土壤硝态氮的测定

土壤硝态氮的测定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO-，在紫外分光光度计波长210n m处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH、CO2-、HCO、NO-和有机质等外，吸光度均很小。

将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO2-、HCO的干扰。

NO■■—般含量极少，也很容易消除。

因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NQ「的含量。

待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。

阳。

是NQ-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NQ-在275nm处已无吸收。

但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A。

中减去，即得NQ-在210nm处的吸光度（△A）。

2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。

3、主要仪器设备紫外—可见分光光度计；石英比色皿；往复式或旋转式振荡机，满足180r/min ±20r/min 的振荡频率或达到相同效果；塑料瓶：200mL。

4、试剂溶液(1 : 9):取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。

氯化钙浸提剂[c(CaCI 2)=・L-1]:称取2.2g氯化钙(CaCI? 化学纯) 溶于水中，稀释至1L。

硝态氮标准贮备液[p (N)=100mg - L-1]:准确称取0.7217g经105〜110C烘2h的硝酸钾(KNQ，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。

硝态氮标准溶液[p (N)=10mg - L-1]:测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。

5、操作步骤称取10.00g 土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20 °C ~25 C振荡30min(180r/min ±20r/min) ，干过滤。

吸取待测液于50mL三角瓶中，加：9 H2SQ溶液酸化，摇匀。

土壤硝态氮的测定（紫外分光光度法）（一）方法提要土壤浸出液中的N03-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高的吸光度，而浸出液中的其他物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。

将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-卜、HCO3-的干扰，NO2-一般含量极少，也很容易消除。

因此，紫外分光光度法直接测定N03-的含量。

待测液酸化后，分别在2l0nm和275mm处测定吸光度。

A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。

但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。

（二）适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。

（三）主要仪器设备1、紫外可见分光光度计。

2、石英比色皿。

3、往复式或旋转式振荡机，满足180 r．min-1±20r．min-1的振荡频率或达到相同效果。

4、塑料瓶：200mL。

（四）试剂1、H2SO4溶液(1：9)：取10mI浓硫酸缓缓加入90mL水中。

2、氯化钙浸提剂[c(CaCl2·6H20)=0.01mol·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCL2·6H20)溶于水中，稀释至l L。

3、硝态氮标准贮备液[p(N)=100 ug·mL-1]：称取0.7217g经105～110℃烘2h 的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1 L，存放于冰箱中。

4、硝态氮标准溶液[p (N)=10 ug·mL-1]：测定当天吸取10．00mL硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中，用水定容。

（五）操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50.0mI氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20～25℃振荡30min(振荡频率：180r·min-1±20r·min-1)，干过滤。

（二）土壤硝态氮的测定1、酚二磺酸比色法1）方法原理土壤用饱和CaSO4 2H2O溶液浸提，在微碱性条件下蒸发至干，土壤浸提液中的NO3－—N在无水的条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。

C6H3OH(HSO3)2+HNO3→C6H2OH(HSO3)2 NO2+H2O2，4-酚二磺酸6-硝基酚-2，4-二磺酸此反应必须在无水条件下才能迅速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO3－—N含量在一定范围内成正相关，可在400～425nm处（或用蓝色滤光片）比色测定。

酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中0.1mg•L-1 NO3－—N，测定范围为0.1～2mg•L-1。

2）主要仪器分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿。

3）试剂（1）酚二磺酸试剂：称取白色苯酚（C6H5OH，分析纯）25.0g置于500mL三角瓶中，以150mL纯浓H2SO4溶解，再加入发烟H2SO475mL并置于沸水中加热2h，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。

使用时须注意其强烈的腐蚀性。

如无发烟H2SO4，可用酚25.0g，加浓H2SO4225mL，沸水加热6h配成。

试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必须贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。

（2）10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液：准确称取KNO3（二级）0.7221g溶于水，定容1L，此为100µg•mL-1 NO3－—N 溶液，将此液准确稀释10倍，即为10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液。

（3）CaSO4•2H2O（分析纯、粉状）、（4）CaCO3（分析纯、粉状）、（5）1:1 NH4OH、（6）活性碳（不含NO3－），用以除去有机质的颜色。

（7）Ag2SO4（分析纯、粉状）、Ca(OH)2（分析纯、粉状）和MgCO3（分析纯、粉状），用以消除Cl-1的干扰。

4）操作步骤（1）浸提：称取新鲜土样（注1）50g（风干土样25g）放在500mL三角瓶中，加入CaSO4•2H2O 0.5g（注2）[凝聚剂的作用，使滤液不混浊而澄清]和250.00mL蒸馏水，盖塞后，用振荡机振荡10min。

（二）土壤硝态氮的测定1、酚二磺酸比色法1）方法原理土壤用饱和CaSO4 2H2O溶液浸提，在微碱性条件下蒸发至干，土壤浸提液中的NO3－—N在无水的条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。

C6H3OH(HSO3)2+HNO3→C6H2OH(HSO3)2 NO2+H2O2，4-酚二磺酸6-硝基酚-2，4-二磺酸此反应必须在无水条件下才能迅速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO3－—N含量在一定范围内成正相关，可在400～425nm处（或用蓝色滤光片）比色测定。

酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中0.1mg•L-1 NO3－—N，测定范围为0.1～2mg•L-1。

2）主要仪器分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿。

3）试剂（1）酚二磺酸试剂：称取白色苯酚（C6H5OH，分析纯）25.0g置于500mL三角瓶中，以150mL 纯浓H2SO4溶解，再加入发烟H2SO475mL并置于沸水中加热2h，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。

使用时须注意其强烈的腐蚀性。

如无发烟H2SO4，可用酚25.0g，加浓H2SO4225mL，沸水加热6h配成。

试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必须贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。

（2）10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液：准确称取KNO3（二级）0.7221g溶于水，定容1L，此为100µg•mL-1 NO3－—N溶液，将此液准确稀释10倍，即为10µg•mL-1 NO3－—N标准溶液。

（3）CaSO4•2H2O（分析纯、粉状）、（4）CaCO3（分析纯、粉状）、（5）1:1 NH4OH、（6）活性碳（不含NO3－），用以除去有机质的颜色。

（7）Ag2SO4（分析纯、粉状）、Ca(OH)2（分析纯、粉状）和MgCO3（分析纯、粉状），用以消除Cl-1的干扰。

4）操作步骤（1）浸提：称取新鲜土样（注1）50g（风干土样25g）放在500mL三角瓶中，加入CaSO4•2H2O 0.5g（注2）[凝聚剂的作用，使滤液不混浊而澄清]和250.00mL蒸馏水，盖塞后，用振荡机振荡10min。

土壤硝态氮的测定This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020土壤硝态氮的测定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO3-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。

将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-、HCO3-的干扰。

NO2-一般含量极少，也很容易消除。

因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。

待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。

A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。

但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。

2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。

3、主要仪器设备紫外—可见分光光度计；石英比色皿；往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；塑料瓶：200mL。

4、试剂溶液(1：9)：取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。

氯化钙浸提剂[c(CaCl2)=·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCl2·6H2O，化学纯)溶于水中，稀释至1L。

硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg·L-1]：准确称取0.7217g 经105~110℃烘2h的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。

硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg·L-1]：测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。

5、操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃~25℃振荡30min(180r/min±20r/min)，干过滤。

土壤硝态氮的测定紫外分光光度法土壤硝态氮的测定紫外分光光度法1 范围本标准规定了运用紫外分光光度法测定土壤浸出液中硝态氮的原理、试剂、仪器、分析步骤、结果计算与表示、精密度、质量保证和控制等。

本标准适用于土壤中硝态氮的测定。

本方法对土壤硝态氮的检出限为0.5 mg/kg，定量限为1 mg/kg。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法HJ 634 土壤氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定氯化钾溶液提取-分光光度法NY/T 52 土壤水分测定法NY/T 1377 土壤中pH值的测定3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。

3.1吸光度 absorbance光线通过土壤浸出液前的入射光强度与该光线通过土壤浸出液后的透射光强度比值的以10为底的对数。

3.2f值 f value土壤浸出液中的有机物在220 nm波长处的吸光度和在275 nm 波长处的吸光度的比值。

4 原理利用土壤浸出液中硝酸根离子在220 nm波长附近有明显吸收且吸光度大小与硝酸根离子浓度成正比的特性，对硝态氮含量进行定量测定。

利用溶解的有机物在220 nm和275 nm波长处均有吸收，而硝酸根离子在275 nm波长处没有吸收的特性，测定土壤浸出液在275 nm处的吸光度，乘以一个校正因数（f 值）以消除有机质吸收220 nm波长而造成的干扰。

5 试剂除非另有规定，在分析中仅使用分析纯试剂，所用水应符合GB/T 6682中三级水的要求。

5.1 氯化钾浸提液[c(KCl)=1 mol/L]准确称取74.55 g氯化钾置于烧杯中，加入约400 mL水溶解。

溶解后转移到1000 mL容量瓶中定容，摇匀。

5.2 硝态氮标准储备液[ρ(N)=1000 mg/L]精确称取7.2182 g经110℃±5℃烘干2 h的硝酸钾置于烧杯中，加入约50 mL水溶解。

土壤硝态氮测定方法一、测定原理测定原理硝酸根离子在220 nm处有强吸收,在275 nm处即无吸收，而主要干扰因子。

土壤有机质均有吸收，首先测定有机质在这二个吸光度之间的转化系数(即校正因数f)，然后以浸提液在275 nm处的吸光度(A275)的f倍代替有机质在220 nm处的吸光度值，将它从浸提液在220 nm处的吸光度(A220)中扣除，即得到硝态氮在220 nm处的校正吸光度，因此，这种方法也称紫外分光光度校正因数法。

二、操作步骤：取5.00 g土样，加入50 ml 2 mol/L KCI溶液，振荡1 h，悬液静置3~5 min 后过滤。

测定浸提液在220 nm和275 nm处吸光度A220和A275。

按照下式计算校正吸光度A：A= A220 -2A275三、标准曲线：分别取10 mg/L硝态氮标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 ml 于50 ml容量瓶中，加入二次重蒸水，定容摇匀。

用1cm比色皿分别在220 nm 和275 nm处测定吸光度。

A=A220 -2A275求的校正吸光度。

求此标准曲线方程。

四、试剂配制10 mg/L NO3-N：称取0.7220 g于105 ℃烘箱中干燥冷却后的KNO3于小烧杯中，加入二次蒸馏水溶解，定量转入1000 ml容量瓶中，定容，摇匀，即为100 mg/L硝态氮标准溶液。

移取该溶液10.00 ml于100 ml容量瓶，定容，摇匀，即为10 mg/L硝态氮标准溶液。

2 mol/L KCI: 称取二倍分子量的KCI（105℃烘2 h），双蒸馏水溶解，定容至1000 ml。

五、结果计算：硝态氮(mg/kg) = C*V*D/m式中：C为从标准曲线查得的NO3-—N含量：V为浸提剂体积(ml)，50；D为稀释倍数,无稀释为1；m为土样质量(g)。

土壤硝态氮的测定文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-土壤硝态氮的测定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO 3-，在紫外分光光度计波长210nm 处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH -、CO 32-、HCO 3-、NO 2-和有机质等外，吸光度均很小。

将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH -、CO 32-、HCO 3-的干扰。

NO 2-一般含量极少，也很容易消除。

因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO 3-的含量。

待测液酸化后，分别在210nm 和275nm 处测定吸光度。

A 210是NO 3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A 275只是有机质的吸光度，因为NO 3-在275nm 处已无吸收。

但有机质在275nm 处的吸光度比在210nm 处的吸光度要小R 倍，故将A 275校正为有机质在210nm 处应有的吸光度后，从A 210中减去，即得NO 3-在210nm 处的吸光度(△A)。

2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。

3、主要仪器设备3.1紫外—可见分光光度计； 3.2石英比色皿；3.3往复式或旋转式振荡机，满足180r/min ±20r/min 的振荡频率或达到相同效果； 3.4塑料瓶：200mL 。

4、试剂4.1H 2SO 4溶液(1：9)：取10mL 浓硫酸缓缓加入90mL 水中。

4.2氯化钙浸提剂[c(CaCl 2)=0.01mol ·L -1]：称取2.2g 氯化钙(CaCl 2·6H 2O ，化学纯)溶于水中，稀释至1L 。

4.3 硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg ·L -1]：准确称取0.7217g 经105~110℃烘2h 的硝酸钾(KNO 3，优级纯)溶于水，定容至1L ，存放于冰箱中。

4.4硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg·L-1]：测定当天吸到10.00mL硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。

硝态氮测定（紫外分光光度校正因数法）双波长紫外比色法1.浸提：称取20.00g 1mm风干土，加入氯化钾溶液100ml，在振荡机上振荡1h，过滤。

2mol/l氯化钾溶液：称取149.1g氯化钾，溶于水中，稀释至1L。

10μg/ml NO3-—N标准溶液：准确称取硝酸钾0.7221g溶于水，定容1L，此为100μg/ml NO3-—N标准溶液，将此液准确稀释10倍，即为10 NO3-—N标准溶液。

2.约测：吸取水样（土壤浸提液）注入1cm光径石英比色杯中，以浸提剂为参比，在210nm波长处约测吸收值。

根据约测结果，测定浸出液应予稀释的倍数，使吸收溶液吸收值在0.1~0.8之间。

3.测定：水样（浸出液）稀释一定倍数后，吸取25ml放入50ml三角瓶中，加入1.00ml 1：9硫酸溶液（防止铵态氮转化为硝态氮），摇匀。

装入1cm光径石英比色杯在紫外分光光度计上分别于210nm和275nm处测定吸光度A210和A275，以同样稀释酸化后的饱和硫酸钙溶液为参比溶液，调节仪器的零点。

4.工作曲线绘制：吸取10mg/LNO3—N标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00ml于50ml容量瓶中，（加一定体积浸提剂）定容。

即得0.00、0.20、0.40、0.80、1.20、1.60mg/LNO3—N标准溶液。

各取25.00mL于50ml三角瓶中，加1.00ml1：9硫酸溶液，摇匀。

装入1cm光径石英比色杯在紫外分光光度计上分别于210nm和275nm处测定吸光度A210和A275。

5.结果计算：ΔA=A210-A275f其中f为校正因数，在土壤有机质含量小于50g/kg时，f可取2.2，若大于土壤有机质含量大于50g/kg，需重新测定。

硝态氮含量（mg/kg）=c*V*D/m其中c为溶液中硝态氮浓度（mg/L），V为浸提液体积（mL），m为烘干土样质量（g），D为浸出液稀释倍数，不稀释时为1。

土壤硝态氮的测定 The manuscript was revised on the evening of 2021土壤硝态氮的测定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO3-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。

将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-、HCO3-的干扰。

NO2-一般含量极少，也很容易消除。

因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。

待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。

A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。

但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。

2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。

3、主要仪器设备紫外—可见分光光度计；石英比色皿；往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；塑料瓶：200mL。

4、试剂溶液(1：9)：取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。

氯化钙浸提剂[c(CaCl2)=·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCl2·6H2O，化学纯)溶于水中，稀释至1L。

硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg·L-1]：准确称取0.7217g经105~110℃烘2h的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。

硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg·L-1]：测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。

5、操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃~25℃振荡30min(180r/min±20r/min)，干过滤。

土壤硝态氮的测定紫外分光光度法1 范围本标准规定了运用紫外分光光度法测定土壤浸出液中硝态氮的原理、试剂、仪器、分析步骤、结果计算与表示、精密度、质量保证和控制等。

本标准适用于土壤中硝态氮的测定。

本方法对土壤硝态氮的检出限为0.5 mg/kg，定量限为1 mg/kg。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法HJ 634 土壤氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮的测定氯化钾溶液提取-分光光度法NY/T 52 土壤水分测定法NY/T 1377 土壤中pH值的测定3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。

3.1吸光度 absorbance光线通过土壤浸出液前的入射光强度与该光线通过土壤浸出液后的透射光强度比值的以10为底的对数。

3.2f值 f value土壤浸出液中的有机物在220 nm波长处的吸光度和在275 nm波长处的吸光度的比值。

4 原理利用土壤浸出液中硝酸根离子在220 nm波长附近有明显吸收且吸光度大小与硝酸根离子浓度成正比的特性，对硝态氮含量进行定量测定。

利用溶解的有机物在220 nm和275 nm波长处均有吸收，而硝酸根离子在275 nm波长处没有吸收的特性，测定土壤浸出液在275 nm处的吸光度，乘以一个校正因数（f 值）以消除有机质吸收220 nm波长而造成的干扰。

5 试剂除非另有规定，在分析中仅使用分析纯试剂，所用水应符合GB/T 6682中三级水的要求。

5.1 氯化钾浸提液[c(KCl)=1 mol/L]准确称取74.55 g氯化钾置于烧杯中，加入约400 mL水溶解。

溶解后转移到1000 mL容量瓶中定容，摇匀。

5.2 硝态氮标准储备液[ρ(N)=1000 mg/L]精确称取7.2182 g经110℃±5℃烘干2 h的硝酸钾置于烧杯中，加入约50 mL水溶解。

土壤硝态氮的测定 Prepared on 22 November 2020土壤硝态氮的测定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的NO3-，在紫外分光光度计波长210nm处有较高吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。

将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-、HCO3-的干扰。

NO2-一般含量极少，也很容易消除。

因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。

待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。

A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为NO3-在275nm处已无吸收。

但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3-在210nm处的吸光度(△A)。

2、适用范围本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定。

3、主要仪器设备紫外—可见分光光度计；石英比色皿；往复式或旋转式振荡机，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；塑料瓶：200mL。

4、试剂溶液(1：9)：取10mL浓硫酸缓缓加入90mL水中。

氯化钙浸提剂[c(CaCl2)=·L-1]：称取2.2g氯化钙(CaCl2·6H2O，化学纯)溶于水中，稀释至1L。

硝态氮标准贮备液[ρ(N)=100mg·L-1]：准确称取0.7217g经105~110℃烘2h的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。

硝态氮标准溶液[ρ(N)=10mg·L-1]：测定当天吸到硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。

5、操作步骤称取10.00g土壤样品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃~25℃振荡30min(180r/min±20r/min)，干过滤。

土壤硝态氮的测定土壤硝态氮的测定4.4.2.1酚二磺酸比色法4.4.2.1.1方法原理土壤浸提液中的NO3－—N在蒸干无水怕条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。

C6H3OH（HSO3）2+HNO3→C6H2OH（HSO3）2NO2+H2O2，4—酚二磺酸6—硝基酚—2，4—二磺酸此反应必需在无水条件下才能快速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO3－—N含量在肯定范围内成正相关，可在400～425nm处（或用蓝色滤光片）比色测定。

酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中0.1mol·L—1NO3－—N，测定范围为0.1～2mol·L—1、4.4.2.1.2重要仪器分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿。

4.4.2.1.3试剂CaSO4·2H2O（分析纯、粉状）、CaCO3（分析纯、粉状）、Ca（OH）2（分析纯、粉状）、MgCO3（分析纯、粉状）、Ag2SO4（分析纯、粉状）、1:1NH4OH、活性碳（不含NO3－）。

（1）酚二磺酸试剂：称取白色苯酚（C6H5OH，分析纯）25.0g 置于500mL三角瓶中，以150mL纯浓H2SO4溶解，再加入发烟H2SO475mL并置于沸水中加热2h，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。

使用时须注意其猛烈的腐蚀性。

如无发烟H2SO4，可用酚25.0g，加浓H2SO4225mL，沸水加热6h配面。

试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必需贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。

（2）10µg·mL—1NO3－—N标准溶液：精准称取KNO3（二级）0.7221g溶于水，定容1L，此为100µg·mL—1NO3－—N溶液，将此液精准稀释10倍，即为10µg·mL—1NO3－—N标准溶液。

4.4.2.1.4操作步骤（1）浸提称取新鲜土样（注1）50g放在500mL三角瓶中，加入CaSO4·2H2O0.5g（注2）和250mL水，盖塞后，用振荡机振荡10min。

（二）土壤硝态氮的测定1、酚二磺酸比色法1）方法原理土壤用饱和 CaSO4 2H2O溶液浸提，在微碱性条件下蒸发至干，土壤浸提液中的 NO3－— N在无水的条件下能与酚二磺酸试剂作用，生成硝基酚二磺酸。

C6H3OH(HSO3)2+HNO3→C6H2OH(HSO3)2 NO2+H2O2，4- 酚二磺酸6- 硝基酚 -2 ，4- 二磺酸此反应必须在无水条件下才能迅速完成，反应产物在酸性介质中无色，碱化后则为稳定的黄色溶液，黄色的深浅与NO3－— N含量在一定范围内成正相关，可在400～425nm处（或用蓝色滤光片）比色测定。

酚二磺酸法的灵敏度很高，可测出溶液中0.1mg?L-1 NO3－— N，测定范围为 0.1 ～2mg?L-1 。

2）主要仪器分光光度计、水浴锅、瓷蒸发皿。

3）试剂（1）酚二磺酸试剂：称取白色苯酚（C6H5OH，分析纯）25.0g 置于 500mL三角瓶中，以 150mL 纯浓 H2SO4溶解，再加入发烟 H2SO475mL并置于沸水中加热 2h，可得酚二磺酸溶液，储于棕色瓶中保存。

使用时须注意其强烈的腐蚀性。

如无发烟 H2SO4，可用酚 25.0g ，加浓 H2SO4225mL，沸水加热 6h 配成。

试剂冷后可能析出结晶，用时须重新加热溶解，但不可加水，试剂必须贮于密闭的玻塞棕色瓶中，严防吸湿。

（2）10μg?mL-1 NO3－— N标准溶液：准确称取 KNO3（二级）0.7221g 溶于水，定容 1L，此为 100μg?mL-1 NO3 －— N溶液，将此液准确稀释 10 倍，即为 10μg?mL-1 NO3－—N 标准溶液。

（3）CaSO4?2H2O（分析纯、粉状）、（4）CaCO3（分析纯、粉状）、（5）1:1 NH4OH、（6）活性碳（不含 NO3－），用以除去有机质的颜色。

（7）Ag2SO4（分析纯、粉状）、 Ca(OH)2（分析纯、粉状）和 MgCO3（分析纯、粉状），用以消除Cl-1 的干扰。

ICS 65.020.01B 10DB12/T土壤样品中硝态氮的测定方法Determination of soil nitrate nitrogen天津市质量技术监督局 发布前 言本标准按照GB/T 1.1-2009起草。

本标准由天津市农业科学院提出。

本标准起草单位：天津市农业资源与环境研究所。

本标准主要准起草人：程文娟、潘洁、肖辉。

2014年4月首次发布。

土壤样品中硝态氮的测定方法1 范围本标准规定了采用紫外分光光度比色法测定土壤硝态氮的检测方法。

本标准适用于天津市范围内农田土壤硝态氮的测定。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改稿）适用于本文件。

GB/T 601-2002 化学试剂 标准滴定溶液的制备GB/T 603-2002 化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T 6682-2008 分析实验用水规格和实验方法NY/T 1121.1-2006 土壤检测 第1部分：土壤样品的采集、处理和贮存3 测定方法3.1 方法和原理利用土壤溶液中溶解的有机物在220nm和275nm处均有吸收，而硝酸根离子在220nm波长处有吸收，在275nm处没有吸收，通过两次比色测定，进而定量测定出硝酸盐氮含量。

3.2 试剂和材料本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时均指分析纯试剂和GB/T 6682-2008中规定的二级水；所述溶液如未指明溶剂均系水溶液。

试验中所需标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时均按GB/T 601、GB/T 603的规定制备。

3.2.1 氯化钠提取液：c（NaCl）=1mol/L，称取58.44g氯化钠溶于水中，定容至1000mL。

3.2.2 活性炭（不含NO3-）。

3.2.3 硫酸溶液（10%）：1份98% 硫酸（ρ=1.84g/mL）加9份水混合，摇匀,冷却。