa
三、仪器与试剂
1、仪器
(1)容量瓶100 ml、250 ml
(2)三角瓶250 ml
(3)碱式滴定管50 ml或25 ml
(4)烧杯100m1
(5)吸管5 ml、50 ml
(6)分析天平
(7)电炉1KW可调
(8)恒温水浴锅
2、试剂
(1) 碱性酒石酸铜溶液A液:称取15、00 g硫酸铜(CuSO4·5H2O)(AR)及0、05g次甲基蓝,
溶于蒸馏水中并稀释至1000 ml。
(2) 碱性酒石酸铜溶液B液:称取50g酒石酸绅钠(AR)与75g NaOH (AR),溶于蒸馏水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后用蒸馏水稀释至1000 ml,贮存于具橡胶塞玻璃瓶中。
(3)乙酸锌溶液:称取21、9g乙酸锌,加3ml冰醋酸,加水溶解并稀释至100ml。
(4)亚铁氰化钾溶液:称取10、6g亚铁氰化钾,加水溶解并稀释至100ml。
(5)葡萄糖标准溶液:准确称取1、0000g至(96±2)℃干燥2h得纯葡萄糖,加水溶解后加人5ml 盐酸,并以水稀释至1000ml。
此溶液葡萄糖浓度为l、0 mg/ml。
3、样品
炼乳
四、实验步骤
1、样品制备
称取炼乳样品约2、50 ~ 5、00g于100ml烧杯中,加入50ml水溶解,转移到25Oml容量瓶中,并用少量水洗涤烧杯,洗液并人容量瓶中。
慢慢加入5ml乙酸锌溶液与5ml亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,混匀。
沉淀,静止30min,用干燥小滤纸做成小菊花形干过滤,弃去初始滤液25ml,其余滤液备用。
2、碱性酒石酸铜溶液得标定
于25Oml三角瓶中吸取碱性酒石酸铜A液及B液各5、0ml,加1Oml水与玻璃珠3粒,从滴定管滴加约9ml葡萄糖(或其她还原糖)标准溶液并摇匀,置于电炉上加热至沸腾(要求控制在2min内沸腾),然而趁热以每2s滴加1滴得速度继续滴加葡萄糖(或其她还原糖)标准溶液,直至溶液蓝色刚好退去,显示淡黄色即为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液得总体积。
同时平行操作三份,沸腾后滴人得葡萄糖(或其她还原糖)标准溶液得体积应控制在0、5~1、0ml以内,滴定时间应控制在1min内。
否则,应增加预加量并重新滴定。
按下式计算10ml碱性酒石酸铜溶液(A液、B液各5、0ml)相当于标准葡萄糖得质量(mg)
式中:
F一10 ml碱性酒石酸铜溶液(A液、B液各5、0ml)相当于标准葡萄糖得质量,mg
V—标定时消耗标准葡萄糖溶液得体积,ml
C一标准葡萄糖溶液得质量浓度,mg/ml
3、样品溶液得预备滴定
吸取碱性酒石酸铜A液与B液各5、Oml于25Oml三角瓶中,加1Oml水与玻璃珠3粒并摇匀,在电炉上加热至沸,趁热以先快后慢得速度,从滴定管中滴加试样溶液,并保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以每2s滴加1滴得速度迅速滴定,直至溶液蓝色刚好退去为终点,记录样品溶液消耗体积。
当样品溶液中还原糖浓度过高时应适当稀释,再进行测定,使每次滴定消耗得体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时所消耗得葡萄糖标准溶液得体积相近(约lOml左右),记录消耗样液得总体积,作为正式滴定参考用。
4、样品溶液得正式滴定
吸取碱性酒石酸铜A液与B液各5、0ml于25Oml三角瓶中,加lOml水与玻璃珠3粒,从滴定管加入比预备滴定体积少lml样品溶液至三角瓶中并摇匀,同上法滴定至终点。
同法平行操作三份。
五、计算
食品中还原糖含量(X%)
式中:
X——每百克试样申还原糖得含量(以葡萄糖计),g
F——10 ml碱性酒石酸铜溶液(A液、B液各5、0ml)相当于标准葡萄糖得质量,mg m——试样质量,g
V——正式滴定时平均消耗样品溶液得体积,m1
七、说明与讨论
1、实验中得加热温度、时间及滴定时间对测定结果有很大影响,在碱性酒石酸铜溶液标定与样品滴定时,应严格遵守实验条件,力求一致。
2、加热温度应使溶液在2min内沸腾,若煮沸得时间过长会导致耗糖量增加。
滴定过程中滴定装置不能离开热源,使上升得蒸汽阻止空气进入溶液,以免影响滴定终点得判断。
3、滴定速度应尽量控制在每2s滴加1滴,滴定速度快,耗糖增多;滴定速度慢,耗糖减少。
滴定时间应在lmin内,滴定时间延长,耗糖量减少,因此预加糖液得量应使继续滴定时耗糖量在0、5~1、0ml以内。
4、碱性酒石酸铜溶液A液、B液应分别存放,使用时以等体积混合。
5、本法就是与定量得酒石酸钾钠铜作用,铜离子就是定量得基础,故样品处理时,不能用铜盐作蛋白质沉淀剂。
6、为了提高测定得准确度,根据待测样品中所含还原糖得主要成分,要求用指定还原糖表示结果,就应用该还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液。
例如,本实验中用葡萄糖表示结果,就用葡萄糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液。
7、碱性酒石酸铜溶液B液中加入少量亚铁氰化钾得目得就是使生成得红色氧化亚铜配位形成可溶性配合物,消除红色沉淀对滴定终点得干扰,使终点变色更明显。