人类免疫缺陷病毒检验

人类免疫缺陷病毒检验人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency vi-rus，HIY）又称艾滋病毒，是获得性免疫缺陷综合征即艾滋病（acpuired immunodeficiency syndrome，AIDS）的病原体，属逆转录病毒科（retroviridae）的慢病毒（lentivinrs）亚科，形态为典型的D病毒，主要通过性传播途径、血液传播途径和母婴传播途径传播。

HIV有HIV-1和HIV-2两种类型，目前在世界广泛流行的是HIV-1型。

HIV基因有高度的变异性，目前在全球流行的HIV-1毒株已出现3个组，即M 组、O组和N组，其中M组又分为A到J十个基因型。

HIV-2是逆转录病毒中的另一个病毒，也可引起人患上艾滋病，但症状多较HIV-1引起的为轻，HIV-2主要在西非国家流行，其与HIV-1在血清学上有一定的交叉反应。

艾滋病是以机会感染及局部肿瘤为特点的致死性传染病。

截止2000年底，我国累计报告HIV/AIDS22517例（AIDS880例），死亡496例，估计实际感染人数远超过已发现的感染者人数，加强艾滋病的预防与控制是我国以及全世界面临的一个紧迫的问题。

1 样本采集1.1血清（浆）样本1.1.1抗原、抗体检测静脉采血，血液样品应在l2h内做到：①送到初筛实验室；②分离出血清；③装入一干净试管内，盖上试管盖；④按标准编号贴上标签。

分离出的血清应立即进行筛查实验。

若因故不能立即检测，应将血清放置－20℃低温保存；无条件时亦可放置4℃，但不得超过3d。

检测后的血清应于－20℃或更低温保存，以用于确认实验。

1.1.2核酸检测使用EDTA抗凝血浆标本，抗凝后6h内分离血浆；如使用血清标本，则需在2h内分离血清，标本的保存应在－70℃下，并避免反复冻融。

1.2全血标本全血标本主要用于提取基因组核酸和病毒核酸，静脉取血后可于4℃下短期保存，如用于提取病毒RNA，则应在取血后尽快提取。

全国人类免疫缺陷病毒检测技术规范(2023年修订版)引言本文档是全国人类免疫缺陷病毒（HIV）检测技术规范的修订版，旨在规范全国范围内HIV检测的质量和准确性，以提高HIV 感染者的早期发现和治疗。

1. 范围本技术规范适用于全国范围内所有医疗机构、疾病预防控制中心、实验室等单位进行HIV检测。

2. 术语定义- HIV：Human Immunodeficiency Virus，人类免疫缺陷病毒。

- HIV抗体：人体对HIV感染产生的免疫反应所产生的抗体。

- HIV抗原：HIV感染人体内HIV病毒产生的抗原。

- HIV核酸：HIV病毒的遗传物质（RNA）。

3. 检测方法3.1 HIV抗体检测- 检测方法应使用经国家药品监督管理部门批准的HIV抗体检测试剂盒。

- 检测过程应严格按照检测试剂盒说明书进行操作。

- 检测结果应根据检测试剂盒说明书的判断标准进行解读。

3.2 HIV抗原检测- HIV抗原检测可作为HIV感染早期诊断的辅助方法。

- 检测方法应使用经国家药品监督管理部门批准的HIV抗原检测试剂盒。

- 检测过程应严格按照检测试剂盒说明书进行操作。

- 检测结果应根据检测试剂盒说明书的判断标准进行解读。

3.3 HIV核酸检测- HIV核酸检测可作为HIV感染确认和病毒负载监测的方法。

- 检测方法应使用经国家药品监督管理部门批准的HIV核酸检测试剂盒。

- 检测过程应严格按照检测试剂盒说明书进行操作。

- 检测结果应根据检测试剂盒说明书的判断标准进行解读。

4. 质量控制4.1 检测设备- 检测设备应符合国家标准和相关法规的要求。

- 设备应定期进行校准和维护，确保其准确性和稳定性。

4.2 检测人员- 检测人员应具备相关专业知识和技能，经过专业培训并持有相关资质证书。

- 检测人员应定期参加质量控制和技术培训，保持技术能力和水平。

4.3 质量控制物质- 检测过程中应使用经国家质量控制中心认证的质控物质，以保证检测结果的准确性和可靠性。

人类免疫缺陷病毒抗体定量测定作业指导书一、目的：规范人类免疫缺陷病毒抗体测定的标准操作程序，确保人类免疫缺陷病毒抗体测定的结果准确有效。

二、适用范围：在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的人类免疫缺陷病毒抗体。

三、临床意义人类免疫缺陷病毒（俗称艾滋病病毒，英文名称是Human Immunodeficiency Virus，缩写为HIV）是一种能生存于人的血液中并攻击人体免疫系统的病毒。

HIV侵入人体后主要攻击的是一种带有CD4表面抗原的淋巴细胞（T4淋巴细胞），这种细胞是免疫系统的基本组成部分，HIV通过大量、不断地复制与释放，导致T4淋巴细胞大量死亡，使人体内T4淋巴细胞明显减少，感染者免疫功能遭到严重破坏，造成免疫缺陷，降低或失去对各种致病因素的抵抗能力，临床表现为各种机会性感染与肿瘤[1]。

有的发生神经系统病变或症状，可能与神经系统的机会性感染（弓形虫病、新隐球菌感染等）有关，同时可能是亲神经型HIV毒株的直接作用造成的。

最终，病人通常死于严重的感染和肿瘤[2]。

四、方法原理本试剂盒采用双抗原夹心法原理进行检测。

以HIV 抗原包被磁微粒，辣根过氧化物酶标记HIV抗原制备酶结合物，通过免疫反应形成抗原－抗体－酶标记抗原复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与HIV抗体的含量成正比。

五、标本的采集与处理5.1.采用正确医用技术收集血清样本（详见标准血液标本前处理流程）。

5. 2.样本中勿添加叠氮钠作为防腐剂。

5.3.样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。

5.4.样本处理、收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2～8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。

使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。

六、标本拒收标准1）严重溶血、脂血 2）标本标识不明七、仪器与材料7.1.仪器：适用于Lucy2、Lumo、AutoLumoA2000化学发光检测仪。

人类免疫缺陷病毒（HIV1+2）抗体诊断试剂盒（胶体金法）标准操作规程一. 预期用途本试剂盒定性检测人血清、血浆或者全血样品中可能存在的HIV-1/HIV-2抗体，作为HIV感染的辅助诊断方法。

二. 检测原理本试剂盒利用免疫层析原理，采用双抗原夹心法检测，在硝酸纤维膜上的检测区域包被HIV-1和HIV-2区段抗原，用胶体金标记同样含有的HIV-1和HIV-2区段的标记抗原，用抗HIV抗体作为对照线原料包被到硝酸纤维膜上形成对照线。

检测时，如果样品内还有HIV抗体时，样品中的HIV抗体可与纸条前段的“胶体金-抗原”结合，形成免疫复合物，复合物由于层析作用沿膜带移动，并在包被了抗原的检测区形成一条红色线，判为阳性；如果样品内不含有HIV抗体，检测区不会形成红色线，判为阴性。

三. 试剂1.生产厂商：北京万泰生物药业股份有限公司2.规格： 1人份/袋 10人份/盒3.试剂组成：测试卡、铝箔袋、干燥剂、说明书、样品稀释液。

测试卡主要成分：塑料卡、塑料底板、吸水滤纸、硝酸纤维膜（包括包被有HIV-1和HIV-2抗原的检测线和包被有抗HIV抗体的对照线），金垫（附着有胶体金标记的HIV-1和HIV-2区段抗原）。

四. 仪器加样器五. 样品要求：1、本试剂检测人血清、血浆或全血2、血清、血浆样品3日内检测的，置2-8℃冰箱保存；超过3日不检测的样品，应低温保存。

3、全血样品建议在采血后立即检测，不可长期放置后检测。

六. 检验方法：1、检测血清或血浆样品，用加样器取80ul血清或血浆样品，缓慢滴加在测试卡加样端中心。

2、检测全血样品：在测试卡加样端中心滴加1滴（约40ul）全血样品，后立即滴加1-2滴（约40-80ul）样品稀释液。

七. 质量控制：出现阳性对照线实验结果有效，不出现阳性对照线实验结果无效。

八. 参考值：加样完毕，室温放置30分钟观察结果，出现两条红色线为阳性，只出现一条对照线为阴性。

九. 检验结果的解释阴性：只出现一条对照线阳性：出现两条红色线。

人类免疫缺陷病毒抗体检测规程
一、操作步骤：
1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。

2、将标本对应微孔按顺序编号。

3、配液：将50ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子
水20倍稀释至1000ml备用。

4、编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设
阴性对照3孔，阳性对照一型、二型各一孔，空白对照一孔。

5、加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100ul。

6、温育：覆盖黏胶纸，置37度孵育30分钟。

7、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸
干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。

1、 检验申请单独检验项目申请：人类免疫缺陷病毒抗体{缩写抗HIV （1+2）]测定。

临床医生根据需要提出检验申请。

2、 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml ，不抗凝，置普通试管中，或采用含分离胶的真空采血管。

也可采集血浆，用肝素、EDTA 或枸橼酸盐抗凝。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml 的全血标本，或少于0.1ml 的血清或血浆。

2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h 后将标本离心分离出血清或血浆，避免溶血。

离心必须达到3000rpm 15min ，离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。

2.2.2标本保存时间：室温（15-25℃）下可稳定48h ，普通冰箱中（2-8℃）稳定7d ，在-20℃最多可保存4周。

避免反复冻融。

不可使用热灭活的标本。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4-8℃冰箱内保存7d 。

2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛，避免剧烈活动。

医院检验科免疫室 体诊断试剂盒（酶联免疫法）标准操作规程 生效日期： 年 月 日版本：第1版第 页，共 页3．方法原理本实验采用HIV 特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板，用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。

当待测标本中存在HIV 抗体时，该抗体和固化的抗原结合于反应板上，并进一步与酶结合物相结合，在TMB 底物参与反应的情况下，产生显色反应。

HIV实验室诊断人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)及其相关标志的检测是预防HIV感染和艾滋病临床治疗中重要的环节，在艾滋病的防治工作中具有重要作用，如艾滋病的诊断、HIV感染的诊断、血源及器官供体的筛选、流行病学调查、艾滋病病人及HIV感染者的病情动态观察、临床治疗疗效考核以及HIV疫苗的安全性和效果鉴定等。

HIV感染标志分为病毒标志、免疫标志和相关标志三大类。

病毒标志是指直接从HIV感染者体内分离出病毒或检出HIV组成成分(抗原或核酸)。

免疫标志是指HIV感染所产生的HIV抗原、抗体等免疫物质。

相关标志是指HIV感染后与艾滋病病情进展有密切关系的某些标志，如CD4细胞、CD8细胞，β2微球蛋白、有关细胞因子等。

这些标志的测定可为HIV感染及临床疗效的考核提供极为重要的诊断、治疗和预后指征。

目前HIV抗体的检测是艾滋病实验室检测中最常用的方法，因为HIV抗体是患者感染HIV后最容易检出并且持续时间最长的免疫学标志，而且抗体的检测方法大多简便、经济，易于推广应用。

在介绍各种HIV实验室诊断方法之前，为了使实验室工作人员能够有效地确保结果准确、可靠、优质，我们必须对作为一种感染因子的HIV以及由它所导致的致命性危害有基本的认识。

实验室工作人员应特别注意病毒的结构、抗原组成，人体的免疫反应，诊断试验的基本原理、试验结果的解释，以及为了准确而有效地提供实验诊断所必需的质量保证措施。

如果由于缺乏技术专长或基本知识而造成不正确的试验结果是不可原谅的。

现将有关内容扼要介绍如下：一、人类免疫缺陷病毒(HIV)概述（一）艾滋病病原体的发现和命名(二)HIV病毒的形态结构、分类和分型HIV病毒是带有包膜的RNA逆转录病毒，在分类上属于逆转录病毒科中的慢病毒亚科。

目前发现有HIV-1和HIV-2两型。

现已将HIV-1分为M组，共10个亚型(A-J)和O组，HIV-2也至少有6个亚型（A-F）。

目录1．实验方法2. 检测原理3．标本要求4．检测试剂5．储存条件及有效期6 检验仪器7. 检验方法8. 质控9.结果计算10.参考值11. 产品性能指标12. 处理及报告13.临床意义14.验方法的局限性15.考前须知1实验方法采用双抗原夹心法.化学发光免疫测定〔CLIA)技术定性检测人血清或血浆中人类免疫缺陷病毒1型和2型抗体的含量2检测原理以HIV抗原包被磁微粒，辣根过氧化物酶标记HIV抗原制备酶结合物，通过免疫反响形成抗原－抗体－酶标记抗原复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与HIV抗体的含量成正比。

3 标本要求1). 应用正确医用技术收集血清或血浆样本。

血浆样本推荐使用EDTA、枸橼酸钠或肝素的抗凝血浆。

2). 样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果，应离心除去。

3〕.严重溶血、脂血或浑浊的样本不能用于测定。

4). 样本收集、处理后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时检测需将样本放置在2~8℃的冰箱中；假设需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，防止反复冻融。

使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。

4 检测试剂5储存条件及有效期:1). 试剂盒应保存于2～8℃，防止冷冻，防止强光照射，有效期为12个月。

2). 试剂机载稳定性•试剂包〔磁微粒混悬液、酶结合物、样品稀释液〕竖直向上存放，在2～10℃环境下冷藏保存2小时后，才可上机使用。

首次使用后，机载或在2～10℃环境下稳定期为28天。

•阴阳性对照开瓶后保存于2～8℃，稳定期为1个月；假设需使用更长时间，应分装冻存。

6检验仪器AutoLumo A2000化学发光分析仪。

7 检验方法7.1、消耗品检查：•根据仪器说明装载或检查消耗品是否充足。

•参考相应的仪器系统操作说明。

7.2、试剂包装载：•试剂包首次上机前，轻轻地倒转试剂包屡次以混合新试剂包的成分，防止产生气泡。

不要倒转已经翻开的试剂包。

•仪器通过扫描试剂包条码自动获取测试所需的参数。

人类免疫缺陷病毒抗体检测（ELISA）1. 原理在微孔条上预包被纯化基因工程人类免疫缺陷病毒I型和II型（HIV-1/HIV-2）抗原（合成肽或基因重组蛋白），采用双抗原夹心法检测血清或血浆中人类免疫缺陷病毒抗体。

样品加入包被抗原反应孔，在随后的温育过程中，若样品中含特异抗体，则该抗体与包被抗原形成抗原抗体复合物被吸附到固相，再加入酶标记的HIV-1/HIV-2抗原，最终形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，洗涤除去未结合的游离酶，加入显色剂后显色。

2. 标本采集2.1 采集前病人准备：受检者应空腹2.2 标本种类：血清或血浆2.3 标本要求：采集病人静脉血2ml（可用EDTA抗凝），室温放置不超过4小时，分离血清备用。

3. 标本储存：2-8°C保存不应超过48小时，-20°C不应超过3个月，-70°C 长期保存，应避免反复冻融。

4. 标本运输：密封，室温运输。

5. 标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。

6. 试剂6.1 试剂名称：人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒6.2 试剂生产厂家：北京万泰生物工程有限公司。

6.3 包装规格：96Test/Kit6.4 试剂盒组成：包被反应板，HIV酶标记物，阳性对照血清，阴性对照血清，浓缩洗涤液，底物A，底物B，终止液，封口膜，密封袋。

6.5 试剂储存条件及有效期：2-8°C避光保存，有效期6个月。

7. 仪器设备7.1 仪器名称：自动酶标仪7.2 仪器厂家：Rayto7.3 仪器型号：RT-61008. 操作步骤8.1 平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温（18-25°C），微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。

8.2 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。

8.3 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。

8.4 加样：用加样器在微孔反应条板孔中加入样品100l；空白孔不加任何液体；阴性对照孔和阳性对照孔，每孔分别加入阴阳对照各100l，标好位置。

滁州市第一人民医院（南区）检验科标准操作规程项目人类免疫缺陷病毒抗体测定方法（双抗原夹心法）文件编号CZYY-NQ-JYK-SOP-MY-008版本第1版编写者：郑昕审核者：陶良萍批准者：谢瑞玉批准日期：20161101 本规程自2016年11月1日起实施，每3年复审一次复审人：复审日期：文件分发部门和/或个人：医务科保管者院长办公室保管者院档案室保管者检验科主任临床免疫室√规程修订记录：修订号修订内容修订人修订日期1.原理采用双抗原夹心两步法检测人血清或血浆中的HIV1/HIV2型抗体。

在微孔板预包被基因重组HIV(1+2)型抗原，当加入的待测样本中存在HIV抗体时，将反应形成抗原抗体复合物，再与加入的酶标记基因工程HIV(1+2)型抗原反应，最后形成“固相HIV抗原-HIV抗体-酶标记HIV抗原”的免疫复合物，加入底物后形成显色反应。

2.样品要求2.1病人准备事项准备事项具体内容禁食/特种饮食不要求禁食，但由于重度脂血可能干扰检测，禁食样品最佳。

病人的准备事项安静状态下抽取静脉血，样品采集特殊要求采血时应一针见血，切忌反复穿刺，避免溶血2.2样品类型及处理方法样品类型血清或肝素、枸橼酸钠、EDTA抗凝血浆样品量最佳量5ml最少量3ml收集容器肝素抗凝管（绿帽）运输要求室温稳定性及储藏要求室温2小时冷藏温度（2-8˚C）4天-20︒C 1月-70︒C 6月标本制备4000转/分离心 5分钟制备血清/血浆标本拒收拒绝采集量不足、肉眼观察有溶血及抗凝剂类型不符的样品3.试剂名称规格储存条件有效期HIV预包被微孔板（包被基因工程HIV96人份2℃～8℃避光保存12个月抗原）HIV酶标抗原1支2℃～8℃避光保存12个月（含HRP标记基因工程HIV抗原）HIV-1型阳性对照1支2℃～8℃避光保存12个月（含HIV-1型抗体）HIV-2型阳性对照1支2℃～8℃避光保存12个月（含HIV-2型抗体）HIV抗体阴性对照1支2℃～8℃避光保存12个月（正常人血清）浓缩洗涤液2瓶2℃～8℃避光保存12个月（PBS-T缓冲液）底物A(含H2O2) 1支2℃～8℃避光保存12个月底物B（含TMB）1支2℃～8℃避光保存12个月终止液（含H2SO4）1支2℃～8℃避光保存12个月4.仪器名称厂家型号全自动酶标分析仪北京天石SM-35.方法性能5.1 特异性：阴、阳性参考品检出情况符合要求。

人类免疫缺陷病毒（胶体金法）标准操作程序1.检验目的用于体外定性检测人全血、血清或血浆样本中人类免疫缺陷病毒(HIV) 1/2型艾滋病。

2.检验程序的原理和方法采用胶体金免疫技术和层析原理，定性检测人全血、血清或血浆样本中的人类免疫缺陷病毒(HIV) 1/2型抗体。

检测阳性样本时，样本中HIV抗体与胶体金标记抗原(大肠杆菌中表达)结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组HIV-Ag(大肠杆菌表达) 结合形成“Au-HIV(1+2) -Ag-HIV-Ab-HI(1+2) -Ag”夹心物而凝聚显色，游离的胶体金标记重组Au-HIV(1+2) -Ag则在对照线处与鼠抗HIV单克隆抗体结合而富集显色。

阴性样本则仅在对照线处显色，30分钟内观察结果即可。

3.性能特征3.1用国家参考品或经国家参考品标化的企业参考品进行检定。

3.1.1阴性参考品符合率：用HV抗体阴性参考品(N1~N20)测定，要求阳性反应不得多于2份，阴性符合率(-l-)应≥18/20。

3.1.2阳性参考品符合率：HV-1型阳性参考品符合率：用HIV-1型阳性参考品(P 1~P 18) 测定，要求应全部为阳性反应， HIV-1型阳性符合率(+/+) 应为18/18；且P 18显色强度应不低于P 17； HIV-2型阳性参考品符合率：用HV-2型阳性参考品(P 19~P 20) 测定，要求应全部为阳性反应， HIV-2型阳性符合率(+/+) 应为2/2。

3.1.3最低检出限：用最低检出限参考品(S1~S3)测定，要求阳性反应不得少于1份(≥1/3)且基质血清(S1)为阴性反应。

3.1.4重复性：用重复性参考品平行检测10次，应均为阳性反应且显色度均一。

3.1.5稳定性：37℃放置20天后，其阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、最低检出限、重复性应符合要求。

3.2本试利盒测定类风湿因子阳性血清、乙型肝炎病毒(HBV) 、甲型肝炎病毒(A) 、梅毒螺旋体(TP)感染者血清不会引起干扰。

人类免疫缺陷病毒血清学检测方法研究人类免疫缺陷病毒（HIV）是一种自体免疫系统攻击的病毒，它会破坏人体的免疫功能并导致艾滋病。

艾滋病是一种慢性疾病，严重影响了患者的生活质量和寿命。

因此，对HIV进行血清学检测是至关重要的。

本文将介绍一些关于HIV血清学检测的方法和技术。

传统上，HIV检测是通过检测抗体来实现的。

HIV抗体是人体免疫系统对HIV感染的反应，它们可以在感染后数周到数月内出现。

通过检测血液中的HIV抗体，可以确定一个人是否感染了HIV。

传统的HIV血清学检测方法包括ELISA和Western blot。

ELISA（酶联免疫吸附试验）是检测HIV抗体的常见方法。

在这个过程中，被测人的血清与HIV特定蛋白质结合，这表明免疫系统已经识别该病毒。

如果抗体存在，则会导致颜色变化，这表明个体已经感染了HIV。

Western blot是ELISA的补充测试，它可以检测更多的HIV蛋白质。

Western blot测试只在ELISA测试呈阳性时进行，以确保准确性。

它通过将血清蛋白电泳到薄膜上，然后使用HIV抗体检测薄膜上的病毒。

虽然传统的血清学检测方法已经被广泛使用并且是可靠的，但它们还有一些问题。

例如，它们需要进行两次测试，这需要更长的时间和更高的费用。

此外，ELISA测试虽然可靠，但出现假阳性结果的风险仍然存在。

为了解决这些问题，研究人员已经开发了许多新的测试方法。

例如，HIV核酸测试可以在感染了HIV但尚未形成抗体时检测病毒的存在。

这种测试使用分子生物学技术来检测HIV的基因组。

近年来，研究人员还开发了一种新的HIV检测方法，称为第四代HIV检测。

此种检测方法不仅可以检测HIV抗体，还可以检测病毒本身。

第四代HIV检测可以在病毒进入人体之后仅几天内检测到，而传统的ELISA测试则需要几周时间才能获得准确的结果。

此外，研究人员正在研究一种称为“追溯免疫学”的新技术，该技术利用了单个免疫细胞的反应以检测HIV感染。

人类免疫缺陷病毒抗体检测一、标本收集及处理：人血清或血浆类标本。

二、测定原理：用基因工程（含HIV-1gp160、gp41、p24,HIV-2gp36）包被反应板，当待测标本中存在抗-HIV抗体时，该抗体与固相化的抗原结合于反应板上，然后用酶标记的抗人IgG 与抗原结合的抗体反应，最后加入底物显色。

三、试剂来源：上海荣盛生物药业有限公司四、试验器材：（一）、试验试剂：1. 预包被反应条1袋7.显色剂B (TMB) 1瓶2. 酶结合物1瓶8.终止液1瓶3. 阳性对照1瓶9.封胶纸1片4. 阴性对照1瓶10.说明书1份5. 浓缩洗涤液1瓶11.自封袋1只6. 显色剂A（TMB）1瓶（二）、试验仪器：1.洗板仪：2.酶标仪：五、试剂制备：1、洗涤液使用前按要求用蒸馏水作1： 20稀释。

2、其他试剂按说明可直接使用。

六、操作程序：1、每次试验设阴性、阳性对照各两孔，分别加入阴性、阳性对照血清1^1,再设一孔空白对照，其余孔加入1^ 1被测样本，置37C孵育30分钟。

2、洗板：1）手工洗板：弃去反应板条孔内液体，拍干；用洗涤液注满每孔，静置5-10秒，弃去孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。

2）洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，最后拍干。

3、每孔加酶结合物1^1 （空白对照孔不加），置37.。

孵育30分钟，同上法洗反应板5次。

4、每孔加显色剂A液、B液各50^1,轻轻振荡后，37C避光静置15分钟。

七、结果判断：1.终止反应：每孔加入终止液50微升，混匀。

2.测定：用酶标仪读数，可选择单波长450 nm （以空白孔校零）或双波长450/630 nm,读取各孔OD值。

3.若阴性对照读数小于0.05时，按0.05计算。

4.临界值（Cut off value）=阴性对照平均值+0.10.测试标本的计算值小于Cut off value则为HIV抗体阴性。

测试标本的计算值等于或大于Cut off value则为HIV抗体阳性。

人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体检测(乳胶法)【样本要求】静脉采血后离心获得血清、血浆样本，不同的抗凝剂如柠檬酸钠，肝素钠，EDTA，草酸钠，枸橼酸钠的血浆标本均可，在2-8℃条件下可保存一周，长期保存需-20C冷冻，应避免反复冻融，发臭、溶血等异常样本请勿使用。

【检验方法】在进行检测前必须先完整阅读使用说明书，并将试剂、样本和缓冲液恢复至室温(20℃-30℃)1.从原包装铝箔袋中取出试剂。

2.将试剂放在干净的平台上，用一次性塑料吸管吸取1滴血清、血(25 Ul)于加样孔(S)中，随后加入1滴缓冲液(的40ul)，开始计时。

3.等待红色条管的出现，检测结果应在15-20分钟判读，20分钟后判读结果无效【检验结果的解释】阳性(+)：两条红色条出现。

一条带位于检测区内(T)，另一条带位于质控区内(C)。

阴性(-)：仅质控区(C)出现一条红色条，在检测区内(T)无红色条带出现。

无效:质控区(C)未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。

在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂新检测。

如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系【检验方法的局限性】1.本试剂仅用于体外诊断2.本试仅用于检测人血清、直浆样本，用其它样本或溶液检测的结果可能有误。

3.本试剂为定性检测。

无法确定样本中HIV抗体的水平。

4.本试剂仅用于HIV抗体初筛检测，HIV抗体确认应遵循相关法规和标准在有资质的HIV确认实验室进行。

5.阳性结果须经相关确证方法的确认或经过国家法定的其他方式处理。

6.受分析灵敏度所限，阴性结果不能完全排除艾滋病毒感染的可能性，可能系样本中抗体浓度低于本产品的灵敏度所致，对于有怀疑的结果建议采用灵数度更高的其他类方法进行复核。