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深部感染真菌种类鉴别的微生物检验白色假丝酵母菌通常存在于人的口腔、上呼吸道、肠道和阴道黏膜上，当机体发生正常菌群失调或抵抗力降低时，可引起各种念珠菌病。
1.1 生物学特性白色假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径3～6μm。
革兰阳性，着色不均匀。
出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、假菌丝，在玉米粉培养基中可产生假菌丝和厚膜孢子。
1.2 微生物检验(1)标本直接检验1)直接镜检取脓汁、痰和局部炎性分泌物直接涂片，革兰染色后镜检。
显微镜下见到革兰阳性、圆形(或卵圆形)菌体或孢子及假菌丝，即可确认假丝酵母菌感染。
2)抗原检测取病人血清做ELISA、免疫印迹等法检测白色假丝酵母菌抗原。
3)核酸检测用PCR法将假丝酵母菌DNA分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏感性和特异性。
(2)分离培养与鉴定1)普通培养将标本接种于沙氏培养基上25℃或37℃培养1～4天后，培养基表面可出现奶油色类酵母型菌落。
镜检可见假菌丝和芽生孢子。
2)芽管形成试验将假丝酵母菌接种于0.2～0.5ml人或动物血清中，37℃孵育1.5～4h，镜检观察有无芽管形成。
白色假丝酵母菌可形成芽管，但并非所有假丝酵母菌都形成芽管，其他假丝酵母菌一般不形成芽管。
试验时应设置阴性对照(热带假丝酵母菌)和阳性对照(白色假丝酵母菌)。
3)糖同化或发酵试验假丝酵母菌，凡能发酵某种糖，一定能同化该种糖，故只需做那些不被发酵糖的同化试验。
将培养物接种于糖发酵管，25℃孵育，一般观察2～3天，对不发酵管或弱发酵管可延长至10天或2～4周。
同化试验所有的基础培养基含有(NH4)2 SO4、KH2PO4、MgSO4?7H2O、CaCl2?2H2O、NaCl和酵母浸膏，试验时分别加入各种糖。
同时以葡萄糖和基础培养基作对照。
观察结果时要观察有无酵母生长或液体培养基是否变混浊。
2 热带假丝酵母茵热带假丝酵母菌广泛分布于自然界，在人体表和外界相同的腔道中也存在，它可引起皮肤、黏膜和内脏假丝酵母菌病，而且其产生的毒素可引起过敏反应及组织损伤。
深部真菌病深部真菌病（Systemic Mycosis，Deep Mycosis）是指除表皮、毛发、甲床以外，真菌侵犯内脏、皮下组织、皮肤角质层以下和粘膜所致的感染。
近十余年来深部真菌感染呈持续增多趋势。
1980年至1990年，美国医院获得性真菌感染由2‰增加至 3.8‰。
美国旧金山的资料显示1980～1982年与1992～1993年相比，念珠菌病发生率由每年每百万分之2.6升至72.8，隐球菌病由4.0升至65.5，曲霉病由8.4升至12.4 ，球孢子菌病由11.2升至15.3，组织胞浆菌病由13.9下降至7.1。
美国医院感染监测资料（NNIS）显示1992～1999年期间医院血流感染中白念珠菌居第四位。
侵袭性真菌感染流行病学发生改变的原因为侵袭性真菌感染的易感人群增多。
越来越多的患者接受化疗、器官移植、血管内导管、免疫抑制剂、广谱抗菌药物、胃肠外营养、血液透析、腹膜透析和低体重新生儿等。
艾滋病患者也为易感人群，易于发生各种真菌感染，从口咽部念珠菌病到暴发性系统性真菌病。
此外，患者生存期的延长，使其发生感染的危险期延长。
【临床表现】深部真菌感染可累及各个系统，不同真菌所致的同一脏器感染，如肺部感染，其临床表现大致类同。
深部真菌病，尤其是条件致病菌所致者，患者原发病常危重，真菌感染的临床症状和体征多为原发病所掩盖，因此必须仔细观察，并及时送病原学检查以尽早诊断并予以治疗。
深部真菌感染中，除少数真菌如足菌肿等感染局限于入侵部位外，其他感染均可波及各脏器，其中以呼吸道感染受累较多，真菌血行播散则可累及中枢神经系统、皮肤、骨骼、关节、泌尿生殖系等。
一、肺部真菌感染念珠菌、隐球菌、组织胞浆菌、粗球孢子菌、芽生菌等感染可引起急性肺部炎症；巴西副球孢子菌病的原发肺部感染常无症状；由曲霉和毛霉所致的侵袭性肺部感染进展迅速，病势常凶险。
除引起急性肺部感染外，念珠菌、曲霉、组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌等尚可形成慢性肺部炎症，有时X 线检查呈结节状阴影，需与结核病及肿瘤鉴别。
深部真菌感染试题及答案一、选择题1. 下列哪项不是深部真菌感染的特点？A. 感染部位通常较深B. 常见于免疫力低下的患者C. 症状明显，易于诊断D. 治疗周期较长答案：C2. 深部真菌感染最常见的病原体是：A. 念珠菌属B. 曲霉属C. 隐球菌属D. 所有以上选项答案：D3. 下列哪项不是深部真菌感染的常见症状？A. 发热B. 咳嗽C. 关节痛D. 皮疹答案：C4. 深部真菌感染的确诊通常需要：A. 血液培养B. 影像学检查C. 组织病理学检查D. 所有以上选项答案：D5. 治疗深部真菌感染的首选药物是：A. 青霉素B. 头孢类C. 抗真菌药物D. 抗病毒药物答案：C二、填空题6. 深部真菌感染的治疗需要考虑患者的_________和药物的_________。
答案：免疫力；副作用7. 预防深部真菌感染的措施包括：保持环境卫生、使用_________消毒剂、提高患者_________等。
答案：抗真菌；免疫力8. 深部真菌感染的高危人群包括：长期使用免疫抑制剂的患者、_________患者、_________患者等。
答案：艾滋病；癌症三、简答题9. 简述深部真菌感染的诊断流程。
答案：深部真菌感染的诊断流程通常包括临床症状的观察、实验室检查（如血液、尿液或组织的真菌培养）、影像学检查（如X光或CT扫描）以及组织病理学检查。
在实验室检查中，可能需要进行多次培养以确保结果的准确性。
最终的诊断需要综合临床症状和实验室检查结果。
10. 描述两种常见的深部真菌感染类型及其特点。
答案：两种常见的深部真菌感染类型包括：- 念珠菌感染：通常影响血液和内脏器官，如念珠菌血症和念珠菌肺炎。
念珠菌感染常见于免疫力低下的患者，如HIV/AIDS患者、癌症患者或长期使用免疫抑制剂的患者。
- 曲霉感染：曲霉是一种常见的机会性真菌，可以引起多种类型的感染，包括侵袭性肺曲霉病和曲霉血症。
曲霉感染常见于慢性肺部疾病患者、严重烧伤患者或接受器官移植的患者。
1.5 学时
第二十九 章 深部感 染真菌
P345 概述: 侵袭深部组织、内脏以及全身的真菌统称为深部真菌，
1、条件致病菌
白假丝酵母菌 2、病原性真菌 新生隐球菌
第 1 节 白假丝酵母菌 概述
1、俗称白色念珠菌，是假丝酵母菌属中最常见的病原菌；
2、念珠菌病是最常见的深部感染真菌病
3、新近分离的柏林假丝酵母菌所占比例有逐年增高的趋势。
一、生物学性状
1、形态与结构：
1) 圆形或卵圆形，革兰氏阳性，但染色不均；
2) 在组织内形成芽生孢子，继而形成假菌丝；
3) 培养后的白假丝酵母菌可发展成为厚膜孢子
2、培养特性：
1) 在普通琼脂培养基、血平板及沙保弱琼脂培养基上均生 长良
好；
2) 37C 培养2~3天后可出现典型的类酵母菌落
3) 在玉米粉琼脂培养基上可形成假菌丝，并产生真菌丝和 厚膜
孢子
二、致病性：
1、 条件致病性真菌，以白假丝酵母菌最多见 (白色念珠菌 )；
2、 感染类型有皮肤黏膜感染、内脏感染和中枢神经感染， 少数发生变应性疾病。
三、微生物学检查：
1、直接镜检
2、分离培养与鉴定： 假丝酵母菌种类繁多，可根据形态结构、
培养特性、生化反应等进行鉴别
1) 芽管形成试验：将菌接种于0.5~1ml 正常人或羊血清中
37 C孵育1.5~4h后镜检，可见芽生抱子和芽管形成；
2)厚膜孢子形成试验：将菌接种于1%吐温80 玉米粉培养基，
25C孵育24~48h后镜检，可见厚膜抱子；
3)白假丝酵母菌和都柏林假丝酵母菌鉴别可用45C培养区分，
前者生长良好，后者不能生长。
3、血清学试验：
1 、患者体内可产生多种假丝酵母菌的抗体，但诊断意义不大；
2、应用胶乳凝集试验或ELISA 可在患者血中检出白假丝酵母菌细胞壁甘露聚糖，特异性较高
4、动物试验：
将1%白假丝酵母菌悬液1ml 尾静脉或腹腔注入小鼠或耳静脉注入兔体内，5~7天后动物可死亡，解剖发现肾、肝等有脓肿
四、防治原则
1 、除去危险因素如潮湿、停止长期应用抗生素等；
2、鹅口疮及皮肤黏膜念珠菌病治疗可局部涂敷制霉菌素、龙胆紫、酮康唑等；
3、深部感染可用两性霉素 B 治疗或与口服氟胞嘧啶合用；
4、目前尚未建立起有效的预防措施。
第 2 节新生隐球菌
概述：
1 、自然界分布广泛；
2、也存在于人体的体表、口腔和粪便中；
3、大量存在于干燥的鸽粪中
一、生物学性状
1、形态与结构：
1)圆形的酵母样细胞；
2)菌体外周有一层肥厚的荚膜，用墨汁负染色后可见黑色的背
景中见到圆形或卵圆形透亮菌体；
3)菌体可见出芽，但不形成假菌丝；
2、培养特性：
1)在血平板及沙保弱琼脂培养基上25 ~37C培养数天后可出现
酵母型菌落；
2)在麦芽汁琼脂培养基上28C培养3~5天后可出现菌落；
3)在麦芽汁液体培养基上25C培养3天后呈混浊生长，可有少
量沉淀或菌膜；
3、生化反应能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气尿素酶试验多为阳性，此菌能分解尿素，以区别于假丝酵母菌
4、抗原结构
荚膜多糖具有抗原性，可分 5 个血清型，以 A 型最多见
二、致病性：
1 、深部感染性真菌，且是条件致病性真菌；
2、主要传染源是鸽子，一般是外源性感染，通过呼吸道入侵；
3、主要引起脑膜的亚急性和慢性感染。
三、微生物学检查：
1 、直接镜检标本作墨汁负染色后检出透亮荚膜和芽生孢子；2、分离培养与鉴定：
沙保弱琼脂培养基上25 ~37C培养数天后可出现酵母型菌落；37 E培养检查尿素酶可鉴定此菌
3、抗原检查应用胶乳凝集试验检查血清和脑脊液中荚膜抗原
4、动物试验
四、防治原则
1、减少鸽子数量或用碱处理鸽粪，可控制此病发生；
2、治疗可选用抗真菌的药物，两性霉素B 或合用氟胞嘧啶、酮康唑等。
第三节其他真菌（自学）包括曲霉、毛霉、肺孢子菌
复习思考题
1.简述两种常见的能引起深部感染的条件致病性单
细胞真菌的致病性。
2.简述白假丝酵母菌感染的微生物学检查方法及结
果分析应注意的问题。
3.解释类酵母型菌落。
