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脊髓损伤后胃肠功能障碍的机制宋成超;王玉玞;闫景龙【摘要】脊髓损伤(SCI)后的患者常出现肠梗阻、便秘、大便失禁、腹胀等胃肠功能障碍的症状,严重影响患者的生活质量.但是相比而言,人们大多数关注患者的运动功能,对于脊髓损伤后胃肠功能障碍的发生机制研究报道并不多见,笔者就目前国内外有关脊髓损伤急性期后胃肠功能障碍发生机制的研究进展作一综述.%It has been commonly reported that spinal cord-injured patients have gastrointestinal dysfunction,including intestinalobstruction,constipation,fecal incontinence and abdominaldistention,which seriously impact patients' quality of life.But compared to the impaired mobility,less attention was paid to gastrointestinal dysfunction after spinal cord injury.This paper is aimed to give an overview of the possible pathophysiology mechanism of the gastrointestinal dysfunction following spinal cord injury and also to review the current progress about it.【期刊名称】《创伤外科杂志》【年(卷),期】2017(019)004【总页数】4页(P306-309)【关键词】脊髓损伤;胃肠功能障碍;病理生理【作者】宋成超;王玉玞;闫景龙【作者单位】150001,哈尔滨,哈尔滨医科大学附属第二医院;150001,哈尔滨,哈尔滨医科大学附属第二医院;150001,哈尔滨,哈尔滨医科大学附属第二医院【正文语种】中文【中图分类】R651.2每年有超过13万患者发生脊柱脊髓损伤[1]。
20242025学年高二生物上学期期中模拟卷（考试时间：60分钟试卷满分：100分）注意事项：1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。
答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。
2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。
如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。
写在本试卷上无效。
3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。
写在本试卷上无效。
4．测试范围：人教版2019选择性必修1全册。
5．难度系数：0.76．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共12个小题，每小题4分，共48分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1．暑假期间，小王每晚跑步约5km，小王运动时大量出汗且锻炼后肌肉感到酸痛，但休息一段时间后恢复正常。
下列有关该过程的叙述，错误的是（）A．小王体内细胞外液的渗透压主要与无机盐和蛋白质的含量有关B．小王感到肌肉酸痛的原因是肌细胞无氧呼吸加强，引起乳酸积累C．小王在跑步过程中，肌肉所需的能量主要由无氧呼吸提供D．小王体内对维持内环境pH稳定起主要作用的物质是，HCO3、HPO42等2．如图表示人体内的细胞与外界环境进行物质交换的过程，下列叙述正确的是（）A．①中若Ca2+浓度过高，易引起肌肉抽搐B．淋巴细胞生活的内环境只有③C．若某人患肾小球肾炎，将会导致②中蛋白质减少，形成组织水肿D．从外界摄入的K+进入细胞的途径为：外界环境→消化系统→A→①→②→组织细胞3．如图是用甲、乙两个电流表研究神经纤维及突触上兴奋传导的示意图。
下列有关叙述错误的是（）A．静息状态下，甲指针偏转，乙指针不偏转B．刺激a处时，甲指针偏转一次，乙指针偏转两次C．刺激b处时，甲指针维持原状，乙指针偏转一次D．清除c处的神经递质，再刺激a处时，甲指针偏转一次，乙指针不偏转4．帕金森病的主要临床表现为静止性震颤（主动肌与拮抗肌交替收缩引起的节律性震颤，常见手指搓丸样动作）、运动迟缓、肌强直和姿势步态障碍。
依达拉奉对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的保护作用梁江红;陈琳【摘要】目的观察依达拉奉对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的保护作用.方法将40只健康成年Wistar大鼠随机分成正常组、EAE组、LDE组、HDE组各10只,EAE组、LDE组、HDE组建立EAE模型,LDE组、HDE组分别腹腔注射相应剂量的药物.正常组、EAE组仅腹腔注射生理盐水0.5ml/d,所有大鼠24h后处死.结果EAE组神经功能缺损评分＞LDE组＞HDE组,组间比较有显著性差异(P＜0.05)；EAE组iNOS、OPN阳性细胞表达＞LDE组＞HDE组,组间比较有显著性差异(P＜0.05).结论依达拉奉对EAE的保护作用可能与其清除自由基、减轻炎症反应、减少iNOS和OPN表达有关.【期刊名称】《现代诊断与治疗》【年(卷),期】2012(023)008【总页数】2页(P1116-1117)【关键词】EAE;依达拉奉;诱导型一氧化氮合酶;骨桥蛋白【作者】梁江红;陈琳【作者单位】南华大学附属第二医院神经内科,湖南衡阳 421001;南华大学附属第二医院神经内科,湖南衡阳 421001【正文语种】中文【中图分类】R744.3多发性硬化（Multiple sclerosis，MS）是一种常见的中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病，是导致中青年残障的重要原因。
近年研究发现自由基损伤与MS发病可能密切相关[1]。
依达拉奉是一种新型自由基清除剂，本实验通过建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠模型，以不同剂量依达拉奉进行干预，探讨依达拉奉对EAE大鼠是否具有保护作用。
1 资料与方法1.1 实验资料取健康成年Wistar大鼠40只（由南华大学实验动物中心提供），雌雄不拘，体质量260～280g，随机分成正常组、EAE 组、LDE 组[依达拉奉4mg/（kg·d）和 HDE 组（依达拉奉 10mg/（kg·d）]各 10 只，EAE 组、LDE 组、HDE 组建立 EAE模型[2]，LDE组、HDE组分别于腹腔注射相应剂量的依达拉奉，正常组、EAE组仅注射生理盐水0.5ml/d，所有大鼠于24h后处死。
垂体腺苷酸环化酶激活肽的生物学效应及其与偏头痛之间的相关性垂体腺苷酸环化酶激活肽（pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide，PACAP）是由ADCYAP1基因编码的，属于血管活性肠肽（VIP）-胰高血糖素-促胰液素家族。
PACAP由ADCYAP1基因编码，形成一个包含175个氨基酸的前肽。
经过剪切，PACAP表达为两种形式的蛋白，分别是由27个氨基酸组成的PACAP-27和由38个氨基酸组成的PACAP-38。
最初，PACAP是Miyata等[1]人在1989年从羊下丘脑中发现的一种神经肽。
PACAP广泛分布于中枢神经系统和外周组织器官中，其中下丘脑中的含量最高，在哺乳动物中，PACAP主要是以PACAP-38的形式存在，而PACAP-27的含量极低。
PACAP的生物学功能十分广泛，本文旨在综述PACAP在各系统中的基本功能，并着重介绍PACAP与头痛之间的相关性。
1 PACAP受体PACAP通过与G蛋白耦联受体VPAC1、VPAC2和PAC1相结合而发挥生物学效应[2]。
其中，PAC1受体与PACAP具有高亲和力，而对VIP亲和力较低；而VPAC1/VPAC2受体与PACAP及VIP具有相似的亲和力[3]。
VPAC1/VPAC2或PAC1受体激活后，通过活化腺苷酸环化酶引起环磷酸腺苷（cAMP）增加。
其他第二信使系统，包括磷脂酶C和磷脂酶D，可能与腺苷酸环化酶同时被激活。
PACAP受体也广泛分布于机体神经系统及外周组织器官中。
研究表明，在中枢神经系统中，PAC1受体主要分布于嗅球、大脑皮层、海马等。
而VPAC 受体则主要分布于基底神经节、大脑皮层和下丘脑等。
然而，研究发现，PACAP 与PACAP受体的分布并不一致，这就提示PACAP不仅可在其产生的局部发挥作用，而且可能发挥着类似于激素样的远程作用。
2 PACAP的生物学效应PACAP是一种具有广泛生物学功能的多肽。
血管活性肠肽（VIP）对单碘醋酸钠诱发关节炎的影响一、简介血管活性肠肽（Vasoactive Intestinal Peptide，VIP）是一种具有广泛生物活性的多肽激素，可通过神经内分泌机制在中枢和周围组织发挥多种生理功能。
VIP在炎症、免疫调节、细胞增殖等方面发挥重要作用，已被证明能够影响关节炎的发病和发展。
单碘醋酸钠（Sodium Iodacetate，SIA）是一种良好的小鼠关节炎模型诱导剂，使用SIA可诱导小鼠发生严重的关节炎症状，包括关节红肿、压痛和肿胀等。
本文将探讨VIP对单碘醋酸钠诱发关节炎的影响。
二、VIP对SIA诱发关节炎的影响VIP能够通过调节炎症相关细胞的功能来影响关节炎的发生和发展。
相关研究表明，VIP能够在单碘醋酸钠诱导的小鼠关节炎模型中发挥保护作用，主要表现为以下方面：1.减轻炎症反应VIP可减弱关节炎引起的炎症反应，减少细胞因子的释放，如TNF-α、IL-1β等。
相关研究表明，VIP的这种抗炎作用可能是由于其可以调节炎症相关细胞（如巨噬细胞、T细胞、树突状细胞等）的功能，使它们产生更少的炎症因子。
2.促进免疫调节VIP还可以促进免疫调节，抑制免疫反应的过度激活，从而减少炎症反应和免疫损伤。
VIP的这种免疫调节作用可能是通过调节T细胞的功能实现的，使其向抗炎性方向发展，同时还可以促进特定的免疫细胞类型的增殖和分化。
3.促进组织修复VIP还可以促进组织修复，此外，还能够调节血流和氧供，从而促进组织细胞的再生和修复。
在关节炎发生和发展过程中，VIP的这种组织修复作用可能有助于缓解疼痛和减轻关节肿胀。
综合上述研究结果来看，VIP可以发挥抗炎、免疫调节和组织修复等多种作用，从而对SIA诱导的小鼠关节炎模型发挥保护作用。
三、VIP与关节炎治疗的研究进展除了在SIA诱导的小鼠关节炎模型中发挥保护作用以外，VIP在关节炎治疗方面的应用也越来越受到重视。
以下是关于VIP在关节炎治疗方面的研究进展：1. VIP在类风湿关节炎中的作用类风湿关节炎（RA）是一种以关节炎为主要表现，且可出现多个内脏受累的自身免疫性疾病。
实验性自身免疫性脑脊髓炎的历史和现状中国神经免疫学和神经病学杂志2010年1月第17卷第1期ChinJNeuroimmunol&Neuro!,.!!,.舍曲林(sertraline),帕罗西汀(paroxetine)和西酞普兰等SSRIs.如有短期记忆困难和认知障碍可试用治疗阿尔茨海默病的抗胆碱酯酶药.3.2.5其他:晚期出现膀胱直肠功能障碍,尿潴留可试用氯化氨基甲酰甲基胆碱(bethanecholchlo—ride),监测残余尿量是预防泌尿系感染的重要措施.发生尿急或尿频(痉挛性膀胱)可用溴丙胺太林(普鲁本辛)或盐酸奥昔布宁(ditropan)松弛逼尿肌,宜间断用药.出现尿潴留时可问断插导尿管,出现严重便秘时可给予间断灌肠处理.3.3康复治疗如运用牵拉带,坡路行走,升降器和手控电瓶轮椅等推迟疾病的卧床期.卧床患者可使用压力转换床垫,硅树脂凝胶垫等预防褥疮.(收稿日期:2009—11-30)(本文编辑:时秋宽)实验性自身免疫性脑脊髓炎的历史和现状张旭李佳关键词:多发性硬化;脑脊髓炎,实验性自身免疫性中图分类号:R744.51文献标识码:C文章编号:多发性硬化(multiplesclerosis,MS)是一种中枢神经系统(centralnervoussystem,CNS)炎性脱髓鞘性自身免疫性疾病,其确切的发病机制仍不清楚,研究MS的实验动物模型成为探索该病病因学的最佳途径和方法.MS的实验动物模型主要分为免疫介导模型和病毒诱导模型两种,其中以免疫介导模型多用,该模型主要是通过注射CNS髓鞘蛋白(或分子肽段)与抗原佐剂的乳化复合物诱导动物对抗原反应,以实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmuneencephalomyelitis,EAE)为代表.过去的50多年里,人们就EAE进行了大量研究,在Medline上用EAE这个关键词进行检索,可检索出8000多条引文,近2/3的文献产生于1990年后.在EAE研究发展的漫长历程中,涉及很多内容,步骤及机体内部因素,其中包括EAE诱导过程中抗原,动物品系,免疫方法的选择以及诱导后机体内免疫系统的应答等.该文简要地回顾EAE的发展史以及自身免疫应答在其发生,发展过程中的作用,并对近年相关的研究热点做简短概述.1EAE的诱导2O世纪20～30年代,Koritschoner等在研究doi:i0.3969/j.issn.1006—2963.2010.01.002作者单位:325000温州医学院附属第一医院神经内科通讯作者:张旭,Email:*************************狂犬疫苗接种后脑脊髓炎的发病机制时,将感染狂犬病的兔脊髓匀浆悬液即巴斯德狂犬疫苗注射患者后发现,部分患者发展成一种与狂犬病完全不同的脑脊髓炎,随后分别在家兔,猴子等动物上通过反复注射神经组织诱导出与人类MS相似的脑脊髓炎,这就是最初的EAE模型,提示EAE是一种针对神经抗原的自身免疫性疾病.早期诱导EAE模型的发病率较低,且通常需要连续多次免疫注射.完全福氏佐剂(completeFreund'Sadjuvant,CFA)的引入使EAE的诱导变得简单,有保证.Kabat等在1946年发表了一篇预实验报道,内容是使用CFA乳化的家兔脑组织抗原乳剂连续3周免疫猴子,结果显示4只猴子中有3只被诱导成功.随后出现了更多在猴,家兔,豚鼠等动物中进行免疫的报道并得出相似结果.这些研究最终奠定了CFA在EAE诱导中不可取缔的作用和地位.诱导小鼠EAE模型的实验最初并不顺利.Olitsky和Y ager在首次尝试失败2年后成功诱导小鼠EAE模型,并进一步研究发现不同品系间EAE易感性不同.在免疫注射含CFA抗原乳剂后,额外追加1次百日咳菌苗,白喉类毒素混合制剂可提高EAE的发病率.Munoz等进一步研究发现百日咳菌苗,白喉类毒素混合制剂中的活性成分为百日咳毒素(PT).目前提纯的百日咳毒素已被常规用于EAE小鼠模型的诱导.免疫动物所用的抗原,从最初天然的CNS组虫国鱼塞茎塑垒兰盘查至蔓!鲞第1期ChinJNeuroimmunolg-Neurol2010,V o1.17,No.1织匀浆(混合抗原)发展到后来分离的CNS髓鞘蛋白或非髓鞘蛋白,以及现阶段被誉为诱导EAE标准试剂的人工合成抗原肽段(含有上述抗原特异性T细胞表位).致脑炎性物质的确定也经历了一个反复验证过程,目前公认具有致脑炎性的抗原包括髓鞘碱性蛋白(MBP),蛋白脂蛋白(PLP),髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)及上述3者的相应肽段,髓鞘相关少突胶质细胞碱性蛋白以及少突胶质细胞特异性蛋白等.另外,sloo~以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)等非髓鞘蛋白亦可诱导出EAE模型,但与髓鞘蛋白诱导的EAE模型相比,SIO0~等非髓鞘蛋白诱导的动物模型临床症状相对轻微,而病理学上的炎症浸润却遍布整个CNS,包括大脑皮质,小脑,中脑以及眼球色素层和视网膜等部位, 从某种意义讲这种模型可以称为实验性自身免疫性全脑炎(experimentalautoimmunepanencepha—litis,EAP).除主动免疫EAE模型外,通过移植致敏的自身反应性淋巴细胞亦可诱导出被动免疫性(或过继免疫性)EAE.在被动免疫性EAE模型中,CNS抗原特异性的自身反应性淋巴细胞在一组动物体内产生,然后将这些自身反应性淋巴细胞移植入另外一组健康动物体内诱导疾病发生.通过该诱导方法,可在不同动物体内分别研究疾病的诱导阶段和效应阶段.此外,根据选用的动物种类,品系,抗原及免疫方法的不同,模型可呈现急性,慢性以及复发一缓解等多种病程,如利用豚鼠脊髓匀浆(spi—nalcordhomogenousofguineapigs,GPSCH)或者MBP免疫诱导的大鼠(如Lewis大鼠等),病程往往呈急性病程,而通过两次重复(问隔6周)注射PLP139—151肽段免疫的C57L小鼠,sJL小鼠以及利用鼠脊髓匀浆免疫诱导的BiozziAB/H小鼠均可呈现缓解一复发型病程.尽管如此,不同品系小鼠的复发倾向也有所不同,以C57L小鼠及遗传学上带有C57BI/10背景的小鼠复发倾向最高.随着遗传学技术及转基因技术的进步,相关基因敲除小鼠或转基因小鼠的EAE模型已越来越成熟,该项技术为研究EAE病程中特定因子的作用打下了良好基础.2EAE的组织病理学EAE组织病理学主要以CNS炎症浸润和伴随不同程度的髓鞘脱失为特征,这也是该模型典型临床表现的病理基础.CNS特征性的炎症病灶称为"血管袖套",即血管周围粒细胞的聚集,这种粒细胞的聚集过程主要包括粒细胞的靠边,粒细胞与内皮的分子交联作用,血一脑脊液屏障破坏等.此外,局部毛细血管的外膜细胞和小胶质细胞也参与血管袖套的形成.血管袖套可与邻近实质内增多的胶质细胞(星形胶质细胞,少突胶质细胞或者小胶质细胞)所形成的胶质结节相伴行.除血管袖套,胶质结节外,EAE另一特征性的病理改变是髓鞘脱失.由于CNS内有髓纤维的髓鞘大多来自少突胶质细胞的轴突,因此EAE病程中的靶目标即为少突胶质细胞的髓鞘.尽管EAE 模型是一种T细胞介导的疾病,但淋巴细胞可能并不直接介导髓鞘脱失,脱髓鞘过程涉及一系列的效应器包括淋巴细胞,巨噬细胞来源的细胞因子, 氧自由基,一氧化氮(NO),金属基质蛋白酶(ma—trixmeta1loproteinases,MMP),抗体,补体以及巨噬细胞和小胶质细胞等吞噬细胞.正如模型临床症状的严重性可通过临床评分来评价一样,EAE的组织病理学评估也有相应的量化标准.大多通过传统的HE染色来反映炎症情况,利用经典LFB(1uxolfastblue)染色显示脱髓鞘程度,然后根据一定的量化标准可分别评估炎症和脱髓鞘,也可一起评估.但由于模型种类不同,目前尚无一套完整的,一致性的评分标准.另外,用免疫组化方法研究EAE病灶相关的特异性分子的表达以及电镜学研究有关EAE病灶均有报道.3EAE中的T细胞,B细胞及抗体从CNS的单个细胞或分子到整个免疫系统的细胞及分子,EAE的发生,发展涉及很多因素,包括自身反应性T细胞,B细胞,抗体,补体,细胞因子,趋化因子,生长因子的作用以及体内胶质细胞,神经元,轴束的变化等.虽然EAE具体的发病机制仍不清楚,但目前EAE是一种以细胞免疫为主的自身免疫性疾病的观点被广泛接受.众多实验研究结果证明,自身反应性CD4Th细胞是启动EAE病理过程的主要效应性T淋巴细胞.尽管CD4'.Th细胞的活化对EAE的启动,诱导非常重要,但目前普遍认为EAE病程中的效应细胞(即巨噬细胞谱系)包括CNS本身的小胶质细胞以及从血液浸润的单核细胞,是造成组织破坏和髓鞘脱失的主要原因.这些细胞的活化需要CD4Th细胞分泌的细胞因子刺激.近年有研究提示CD8T中国神经免疫学和神经病学杂志2010年1月第l7—鲞舅1期!!rn坠:!!!:! 细胞以及7艿T细胞对EAE的病理学亦有一定影响,更确切的机制需进一步研究.既往2O年中,关于EAE和MS的研究似乎已经认同这样一种观点:Th细胞介导的免疫反应对MS的发病机制至关重要,MS被视为一种T细胞介导的自身免疫性疾病.然而,随着Kabat报道MS患者脑脊液(cerebrospinalfluid,CSF)中免疫球蛋白水平升高,支持体液免疫在MS病因学中亦具有一定作用的观点再次呈现.近年,有关MS患者的临床实验数据及基因敲除或转基因小鼠的EAE模型研究使人们对B细胞及抗体等体液免疫在MS发病机制中的作用有了新的认识.尽管这些抗体和B细胞并不参与CNs中炎症病灶的引发和启动,但其在疾病的发展中具重要作用.B细胞,浆细胞及抗体在EAE中的可能作用包括:(1)B细胞作为抗原提呈细胞(APC)进行抗原的摄取,处理以及提呈;(2)抗体以及补体介导脱髓鞘;(3)协同刺激T细胞;(4)对细胞因子产生平衡方面的影响;(5)自身抗体的潜在免疫调节效应.需要明确的是,CD4Th细胞的辅助作用对这些自身抗体的产生非常必要.总而言之,细胞免疫和体液免疫的相互作用,相互影响可能共同促进了MS以及EAE病程中脱髓鞘的发生,发展.4EAE中的细胞因子有关EAE的研究热点已从模型诱导转向EAE病程中的免疫机制研究,尤其是细胞因子方面.细胞因子是介导免疫系统内各细胞成分之间相互作用以及调节免疫功能的可溶性蛋白.调控EAE病程中的炎症,脱髓鞘,复发以及缓解的细胞因子网络非常复杂.随着新的细胞因子发现,这个细胞因子网络的复杂性将越来越明显.迄今为止发现的细胞因子大多在EAE或MS的研究中被涉及,其中最主要的包括与疾病活动性或者严重性相关的IL一2,TNF—a/I3和IFN一7,以及与EAE的缓解或抵制EAE的发生相关的II『4,IL_5,IL-10和IL一13等.这些细胞因子促炎或抗炎的特点已被公认,但在EAE研究中发现很多貌似相互矛盾的现象,尤其是关于细胞因子的效应,影响及作用机制方面.例如,近年发现很多促炎性细胞因子具有抗炎作用,其中以IFN一7为着,其他还有IL一1,IL- 2,IL一6,IL一12及TNF等促炎性细胞因子;同样现象亦发生在抗炎性细胞因子方面,一些抗炎性细胞因子如IL一4,IL一1O以及TGF—B等亦具有促炎性作用.这些貌似自相矛盾的现象已成为目前研究的新热点.除此之外,一些新近研究发现在EAE中具有一定作用和影响的IL一17,IL一23等其他细胞因子也越来越受到关注.IL一17尤其是IL一17A/F系由Thl7细胞分泌,尽管目前认为Th17细胞本身与致脑炎状态相关,但IL一17在EAE发生,发展中是否亦具有促炎性作用仍无定论;IL一23与Thl的反应性相关,可刺激T细胞产生IFN一;此外,虽然IL一23与IL一12拥有一个相同的亚基,但两者的作用效果并不完全相同,IL一23的发现将促使对IL一12的作用进行重新评估,两者在EAE发生,发展中的相应作用需进一步研究.综上所述,EAE的发生,发展过程中涉及很多因素,对各因素及环节进行精细,详尽研究有助于明确揭示临床MS的发病机制及更好地指导临床治疗.目前用于EAE研究的物种主要是啮齿类动物,由于啮齿类动物与人类在物种起源上存在差距,在EAE中有效的治疗措施并不一定代表对临床MS患者有效.因此,在某些情况下灵长类动物的EAE模型的使用可能有助于弥补啮齿类动物和人类在免疫学,神经生物学方面的差异.此外,将人类的免疫分子转基因表达在小鼠身上的人类化的动物模型也正在研发中,该模型的出现可能有助于提高动物实验与MS的相关性.(收稿日期:2009—11-30)(本文编辑:时秋宽)。
血管活性肠肽的免疫调节作用
徐海燕
【期刊名称】《国外医学：免疫学分册》
【年(卷),期】2002(025)002
【摘要】血管活性肠肽是一种神经肽，又是一种小分子免疫活性肽。
随着与相应血管活性肠肽受体的cDNAs被克隆和表达，对血管活性肠肽的免疫学民有了更深入的认识。
血管活性肠肽通过影响细胞因子的产生、调节炎症反应、影响胸腺细胞的分化、调节Th细胞应答来参与免疫自稳的调节，并可抑制T淋巴细胞的凋亡、抑制T细胞介导的细胞毒作用。
【总页数】4页(P73-76)
【作者】徐海燕
【作者单位】潍坊医学院免疫学教研室，山东潍坊261042
【正文语种】中文
【中图分类】R392.12
【相关文献】
1.穴位埋线疗法对慢传输型便秘结肠传输功能及血浆P物质、血管活性肠肽的影响[J], 张群;赵跃萍
2.血清血管活性肠肽、降钙素原及血清淀粉样蛋白A在儿童肠炎鉴别诊断中的价值 [J], 黄玲;廖春
3.大黄对小鼠水通道蛋白3、4及血管活性肠肽的影响 [J], 包佳鹭;赵伟;路一璇;何欣;刘海隆
4.柴芩承气汤对重症急性胰腺炎并发肠梗阻患者免疫功能及血清血管活性肠肽胃动素胃泌素水平的影响 [J], 朱锋;瞿昌晶;陈慧丽;汪漩;俞洪韵;陶治华;杨力;赵越
5.针灸联合康复治疗对于脾胃虚寒型慢性胃炎的临床疗效及其对血管活性肠肽胃泌素及血清胃动素影响的研究 [J], 邓水仙
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血管活性肠肽对关节炎诱发神经传入冲动的影响血管活性肠肽（VIP）是一种神经递质，存在于中枢和外周神经，它在关节炎中对疼觉信息上传的作用尚不清楚。
本实验的目的是观察VIP对关节炎模型大鼠外周神经传入冲动的影响。
研究结果表明VIP注射入炎症膝关节，可显著地减少神经传入冲动的发放频率。
标签：血管活性肠肽；骨关节炎模型；神经传入冲动血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide，VIP）作为经典的神经递质，存储在神经末梢的囊泡中，广泛存在于动物及人大脑、脊髓和周围神经，在正常生理状态下，VIP的释放对维持血管的扩张状态具有重要作用。
由于VIP对疼痛信息外周传递的影响如何尚未知，本实验的目的是观察VIP对关节炎模型外周神经传入冲动的影响。
为鉴定和评估药物的治疗作用提供一个新的可靠方法。
1. 材料与方法单碘醋酸钠（MIA）和血管活性肠肽（VIP）等购买于Sigma - Aldrich公司，药物用新鲜的0.9％生理盐水溶解，雄性Wistar大鼠，体重100-200克，动物被安放在室温22℃的鼠笼内。
关节炎疼痛模型，详细的过程已在前文描述[1]，大鼠用异氟醚作吸入性深麻醉，伴随氧气供应。
MIA（3 mg/50l）的生理盐水溶液进行右膝关节腔内注射，大鼠被饲养14天[2]。
大鼠被用25％氨基甲酸乙酯深麻醉（2克/公斤体重，腹腔注射），麻醉深度，由检测大鼠缩爪反射的消失来确定。
然后进行手术分离膝关节传入纤维，大鼠被安放在温控加热毯上，其体温维持在37 oC，核心体温的测量由直肠插入温度计，并通过温控加热仪进行反馈调控。
气管插管连接到一个啮齿类人工通气呼吸泵，进行人工呼吸，输入100％氧气（通气量为2.5毫升/次，呼吸频率为50次/分）。
用细导管（0.5mm的内径）进行左侧颈动脉插管，导管内充满生理盐水包含有肝素（100单位/毫升）。
该套管连接到一个压力传感器，可以进行连续血压测量和监控。
左侧颈内静脉也进行插管（0.40毫米的内径），通过导管注入肌肉松弛剂三碘季铵酚（50mg/kg），以消除后肢神经肌肉产生的肌电干扰。
血管活性肠肽（VIP）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠脑组织 IL-17A含量的影响杨元;袁正洲;吕志宇;张淑江;李晓红;李作孝【摘要】目的：探讨血管活性肠肽（ vasoactive intestinal peptide， VIP ）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（ experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE）大鼠脑组织IL-17A含量的影响。
方法60只健康雌性Wistar大鼠随机分成正常对照组、EAE对照组、VIP低剂量防治组和VIP高剂量防治组。
利用髓鞘碱性蛋白（ MBP）＋完全福氏佐剂（ CFA）诱导建立EAE模型。
自造模当日起，每隔一日分别对VIP低、高剂量防治组大鼠腹腔注射VIP 4 nmol／kg（0.2 mL）、16 nmoL／kg（0.8 mL），正常对照组及EAE对照组注射0.8 mL生理盐水，连续10 d。
观察大鼠发病情况；ELISA法检测脑组织匀浆中IL-17A因子含量变化；免疫组化技术，利用抗胶质纤维酸性蛋白抗体（ GFAP）检测脑组织内的星型胶质细胞活化情况。
结果 VIP各剂量防治组大鼠发病潜伏期延长、进展期缩短、发病高峰期神经功能障碍评分（ NDS）降低，脑组织匀浆中IL-17A含量降低，活化的星型胶质细胞即GFAP＋细胞量减少，且各剂量组间存在一定剂量依赖关系。
结论 VIP通过降低脑组织中IL-17A含量、抑制星型胶质细胞活化，发挥对EAE的防治作用。
%Objective To explore the effect of vasoactive intestinal peptide (VIP) on the content of IL-17A in the brain tissue of rat models of experimental autoimmune encephalomyelitis ( EAE) .Methods Sixty healthy female Wistar rats were randomly divided into normal control group, EAE control group, low-dose VIP group and high-dose VIP group. Ten healthy guinea pigs were used to prepare anti-IL-17A antibody.Myelin basic protein ( MBP) +complete adjuvant ( CFA) were used to establish the EAEmodel.Since the first day of modelling, the low-dose and high-dose VIP groups received intraperitoneal injection of VIP 4 nmol/kg (0.2 mL) and 16 nmol/kg (0.8 mL), respectively, every other day for 10 consecutive days.The normal control group and EAE group were injected with 0.8 mL saline instead of VIP.The incubation period, progression and the peak of neurological dysfunction scores ( NDS) of the rats were recorded.The levels of IL-17A in the brain tissue was determined by ELISA assay, and the GFAP+astrocyte activation in brain at morbidity peak in the rats was examined using anti-GFAP ( glial fibrillary acidic protein) antibodies.Results The incubation period were extended, the progression period was shortened and the peak neuological dysfunction score ( NDS) was decreased in the VIP-treated groups, in a dose-response relationship.The cytokine levels of IL-17A and the astrocyte activation degree in brain tissue were reduced in each VIP dose group, in a dose-response relationship.Conclusions VIP exerts therapeutic effect on experimental autoimmune encephalomyelitis through lowering the IL-17A content and inhibition of astrocyte activation in the brain tissue.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2016(026)010【总页数】5页(P32-35,68)【关键词】血管活性肠肽;实验性自身免疫性脑脊髓炎;IL-17A;GFAP+星型胶质细胞【作者】杨元;袁正洲;吕志宇;张淑江;李晓红;李作孝【作者单位】西南医科大学附属医院神经内科，四川泸州 646000;西南医科大学附属医院神经内科，四川泸州 646000;西南医科大学附属医院神经内科，四川泸州 646000;西南医科大学附属医院神经内科，四川泸州 646000;西南医科大学附属医院神经内科，四川泸州 646000;西南医科大学附属医院神经内科，四川泸州646000【正文语种】中文【中图分类】R-33多发性硬化(multiple sclerosis, MS)作为一种中枢神经系统(central nervous system，CNS)的自身免疫性疾病，其病因尚不明确，各种病因通过破坏Th1/Th2细胞免疫平衡，最终导致CNS炎细胞浸润、白质脱髓鞘、轴突变性等病理改变[1,2]。
随着对其动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)研究深入，越来越多的证据表明Th17细胞分泌的IL-17A因子在该疾病发病过程中也发挥重要的作用[3-5]。
血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide, VIP)是一种非胆碱能非肾上腺能神经递质，由28个氨基酸残基组成，属于胰高血糖素-胰泌素家族[6，7]。
研究表明VIP通过诱导免疫细胞增殖、分化、活化及迁移，抑制炎症因子(IL-17A、IFN-γ、NO等)的合成及分泌，发挥免疫调节的作用[8]。
国内外有将VIP运用在类风湿关节炎(RA)的治疗报道[9，10]，但尚未明确阐明VIP对MS发病中各种免疫细胞因子的具体作用，因此本实验通过探讨VIP对EAE大鼠脑组织IL-17A含量影响、星型胶质细胞活化影响，为临床应用VIP治疗MS提供理论依据。
1.1 主要实验动物、药物及试剂健康雌性Wistar大鼠60只(200 g～250 g/只、6～8周龄)、健康豚鼠10只(250g～300 g)/只，均购买于西南医科大学实验动物中心，均为一级合格动物【生产许可证号：SCXK(川)2013-17】(喂食清洁饲料和自来水，每日按时更换垫料，保持动物房的清洁、适宜的温度和湿度等，使用许可证号【SYXK(川)2013-181】)；血管活性肠肽(北京博奥森生物技术有限公司)；完全弗氏佐剂CFA(美国Sigma公司产品)；IL-17A ELISA免疫试剂盒(广州雅怡生物科技有限公司 )；兔抗GFAP多克隆抗体(1:160)(上海雅吉生物科技有限公司)；SP免疫组化试剂盒(武汉博士德生物技术公司)。
1.2 实验方法1.2.1 免疫抗原的制备：断颈处死10只豚鼠后，在无菌条件下迅速分离出脊髓，去脊膜，称重后移入玻璃匀浆器，与等量的0℃生理盐水混合后研磨成50%的全脊髓匀浆(WSCH)。
将完全弗氏佐剂(CFA)与WSCH等体积混合，玻璃注射器抽打至油包水乳状，以滴在水面不散即为合格抗原。
1.2.2 实验动物分组、制模及药物干预：将60只雌性Wistar大鼠随机分为四组(15只/组)：正常对照组、EAE对照组、VIP低剂量防治组、VIP高剂量防治组。
将免疫抗原注入EAE对照组、VIP低、高剂量防治组大鼠双侧后肢足掌皮下(0.2 mL/100 g)进行主动免疫，正常对照组给予等量生理盐水+CFA。
自造模当日起，VIP低、高剂量防治组每隔一日分别腹腔注射VIP 4 nmoL/kg (0.2 mL)、16 nmoL/kg (0.8 mL)，正常对照组及EAE对照组给予腹腔注射0.8 mL NS，连续10 d。
1.2.3 动态观察实验动物：自造模日起，每日早晨10 时由同一观察者采用Kono’s评分标准对大鼠进行神经功能让障碍评分(NDS)。
在发病高峰期(将连续3 d评分无加重、四肢瘫痪或死亡作为大鼠发病高峰期)处死大鼠，未发病大鼠饲养8周后处死。
1.2.4 检测脑组织匀浆中IL-17A含量变化：采用双抗体夹心(ABC-ELISA)法检测脑组织匀浆中IL-17A含量。
1.2.5 检测脑组织中星型胶质细胞的活化情况：利用免疫组织化学(SP)技术，采用抗胶质纤维酸性蛋白抗体(GFAP)检测各组大鼠脑组织内的星型胶质细胞活化情况。
将大鼠脑组织行石蜡切片后常规脱蜡、水化、清除内源性过氧化物酶活性、封闭组织蛋白后，逐次滴加一抗(以1∶160 稀释的兔抗GFAP多克隆抗体)、生物素标记的二抗 (山羊抗兔IgG抗体)、链霉卵白素(辣根酶标记)，DAB显色液，复染，脱水，透明，封片。
400倍光镜下观察大鼠脑组织GFAP+细胞表达情况，胞质呈棕黄色为阳性细胞。
采用ImagePro Plus 软件分析GFAP+细胞的平均光密度值(IOD)，对GFAP+表达行半定量测定。
计量资料结果以±s 表示；多组计量资料均数比较，当方差齐时用单因素方差分析，方差不齐时采Kruskal-Wallis检验；两两比较采LSD检验；变量间相互关系采用Pearson 直线相关分析。
