实验三、孕马血清促性腺激素效价的生物学测定

促性腺激素测定实验报告
实验目的：通过测定促性腺激素的水平，探究其在生理和疾病状态中的作用和变化规律。

实验材料和方法：将实验样本与检测试剂按照说明书要求配制，通过酶联免疫吸附分析法（ELISA）测定促性腺激素的浓度，并根据相关标准曲线计算各样本中促性腺激素的含量。

实验结果：测定结果显示，在正常生理状态下，促性腺激素的水平处于正常范围；而在某些疾病状态下，促性腺激素的水平可能升高或降低，提示相应的生理或病理变化。

实验结论：促性腺激素测定可以作为评估性腺功能和男女生殖健康状况的重要指标，对于临床诊断和治疗具有一定的指导意义。

实验总结：本实验通过促性腺激素测定，深入探究了其在生理和病理状态下的变化规律，为进一步研究性腺功能和生殖健康提供了重要参考。

实验意义：促性腺激素测定实验有助于加深对性激素调节机制的理解，为临床诊断和治疗提供了重要的实验数据支持。

99PIGS TODAYJanuary 2021文 ⊙ 赵 越 镇江句容后白畜牧兽医站 施增斌 新疆泰昆农牧科技有限公司本研究综合应用烯丙孕素、孕马血清促性腺激素等对某商品猪场8～9月龄的400头长大二元杂后备母猪进行同期发情试验，以进一步研究外源激素产品对后备母猪同期发情和繁殖性能等方面的影响。

结果表明烯丙孕素+低剂量的孕马血清促性腺激素组合配种利用率最佳。

不同激素药物促进后备猪同期发情试验报告同期发情主要是指利用外源激素诱导母猪群体在同一时期内集中发情和排卵的技术。

其主要目的是便于组织集约化生产和管理，实现母猪集中配种、分娩及断奶等。

在一个大的猪群中，每头母猪所处的发情周期阶段是随机的。

由于黄体期的时间占了整个发情周期的大部分时间（70%左右），即一群母猪中处于黄体期的个体占了大多数。

因此，控制个体猪只黄体的消长是控制母猪群同期发情的关键。

同期发情就是利用外源激素人为地控制并调整一群母猪发情周期的进程，使之在预定的时间内集中发情和排卵。

实践中常用前列腺素PGF2α来提前消除黄体，或用孕激素类药物来延长黄体期以实现群体母猪发情的同期化。

下文对促进同步发情的相关药物进行了介绍。

烯丙孕素，也叫四烯雌酮，是一种人工合成的口服型活性孕激素，以类似于天然孕酮的作用模式来抑制促性腺激素的释放，主要用于控制母猪的发情周期，可以延长母猪的黄体期。

一般以烯丙孕素直接口腔饲喂或者饲料给药，每日20mg，每日定时给药1次，连续14～18d。

孕马血清促性腺激素（PMSG）,是一种糖蛋白，来源于马属动物胎盘的杯状结构，可在妊娠30d以后的母马血液中检测到，妊娠70d左右含量最高，以后逐渐减少，至180d在母马血液中消失。

PMSG生理功能主要是促进卵泡发育，此外还具有一定促排卵和黄体形成的功能。

喜得孕GES ®，每头份含400IU孕马血清促性腺激素（PMSG）和200IU绒毛膜促性腺激素（HCG），前者能促进卵泡成熟，后者促进排卵。

孕马血清标准
孕马血清（PMSG）是一种常用的动物用促性腺激素，用于促进动物排卵和改善繁殖性能。

孕马血清的标准因生产厂家和用途而异，但通常会根据其促性腺激素的含量、纯度、生物活性、安全性等方面进行规定。

一般来说，孕马血清中促性腺激素的含量越高，其促排卵效果越好。

同时，孕马血清的纯度也很重要，高纯度的产品可以减少杂质和其他激素的干扰，提高使用效果。

此外，孕马血清的生物活性也是评价其质量的重要指标，活性越高，促排卵效果越好。

在安全性方面，孕马血清应符合相关法规和标准，如无菌、无热原、无有害微生物等。

此外，孕马血清的使用剂量和注射时间应根据具体情况而定，一般建议在兽医指导下使用。

总之，孕马血清的标准是多方面的，包括促性腺激素含量、纯度、生物活性、安全性等。

选择符合标准的孕马血清产品可以提高动物的繁殖性能和生产效益。

孕马血清促性腺激素定量检测试剂盒的建立与应用章金刚军事医学科学院输血医学研究所血清或血浆成分的检测多采用免疫学方法。

根据检测的目的不同，检测方法很多，其中酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种最为常用也比较成熟的试验技术，既可用于定性，也可用于定量。

在医学和兽医学实践中，大多数的检测试剂盒都是基于ELISA方法。

目前，用于检测抗原（包括孕马血清促性腺激素（PMSG）），多采用双抗体夹心ELISA。

理论上讲，对于孕马血清促性腺激素（PMSG）的定量检测，应该采用双抗体夹心ELISA方法。

要建立PMSG的双抗体夹心ELISA，必须首先获得特异性好、敏感性高、亲和力强的抗体。

所用抗体可以是纯化的多克隆抗体（抗血清），也可以是单克隆抗体（单特异性）。

上述两类抗体各有优缺点，关键是标准化、特异性、敏感性、重复性的问题。

以下从主要研究内容、试验技术方案、基本经费预算、可能存在问题（风险因素）等几个方面简要叙述，供参考。

一、主要研究内容1、抗原制备与鉴定无论是制备多克隆抗体，还是单克隆抗体，抗原即PMSG的纯度都至关重要。

基本要求是PMSG的纯度应为电泳纯级，毫克量以上。

否则，可能影响整个工作的开展。

2、单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备包括小鼠免疫与检测、杂交瘤细胞的融合与筛选、阳性克隆的筛选与扩增、杂交瘤细胞株的建立与鉴定（含染色体鉴定）、抗体的亚类与效价鉴定、抗体的亲和力与特异性鉴定、单抗的制备与纯化、单抗的标记与测定等。

要建立检测试剂盒，必须选出3～5株针对不同抗原决定簇的单克隆抗体，继续有关特异性、敏感性、稳定性等一系列试验。

3、多克隆抗体的制备一般选用家兔。

主要内容包括免疫与检测、血清的采集与鉴定、抗体的纯化与鉴定、抗体的标记与测定等。

多克隆抗体存在的最大缺陷是难于标准化，检测结果不稳定，这也是目前检测试剂盒多采用单克隆抗体的主要原因。

4、检测方法的建立和优化检测方法的建立和优化包括抗体和抗原最适工作浓度的优化、抗体包被浓度的优化、抗原标准含量曲线的建立、样品检测等。

北京华越洋生物提供 QQ:1733351176孕马血清促性腺激素（PMSG ）PMSG 也是一种糖蛋白激素，其特点是含糖量高，约占41～45%，而且唾液酸含量多，因而形成了PMSG 的酸性特点，故在血液中的半衰期可长达40—120小时。

PMSG 分子与垂体促性腺激素一样，也是由α和β亚单位组成，而β亚单位是表现其活性的主要部分。

其分子量为53000。

由于分子不够稳定，高温、酸、碱条件都易引起失效，同时对它的分离提纯工作也较其他糖蛋白激素困难，但是目前通过研究其肽链的编码DNA ，已经推出其α、β两亚基的氨基酸顺序。

1.PMSG 具有类似FSH 和LH 的双重活性，但以FSH 的作用为主，因此有着明显的促卵泡发育的作用，同时有一定的促排卵和黄体形成的功能。

2.对雄性动物具有促使精细管发育和性细胞分化的功能。

关于PMSG 对妊娠母马本身的确切功能和生物学特性．至今还了解不够，尚待深入研究论证。

(四)孕马血清促性腺激素的应用PMSG 是一种经济实用的促性腺激素。

在生产上常用以代替较昂贵的FSH 而广泛应用于动物的诱发发情、超数排卵或增加排卵率(如提高双羔率)；对卵巢发育不全或雄性生精能力衰退等也都可收到一定疗效。

其应用方法和常用剂量列于表2—4。

应该提出的是，在实践中进行诱发发情或超数排卵处理时，发现动物个体对PMSG 的反应性差异很大，有的个体甚至没有反应。

其原因比较复杂，是否与个体生理状态不同，或者不同个体产生不同程度的免疫性反应所致，尚有待进一步探讨。

关于PMSG 与PG 或hCG 等其他激素合用，在胚胎移植中作超排处理的方法、剂量详见有关章节。

(五)孕马全血、孕马血清制备或提取孕马血清促性腺激素的方法编码 品名 规格 单位 北京华越洋生物WX01-1000 孕马血清促性腺激素（PMSG ）1000IU 瓶 北京华越洋生物WX01-5000孕马血清促性腺激素（PMSG ） 5000IU 瓶北京华越洋生物提供QQ:17333511761.孕马全血的制备取500ml玻璃瓶，加入硼砂10g、硫代硫酸钠5g及蒸馏水30ml，在蒸锅中灭菌。