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天然虾青素分析方法的研究进展虾青素是一种特殊生理活性的物质，具有超强的抗氧化、抗衰老、抗癌、提高免疫力等作用。
近些年国内外在天然虾青素的分析方法上有了一定的进展，本文对薄层层析法、紫外光谱法，液相色谱法等分析方法进行了综述。
标签：虾青素；薄层分析；比光谱导数法；光镊拉曼光谱法；高效液相色谱法1前言虾青素是一种端基为酮基的类胡萝卜素色素，化学名称为3，3’-二羟基-4，4’-二酮基-β，β’-胡萝卜素，分子式为C40H52O4，又名虾黄素，虾黄质，龙虾壳色素，是一种非维生素A源类胡萝卜素。
虾青素不仅具有很强的抗氧化性、抗肿瘤及增强免疫的生理功能，而且拥有艳丽的红色及极强的色素沉积能力，国外已成功用于高档水产养殖[1]。
基于虾青素特殊的结构，分别在两端的环结构上存在手性中心，每个手性中心有两种构象，因此存在三种立体异构体，分别是左旋、右旋和消旋体[2]。
虾青素色泽为粉红色，具脂溶性，不溶于水，易溶于氯仿、丙酮、苯和二硫化碳等有机溶剂[3]。
动物实验表明，虾青素可以清除二氧化氮、硫化物、二硫化物，也可降低脂质过氧化作用，有效的抑制自由基引发的脂质过氧化。
另外，虾青素还具有很强的抑制肿瘤发生、增强免疫功能等生理作用[4]。
因而在食品添加剂、水产养殖、化妆品、保健品和医药工业方面有广阔的应用前景。
目前虾青素的主要来源是从水产品废弃物中提取、利用藻类和酵母生产[5]，因此研究快速、简便、准确的虾青素含量测定方法是十分必要的。
本文论述了薄层层析法、比光谱导数法、分光光度法、光镊拉曼光谱法、高效液相色谱法五种检测方法。
2虾青素的分析方法2.1薄层层析法薄层层析以其简单、廉价、快速、适用范围广的优点而成为天然藥物提取、分离过程中常用的检测、分析手段。
样品溶液用毛细管点在薄层板的一端，置密闭槽中，加入适宜溶剂为流动相。
由于毛细管原理，溶剂被吸上，沿板移动，并带动样品中各组分向前移动，这个过程称为展开。
由于各组分性质不同，移动距离不同，展开一定距离后，即得互相分离的组分斑点。
虾青素化学分析方法富士化学测试方法：前言：高效液相色谱法（HPLC）分析虾青素含量包括两个重要步骤：藻粉中虾青素的提取及之后的脱脂过程。
这两个过程都会影响色谱分析结果，而分光光度计法则只要求虾青素的提取过程完全彻底即可。
因为微藻体内的虾青素在化学结构上有两个羟基（3和3’位置上），因此其往往与脂肪酸结合形成酯类，故虾青素存在形式主要有三种：二酯、单酯和自由体，不同藻系三种形式的含量不同，一般二酯成分最高70-80%左右，单酯10%左右，而自由体仅占5%左右。
相比较二酯和单酯形式自由体的极性更强。
分光光度法测定的是474nm波长下类胡萝卜素的吸光度，以此计算出的含量中包含其他一些类胡萝卜素成分，如β-类胡萝卜素、角黄素和叶黄素等，因此不甚准确；而在HPLC 分析中，很难对酯化虾青素成分进行精确定量，因此常常采用酶水解的方法将二酯和单酯结构的虾青素水解为自由体，然后进行色谱分析。
一般化学脱脂反应如皂化反应不能用于虾青素脱脂，因为皂化反应条件易造成虾青素的氧化和降解，使得测量结果偏低。
在HPLC分析中，若酶水解不完全，在色谱图中11min左右的反式结构的虾青素色谱峰会相对较小，且在保留时间约20-30min处会看到大量酯化成分的色谱峰，可作为判断样品是否完全水解的依据。
试剂及设备：试剂：0.05M Tris-HCl缓冲液（PH 7.0）；胆固醇酯酶；Trans-bata-apo-8’-carotenal；虾青素；1%（v/v）磷酸；丙酮；正己烷，石油醚，甲醇；甲基异丁基谜；十水硫酸钠；无水硫酸钠。
设备：10ml 离心管；30ml、100 ml 、200 ml、500ml容量瓶；0.45um 针筒过滤器；水浴锅；分析天平；离心机；超声波破碎仪；分光光度计；HPLC；色谱柱。
（具体试剂及设备型号见文献）实验步骤：2.0 水解酶的配置：准确称取一定量的胆固醇酯酶溶解于50mM Tris-HCL(PH 7.0) 中，使最终酯酶浓度为4单位/ml. (现配现用，不能冷冻保存)。
虾青素试验方法警告----本产品对光敏感，在操作过程中应避光操作。
三氯化锑-三氯甲烷溶液有强腐蚀性，在操作过程中应注意避免与皮肤接触，如不慎接触到皮肤，应立即用清水冲洗。
本标准所用的试剂和水，除非另有说明，均指分析纯试剂和符合GB/T6682中规定的三级水。
4.1 试剂和溶液4.1.1 三氯甲烷。
4.1.2 无水乙醇。
4.1.3 BHT（2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚）。
4.1.4 三氯化锑-三氯甲烷溶液：称取1g三氯化锑用4ml三氯甲烷溶解即得（现配现用）。
4.2 仪器和设备4.2.1 紫外-可见分光光度计。
4.2.2 分析天平。
4.2.3 超声波清洗器。
4.2.4 恒温水浴装置。
4.2.5 离心机（离心试管体积大于20ml）。
4.2.6 氮气吹干装置。
4.2.7 孔径为0.84mm的分析筛。
4.2.8 孔径为0.425mm的分析筛。
4.3 鉴别4.3.1 取试样约10mg于试管中，加50℃-60℃热水1ml，于50℃-60℃热水浴中超声5min。
冷至室温后，加入三氯甲烷（4.1.1）10ml并振摇30s，静置分层后，取三氯甲烷层溶液3ml与三氯化锑-三氯甲烷溶液（4.1.4）1ml反应，溶液应立即显蓝紫色。
4.3.2 取含量测定项（4.4.1）下的待测液，以三氯甲烷为空白，使用1cm的比色皿，于分光光度计上扫描波长200nm-600nm之间的吸收光谱，其最大吸收波长应在波长 484nm-490nm之间，光谱图参见附录A。
4.4 含量4.4.1 测定待测液：称取试样0.15g（精确至0.0002g），置于250ml棕色容量瓶中，加入BHT（4.1.3）约10mg，加入蒸馏水10ml，在50℃-60℃热水浴中超声5min，流水冷却至室温，加入无水乙醇（4.1.2）100ml和三氯甲烷100ml，于室温水浴中超声5min，用三氯甲烷稀释至刻度摇匀。
取该溶液适量，置于具塞离心管中离心5min（转速为3000r/min），精密称取上层清液2ml于50ml棕色容量瓶中，将容量瓶置于约45℃的水浴中，用氮气流吹干，用三氯甲烷溶解并稀释至刻度，摇匀，即为待测液，应立即测定（于20min内完成测定）。
虾青素检测方法虾青素分析方法1.仪器：Agilent 1100 旋转蒸发器超声波2.试剂：无水乙醇三氯甲烷正己烷（HPLC）丙酮（HPLC）3.检测方法：色谱柱：ZORBAX RX-SIL 4.6×250mm,5um流动相：正己烷：丙酮=86：14柱温：25℃检测波长：470nm（VWD）流速：1.2ml/min进样体积：20ul4.溶液配制供试品溶液：精密称取虾青素（微粒）样品100mg，置于250ml容量瓶中，加5ml水，50℃水温超声10min，使样品完全溶解。
冷却到室温，加100ml无水乙醇，用三氯甲烷定容。
取一定量的溶液离心，转速2500/min，5min。
移取上清液5ml于蒸馏烧瓶中，50℃旋转蒸发，残渣用4ml三氯甲烷溶解，移入50ml容量瓶中，并用正己烷定容。
此溶液为供试品溶液。
标准品溶液：精密称取虾青素对照品10.0mg，置于100ml容量瓶中，加10ml 三氯甲烷，冷水超声溶解，加正己烷稀释至刻度，摇匀。
移取此溶液5ml于50ml容量瓶中，加4ml三氯甲烷，用正己烷稀释至刻度，摇匀，此溶液为标准品溶液。
5.计算虾青素含量＝样品峰面积×标准品质量×250×10×标准品含量×100％÷标准品峰面积÷样品质量÷100÷1010%虾青素干粉的紫外检测方法1.样品液配制取待测样品100毫克干粉至250毫升棕色容量瓶中，加5毫升去离子水，在50摄氏度条件下超声溶解5min，冷却后，加100毫升无水乙醇摇匀，再用氯仿定容，过滤。
取5毫升上述溶液至50毫升容量瓶中，再用氯仿定容至刻度。
2.虾青素空白溶液用氯仿做空白。
在474nm处测最大吸收值。
3.结果计算C=A*2500/（1830*W）A为吸光系数W为样品重量虾青素晶体、油悬检测方法1.样品液配制取待测样品20毫克晶体（或油悬液60毫克）至100毫升棕色容量瓶中，加入10毫升氯仿溶解，加正己烷定容，摇匀，取1毫升上述溶液至100毫升容量瓶中，再用正己烷定容至刻度。
高效液相色谱法对水产品中虾青素的测定作者：吴祥庆，黎小正，杨妹丽，等来源：《湖北农业科学》 2014年第20期吴祥庆，黎小正，杨姝丽，吴明媛，谢宗升，陈静，秦振发，黄鸾玉（广西水产科学研究院广西渔业病害防治环境监测和质量检验中心，南宁５３００２１）摘要：建立水产品中虾青素含量的高效液相色谱测定方法。
样品经乙腈萃取、超声提取、离心后，将上清液旋转蒸发、定容，用液相色谱－紫外检测器检测，外标法定量。
虾青素浓度在０．０２～１０.00 μｇ／ｍＬ范围内线性关系好，相关系数０．９９９５；加标回收率为９１．９％～９５．８％，检出限为１０.00 μｇ／ｋｇ。
该方法准确度高，重现性好，易操作，适用于水产品中虾青素含量的测定。
关键词：高效液相色谱法；虾青素；水产品中图分类号：Ｏ６５７．６文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０14）20－4958-02ＤＯＩ：１０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ0４３９－８１１４．２０１４．２０．０50收稿日期：２０１４－０４－２８基金项目：广西区直属公益性科研院所基本科研项目（ＧＸＩＦ－２０１２－９）作者简介：吴祥庆（１９７７－），男，广西玉林人，副研究员，主要从事渔业生态环境和水产品检测技术研究工作，（电话）０７７１－５３１４６４３（电子信箱）ｗｕｘｉａｎｇｑｉｎｇ１９＠１６３．ｃｏｍ；通讯作者，杨姝丽，工程师，主要从事渔业生态环境和水产品检测技术研究工作，（电话）０７７１－５３１４６４３（电子信箱）１３０４２６０６＠ｑｑ．ｃｏｍ。
虾青素（Ａｓｔａｘａｎｔｈｉｎ）化学名称为３，３′－二羟基－４，４′－二酮基－β，β′－胡萝卜素，分子式为Ｃ４０Ｈ５２Ｏ４，广泛存在于生物中，其抗氧化活性是维生素Ｅ的５００倍以上［１，２］，具有抗肿瘤、降血脂以及增强人体免疫的功能［３，４］。
虾青素为海洋甲壳类动物和鱼类色素的主要成分，鲑鱼、龙虾等海产品红润的肉色即为虾青素所体现，但人工养殖的水产品无法合成虾青素，须在饲料中补给［５］。
一种全反式虾青素含量测定方法
一种全反式虾青素含量测定方法是利用高效液相色谱-质谱（HPLC-MS/MS）技术进行测定的方法。
1. 检测前样品准备
首先，需要将新鲜的虾青素样品在离心管中进行离心，保留上清液。
将上清液转移至经过滤的2ml微离心管中，加入甲醇进行稀释。
然后进行涡旋混合，再进行离心，将上清液转移到色谱小瓶中，进行
进一步的测定。
2. 仪器设置
采用HPLC-MS/MS系统进行虾青素含量的测定，HPLC参数为：色
谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱（2.1mm×50mm，
1.8μm），流动相为乙腈和0.1%乙酸水溶液（V/V=8∶92），流速为
0.4 mL/min，柱温为40℃；MS/MS参数为：电喷雾离子化（ESI）正离
子模式，离子传输电压为1500 V，锥形电势为20 V，源温度为400℃，电离二次质量过滤器轻/重离子转换时间为50/950 ps，扫描模式为多
反应监测（MRM）模式。
3. 测定
将样品注射进入HPLC-MS/MS系统，进行检测和分析。
根据HPLC-MS/MS数据处理软件的分析结果得到各样品中虾青素的含量，并进行结果分析。
4. 结果分析
通过该全反式虾青素含量测定方法，可以得到准确、可靠的含量值。
同时，该方法还能检测出一些与虾青素相关的化合物，为后续药
物研究提供了更多的信息。
综上所述，该全反式虾青素含量测定方法具有测定精度高、灵敏
度高、可重复性好、同时还具备检测一些与虾青素相关的化合物的优点，可为虾青素的研究开发提供更多的技术支持。
虾青素化学分析方法虾青素是一种天然的红色素，主要存在于海洋中的甲壳类动物体内。
由于虾青素具有良好的色泽、抗氧化和健康的生理功能，因此在食品、保健品和化妆品等领域得到了广泛的应用。
为了确保虾青素的质量和安全性，需要进行化学分析以确定其含量和纯度。
本文将介绍虾青素化学分析的方法。
虾青素的化学分析主要包括以下几个方面：样品的制备、萃取、纯化和定量分析。
首先，样品的制备是整个分析过程的基础。
通常情况下，我们选择新鲜虾类作为样品，通过去壳、去头、去黄和去内脏等步骤，得到纯净的虾肉。
然后，将虾肉加工成粉末状样品，以利于后续的处理。
接下来是虾青素的萃取。
萃取是将虾肉中的虾青素从复杂的样品基质中提取出来的过程。
萃取方法有多种选择，常用的有溶剂萃取法和超声波辅助萃取法。
溶剂萃取法是将虾肉和有机溶剂（如乙酸乙酯）混合搅拌，使虾青素从虾肉中转移到有机相，再通过分离器将有机相分离出来。
超声波辅助萃取法是将虾肉加入溶剂中后，通过超声波的作用来促进虾青素的萃取。
虾青素的纯化是为了去除样品中的杂质，得到高纯度的虾青素。
纯化方法有很多种，如溶剂萃取法、硅胶柱层析法和高速离心法等。
其中，溶剂萃取法和硅胶柱层析法是较为常用的方法。
溶剂萃取法是将虾青素溶解在有机溶剂中，再通过适当的萃取剂将杂质去除。
硅胶柱层析法则是将虾青素样品涂抹到硅胶柱上，然后通过适当的溶剂系统将虾青素和杂质分离。
最后是虾青素的定量分析。
目前，常用的定量分析方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和分光光度法等。
其中，HPLC是最常用的方法之一、HPLC方法是将萃取得到的虾青素样品注入HPLC色谱仪中，通过流动相和固定相之间的相互作用，使虾青素分离出来，并通过检测器对其进行定量。
GC方法则是将虾青素样品通过气相色谱柱，利用分子的挥发性差异进行分离和检测。
分光光度法是通过测量虾青素溶液在特定波长下的吸光度来定量。
综上所述，虾青素的化学分析方法主要包括样品的制备、萃取、纯化和定量分析等步骤。
超高效液相色谱法测定虾青素陈伟珠;张怡评;晋文慧;方华;洪专【摘要】A ultra performance liquid chromatography(UPLC) method for determination of astaxanthin was developed. The determination of astaxanthin was performed on a UPLC BEH C8 column (50 mm×2.1mm,1.7μm). The influence of mobile phase,flow rate and column temperature on the separation of astaxanthin was comprehensively studied. The optimal separation condition was as follows:the mobile phase was methanol–water (volume ratio was 75∶25) with a isocratic elution profile and flow rate of 0.5 mL/min,the detection wavelength was 475 nm,the column temperature was 40℃. The mass concertration of astaxanthin has good linear ralationship with the chromatographic peak area in the range of 0.2–10.0 µg/mL,the correlation coefficient r was 0.998 8. The detection limit was 0.1 µg/mL (S/N=3). The quantitation detection limit was 0.2 µg/mL(S/N=10). The relative standard deviation of determination results was 0.41%(n=6), and the recovery was 105.8%–110.3%. The method is rapid,simple,reliable,and sensitive with a good reproducibility, it can be used for the determination of astaxanthin.%建立超高效液相色谱法快速检测虾青素的方法。
虾青素分析测定方法的研究【摘要】选择分光光度法及高效液相色谱法对测定虾青素的分析条件进行研究，从而得出最佳的测定条件。
用分光光度法和高效液相色谱法测定虾青素，标准曲线的回归方程的r2都超过了0.99。
用分光光度法测定虾青素，回收率范围为99.3-101%，相对标准偏差rsd值为0.78-1.3%；用液相色谱法测定虾青素，回收率范围为100-102% ，相对标准偏差rsd为0.62-1.4%。
这些值都在定量分析所要求的阈值范围内，可以用于定量分析。
【关键词】分光光度法；高效液相色谱法；虾青素abstract： choice two based on the spectrophotometry and high performance liquid chromatography (hplc) were developed for determination the astaxanthin. and the optimum conditions was investigated in detail. the total amount of astaxanthin was measured by spectrophotometry, the recoveries were in the range of 99.3-101%, and rsd were in the range of 0.78 %-1.3 %. also the astaxanthin was determined by hplc, and the recoveries were in the range of 100% -102%, rsd were in the range of 0.62%-1.4%. all these values were within the range of permissive threshold value on quantitative analysis, which showed that it’s feasible for measuring the content of astaxanthin by these two methods.key words: spectrophotometry；hplc；astaxanthin从动植物及菌类中提取虾青素目前还处于实验研究的基础阶段，要实现产业化生产虾青素，还必须对其提取工艺进行广泛深入的研究。
要开展这方面的研究，必须建立起快速、高效、简便的虾青素分析方法。
虾青素是一种类胡萝卜素[1]，分光光度法和高效液相色谱法是常用的两种类胡萝卜素分析方法[2,3]，这两种方法各有特点：类胡萝卜素分子因其分子结构中的共轭双键体系及离域化的π电子，在可见光区表现出强吸收带，且每种类胡萝卜素分子的最大吸收峰位置与紫外可见光光谱的精细结构都是具有特征性的。
由于类胡萝卜素分子的这种光吸收性质，溶液中的类胡萝卜素一般服从beer-lambert定律，所以通过分光光度法可实现对其精确的定量分析[4]；高效液相色谱法具有分离速度快，在线检测（如uv 检测器），灵敏度高等优点，是美国nfia（美国饲料协会）规定的测定方法。
本工作旨在通过对分光光度法和液相色谱法测定虾青素的研究，从而建立快速、有效、准确的测定虾壳中虾青素的方法。
一、材料和方法（一）材料（1）仪器：721型分光光度计（上海精科食品厂）高效液相色谱仪（日本岛津公司）ｃ18 色谱柱：250 mm×4.6 mm（迪马公司）恒温箱 202-1 型(上海市上海县试验仪器厂)ja2003 上皿电子天平（上海天平仪器厂）（2）试剂：虾青素标准品（分析纯，美国sigma公司）；乙腈（色谱纯）；甲醇、无水乙醇、二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、石油醚等均为分析纯。
（二）实验方法（1）分光光度法准确称取一定量的虾青素纯样品多份，分别用乙醇有机溶剂溶解后各自配制成1.0μg/ml、2.0μg/ml、3.0μg/ml、4.0μg/ml、5.0μg/ml、6.0μg/ml的标准溶液，用721型分光光度计测定不同波长下的吸光度。
在最大波长下，以试剂空白调零，测其吸光度。
以虾青素标准溶液的浓度为横坐标，对应的吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。
（2）高效液相色谱法1. 色谱工作条件色谱柱：c18（250mm×4.6mm）。
流动相：乙醇：甲醇：二氯甲烷＝75：15：10（v/v），流速为1.0ml/min。
柱温：室温。
检测波长为480nm，进样量20μl。
2. 标准工作曲线绘制称取一定量的虾青素标准溶液，用甲醇配制浓度分别为1.0 μg/ml、2.0μg/ml、4.0μg/ml、6.0μg/ml、8.0μg/ml、10.0 μg/ml标准溶液，分别取20μl进样，根据峰面积与相应的浓度进行线性回归，绘制标准工作曲线。
二、结果与分析（一）分光光度法分析虾青素（1）虾青素标准样品在乙醇溶剂中的最大吸收波长我们将虾青素标准样品溶解在乙醇溶剂中，在400 nm 至700 nm 范围内测其吸光度，结果如图1。
从图中可以看出，虾青素标准样品在乙醇溶剂中的最大吸收波长为474 nm。
（2）虾青素标准样品在乙醇有机溶剂中的标准曲线准确称取一定量的虾青素纯样品多份，分别用乙醇有机溶剂溶解后，以试剂空白调零，用721型分光光度计测其吸光度。
以虾青素标准溶液的浓度为横坐标，对应的吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。
结果见图2。
条件：测定波长λ=474nm从图2中可以看出，在乙醇溶剂中虾青素浓度与其吸光度具有良好的线性关系（相关系数r2大于0.999），通过测得的吸光度按其线性回归方程可计算虾青素的浓度。
（3）回收率和精密度试验精密称取虾青素10.00mg，置100ml容量瓶中，分别加入浓度为100μg/ml虾青素标准储备液2ml、3ml、4ml，用乙醇溶解并稀释至刻度。
用新建立的方法对其进行分析，计算回收率及精密度值，实验结果如表1所示。
条件同图2从表1可以看出，虾青素的回收率范围为99.3%-101%，相对标准偏差rsd值为0.78%-1.3%。
（二）液相色谱法分析虾青素（1）检测波长的选择由于hplc的检测器是紫外检测器，综合考虑乙醇有机提取溶剂的最大吸收值及灵敏度，最终选择紫外检测波长为480 nm。
（2）色谱柱类型的选择利用高效液相色谱法测定色素的国家标准，大部分都是使用c8或c18为填料的反相液相色谱法，根据本实验室现有条件，采用了填料为c18的色谱柱来进行虾青素的液相色谱测定试验。
（3）流动相及其他色谱条件的选择甲醇、乙腈、四氢呋喃、水、甲醇、二氯甲烷、丙酮等是高效液相色谱法中最常用的流动相。
在反相色谱中极性大的组分因k值较小先流出色谱柱，极性较小的组分后流出。
流动相中有机溶剂的比例增加，流动相极性减小，洗脱力增强。
用水-甲醇作为流动相，显然比较经济，但我们试验的结果是出峰时间较后，且峰形较胖，所以本实验最终采用乙腈：甲醇：二氯甲烷＝75：15：10（体积比）作为流动相，超声波脱气，进样前样品用0.45 μm微孔滤膜过滤。
流速：1ml/min；检测波长为480nm；进样量：20μl；柱温为室温。
（4）标准工作曲线及色谱图如上1.2.2.2配制系列标准溶液，按给定色谱条件试验，以峰面积（y）对各组分浓度（x）求回归方程并绘制标准工作曲线，实验结果见图3。
由图3可知：虾青素浓度在1.0～10.0μg/ml 时，其浓度与峰面积成一直线关系。
在此浓度范围内，其标准曲线的回归方程为：y=139580x+3470，其中y：表示hplc峰面积；x 表示游离虾青素浓度（μg/ml）。
相关系数r＝0.9999，线性相关性很好。
图4为虾青素标准样品的高效液相色谱图。
由图中可知出峰时间为7.432 min 左右的峰为游离虾青素。
（5）回收率和精密度测定精密称取虾青素10.00mg，置100ml容量瓶中，分别加入浓度为100μg/ml虾青素标准储备液5ml、6ml，用流动相溶解并稀释至刻度。
用新建立的方法对其进行定量分析，每个样品平行做3个，计算回收率及精密度值，实验结果如表2所示。
条件同图4.从表2中可以看出，虾青素的回收率为100%-102%；虾青素测定的相对标准偏差rsd为0.62%-1.4%。
三、结论利用虾青素不溶于水，易溶于有机溶剂的特点，将虾青素标准样品经有机溶剂处理后，利用分光光度法和高效液相色谱法对其虾青素含量进行测定，其标准曲线的回归方程的r2都超过了0.999，线性良好，能用于定量分析测定。
用分光光度法测定虾青素，回收率范围为99.3-101％，相对标准偏差rsd值为0.78-1.3％；用液相色谱法测定虾青素，回收率范围为100-102%，相对标准偏差rsd为0.62-1.4%。
这些值都在定量分析所允许的阈值范围内[5]，说明用分光光度法和高效液相色谱法均可用来准确地测定虾青素。
参考文献[1] 李浩明，高蓝．虾青素的结构、功能与应用．精细化工．2003，20(01)：35-40．[2] 应国清，王晓艳，沈寅初．高效液相色谱法分析检测虾青素．食品与发酵工业，2001，27(11)：43-44．[3] j. j . scdmak, d. k. weerasinghe, s. o. jolly. extraction and quanfitafion of astaxanthin from phaffiarhodozyma.bioteehnol tech, 1990, 4:107-112.[4] 惠伯棣．类胡萝卜素化学及生物化学．北京：中国轻工业出版社，2005．[5] l. r. armenta, l. i. guerrero, s. huerta. astaxanthin extraction from shrimp waste by lactic fermentation andenzymatic hydrolysis of the carotenoprotein complex. j food chem, 2002, 67(3):1002-1006。
