下载文档原格式
脓汁及病灶分泌物微生物学检验的标准操作程序1 检验目的做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导临床治疗及预后和流行病学的调查。
2 原理组织或器官的化脓性感染，其病原菌的来源可以分为两类：（1）．内源性：感染原是炎症局部周围器官中的正常菌群（常栖居菌群），由于损伤等因素造成正常栖居菌群进入无菌状态的组织内，发生感染。
（2）．外源性：感染是存在于人体外部自然界的微生物，由于外伤和直接接触，外界微生物通过人体表面进入人体，造成感染。
3 标本要求（1）标本类型：各部位脓性分泌物等（2）标本采集：见标本采集手册（3）标本储存和运输：室温放置，室温运输并立即送检。
（4）标本拒收状态：非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。
4 容器和添加剂类型均使用灭菌器皿盛放标本5 试剂（1）试剂名称：革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、中国蓝平板、SS平板、柯玛嘉平板、相关生化试剂等。
6仪器设备：（1）接种针、接种环、酒精灯（2）梅里埃ATB药敏鉴定仪（3）显微镜、SPX-150B型生化培养箱、超净工作台、台式离心机、天平7 校准程序(送市计量质量检测研究所校准)8 标本的处理8.1 培养：血琼脂平板和中国蓝平板式基础。
8.2 培养基选择：血平板、中国蓝、麦康凯平板、巧克力。
9 操作步骤浓汁、创伤分泌物涂片、染色镜检需氧培养厌氧培养革兰染色抗酸性染色厌氧血琼脂平板及血琼脂平板硫乙醇酸钠培养基（巧克力平板）或胞肉增菌培养基及伊红美蓝或麦康凯平板观察菌落数涂片镜检纯培养鉴定药物敏感性实验10 质量控制：参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动11 患者检验结果的可报告区间阴性：无菌生长。
阳性：根据细菌鉴定报告。
全身化脓性感染应该做哪些检查？
*导读：本文向您详细介全身化脓性感染应该做哪些检查，
常用的全身化脓性感染检查项目有哪些。
以及全身化脓性感染如何诊断鉴别，全身化脓性感染易混淆疾病等方面内容。
*全身化脓性感染常见检查：
常见检查：肾功能检查、心电图、药敏试验、血培养、脓汁和创伤感染标本细菌学检查、痰及下呼吸道分泌物标本的细菌学检验*一、检查
1、引起全身感染的病源明确的可查心电图、血肌酐、血尿
素氮(BUN)项即可; 2、对于引起全身感染的病源不明确，可
根据可疑所在器官、部位选择心电图、血肌酐、血尿素氮(BUN)+分泌物及组织培养+药敏、血培养+药敏试验项内相应基础上进行检查。
*以上是对于全身化脓性感染应该做哪些检查方面内
容的相关叙述，下面再来看看全身化脓性感染应该如何鉴别诊断，全身化脓性感染易混淆疾病。
*全身化脓性感染如何鉴别？：
*一、鉴别
主要是对败血症和脓毒血症进行鉴别。
*温馨提示：以上内容就是为您介绍的全身化脓性感染应该做哪些检查，全身化脓性感染如何鉴别等方面内容，更多更详细资料请关注疾病库，或者在站内搜索“全身化脓性感染”了解更多，希望以上内容可以帮助到大家！。
伤口及脓肿培养标本采集指南导语皮肤、软组织的急性化脓性炎症、化脓性疾病、脓肿和创伤感染等疾病的发病机制复杂，其病原菌可为单一微生物，也可由多种微生物混合感染。
临床取伤口及脓肿感染标本行细菌培养及药物敏感试验，常作为诊断和药物治疗的依据，而无效失实的培养结果则会混淆医生的正确判断，延长或延误治疗时机。
因此，临床必须联合微生物实验室共同努力，规范标本的采集、送检，确保检测结果的准确性。
1选择采集指征1.开放性损伤或术后切口感染2.导管治疗感染3.瘘管内脓液4.脓肿（包括阑尾脓肿、胸腹腔脓肿、脑脓肿、盆腔脓肿、肛周脓肿、肺脓肿、肝脓肿、肾周脓肿、淋巴结乳腺脓肿等）5.皮肤化脓（毛囊炎、疖、痈）和皮下软组织化脓感染。
2采集开放性损伤和术后切口感染先用无菌生理盐水冲洗表面，进行清创，尽量去除表层覆盖物和渗出物，再用无菌拭子擦拭病变有进展的边缘或深层基底部进行取样。
也可采集新鲜渗出物进行需氧培养，已形成肉芽或组织增生的慢性感染，可取感染部位下的组织送检。
说明：在开放性损伤和术后切口感染处不易采得合格标本，因为其表面有污染菌和大量定值菌群。
因此，在采样之前必须进行清创(可以用无菌蒸馏水或生理盐水浸湿的纱布擦拭表面，为防止重复污染，每次都要更换一个新的)单纯采集伤口脓液进行培养所得结果是不可信的，甚至会误导治疗。
临床医生根据经验（如伤口出现产气、发臭、产生大量脓液等症状）怀疑有厌氧菌感染时，应严格按照厌氧菌标本采集要求采样送检，或者联系微生物实验室寻求帮助。
为什么好多脓液标本培养是无菌生长？因为脓液中除含有脓细胞（变性坏死的白细胞）外，还有大量坏死的细菌，组织碎片和渗出的组织液。
也就是说脓液就是一个大混战后的战场，除仍在激战的白细胞和细菌们之外，更多的是战死的细菌尸体和阵亡的白细胞将士。
而对于脓液这个尸殍遍野的战场来讲，细菌的活力已经不是很好，加之临床上很多脓液培养可能都是在抗生素使用之后采集留取，腹背受敌，细菌就更难生长。
细菌室脓汁及病灶分泌物细菌学检验操作规程1、脓汁及病灶分泌物培养常见病原菌革兰阳性菌革兰阴性菌葡萄球菌肠杆菌科细菌链球菌假单胞菌炭疽芽孢杆菌拟杆菌破伤风芽孢杆菌腐败谢瓦纳拉菌产气荚膜梭菌嗜血杆菌结核分枝杆菌产碱杆菌放线菌、奴卡菌弧菌属细菌念珠菌气单胞菌2、标本采集：标本由临床医师行无菌操作术采集，但应注意以下几点：2.l、闭锁性脓肿疑为厌氧菌感染时，取材后立即将空气排空，同时针尖插入橡皮塞内防止空气进入，连同注射器一并送检。
2.2、开放脓肿、脓性分泌物可在患部直接用棉拭或纱布擦抹，如为瘘管亦可在无菌操作下取组织碎片分散在无菌盐水中。
2.3、烧伤创面的分泌物，用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物，置无菌试管中送检。
2.4、取尿道分泌物必须先清洗、消毒尿道后用挤压法使分泌物从尿道溢出，用无菌生理盐水浸湿拭子直接采集标本。
如女性做宫颈分泌物细菌培养，应尽量避免杂菌污染。
2.5、组织脏器碎片的收集，先要消毒表面的污染菌，后用无菌刀切开，取内容物及碎片分散于无菌生理盐水中，然后增菌、接种，如活体微量标本可直接放人肉汤增菌培养基中增菌。
3、检验步骤3.1、涂片检查：脓汁及分泌物标本均应做涂片检查。
涂片做革兰氏染色镜检，根据形态和染色特点，可报告“找到革兰氏×性菌，形似××菌”或报告“未发现细菌”。
涂片检查包括涂片找细菌、淋球菌、酵母菌等。
3.2、培养普通细菌培养：标本接种血平板、麦康凯平板各一只，35℃培养18～24小时，根据菌落特性和形态染色，进行鉴定和药敏试验，如培养48小时无菌生长，即报告“无细菌生长”。
4、报告结果4.1、涂片报告“找到革兰氏×性菌”，淋球菌要报告在白细胞内外是否发现革兰氏阴性双球菌。
4.2、对正常无菌部位的感染，从脓汁或分泌物分离到细菌，均有临床意义，按分离鉴定结果报告细菌名称及药敏试验。
医院微生物室脓汁及病灶分泌物细菌学检验操作规程1、脓汁及病灶分泌物培养常见病原菌革兰阳性菌革兰阴性菌葡萄球菌肠杆菌科细菌链球菌假单胞菌炭疽芽孢杆菌拟杆菌破伤风芽孢杆菌腐败谢瓦纳拉菌产气荚膜梭菌嗜血杆菌结核分枝杆菌产碱杆菌放线菌、奴卡菌弧菌属细菌念珠菌气单胞菌2、标本采集：标本由临床医师行无菌操作术采集，但应注意以下几点：2.l、闭锁性脓肿疑为厌氧菌感染时，取材后立即将空气排空，同时针尖插入橡皮塞内防止空气进入，连同注射器一并送检。
2.2、开放脓肿、脓性分泌物可在患部直接用棉拭或纱布擦抹，如为瘘管亦可在无菌操作下取组织碎片分散在无菌盐水中。
2.3、烧伤创面的分泌物，用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物，置无菌试管中送检。
2.4、取尿道分泌物必须先清洗、消毒尿道后用挤压法使分泌物从尿道溢出用无菌生理盐水浸湿拭子直接采集标本。
如女性做宫颈分泌物细菌培养，应尽量避免杂菌污染。
2.5、组织脏器碎片的收集，先要消毒表面的污染菌，后用无菌刀切开，取内容物及碎片分散于无菌生理盐水中，然后增菌、接种，如活体微量标本可直接放人肉汤增菌培养基中增菌。
3、检验步骤3.1、涂片检查：脓汁及分泌物标本均应做涂片检查。
涂片做革兰氏染色镜检，根据形态和染色特点，可报告“找到革兰氏×性菌，形似××菌’’或报告“未发现细菌”。
涂片检查包括涂片找细菌、淋球菌、酵母菌等。
3.2、培养普通细菌培养：标本接种血平板、巧克力平板和麦康凯平板各一只，35℃培养18～24小时，根据菌落特性和形态染色，选择相应的鉴定及药敏试条进行鉴定和药敏试验，如培养48小时无菌生长，即报告“无菌生长”。
4、报告结果4.1、涂片报告发现革兰氏×性××菌，淋球菌要报告在白细胞内外是否发现革兰氏阴性双球菌。
4.2、对正常无菌部位的感染，从脓汁或分泌物分离到细菌，均有临床意义，按分离鉴定结果报告细菌名称及药敏试验。
SOP_15-6 脓汁及创伤感染分泌物培养标准操作程序一、脓汁及创伤感染分泌物标本培养标本采集和运送：见本手册《病原微生物标本的采集运送和处原则》。
二、标本验收1.申请单验收：要求伤口分泌物培养申请单除患者的基本信息以外还应包括标本收集时间、收集方式、是否已使用抗生素等，验收时应检查申请单是否填写完整。
2.标本验收：（l）检查标本标识是否与申请单相符；(2）检查送检时间是否超过规定的标本保存时间。
3.不合格标本处理：(1）对申请单信息不全者应设法与临床医师取得联系；(2）对标识不符、送检容器不合格，送检时间超过规定时间的标本应注明原因，退回，要求重新留取标本，并做记录。
三、实验室处理1、涂片检查脓液标本在培养的同时均须涂片，涂片的结果一方面报告临床提供最初的诊治依据，另一方面可作为分离培养的质量指标。
涂片见到的细菌应分离检出。
涂片直接做革兰氏染色，必要时做抗酸染色，按镜下所见报告结果。
破伤风和气性坏疽梭菌为革兰阳性杆菌，注是是否有芽胞以及芽胞菌体内的位置。
2、培养血琼脂平板和中国蓝/麦康凯平板是基础的分离培养基，对内源性感染病灶的分泌物往往是多种细菌混合存在，且以革兰阴性菌为主，必须用选择性培养基并以分区划线法接种，深部脓肿分泌物标本接种厌氧菌血平板置于厌氧环境培养。
三、结果观察和报告1.结果观察：置35度孵育箱培养24小时后观察培养结果，阳性进行细菌鉴定有抗生素敏感试验，阴性结果培养48小时报告。
2.阴性培养结果报告：普通培养48小时无细菌生长3.阳性培养结果报告：有意义的阳性培养结果报告，细菌种属名称及标准抗菌药物敏感性试验结果。
化脓及创伤感染标本细菌学检验知识
化脓及创伤感染标本细菌学检验知识
脓液及创伤分泌物是传染过程中最常见的，对其标本的采集和送检，检验人员与执业医师网临床医师应密切配合，以确保正确的采集和快速送检。
从脓液及创伤分泌物中能够检出的细菌种类很多，最优先考虑的致病菌为金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌，其次为假单胞菌、肠杆菌科细菌等。
下面是yjbys店铺为大家带来的化脓及创伤感染标本细菌学检验知识，欢迎阅读。
一、脓液及创伤感染标本中可能发现的细菌
在临床化脓及创伤感染标本的细菌学检验中可能发现的细菌：
1.革兰阳性球菌
葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、四联球菌。
2.革兰阴性球菌
卡他布兰汉菌、淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、干燥球菌、黄色球菌。
3.革兰阳性杆菌
破伤风芽胞梭菌、炭疽芽胞杆菌、产气荚膜芽胞梭菌、白喉棒状杆菌、类白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌。
4.革兰阴性杆菌
大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、产气肠杆菌、鼠疫耶尔森菌、土拉热弗朗西斯菌、肺炎克雷伯菌、厌氧杆菌。
5.其他
伊色列放线菌、星形奴卡菌、白色假丝酵母菌。
二、标本的采集
(一) 操作
1.首先用无菌生理盐水拭净病灶表面的污染杂菌。
2.对已破溃脓肿一般以无菌棉拭子采取脓液及病灶深部的分泌物，而瘘管则以无菌方法采取组织碎片，放入无菌试管中送检。
3.对未破溃脓肿最好用2.5 %～3 %碘酊和75 % 酒精消毒患部皮
肤后，以无菌注射器抽取脓汁及分泌物，也可于切开排脓时，以无菌棉拭采取。
4.有时也可将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌平皿内送检。
5.对放线菌的标本，常用无菌棉拭挤压瘘管，选取流出脓汁中的“硫磺样颗粒”盛于试管内送检，也可将灭菌纱布塞入瘘管内。
次日取出送检。
(二) 注意事项
1.如果患者局部伤口已用抗生素磺胺类药物治疗，则应在培养基内加入相应的物质(如青霉素酶、对氨基苯甲酸等) 以避免假阴性结果的出现。
2.当创伤出血时或敷有药物在2 小时以内及烧伤在12 小时内均不应采集标本，此时获得阳性结果的机会甚少。
3.标本采取后应及时检查，如不能立即检验应置冰箱内保存，以防杂菌污染。
4.采集标本时注意观察脓汁及分泌物的性状，色泽及有无恶臭味等，为培养和鉴定提供参考依据。
如脓汁带绿色时，可能有铜绿假单胞菌的感染，有恶臭味时可能有厌氧菌感染。
三、检验程序
脓液及创伤感染标本的细菌学检验程序参见图
化脓及创伤感染标本的检验程序
四、检验方法及报告方式
(一) 直接涂片检查
1.一般细菌涂片检查
取一洁净玻片，用玻璃笔标明标本号、将待检标本置于玻片上涂成薄膜，经火焰固定后进行革兰染色镜检。
根据镜下所见细菌的形态及染色特点，可做初步报告：“找到革兰X 性X 菌，形似X X 菌”。
如发现具有芽胞或荚膜的细菌，报告时应注明其大小与位置及疑似X X 菌。
如镜检时未发现细菌时，可初步报告为：“直接涂片，未找到细菌”。
对疑有结核分枝杆菌感染的标本，还应作抗酸染色检查。
2.伊色列放线菌及星形奴卡菌涂片检查
用肉眼或放大镜检查脓汁、分泌物或敷料内有无直径1 m m 以下的灰白色或硫磺样颗粒，用接种环挑取含有硫磺样颗粒的标本置于洁净的玻片内，覆以盖玻片，轻轻挤压。
若颗粒结构不明显，可加50g ～100g/L 的氢氧化钾溶液2 ～3 滴加以消化。
用低倍镜及高倍镜仔细观察。
如有伊色列放线菌的颗粒，可见中央为交织的菌丝，菌丝的末端稍膨大似棒状排列并呈放射状。
有时可见嵌于类似明胶的鞘膜内。
奴卡菌与伊色列放线菌形态基本上相同，但在分枝菌丝末端一般不膨大成棒状，革兰染色阳性，抗酸染色呈抗酸性;而伊色列放线菌革兰染色阳性，抗酸染色呈蓝色，为非抗酸性。
如查见中间部分菌丝染成革兰阳性，向四周放射的末梢部分菌丝呈革兰阴性，抗酸染色为非抗酸性者，可报告：“找到伊色列放线菌”;若革兰染色反应与伊色列放线菌相同，而抗酸染色为抗酸性者，可报告为：“找到奴卡菌。
”
如革兰染色为阴性，抗酸染色为非抗酸性者，可报告：“未找到伊色列放线菌及星形奴卡菌”。
(二) 培养检查
1.一般细菌培养
取脓汁棉拭子或将脓汁用接种环接种于血平板上划线分离，置37 ℃ 孵箱培养18 ～24h ，观察结果，如有细菌生长，可按菌落特征挑取各种单独的菌落，分别涂片进行革兰染色镜检。
通常根据菌落特点结合涂片结果，多可初步判断出细菌的类属，然后再按各类细菌的生物学性状进行鉴定。
菌落小如针尖，周围伴有大而透明的溶血环可能为溶血性链球菌，结合镜检有助于鉴别，必要时进行血清肉汤培养，若出现沉淀生长且涂片染色为长链状排列，即可报告：“培养出乙型溶血性链球菌。
” 血平板上见中等大小有脂溶性金黄色色素或无特殊色素有透明溶血环，涂片染色为革兰阳性球菌呈葡萄状排列，可进一步作甘露醇发酵试验，血浆凝固酶试验等，如阳性时，可报告：“培养出金黄色葡萄球菌”。
如见到菌落与医.学全在线上述近似但无溶血环，血浆凝固酶试验阴性，可初步报告：“培养出血浆凝固酶阴性葡萄球菌”。
如见菌落小，周围有草绿色溶血环，染色镜检为革兰阳性球菌，呈短链排列多为甲型溶血性链球菌，呈双排列多为肺炎链球菌。
确定
诊断则需进一步作鉴定试验和鉴别试验。
如有变形杆菌生长而影响其他细菌分离，可将标本接种于含有4g/L 硼酸的血平板上，以抑制变形杆菌生长，再进行分离培养、鉴定。
根据鉴定结果及菌落的多少，即可报告：“培养出X X 菌”。
如观察48 小时后，无细菌生长，可报告：“培养48 小时后，无细菌生长”。
若遇到难以鉴定的细菌时，应详细描述革兰染色性质、菌体以及菌落的形态特点、生化反应、血清学试验结果等，必要时做G +C 摩尔百分比浓度测定、动物试验观察其致病力，以供临床医师参考。
2.炭疽芽胞杆菌培养
疑为炭疽芽胞杆菌感染时，可取患部脓液接种于血平板，对于污染严重的标本，可首先在肉汤培养基内增菌一夜后，经80 ℃20 分钟加热，杀灭非芽胞细菌，然后再移种血平板作分离培养，经37 ℃18 ～24h 培养后，如在血平板上见有大而扁平、毛茸状、灰白色、边缘不整齐，形似卷发状(以低倍镜下观察更为清楚) 不溶血的菌落，则挑取菌落涂片染色镜检，如为革兰阳性竹节状大杆菌，排列呈链状，悬滴检查无动力，则可作出初步诊断，必要时再做动物接种以及串珠试验和噬菌体裂解等鉴别试验，并作出结论。
3.厌氧菌培养
疑为厌氧菌感染的标本，可将标本接种于牛心、牛脑浸出液或布氏菌肉汤培养基中，亦可直接接种K V A 血平板(或LK V 血平板)，置厌氧环境中培养。
分离厌氧芽胞杆菌如破伤风芽胞梭菌及产气荚膜芽胞梭菌时，应将已接种标本的液体培养基先置80 ℃水浴中加热20 分钟杀灭非芽胞细菌，然后经37 ℃24 ～48h 培养后，根据生长情况及涂片染色镜检结果，按该厌氧菌的生物学性状(生化反应和动物试验) 进行鉴定。
经最后证实，即可报告：“培养出X X 菌”。
若经3 ～5 天培养仍未见细菌生长者，即可报告：“厌氧培养X 天未见细菌生长”。
4.伊色列放线菌及星形奴卡菌培养
(1) 若疑有杂菌污染的瘘管引流液，应首先将标本倒入无菌平皿内，以无菌蒸馏水洗涤溶解血细胞后，再挑选典型或可疑的.硫磺样颗粒，
将其压碎，然后分别接种于两份葡萄糖肉汤琼脂平板上置37 ℃进行需氧及厌氧培养，同时接种沙保弱葡萄糖琼腊斜面(或平板) 上，置22 ℃～28 ℃培养。
如无硫磺样颗粒，也可取标本直接接种于上述培养基。
(2) 对于未被细菌或真菌污染的标本，可直接采取硫磺样颗粒或脓液接种人硫乙醇酸钠肉汤或深层葡萄糖肉汤琼脂培养基，置37 ℃进行厌氧培养，同时接种沙保弱葡萄糖琼脂斜面，置22 ℃～28 ℃培养。
(3) 经4 天培养后，若在厌氧培养的葡萄糖肉汤琼脂平板上见有白色、粗糙或结节状的菌落生长，粘附于培养基上不易用接种环取下，且在盐水内不易乳化，而在需氧培养的平板上则无类似菌落生长时，可疑为伊色列放线菌。
(4) 将疑为伊色列放线菌的菌落移种于硫乙醇酸钠肉汤管的底部：置37 ℃ 培养4 ～6 天后，可见有白色绒毛样菌团物长出，摇动后破碎，上部培养液仍保持澄清。
移种于葡萄糖肉汤琼脂作深层培养，经37 ℃培养4 ～6 天后，可见在深层培养管表面下层出现分叶状的菌落。
取菌落作涂片镜检，可见有交织成团或小碎片状菌丝，抗酸染色为非抗酸性菌丝，可报告：“有伊色列放线菌生长”。
(5) 如有奴卡菌生长，则在需氧培养的沙保弱培养基上出现光滑、不规则折叠或颗粒状的菌落，具有黄色至橙黄色的颜色，取菌落作湿片镜检，如发现精细分枝状菌丝，呈革兰阳性，抗酸性染色呈红色的菌丝者，可报告：“有奴卡菌生长”。
(三) 抗生素敏感试验提示
1.接到标本后，48 小时内应得出抗生素敏感试验结果。
2.由于链球菌、巴斯德菌和放线菌等几乎都对青霉素敏感，故不必对其测试抗生素敏感性。
3.耐苯唑西林的葡萄球菌对头孢菌素亦耐药，耐青霉素的葡萄球菌对氨苄西林亦耐药，不必重复测试。
