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500nm波长
500nm波长是指在可见光谱中，光线的波长为500纳米。
可见光谱是指人眼能够看到的电磁波的一部分，其波长范围从400纳米到700纳米。
在可见光谱中，500nm波长的光线属于绿色波段，是人眼能够感知的颜色之一。
500nm波长的光线在生物荧光显微镜、显微镜和激光器等应用中具有重要的作用。
在生物荧光显微镜中，500nm 波长的光线可以穿透生物组织，并激发荧光染料，从而提供高对比度的图像。
在显微镜中，500nm波长的光线可以提供清晰的图像，并且不会对样品产生破坏。
在激光器中，500nm波长的激光器可以产生高能量的激光束，用于材料加工、医疗美容和科学研究等领域。
此外，500nm波长的光线还可以用于显微分析、光学传感器和光存储等领域。
在显微分析中，500nm波长的光线可以提供高分辨率的图像，并且可以通过选择适当的偏振方式来增强图像对比度。
在光学传感器中，500nm波长的光线可以与特定的化学物质发生共振，并且可以用于检测污染物和化学成分等。
在光存储中，500nm波长的光线可以用于记录和读取数字信息。
总之，500nm波长的光线在生物荧光显微镜、显微镜、激光器、显微分析、光学传感器和光存储等领域都有
广泛的应用。
荧光波长以及颜色
荧光波长是指物体吸收光能后所发射的光的波长范围。
不同物质的荧光波长范围各不相同，因此发出的颜色也会有所差异。
常见的荧光颜色包括：
1. 绿色：荧光绿的波长范围大约在500-570纳米之间。
2. 蓝色：荧光蓝的波长范围大约在440-490纳米之间。
3. 红色：荧光红的波长范围大约在570-650纳米之间。
除了这些基本颜色，还有许多其他的荧光颜色，如黄色、橙色、紫色等，其波长范围会有所差异。
需要注意的是，荧光颜色的产生是由物质的性质决定的，不同的物质在吸收和发射光能时会有不同的波长范围和颜色。
⏹人肉眼对光源波长的颜色感觉红色770-622 nm橙色622~597 nm黄色597~577 nm绿色577~492 nm蓝靛色492～455nm紫色455～350nm⏹常见显微镜滤光片的波长在激发波长在Ex围才能被激发，只有发射光波长大于BA/EM才能被观察到，背景光的波长只有大于DM才能被观察到。
红色滤光片G-2AEx 510-560DM 575BA 590绿色滤光片B-2AEx 450-490DM 505BA 520蓝色滤光片UV-2AEx 330-380DM 400BA 420其它荧光染料介绍【菁类染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5)】Cy2耦联基团激发波长为492nm，发光为波长510nm的绿色可见光。
Cy2和FITC使用相同的滤波片。
由于Cy2比FITC在光下更稳定。
要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂，因为这种抗淬灭剂和Cy2反应，在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。
Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮，更稳定，背景更弱。
Cy3耦联基团激发光的最大波长为550nm，最强发射光为570nm。
因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中，可使用和TRITC一样的滤波片。
Cy3在氩光灯(514nm或528nm)下可以被激发出50％的光强，在氦氖灯(543nm)或者汞灯(546nm)下则约75％。
Cy3可以和荧光素一起作双标。
Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。
Cy5耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。
在氪氩灯(647nm)下它们可被激发出98％的荧光，在氦氖灯下(633nm)为63％。
Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。
由于它的最大发射波长在670nm，Cy5很难用裸眼观察，而且不能用汞灯作理想的激发。
通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜。
在水相封片剂中应当加入抗淬灭剂。
invitrogen qubit荧光波长
【原创实用版】
目录
1.概述
2.Invitrogen QuBit 的荧光波长
3.应用领域
4.结论
正文
1.概述
Invitrogen QuBit 是一种用于生物科学研究的荧光探针。
这种探针具有高度灵敏和快速成熟的特点，使其成为生物实验的理想选择。
荧光波长是衡量荧光探针性能的重要参数之一。
2.Invitrogen QuBit 的荧光波长
Invitrogen QuBit 的荧光波长通常在 350-750 纳米范围内。
具体波长取决于所使用的荧光染料。
例如，如果使用 Alexa Fluor 488，那么荧光波长将为 488 纳米。
同样，如果使用 Orange Fluorescent Protein (mCherry)，那么荧光波长将为 610 纳米。
3.应用领域
Invitrogen QuBit 广泛用于生物科学研究，包括细胞生物学、生物化学、药物筛选、基因编辑等。
荧光波长的选择取决于实验的需要和所研究的分子。
例如，如果研究细胞内蛋白质的位置，可以使用荧光染料标记蛋白质，并通过荧光显微镜观察蛋白质的位置。
在这种情况下，荧光波长的选择将取决于蛋白质的表达和荧光染料的可用性。
4.结论
总的来说，Invitrogen QuBit 是一种非常有用的荧光探针，其荧光波长范围广泛，可以根据实验需要进行选择。
liz荧光波长
摘要：
1.荧光波长的概念
2.荧光波长的应用
3.荧光波长的测量方法
4.荧光波长的发展趋势
正文：
荧光波长是指在荧光现象中，荧光物质发射出的光的波长。
荧光是一种物理现象，当物质受到外部能量激发后，内部的电子或原子处于激发态，必须释放出能量才能回到基态，这个过程就会产生荧光。
荧光波长通常与激发光源的波长有关，但也受到荧光物质的性质和环境的影响。
荧光波长在许多领域都有应用，如生物学、化学、环境科学等。
在生物学中，荧光波长被用于标记生物分子，如蛋白质和核酸，以便于研究其功能和运动。
在化学中，荧光波长可以用于检测和测量化学物质的浓度。
在环境科学中，荧光波长可以用于监测水体中的有机污染物。
荧光波长的测量方法通常使用荧光光谱仪。
荧光光谱仪通过测量荧光物质在特定波长下的发光强度，来确定荧光波长。
此外，也可以通过测量荧光物质的激发波长和发射波长来确定荧光波长。
随着科技的发展，荧光波长的应用领域将会越来越广泛。
例如，在医学领域，荧光波长可以用于癌症的早期诊断和治疗。
在能源领域，荧光波长可以用于提高太阳能电池的效率。
在环境领域，荧光波长可以用于监测和防止水污
染。
总的来说，荧光波长是一个重要的科学概念，其在多个领域都有广泛的应用。
罗丹明b激发波长和发射波长
罗丹明B激发波长和发射波长
罗丹明B是一种广泛应用于细胞荧光显微镜技术的荧光染料，其激发
波长和发射波长是控制荧光显微成像的关键。
激发波长
罗丹明B的激发波长为约555纳米，也就是在这一波长的光照射下，
罗丹明B分子就会被激发并发出亮丽的荧光信号。
这一波长的光通常
由荧光显微镜中的汞弧灯或激光发生器产生，可以对荧光分子进行激发。
通过改变激发波长，可以控制荧光显微镜的成像深度和分辨率。
例如，在使用罗丹明B染色的活体细胞成像中，较短的激发波长可以提供更
好的空间分辨率，但也会导致较深的成像深度。
而较长的激发波长则
可以深入细胞组织成像，但分辨率会降低。
发射波长
罗丹明B的发射波长为约620纳米，也就是它在受到激发后发出的亮
丽荧光信号的波长。
这一波长的荧光信号可以被荧光显微镜中的荧光
探测器捕获和记录。
通过选择合适的发射滤光片，可以对罗丹明B的荧光信号进行进一步的筛选，以提高图像质量和信噪比。
使用较窄的发射滤光片可以减少背景噪声，提高信号的特异性。
结语
在现代细胞学和神经科学研究中，罗丹明B已成为了极其广泛的荧光染料，它的激发波长和发射波长的选择与调整对于成像质量和空间分辨率的提高至关重要。
同时，罗丹明B也为荧光显微成像的高效应用提供了正确而有力的技术支持。
显微镜荧光波长详解人肉眼对光源波长的颜色感觉红色770-622nm橙色622~597nm黄色597~577nm绿色577~492nm在激发波长在Ex范围内才能被激发，只有发射光波长大于BA/EM 才能被观察到，背景光的波长只有大于DM才能被观察到。
红色滤光片G-2AEx510-560DM575BA590绿色滤光片B-2A Ex450-490DM505BA520蓝色滤光片UV-2A Ex330-380DM400BA420Cy2Cy2比在染色耦联基团可使用和Cy375％。
Cy3波长最大(633nm)为63，Cy5很长为发射荧光，可避免来自其他生物材料荧光的干扰；并且具有极高的发射量子产率；另外PE具有非常高的水溶性而且与许多生物学或合成材料的多位点稳定交联。
【AminomethylcoumarinAcetate(AMCA)】耦联的AMCA吸收光波长最大为350nm，发荧光则为450nm。
对于荧光显微镜来说，AMCA可以用汞灯来激发，用紫外滤板来观察。
由于AMCA的信号相对较弱，单标实验中不推荐使用AMCA。
AMCA 和荧光素的荧光波长只有很小的重叠范围，而和发出长波长荧光的荧光基团没有或者只有极少的重叠，因此它最常用于多标记实验中，比如免疫荧光显微镜和流式细胞仪。
由于人眼不能很好的检测蓝色荧光，在多标记的实验中，AMCA耦联的二抗应当被用于检测大量的抗原。
AMCA和荧光素一样很快淬灭，使用抗淬灭剂可以减轻。
且由于肉眼不能很好的检测AMCA所激发的蓝色荧光，因而AMCA耦联的二抗更适用于检测大量存在的抗原。
如果使用在流式细胞仪中，AMCA 可以用汞灯或者水冷却的氩光灯激发，因为它们发出的光线是在光谱的紫外区。
注：由于观察荧光需要一定波长的激发光，必须根据实验室已有的仪器可发光的波段进行选择。
另外，多标记中对探针色彩区分程度的要求。
例如，若丹明红-X(RRX)和德克萨斯红(TR)荧光素的区别就比四甲基若丹明(TRITC)或者Cy3的区别明显。
荧光激发波长和发射波长荧光激发波长和发射波长是荧光分析中最基本的概念之一，是研究物质荧光性质不可或缺的工具。
荧光激发波长是指荧光色团被激发时吸收的外界光线的波长，而发射波长则是荧光色团发出的荧光所对应的波长。
在荧光分析和应用研究中，荧光激发波长和发射波长的测定和选择是非常重要的。
一、荧光激发波长的测定方法1.1.普通荧光分析法普通荧光分析法是测定荧光激发波长的常用方法。
根据样品的不同特性，选择恰当波长下进行荧光测定。
可以使用多种荧光分析仪器进行，例如荧光分光光度计、荧光显微镜或荧光摄影仪等。
通过扫描不同激发波长下的荧光及比较其强度，能够确定荧光分析的最佳激发波长。
1.2.多光谱扫描法多光谱扫描法是一种高级的荧光分析方法，主要针对荧光分析技术的发展趋势以及选材改进，其主要优点在于高速扫描、较高的分辨率、可重复性好、尺寸小，能够检测更广泛的样品。
但其缺点在于机器设备昂贵，保养成本高，需要经过一定的专业培训方可操作。
二、荧光发射波长的测定方法2.1.直接扫描法直接扫描法是测定荧光发射波长的最基本方法之一，通常可通过荧光显微镜测定，但其分辨率较低，误差较大。
因此，在精确测定发射波长时，可以将荧光分光光度计作为重要工具，通过设定激发波长和发射波长的具体参数，对发射波长进行精确测定。
2.2.荧光拉曼光谱法荧光拉曼光谱法也是测定荧光发射波长的新技术，其主要是在化学反应或生物学研究中应用而开发出如抗荧光污染等新方法以及仪器设备来完成该项技术。
总结：荧光激发波长和发射波长是荧光研究中的基本概念，其测定能够更准确地研究物质的荧光特性。
荧光激发波长的测定一般采用普通荧光分析法和多光谱扫描法，而荧光发射波长的测定则主要有直接扫描法和荧光拉曼光谱法等。
在实际应用中，荧光激发波长和发射波长的选择和测定，能够帮助科学家更准确地研究各类化合物或生物分子的的荧光特性。
荧光显微镜的应用原理简介荧光显微镜是一种利用荧光原理进行显微观察的仪器。
它可以通过激发样本中的荧光物质，使其发出可见光，从而获得对样本内部结构和特性的详细信息。
荧光显微镜在生物学、医学、材料科学等领域具有广泛的应用。
本文将介绍荧光显微镜的应用原理。
应用原理1.荧光显微镜的光源：荧光显微镜使用的光源通常是高压汞灯或氙灯。
这些光源能够产生强烈的紫外线光，用于激发样本中的荧光物质。
2.激发和发射波长：荧光显微镜中，激发波长是指用于激发荧光物质的光波长，而发射波长是指荧光物质发射的光波长。
通常，激发波长比发射波长更短，因为激发需要更高能量的光。
3.滤光片和镜片：荧光显微镜中使用滤光片和镜片来选择特定的激发和发射波长。
滤光片能够选择性地过滤掉非特定波长的光，从而增强荧光物质的检测。
镜片则用于聚焦光线和观察样本。
4.荧光探针：荧光显微镜中常用的荧光探针有荧光染料和荧光蛋白。
荧光染料可以选择性地与样本中的特定分子结合，并发出荧光信号。
荧光蛋白则是一类特殊的蛋白质，其基因已被改造，使其变成能够发出荧光的蛋白质。
D相机：荧光显微镜通常配备了CCD相机，用于捕捉和记录荧光信号。
CCD相机能够将荧光信号转化为数字信号，并提供高分辨率和灵敏度。
应用领域荧光显微镜具有广泛的应用领域，以下列举几个重要的应用领域：•生物学研究：荧光显微镜在生物学研究中被广泛应用。
它可以用于观察和研究细胞的结构、细胞器的定位、细胞活动和细胞分裂等过程。
同时，荧光染料和荧光蛋白还可以用于标记和追踪特定的蛋白质和分子，以研究其功能和相互作用。
•医学诊断：荧光显微镜在医学诊断中起着重要的作用。
它可以用于检测和鉴定病原体，如细菌、病毒和真菌等。
同时，荧光显微镜还可以观察和分析组织标本，诊断疾病并指导治疗。
•材料科学：荧光显微镜在材料科学领域也得到了广泛应用。
它可以用于观察和分析材料的晶体结构、表面形貌和材料性能等。
通过标记不同的荧光染料，荧光显微镜还能够追踪材料中的微观变化和反应，揭示材料的物理和化学性质。
常用荧光波长荧光是一种物理现象，指物质在受到激发后，能够发射出光线的现象。
荧光现象广泛应用于科学研究、工业生产和日常生活中。
荧光的波长是指荧光发射的光线的波长，不同的物质受到不同的激发后，荧光发射的波长也会不同。
以下是常用荧光波长的介绍。
1. 紫外荧光波长紫外荧光波长是指在紫外光激发下，物质发射的荧光波长。
紫外荧光波长通常在200-400纳米之间，常用于荧光显微镜、荧光染料和荧光探针等领域。
紫外荧光波长的应用范围广泛，可以用于生物学、医学、化学、材料科学等领域的研究。
2. 蓝色荧光波长蓝色荧光波长是指在蓝色光激发下，物质发射的荧光波长。
蓝色荧光波长通常在400-500纳米之间，常用于LED照明、荧光染料和荧光探针等领域。
蓝色荧光波长的应用范围广泛，可以用于生物学、医学、化学、材料科学等领域的研究。
3. 绿色荧光波长绿色荧光波长是指在绿色光激发下，物质发射的荧光波长。
绿色荧光波长通常在500-600纳米之间，常用于LED照明、荧光染料和荧光探针等领域。
绿色荧光波长的应用范围广泛，可以用于生物学、医学、化学、材料科学等领域的研究。
4. 黄色荧光波长黄色荧光波长是指在黄色光激发下，物质发射的荧光波长。
黄色荧光波长通常在600-700纳米之间，常用于LED照明、荧光染料和荧光探针等领域。
黄色荧光波长的应用范围广泛，可以用于生物学、医学、化学、材料科学等领域的研究。
5. 红色荧光波长红色荧光波长是指在红色光激发下，物质发射的荧光波长。
红色荧光波长通常在700-800纳米之间，常用于LED照明、荧光染料和荧光探针等领域。
红色荧光波长的应用范围广泛，可以用于生物学、医学、化学、材料科学等领域的研究。
总之，荧光波长是荧光现象的重要特征之一，不同的荧光波长在不同的领域有着广泛的应用。
随着科技的不断发展，荧光波长的应用也将不断扩大和深化。
500nm 波长
【实用版】
目录
1.500nm 波长的概述
2.500nm 波长的应用领域
3.500nm 波长的特性
正文
500nm 波长，属于可见光范围，位于绿色光谱区域。
在科学研究和工程应用中，500nm 波长具有广泛的应用。
首先，在生物学领域，500nm 波长被用于荧光显微镜的照射光源。
荧光显微镜是一种利用荧光物质在特定波长光照射下产生荧光的原理，对生物组织进行观察和研究的显微镜。
500nm 波长的绿光能够使荧光物质产生强烈的荧光，使得细胞和组织的结构和功能能够清晰地被观察到。
其次，在环境监测领域，500nm 波长也被广泛应用。
例如，在监测水质中，500nm 波长可以用于测量水中的化学物质，如叶绿素等。
叶绿素是一种绿色的光合色素，它在 500nm 波长的光照射下，会产生强烈的荧光，通过测量这种荧光，可以了解水体的富营养化程度，从而进行水质的监测和管理。
此外，500nm 波长还具有良好的光生物安全性。
在光生物安全标准中，500nm 波长的光被认为是安全的，不会对人体和动植物造成伤害。
因此，500nm 波长被广泛用于照明设备和显示设备中，如绿色 LED 灯和显示器等。
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⏹人肉眼对光源波长的颜色感觉红色770-622nm橙色622~597nm黄色597~577nm绿色577~492nm蓝靛色492～455nm在激发波长在Ex范围内才能被激发，只有发射光波长大于BA/EM才能被观察到，背景光的波长只有大于DM才能被观察到。
红色滤光片G-2AEx510-560DM575BA590绿色滤光片B-2AEx450-490DM505BA520蓝色滤光片UV-2AEx330-380DM400BA420其它荧光染料介绍【菁类染料-Cyaninedyes(Cy2,?Cy3,?Cy5)】Cy2耦联基团激发波长为492nm，发光为波长510nm的绿色可见光。
Cy2和FITC使用相同的滤波片。
由于Cy2比FITC在光下更稳定。
要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂，因为这种抗淬灭剂和Cy2反应，在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。
Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮，更稳定，背景更弱。
Cy3耦联基团激发光的最大波长为550nm，最强发射光为570nm。
因为激发光和发射光波长很接近TRITC,在荧光显微镜中，可使用和TRITC一样的滤波片。
Cy3在氩光灯(514nm或528nm)下可以被激发出50％的光强，在氦氖灯(543nm)或者汞灯(546nm)下则约75％。
Cy3可以和荧光素一起作双标。
Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。
Cy5耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。
在氪氩灯(647nm)下它们可被激发出98％的荧光，在氦氖灯下(633nm)为63％。
Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。
由于它的最大发射波长在670nm，Cy5很难用裸眼观察，而且不能用汞灯作理想的激发。
通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜。
在水相封片剂中应当加入抗淬灭剂。
使用传统的表面荧光显微镜时，不推荐使用Cy5。
【藻红蛋白或藻胆色素蛋白-Phycoerythrin(PE)荧光标记二抗】存在于被称为藻红的多聚微粒中，位于叶绿素的反应中心，在自然结构中，藻红蛋白吸收光能，吸收后转化成能量，供其发育生长。
⏹人肉眼对光源波长的颜色感觉红色770-622 nm橙色622~597 nm黄色597~577 nm绿色577~492 nm蓝靛色492～455nm紫色455～350nm⏹常见显微镜滤光片的波长在激发波长在Ex范围内才能被激发，只有发射光波长大于BA/EM才能被观察到，背景光的波长只有大于DM才能被观察到。
红色滤光片G-2AEx 510-560DM 575BA 590绿色滤光片B-2AEx 450-490DM 505BA 520蓝色滤光片UV-2AEx 330-380DM 400BA 420其它荧光染料介绍【菁类染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5)】Cy2耦联基团激发波长为492nm，发光为波长510nm的绿色可见光。
Cy2和FITC使用相同的滤波片。
由于Cy2比FITC在光下更稳定。
要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂，因为这种抗淬灭剂和Cy2反应，在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。
Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮，更稳定，背景更弱。
Cy3耦联基团激发光的最大波长为550nm，最强发射光为570nm。
因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中，可使用和TRITC一样的滤波片。
Cy3在氩光灯(514nm或528nm)下可以被激发出50％的光强，在氦氖灯(543nm)或者汞灯(546nm)下则约75％。
Cy3可以和荧光素一起作双标。
Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。
Cy5耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。
在氪氩灯(647nm)下它们可被激发出98％的荧光，在氦氖灯下(633nm)为63％。
Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。
由于它的最大发射波长在670nm，Cy5很难用裸眼观察，而且不能用汞灯作理想的激发。
通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜。
在水相封片剂中应当加入抗淬灭剂。
荧光显微镜技术参数
主要技术参数：
1、光源输出：LED光源，无衰减输出＞3万小时，使用寿命内光强稳定、无衰减。
2、激发光波长范围：460－490nm，适用于临床免疫荧光检测需要。
3、光源启动后响应时间为即开即用型（达到100%预设强度）。
4、冷光源，安全环保，不含汞等有毒物质，不含有害紫外线。
5、有UPS电源供应，适用突然停电或移动操作环境。
6、配套荧光成像与图文报告系统软件系统：镜下荧光图像实时显示；荧光核型软件判读系统；能与LIS相连，生成图文报告；图像可实现多人同时观察，满足教学与科研应用。
7、具有CFDA注册证。
8、每年至少提供一次专业的光强校验服务和校准服务。
9、保修期间的免费维修服务
10、显微镜与分析软件要单一匹配。
配套的荧光成像和图文报告系统，售后服务周到。
荧光素激发波长和发射波长荧光素，这个名字听起来是不是有点高深？别担心，今天咱们就来聊聊这个神奇的玩意儿，让它在我们的生活中不再神秘，反而变得亲切可人。
首先，荧光素是一种能发光的化合物，听上去有点像魔法，不是吗？其实，它的工作原理就像一个小小的灯泡，只不过这个灯泡需要“激发”，才能让它闪闪发光。
1. 荧光素的基本知识1.1 激发波长是什么？那么，什么是激发波长呢？简单来说，激发波长就是你得给荧光素“喂”什么样的光，才能让它“高兴”起来，开始发光。
就像我们有时候需要咖啡提神，荧光素也得需要特定波长的光来激发。
通常，这个波长在紫外线范围，听上去有点像科幻片里的设定，但其实就在我们周围！1.2 发射波长又是啥？然后，再说说发射波长。
这就像是荧光素“高兴”过后，给我们展现出来的光芒。
每种荧光素发出来的光的颜色都不同，这就像每个人都有自己独特的性格一样。
你激发了它，它就会发出五光十色的光，有的可能是绿色，有的可能是蓝色，甚至是红色，真是让人眼花缭乱！2. 荧光素的应用2.1 科学实验中的大明星说到荧光素，它在科学实验中可是个大明星呢。
比如，研究人员用荧光素标记细胞，以便在显微镜下观察。
这就像是在黑暗的房间里打开了一盏灯，让所有的细胞都亮起来，研究人员可以清楚地看到它们的形态和运动。
想想看，细胞在显微镜下跳舞的场景，简直酷毙了！2.2 日常生活的小帮手不仅如此，荧光素还在我们的日常生活中发挥着作用。
你可曾在派对上见过那些荧光棒？没错，那就是荧光素的魅力所在！当你在黑暗中摇晃它时，看到的那种光亮，都是因为激发波长和发射波长的完美配合。
简直让人感到活力四射，心情瞬间就飞扬起来了！3. 小结3.1 激发与发射的乐趣总的来说，荧光素的激发波长和发射波长，就像是一对亲密的好朋友，缺一不可。
激发波长给荧光素能量，而发射波长则将这种能量转化为可见的光。
就好比我们在生活中，有时候需要朋友的鼓励才能找到自信，展现出最好的自己。
人肉眼对光源波长的颜色感觉红色770-622 nm橙色622~597 nm黄色597~577 nm绿色577~492 nm蓝靛色492～455nm紫色455～350nm⏹常见显微镜滤光片的波长在激发波长在Ex范围内才能被激发，只有发射光波长大于BA/EM才能被观察到，背景光的波长只有大于DM才能被观察到。
红色滤光片G-2AEx 510-560DM 575BA 590绿色滤光片B-2AEx 450-490DM 505BA 520蓝色滤光片UV-2AEx 330-380DM 400BA 420⏹其它荧光染料介绍【菁类染料-Cyanine dyes(Cy2,?Cy3,?Cy5)】Cy2耦联基团激发波长为492nm，发光为波长510nm的绿色可见光。
Cy2和FITC使用相同的滤波片。
由于Cy2比FITC在光下更稳定。
要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂，因为这种抗淬灭剂和Cy2反应，在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。
Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮，更稳定，背景更弱。
Cy3耦联基团激发光的最大波长为550nm，最强发射光为570nm。
因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中，可使用和TRITC一样的滤波片。
Cy3在氩光灯(514nm或528nm)下可以被激发出50％的光强，在氦氖灯(543nm)或者汞灯(546nm)下则约75％。
Cy3可以和荧光素一起作双标。
Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。
Cy5耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。
在氪氩灯(647nm)下它们可被激发出98％的荧光，在氦氖灯下(633nm)为63％。
Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。
由于它的最大发射波长在670nm，Cy5很难用裸眼观察，而且不能用汞灯作理想的激发。
通常观察Cy5时采用具有合适激发光和远红外检测器的共聚焦显微镜。
在水相封片剂中应当加入抗淬灭剂。
使用传统的表面荧光显微镜时，不推荐使用Cy5。
【藻红蛋白或藻胆色素蛋白-Phycoerythrin(PE)荧光标记二抗】存在于被称为藻红的多聚微粒中，位于叶绿素的反应中心，在自然结构中，藻红蛋白吸收光能，吸收后转化成能量，供其发育生长。
当藻红蛋白被分离和纯化后，其蛋白质变得具有很强的荧光，能吸收不同波长的光，发出亮红色的荧光，此时不再接受任何外来的光，也不能转移光能。
藻红蛋白PE的吸收波长范围较广，最大的吸收波长为566nm，最大的发射波长为574nm。
藻红蛋白作为荧光标记物具有以下优点：首先具有强的长波长激发和发射荧光，可避免来自其他生物材料荧光的干扰；并且具有极高的发射量子产率；另外PE具有非常高的水溶性而且与许多生物学或合成材料的多位点稳定交联。
【Aminomethylcoumarin Acetate (AMCA)】耦联的AMCA吸收光波长最大为350nm，发荧光则为450nm。
对于荧光显微镜来说，AMCA可以用汞灯来激发，用紫外滤板来观察。
由于AMCA的信号相对较弱，单标实验中不推荐使用AMCA。
AMCA和荧光素的荧光波长只有很小的重叠范围，而和发出长波长荧光的荧光基团没有或者只有极少的重叠，因此它最常用于多标记实验中，比如免疫荧光显微镜和流式细胞仪。
由于人眼不能很好的检测蓝色荧光，在多标记的实验中，AMCA耦联的二抗应当被用于检测大量的抗原。
AMCA和荧光素一样很快淬灭，使用抗淬灭剂可以减轻。
且由于肉眼不能很好的检测AMCA所激发的蓝色荧光，因而AMCA耦联的二抗更适用于检测大量存在的抗原。
如果使用在流式细胞仪中，AMCA可以用汞灯或者水冷却的氩光灯激发，因为它们发出的光线是在光谱的紫外区。
注：由于观察荧光需要一定波长的激发光，必须根据实验室已有的仪器可发光的波段进行选择。
另外，多标记中对探针色彩区分程度的要求。
例如，若丹明红-X (RRX)和德克萨斯红(TR)荧光素的区别就比四甲基若丹明(TRITC)或者Cy3的区别明显。
如果对灵敏度有更高的要求，则Cy3和Cy5就比其他的荧光团探针要亮。
西美杰备有全面的二抗现货产品并能提供最完整的二抗产品线。
主要二抗品牌为全球最大的二抗和底物生产厂商KPL以及前沿抗体生产商ProteinTech。
针对荧光标记二抗，有FITC、TRITC、Rhodamine、PE、Cy3/5、AMCA、Dylight等多种荧光标记二抗；按照检测物种分，有抗人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛，以及多种细菌类二抗；另外，还有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同类型抗体。
The role of filters in epi-fluorescence microscopy在激发波长在Ex范围内才能被激发，只有发射光波长大于BA/EM才能被观察到，背景光的波长只有大于DM才能被观察到。
As shown in Figure 1, filter blocks are constructed from 2 types of filters and 1 dichroic mirror. Selecting appropriate filters and mirrors for each use allows researchers to attain a high signal to noise (S/N) ratio between the fluorescence and background light. The functions of these optical elements are described below.荧光滤色块组示意图。
每个滤色块组有一个半透半反镜，一个激发光滤光片，两个发射光滤光片。
如前面介绍的，由光源发出的光透过激发光滤光片进入滤色块组，被半透半反镜反射；发射出的荧光透过发射光滤光片进入目镜或相机。
在这一组合中，半透半反镜以及左侧的发射光滤光片是固定在架子上的，而右侧的发射光滤光片则安装在一个可以拆卸的滤片框内。
只要松动螺丝，就可以拆下右侧的滤片框，然后根据需要，更换半透半反镜。
更换时需要注意，不要把固定用的胶水，涂到半透半反镜上，操作要带手套，避免将指纹留在镜面上。
??? 上述体视镜可搭配3各荧光滤色块，以及一个用于明场观察的无滤片块。
观察时，可通过拉动杠杆调节滤色块的位置，每一个滤色块配有不同的标识，便于选择。
Excitation filter (EX)——激发光The excitation filter is the optical element that passes only the wavelength of light necessary for excitation from the excitation light source (usually a mercury lamp) to the fluorophore. As shown in Figure 2, only the excitation wavelength passes through the filter, usually a "band pass filter".Dichroic mirror (DM)The dichroic mirror is the optical element that separates the excitation light from the fluorescence. Dichroic mirrors are special mirrors that reflect only a specific wavelength of light, allowing all other wavelengths to pass through (Figure 3). Dichroic mirrors used in epi-fluorescence microscope filter blocks are placed in a 45° incidence angle to light, creating a "stop band"of reflected light and a "pass band"of transmitted light. Light passing through the excitation filter is reflected 90° toward the objective and the specimen. Finally, light emanating from the specimen is passed through and directed toward the observer (or high-sensitivity camera).Barrier filters (BA) or emission (EM) filtersBarrier filters are optical elements that separate fluorescence emanating from the fluorophore from other background light. As shown in Figure 4, the barrier filter transmits light of the fluorescence wavelength which passes through the dichroic mirror while blocking all other light leaking from the excitation lamp (reflected from the specimen or optical elements). This is necessary because the strength of the fluorescent light is weaker than the excitation light by a factor of more than 100,000:1. Most barrier filters are positioned at a slight angle to allow better fluorescent imaging by suppressing ghost images.Nikon's noise terminatorNikon's epi-fluorescence microscopes have a proprietary Nikon optical element called a "noise terminator" (on models TE2000 and later). As shown in Figure 1, the noise terminator allows efficient processing of light transmitted through the dichroic mirror by preventing the excitation light from scattering within the filter block and leaking into the observed image. This helps to eliminate background light noise and more effective fluorescent images.。
