植物中硝态氮的测定方法

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硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况,因此可作为土壤肥氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

(一)原理

在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,硝基水杨酸在碱性条件下(PH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可直接比色测定。

(二)仪器与用具

(1)722型分光光度计1台;(2)电子顶载天平1台(感量1/万);(3)刻度试管20ml26支;(4)刻度吸管0.1ml. 0.5ml. 5ml. 10ml各1支;(5)容量瓶50ml8个;(6)容量瓶25ml3个;(7)小漏斗(∮5cm)3个;(8)玻棒1根;(9)洗耳球1个;(10)电炉1个;(11)铝锅1个;(12)玻璃塞;(13)定量滤纸7cm。

试剂:

500ppmNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中,定容至200ml。

5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100ml,浓硫酸中(密度为1. 84),搅拌溶解后,贮于棕色瓶中。置冰箱保存一周有效。

8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。

(三)实验步骤

1. 标准曲线的制作

(1)吸取500ppmNO3-标准溶液1ml. 2ml. 3ml. 4ml. 6ml. 8ml. 10ml. 12ml分别放入501ml容量瓶中,用无离子定至刻度,使之成10. 20、30、40、60、80、100、120、ppm的系列标准溶液。

(2)吸收上述系列标准溶液0.11ml,分别放入刻度试管中,以0.11ml无离子水代替标准溶液作空白,再分别加入0.4ml水杨酸一硫酸溶液,摇匀,在室温下放置20分钟后再加入8%NaOH溶液9. 51ml摇匀冷却至室温,显色液总体积为101ml。

(3)以空白作参比,在410nm波长下测定吸光度。以NO3-N浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

2. 样品中硝酸盐的测定

(1)样品液的制备,取一定量的植物材料剪碎混匀后,精确称取2-3克分别放入三支刻度试管中,加入10ml无离子水,用玻璃塞封口,置入沸水浴中提取30分钟,到时间后取出,用自来水冷却,将是取液过滤到25ml容量瓶中,并反复冲洗残渣,最的定容至刻度。

(2)样口液的测定吸取样品0.1 ml分别于三支刻度试管中,然后加入5%水杨酸一硫酸溶液0.4 ml,混

匀后置室温下20分钟,再慢慢加入9. 5 ml 8%NaOH溶液,待冷却至室温后,以空白作参比,在410nm波长下测期吸光度。在标准曲线上查得或用回归方程计算出NO3--N浓度,再用下公式计算其含量。