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土壤可溶性有机氮、硝态氮、铵态氮、微生物量氮最方便最简单的测定方法1.母液制样：称取新鲜土壤（30.0g）于放置烧杯中，加约等于田间持水量60%水在25℃下培养7~15d。
取15.0g土于烧杯，置于真空干燥器中，同时内放一装有用100ml精制氯仿的小烧杯，密封真空干燥器，密封好的真空干燥器连到真空泵上，抽真空至氯仿沸腾5分钟，静置5分钟，再抽滤5分钟，同样操作三次。
干燥器放入25℃培养箱中24小时后，抽真空15-30分钟以除尽土壤吸附的氯仿。
按照土：0.5M K2SO4=1:4(烘干土算，一般就是湿土：0.5M K2SO4=1：2)，加入0.5M K2SO4溶液（未熏蒸为空白直接称取15.0g土，加同样比例0.5M K2SO4溶液）震荡30分钟，过滤。
其中熏蒸后的土壤过滤液为A母液，未熏蒸的土壤过滤液为B母液。
母液要是不及时测定，需立即在-15℃以下保存2.测定可溶性有机氮=可溶性全氮-（铵态氮+硝态氮）要是有流动分析仪器还有TOC的话可以利用A母液测得碳氮减去B母液的碳氮含量根据公式计算得出微生物碳氮，可以用B母液测的铵态氮、硝态氮和可溶性全氮，是很方便的。
以下的是用传统的方法测定以上指标，经过852个土壤样品试验结果还是很好的。
土壤可溶性全氮测定氧化剂:将6g NaOH 和30g K2S2O8溶于蒸馏水中并定容至1L(K2S2O8 比较难溶，在低于60℃得瑟水浴中溶解，高于60℃配置的溶液至其氧化性失效，NaOH制成溶液，致其温度达到常温后与K2S2O8溶液混合定容至1L)测定：移取A母液10ml至消化试管，加入10ml氧化剂，水浴中加热，温度升高到120℃后保持90min，使用紫外分光光度计测定A220和A275，空白需加入1ml氧化剂并同时作水浴处理。
（Tips：农化上母液与氧化剂各取25ml，此处取其比例为1:1。
）标准曲线：0.7218g硝酸钾溶于水中，转入1000ml容量瓶中定容摇匀，制得浓度为100mg/L的氮标准贮存液。
氯仿熏蒸浸提法测定土壤微生物碳氮
采用氯仿熏蒸0.5 mol/L K2SO4浸提法测定土壤微生物量碳、氮。
首先将土样在25℃下密封培养7d 左右，然后称取预处理土样6 份放入烧杯中，将 3 份其置于底部有少量Na OH、200 m L 水和去乙醇氯仿的真空干燥器中，抽真空后保持氯仿沸腾3～5 min，然后，将干燥器移置在黑暗条件下25℃熏蒸土壤24 h，再次抽真空完全去除土壤中的氯仿。
将熏蒸好的土壤转移到200 m L 提取瓶中，加入0.5 mol/L K2SO4浸提液（水∶土质量比为4∶1）。
另外3 份做未熏蒸空白试验，每份重复3 次，分别测定浸提液中的有机碳和全氮含量。
其中浸提液中的可溶性有机碳采用总有机碳分析仪（Phoenix 8000，美国）测定，由熏蒸与未熏蒸土样有机碳的差值除以转换系数，计算得到微生物量碳。
浸提液中土壤可溶性全氮采用碱性过硫酸钾氧化法测定，浸提液中无机氮采用流动分析仪测定，土壤可溶性有机氮是可溶性全氮和无机氮的差值。
熏蒸与未熏蒸土样的全氮的差值除以转换系数，计算得到微生物量氮。
微生物量碳、氮的转换系数为0.45。
土壤的有机质、全氮、全磷、有效磷、速效钾、NO3--N、NH4+-N、pH 值采用常规的土壤农化分析方法测定。
固氮的方法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述固氮是指将氮气(N2)转化为可被植物吸收利用的氮化合物的过程，是土壤中氮循环的重要环节之一。
氮素是植物生长的关键营养元素之一，但大部分植物无法直接利用大气中的氮气。
因此，固氮对于植物的生长发育和土壤生态系统的健康至关重要。
固氮的方法主要可以分为生物固氮和非生物固氮两大类。
生物固氮是指通过植物与一些特定的菌株或微生物共生来实现。
这些共生菌株能够将空气中的氮气转化为植物可吸收的氮化合物，主要包括根瘤菌和蓝藻等。
非生物固氮则是利用化学反应或物理方法将氮气转化为其他可被植物利用的化合物。
本文将介绍三种主要的固氮方法及其相关内容。
方法一是通过选择适宜的菌株并在合适的培养条件下培养它们，通过评估固氮效率并优化培养策略来实现固氮。
方法二是通过与植物的共生菌株形成根瘤，在根瘤中固氮，通过营养管理来促进植物的生长和固氮效果。
方法三是利用化学反应，选择合适的催化剂和反应条件来实现固氮。
通过比较这三种方法的优劣和应用前景，可以为解决氮肥过度使用和农业可持续发展提供指导和借鉴。
不过，每种固氮方法都存在一定的局限性，如生物固氮受环境因素影响较大，非生物固氮的能源消耗较大等。
因此，在应用固氮方法时需要结合具体情况和需求，选择适合的方法来提高固氮效率，促进农业可持续发展。
1.2文章结构文章结构部分是对整篇文章的组织和安排进行说明。
下面是对文章结构部分的内容的一个示例：1.2 文章结构本文共分为引言、正文和结论三个主要部分。
其中，引言部分对固氮的概述、文章的结构和目的进行介绍，为读者提供了文章的背景和整体框架。
正文部分包括三个方法：方法一、方法二和方法三，分别介绍了不同的固氮方法。
方法一详细介绍了菌株选择、培养条件、固氮效率评估和优化策略。
方法二则讲解了植物共生菌株的选择、根瘤形成、固氮效果评估以及营养管理等方面的内容。
方法三则涉及了化学固氮的原理、催化剂选择、反应条件以及环境影响等相关内容。
土壤凯氏定氮法
土壤凯氏定氮法是一种用于测定土壤中可溶性氮含量的方法。
该方法利用硫酸钠与苏打灰反应生成氨气的特性，通过收集氨气并用酸进行中和，计算出样品中的氮含量。
具体操作步骤如下：
1. 准备样品：将需要测定的土壤样品取若干克，经过干燥处理后，将土壤样品孔隙内的空气排净，保证样品中只有土壤。
2. 加入试剂：将样品放入一个特制的凯氏消化管中，加入一定量的酸，然后加入硫酸钠试剂和氢氧化钠试剂，反应生成氨气。
3. 收集氨气：利用凯氏影射瓶收集生成的氨气，通过长管与影射瓶相连，将氨气从凯氏消化管中传输到影射瓶中。
4. 中和氨气：在影射瓶中加入一定量的酸，将氨气中和至酸碱中性，使氨气转化为水。
5. 测定氮含量：测定影射瓶中酸的剩余量，计算出氨气转化为氮酸的质量，并通过计算得出土壤中可溶性氮的含量。
土壤凯氏定氮法主要适用于测定土壤中的无机氮含量，包括铵态氮和硝态氮。
该方法操作简单、准确性高，广泛应用于土壤肥力评价和农业生产中。
氮氧化物的测定定电位电解法氮氧化物是一类空气污染物，包括氮氧化物（NOx）和氧化亚氮（NO）。
测定氮氧化物的浓度是评估空气质量和控制污染的重要指标之一。
定电位电解法是一种常用的方法来测定氮氧化物的浓度。
该方法基于氮氧化物在电极上的反应产生的电流与浓度之间的关系。
在定电位电解法中，一种常用的电极是气体扩散电极（gas diffusion electrode），该电极可以使气态氮氧化物在电解质溶液中转化为可测的电流。
测定过程中，首先将氮氧化物样品与适当的电解质溶液接触，然后将电极浸入溶液中。
通常会施加一个特定的电位到电极上，并测量由氮氧化物反应产生的电流。
测定氮氧化物的浓度需要事先进行校准，一般使用标准气体或标准溶液来制备一系列浓度的标准曲线。
通过将待测样品的电流与标准曲线进行比较，可以确定氮氧化物的浓度。
定电位电解法具有以下优点：1. 灵敏度高：可以测定低至ppb (parts per billion)级别的氮氧化物浓度。
2. 准确性高：通过使用标准曲线进行校准，可以得到准确的浓度结果。
3. 简便易行：测定过程相对简单，不需要复杂的设备和操作。
然而，定电位电解法也存在一些局限性：1. 受电解液pH值和温度等因素影响：电解液酸碱度和温度的变化可能会影响氮氧化物的浓度测定结果。
2. 要求样品处理：需要将氮氧化物样品与电解质溶液接触，可能需要对样品进行预处理或适当的稀释。
3. 适用性受限：该方法适用于氨气（NH3）、氮氧化物（NOx）等具有一定可溶性的氮气体。
总的来说，定电位电解法是一种可靠且常用的测定氮氧化物浓度的方法，但在具体测定时需要考虑实际样品特性和一些实验条件。
烟草含氮化合物测定烟叶中氮化合物的特性及其测定意义1、烟草中氮素形态：蛋白质 氨基酸 酰胺 NH3 硝酸盐 植物碱 未知氮化物2、烟草氮化合物分类：1 水不溶性氮：部分蛋白质（醇溶性和脂溶性蛋白质）2 水溶性氮：除去不溶性蛋白质，剩余氮化物都是水溶性的，其中也包括了水溶性蛋白质。
蛋白质占整个含氮化合物的60％-90％，植物体中蛋白质的含氮量为15％-17.6％，平均为16％（蛋白质系数）烟草样品（干烟叶）中主要的含氮化合物是蛋白质（8%）和生物碱（1.5-3.5％），其次是游离氨基酸（0.8％）等。
3、 含氮化合物测定意义1 含氮量高的鲜烟叶，其多酚氧化酶活性也高，烘烤时易出现黑糟烟2 含氮化合物高的干烟叶，燃吸时，味苦，辛辣，刺激性强，杂气大。
烟叶总氮测定烟叶中总氮含量高，则其它氮化物含量往往也高，蛋白质和烟碱也高，因此测定总氮的含量对了解烟叶氮化物的特征具有代表性。
一、测定方法测定主要有凯氏法和杜马法两种。
杜马法就是将烟叶燃烧，收集N2和其它氮的氧化物，所用仪器十分精密。
现在主要用的是凯氏法。
二、凯氏法定氮1原理：烟草中的含氮化合物用浓硫酸消煮分解，使其中各种形态的氮素全部转化为氨，并与硫酸结合形成硫酸铵，然后加碱（NaOH）蒸馏，使硫酸铵中的NH3释放出来，用硼酸吸收，然后用标准酸（H2SO4）滴定，计算出N含量。
1 烟样消化在高温下浓硫酸是一种强氧化剂，能将有机物中的碳全部分解氧化成CO2,从而破坏了有机物的结构，样品中的含氮化合物，如蛋白质，在浓硫酸的作用下，水解为氨基酸，氨基酸脱氨产生NH3,NH3与硫酸结合成为硫酸铵留在溶液中。
2 蒸馏向消化液中加入过量的强碱NaOH，使（NH4）2SO4的NH3逸出，并用硼酸溶液吸收之。
3 滴定 用标准酸滴定硼酸吸收的氨，根据标准酸的用量计算出消化液中的N量。
这种测定总氮的方法最初是由凯德尔（Kjeldahl）1884年在研究蛋白质中的N时发明的，所以叫凯氏定氮法。
水中可溶性总氮的测定A-TN（碱性过硫酸钾氧化—紫外分光光度计法）一、试剂：1、碱性过硫酸钾氧化剂溶液：45 g过硫酸钾（K2S2O8, 分析纯）和15 g氢氧化钠（NaOH,分析纯）溶于水，稀释至1 L。
2、氮标准贮存溶液[p(N) = 100 mg/L]：硝酸钾（KNO3.分析纯）在105～110℃干燥箱中烘干3 h，冷却后，称取0.7218 g硝酸钾，溶于少量水中，转入1 L容量瓶中，定容。
在0～10℃下暗处保存，可保存6个月左右。
3、氮标准溶液[p(N) = 5 mg/L]：将氮标准贮存溶液准确稀释20倍，现配现用。
二、操作步骤：1、取经定性的滤纸过滤后水样15 ml于25 ml具磨口塞比色管。
加入碱性氧化剂溶液5 ml，塞紧瓶塞，并用纱布将瓶塞包好扎紧，放入高压蒸汽灭菌器中，先开启防气阀，至有水气喷出时，关闭放气阀，继续加热至120℃保持30 min。
冷却后取出，加1 ml的1:9 HCI，定容到25 ml。
直接在紫外分光光度计上用波长220 nm和275 nm测定A220和A275，用1 cm石英比色皿，用蒸馏水作参比。
2、工作曲线：吸取氮标准溶液0 ml、1 ml、2 ml、3 ml、4 ml、5 ml、6 ml分别于25 ml具磨口塞比色管中，定容到15 ml，各加入5 ml氧化剂溶液，与样品同步消煮，冷却后，定容至25 ml。
工作曲线氮的系列浓度为：0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L、1.0 mg/L、1.2 mg/L，在紫外分光光度计上测定A220和A275。
以A(A = A220 --A275)为纵坐标，氮的浓度为横坐标绘制工作曲线，根据样品所测得的校正吸光值A (A = A220 -- A275)查得相应的氮浓度值，再根据稀释倍数换算出水样的氮浓度值。
3、同时做空白试验。
空白试验除以蒸馏水替代水样外，其余所有的步骤与水样的测试相同。
氨氮检测方法
氨氮是指水中可溶性氨和铵离子的总含量，常用于评价水体的污染程度。
氨氮检测方法主要有以下几种：
1. Nessler法：将样品与碱性溶液一起加热，形成深黄色沉淀，沉淀的颜色与氨氮含量成正比。
2. 蒸馏-滴定法：将样品进行蒸馏，将挥发性氨气转移到酸性
溶液中，再用酸碱滴定法测定溶液中未反应的酸的含量，根据酸与氨之间的化学反应计算氨氮的含量。
3. 电化学法：利用特定电化学传感器对水中氨氮进行快速、准确的检测，常见的电化学传感器包括氨电极和氨电离子选择性电极。
4. 光谱分析法：利用分光光度计等仪器，测定特定波长下氨氮溶液的吸光度，再根据标准曲线计算氨氮的含量。
总的来说，氨氮检测方法多种多样，选择合适的方法取决于实验要求、设备条件和样品特性等因素。
水中总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法疑问解释：可滤性总氮：指水中可溶性及含可滤性固体小于0.45mg颗粒物的含氮量。
总氮：包括溶液中所有含氮化合物，即亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机盐氮、溶解态氮及大部分有机含氮化合物中的氮的总和。
紫外分光光度法：根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好，波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。
100nm、200nm、400nm、800nm、400um、1m通指X-射线、紫外区、可见区、红外区、微波区、无线电波区。
摩尔吸光度数：物质对某波长的光的吸收能力的量度。
指一定波长时，溶液的浓度为1 mol/L，1cm的吸光度，用ε或EM表示。
越大吸收光的能力越强，相应的分光度法测定的灵敏度就越高。
以一定波长的光通过时，所引起的吸光度值A。
A220和A275：为什么要测这两个波长的吸光度？因为过硫酸钾将水样中的氨氮、亚硝酸盐氮及大部分有机氮化合物氧化为硝酸盐。
硝酸根离子在220nm波长处有最大吸收但是溶解性有机物在此处也有吸收，干扰测定。
275nm处硝酸根离子没有吸收只有溶解性有机物有吸收，所以在275nm处也测定吸光度，用来校正硝酸盐氮值，这种方法叫双波长分光光度法。
校准曲线：通过测定不同总氮含量的标准溶液的A值而制定的A值与总氮含量的线性关系。
无氨水：就是不含氨的纯净水，蒸馏可得。
实验简述：1.内容：本方法用碱性过硫酸钾（K2S2O8）在 120~124℃消解，紫外分光光度测定水中总氮。
2.范围：本方法适用于地面水、地下水的测定，可测定水中亚硝酸盐氮、硝酸盐氮、无机铵盐、溶解态氨及大部分有机含氮化合物中氮的总和。
氮的最低检出浓度为0.05mg/L，测定上限为4mg/L。
3.摩尔吸光度数设定：本方法的摩尔吸光系数为1.47×103L·mol-1·cm-1。
FNCPSL0075 动物饲料可溶性氮的测定稀盐酸中用胃蛋白酶处理法F_NCP_SL_0075动物饲料—可溶性氮的测定—稀盐酸中用胃蛋白酶处理法1 范围该国际标准规定了在稀盐酸中用胃蛋白酶处理后测定动物饲料可溶性氮含量的方法。
该方法不能区别蛋白氮和非蛋白氮。
注:用此方法得到的值同体内消化率没有直接关系。
如果从实验结果中除去非蛋白氮，它的含量应该用一个适宜的方法测定。
2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。
在标准出版时，所示版本均为有效。
所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨，使用下列标准最新版本的可能性。
ISO 5983：1997 动物饲料中氮含量测定和粗蛋白质含量的计算——K氏法。
ISO 6498：1983 动物饲料试样的制备。
3 原理样品在胃蛋白酶稀盐酸溶液中于400C培养48h。
悬浮液过滤并按照K氏方法即可测定滤液的氮含量也可测定滤器上残渣氮含量。
4 试剂只能使用认可的分析级试剂，蒸馏水或去离子水或至少同等纯度的水。
所有试剂(除标准材料外)实际都应该是无氮化合物。
4.1 稀盐酸，c(HCl)=0.075mol/L。
4.2 胃蛋白酶，活性2.0U/mg与附录A中给出的定义一致。
按附录A中规定的方法检查胃蛋白酶活性。
4.3 胃蛋白酶盐酸溶液，酶活性约400U/L。
在1L稀盐酸溶液中(4.1)溶解0.2g±0.001g胃蛋白酶。
使用之前立即制备该溶液。
如果胃蛋白酶活性偏离2.0U/mg，调节胃蛋白酶质量以便获得一个胃蛋白酶活性为400U/L 的溶液。
4.4 盐酸，c(HCl)=7.5mol/L (ρ20=1.125g/ml)。
5 仪器设备一般实验室设备，特殊的如下。
5.1 水浴或培养葙，温度能维持在400C±10C。
5.2 K氏烧瓶，适宜容积。
5.3 滤纸，快速，耐酸。
5.4 蒸馏和滴定装置。
6 采样6.1 散装产品采样方法根据堆型和体积大小分区设点，按货堆高度分层采样。
6.1.1 分区设点：在货堆的不同方位选若干个采样区。
各区设中心、四角五个点，货堆边缘的点在距边缘约50cm处。
6.1.2 采样：按区设点，先上后下逐点采样，各点采样数量一致。
6.2 散装采样方法散装或罐车在出口处根据采样量的需要，间隔采样。
6.3 袋装采样方法6.3.1 采样包数：5包至10包逐包采样；10包以上选取10包采样；5包以下不采。
采样包的选取参照6.1.2。
6.3.2 采样：将取样钎槽口朝下，从包的一角水平斜向插向包的对角，然后转动取样钎至槽口朝上取出，每包采样次数一致。
或拆包采取。
6.4 成品出料口采样方法在出料口采样，每10袋或间隔2min，取样铲采样。
6.5 样品的缩分将样品倒在清洁、光滑、平坦的桌面或光面硬纸上，充分混匀后将样品摊成平面正方形，然后以两条对角线为界分成四个三角形，取出其中两个对角三角形的样品，剩下的样品再按上述方法反复缩分，直至最后剩下的两个对顶三角形的样品接近平均样品所需的重量为止。
实验室收到的样品的真实性和代表性以及在传送和贮存时不发生损坏是十分重要的。
保存样品时应避免样品发生变质和变化。
7 试样制备按照ISO 6498(即FNCPSL0067)制备试样。
如果试样脂肪含量超过10%(m/m)，按照ISO 6498提取脂肪，计算(条款9)时要考虑提取的脂肪含量。
8 操作步骤8.1 试料称取2g制备的试样，精确至0.001g。
8.2 培养将试料置于500ml容量瓶中并加50ml事先加热到400C的胃蛋白酶溶液。
振摇以避免结块。
检查悬浮液的pH值低于1.7。
将烧瓶置于400C水浴或培养箱中放48h。
8h、24h和32h后振摇。
48h后加15ml盐酸并冷至200C。
用水稀释至刻度，振摇并通过滤纸过滤。
按8.3或8.4进行。
8.3 滤液氮含量的测定8.3.1 有机物消化取250ml滤液转移到K氏烧瓶中，加入15g的硫酸钾，0.3g氧化铜或0.9~1.2g五水硫酸铜。
对于1g干物质的试料要加25ml硫酸, 以后每增加1g干物质多加6~12ml。
充分混合，确保试料完全润湿，混合并煮沸。
保持溶液充分沸腾直至水分几乎全部蒸发。
小心去除最后微量水，减低加热速度。
液体变清澈后，继续加热1h，然后移开放冷。
8.3.2 蒸馏和滴定8.3.2.1 氨的蒸馏小心加入250~350ml水, 使硫酸盐全部溶解, 如必要可将烧瓶放在热水加速溶解, 回旋混合, 冷却。
加几粒浮石。
注：对某些特定的样品,其硫酸盐不能完全溶于水中, 此时建议, 用较少的硫酸钾重新消解。
向蒸馏装置的收集瓶中吸移25ml硫酸 , 根据试料预期的氮含量, 选择其浓度。
加100~150ml 的水加几滴混合指示剂，也可在收集瓶中移入250ml硼酸, 加几滴混合指示剂。
注：建议蒸馏中同时进行氨滴定, 这样有助于确定蒸馏终点。
将冷凝器末端插入收集瓶的溶液中, 没入深度至少1cm。
向消煮瓶中沿瓶壁慢慢加入100ml氢氧化钠溶液。
立即将此烧瓶接入蒸馏装置。
加热，使其30min内可以收集约150ml的馏出液。
蒸馏终点用石蕊试纸检验冷凝器末端馏出液的pH, 如反应呈碱性, 需继续蒸馏。
注意：蒸馏结束前, 应将冷凝器末端提离收集液, 以避免倒吸。
如果用硫酸做吸收液，蒸馏期间收集瓶内溶液呈碱性，需做适当调整后重新测定。
8.3.2.2 滴定注：推荐滴定时用pH计自动指示终点, 否则用混合指示剂的颜色变化指示终点。
如果用硫酸做吸收液,用氢氧化钠溶液滴定收集瓶中过量的硫酸(选择适当的浓度c(Na OH) = 0.1mol/L 或c(NaOH) = 0.25mol/L), 直至pH计指示终点或溶液颜色由紫变绿。
如果用硼酸做吸收液, 则用硫酸[选择适当的浓度c(H2SO4)= 0.05mol/L 或c(H2SO4)= 0.125mol/L] 滴定氨, 直至pH计指示终点或溶液颜色由绿变紫。
如果不能同时进行滴定, 滴定应在蒸馏完成后尽快进行, 保证馏出液温度不超过25℃，以避免氨的损失。
用相同程序完成空白试验但省略试料。
按条款9进行。
8.4 残渣和试样氮含量测定8.4.1 残渣中有机物的消化用温水冲冼滤纸和残渣至它们无酸性。
转移滤纸和残渣到一个K氏消化瓶中。
加入15g的硫酸钾，0.3g氧化铜或0.9~1.2g五水硫酸铜。
对于1g干物质的试料要加25ml硫酸, 以后每增加1g干物质多加6~12ml。
充分混合，确保试料完全润湿，混合并煮沸。
注：可以适当的加入一种抗泡剂。
开始猛烈煮沸去掉水分，然后减低加热速度至去掉最后微量水分。
液体变清澈后，继续加热1h，然后移开放冷。
8.4.2 蒸馏和滴定8.4.2.1 氨的蒸馏小心加入250~350ml水, 使硫酸盐全部溶解, 如必要可将烧瓶放在热水加速溶解, 回旋混合, 冷却。
加几粒浮石。
注：对某些特定的样品,其硫酸盐不能完全溶于水中, 此时建议, 用较少的硫酸钾重新消解。
向蒸馏装置的收集瓶中吸移25ml硫酸 , 根据试料预期的氮含量, 选择其浓度。
加100~150ml 的水加几滴混合指示剂，也可在收集瓶中移入250ml硼酸, 加几滴混合指示剂。
注：建议蒸馏中同时进行氨滴定, 这样有助于确定蒸馏终点。
将冷凝器末端插入收集瓶的溶液中, 没入深度至少1cm。
向消煮瓶中沿瓶壁慢慢加入100ml氢氧化钠溶液。
立即将此烧瓶接入蒸馏装置。
加热，使其30min内可以收集约150ml的馏出液。
蒸馏终点用石蕊试纸检验冷凝器末端馏出液的pH, 如反应呈碱性, 需继续蒸馏。
注意：蒸馏结束前, 应将冷凝器末端提离收集液, 以避免倒吸。
如果用硫酸做吸收液，蒸馏期间收集瓶内溶液呈碱性，需做适当调整后重新测定。
8.4.2.2 滴定注：推荐滴定时用pH计自动指示终点, 否则用混合指示剂的颜色变化指示终点。
如果用硫酸做吸收液,用氢氧化钠溶液滴定收集瓶中过量的硫酸(选择适当的浓度c(Na OH) = 0.1mol/L 或c(NaOH) = 0.25mol/L), 直至pH计指示终点或溶液颜色由紫变绿。
如果用硼酸做吸收液, 则用硫酸[选择适当的浓度c(H2SO4)= 0.05mol/L 或c(H2SO4)= 0.125mol/L] 滴定氨, 直至pH计指示终点或溶液颜色由绿变紫。
如果不能同时进行滴定, 滴定应在蒸馏完成后尽快进行, 保证馏出液温度不超过25℃，以避免氨的损失。
用相同程序完成空白试验但省略试料。
按条款9进行。
8.4.3空白试验用相同步骤完成空白试验但省略试料。
9 结果计算9.1 用8.3中规定的步骤得到的可溶性氮含量的计算对于样品测定和空白试验所提供接收氨的硫酸用量是相等的，试样可溶性氮含量的计算用公式：w1=mM cVV××−)(21式中：w1——用8.3规定的步骤得到的试样可溶性氮含量，g/kg；V0——空白试验所用氢氧化钠溶液体积，ml；V1——测定(8.3.2)所用氢氧化钠溶液体积，ml；c——滴定用氢氧化钠溶液浓度，mol/L；m——试料质量，g；M——氮的摩尔质量( M=14g/mol)，g/mol；报告结果精确至0.1g/kg。
9.2 用8.4规定的步骤所得可溶性氮含量的计算对于样品测定和空白试验所提供接收氨的硫酸用量是相等的，试样可溶性氮含量的计算用下述公式：w2=mM cVVN××−−)(1W式中：W2——用8.4规定的步骤所得到的试样可溶性氮含量，g/kg ;V0——空白试验所用氢氧化钠溶液体积(见ISO5983:1997，4.9.1)，ml；V1——测定(8.4.2)所用氢氧化钠溶液体积(见ISO5983:1997，4.9.1)，ml；c——滴定用氢氧化钠溶液(见ISO5983:1997，4.9.1)浓度，mol/L；m——试料质量，g；M——氮的摩尔质量( M=14g/mol)，g/mol；W N——8.4.3中测定的试样的氮含量，g/kg；报告结果精确至0.1g/kg。
9.3 可溶性粗蛋白质含量的计算如果以可溶性粗蛋白质表示结果，用测定的可溶性氮含量乘系数6.25。
10 精密度10.1 重复性用相同方法，同一种试验材料，在同一实验室，同一操作者用相同设备在短时间间隔内所得到的二个独立单个试验结果之间差值，超出表1中所列r值的情况不大于5%。
10.2 再现性用相同方法，同一种试验材料，在不同实验室，不同操作者用不同的设备所得到的二个单个试验结果之间差值，超出表1中所列R值的情况不大于5%。
表1重复性限(r)和再现性限(R)样品可溶性粗蛋白质含量均值， g/kg 1)r，g/kg R， g/kg苜蓿草粉玉米麸质饲料椰子粕牧草青贮骨粉羽毛粉136.6141.5149.5192.9512.0574.37.28.97.47.98.922.126.528.931.636.363.1166.31)以干物质为基础11 试验报告试验报告应详细说明：完整鉴定样品所需全部信息；使用的采样方法，如果知道；应用的方法；获得的试验结果，以可溶性氮或可溶性蛋白质表示，后者使用转换系数(即6.25)；如果重复性被检查的话，最后得到的结果；该国际标准中没有规定的操作细节，或者被认为是可任意选择的，还有当完成方法时难免发生的能影响试验结果的任何细节。
