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实验二槐米中芸香苷的精制、水解与检识【实验目的】1、学会运用重结晶的方法精制芸香苷,并进行水解.2、学会用显色反应检识黄酮类化合物.【实验原理】采用碱溶酸沉法提取,其原理是芸香苷结构中含有酚羟基,具酸性,能溶于碱水,当加入酸溶液后,则芸香苷沉淀析出.芸香苷的精制是利用其可溶于热水,难溶于冷水的性质与杂质分离.【实验材料】设备:电炉、托盘天平、500 ml烧杯、量筒、玻璃棒、滴管、抽滤装置、研钵、250 ml圆底烧瓶、冷凝管、新华色谱滤纸、试管、试管架。
药品:芸香苷粗品、浓盐酸、蒸馏水、2%硫酸、95%乙醇、氨水、三氯化铝、浓硫酸、α–萘酚、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、镁粉醋酸镁【实验步骤】1. 芸香苷的精制:称一定重量的粗品，按约1∶200的比例悬浮于蒸馏水中，煮沸10分钟使其全部溶解，趁热抽滤，冷却滤液，静置析晶。
抽滤，置空气中晾干或60℃～70 ℃干燥，得精制芸香苷，称重。
计算得率。
2. 芸香苷的水解:取芸香苷1 g,研细后置于250 ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸溶液100 ml，直火微沸回流约40分钟，至析出鲜黄色沉淀不再增加为止，放冷抽滤，滤液保留作糖检查，沉淀用少量水洗去酸，抽干水分，晾干称重，得粗制槲皮素，然后用乙醇(95%乙醇约15 ml)重结晶即得精制槲皮素。
4、检识：(1)Molish反应：取芸香苷少许置小试管中，加乙醇0.5 ml，加10%α-萘酚溶液1 ml振摇使溶解，沿管壁徐徐加入浓硫酸约0.5 ml，静置。
观察两层溶液的界面变化，出现紫色环者为阳性。
以同法试验槲皮素，比较二者的不同。
(2)酸性实验：取小试管四支为一组，共二组，第一组每管中加入芸香苷1 mg，第二组每试管中加入槲皮素1 mg，每组分别加稀氨水、5% 碳酸氢钠溶液、5% 碳酸钠溶液和1% 氢氧化钠溶液各2 ml，振摇后，观察各管溶解情况，溶解的溶液应呈黄色。
再加盐酸数滴，黄色应褪去或变浅，并有沉淀或浑浊析出。
一、实验目的1. 熟悉云香苷的提取、精制、水解及检识的方法。
2. 培养学生对实验仪器的操作技能。
3. 提高学生对实验数据的处理和分析能力。
二、实验原理云香苷，又称芦丁，是一种黄酮类化合物，具有广泛的生物活性。
在植物界中，云香苷主要存在于槐米、玉米须、荞麦叶等植物中。
云香苷的提取、精制、水解及检识是研究其生物活性及其应用的重要步骤。
本实验采用碱溶酸沉法提取云香苷，该方法利用云香苷在碱性条件下可溶于水，而在酸性条件下可沉淀析出的特性。
通过水解反应，将云香苷分解为槲皮素和葡萄糖，进一步鉴定其结构。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外光分析仪、水泵、试管、烧杯、回流提取器、抽滤瓶、锥型瓶、层析缸、蒸发皿、布氏漏斗等。
2. 试剂：槐米、2%硫酸、0.4%硼砂溶液、石灰乳、镁粉、浓盐酸、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮等。
四、实验步骤1. 提取（1）称取槐米粉末5g，加入100mL 2%硫酸溶液，搅拌均匀，置于回流提取器中，加热回流1小时。
（2）取出提取液，用布氏漏斗过滤，收集滤液。
（3）将滤液用石灰乳调节pH至中性，静置过夜。
（4）取上清液，用浓盐酸调节pH至4.5，静置，待沉淀完全析出。
（5）用布氏漏斗过滤，收集沉淀。
2. 精制（1）将沉淀用少量甲醇洗涤，再用布氏漏斗过滤。
（2）将滤液置于蒸发皿中，蒸发浓缩至近干。
（3）加入少量甲醇溶解，转移至锥型瓶中，加入适量的活性炭脱色。
（4）过滤，收集滤液。
3. 水解（1）取上述滤液，加入适量的稀硫酸，加热回流2小时。
（2）取出，用石灰乳调节pH至中性，静置过夜。
（3）取上清液，用布氏漏斗过滤，收集滤液。
4. 检识（1）取上述滤液，加入适量的镁粉，滴加浓盐酸，观察颜色变化。
（2）取上述滤液，加入适量的三氯化铁溶液，观察颜色变化。
五、实验结果与分析1. 提取通过碱溶酸沉法，成功提取了槐米中的云香苷。
在实验过程中，观察到沉淀的形成，表明云香苷在酸性条件下析出。
2. 精制通过活性炭脱色，成功去除滤液中的杂质，提高了云香苷的纯度。
实验三槐米中芸香苷的提取、精制和检识
一、目的要求
掌握芸香苷的主要性质及提取、分离精制和检识方法。
二、实验原理
根据芸香苷可溶于碱水，在酸性条件下又可沉淀析出，采用碱溶酸沉法提取。
根据芸香苷在冷水和热水中溶解度相差较大，以水为溶剂,采用结晶法进行精制。
三、实验方法
（一）芸香苷的提取
1.不锈钢锅中加500毫升水，加热至沸后加入槐米50克，
用石灰乳调pH值8-9，继续加热20分钟，随时补充损失的水分，趁热用纱布过滤，药渣再提取一次，两次滤液合并。
2.用浓盐酸调提取液使pH值2-3，放置过夜。
3.抽滤，将沉淀抽干，置于室温中自然干燥，得芸香苷粗品。
（二）芸香苷的精制
1.取芸香苷粗品2克置800毫升的烧杯中，加水约400毫升，
加热至沸，使芸香苷完全溶解，趁热抽滤，滤液放置过夜，析晶。
2.抽滤，自然干燥，得芸香苷精制品。
（三）芸香苷的检识(要求写出反应现象)
1.氢氧化钠实验
取芸香苷少许置于试管中，加入2ml蒸馏水，振摇。
滴加2-3滴氢氧化钠溶液，芸香苷溶解，呈黄色澄明溶液。
再滴加盐酸溶液2-3滴，观察是否有沉淀生成。
2.α-萘酚—浓硫酸实验（Molish反应）
取芸香苷少许置干燥试管中，加2ml无水乙醇，振摇。
再滴加2-3滴α-萘酚溶液，振摇。
将试管倾斜，沿管壁滴加1ml 浓硫酸，观察两液面交界处颜色变化。
3.盐酸-镁粉实验
取芸香苷少许置于试管中，加入2ml 50%的乙醇，水浴加热溶解。
加入少许镁粉，再加入盐酸数滴，观察颜色变化。
写出碱提取酸沉淀提取芸香苷的流程
1. 原料预处理：取槐花米（或其他含芸香苷的植物原料），洗净，晾干，粉碎成粗粉。
2. 碱提取：
- 将粗粉置于烧杯中，加入适量的0.4%硼砂水溶液，搅拌均匀。
- 再缓慢加入石灰乳（氢氧化钙乳液），调节pH值至8 - 9。
- 加热至微沸，保持该状态并搅拌提取一定时间（约30 - 60分钟）。
- 趁热过滤，得到碱提取液。
3. 酸沉淀：
- 在碱提取液中，边搅拌边缓慢加入稀盐酸，调节pH值至4 - 5。
- 随着酸的加入，可见芸香苷逐渐沉淀析出。
- 静置一段时间（如1 - 2小时），使沉淀完全。
- 过滤，得到芸香苷粗品沉淀。
4. 精制：
- 将芸香苷粗品沉淀用适量蒸馏水洗涤，以除去杂质。
- 再用乙醇进行重结晶，得到较纯的芸香苷晶体。
一、实验目的1. 掌握芸香苷的提取方法。
2. 学习黄酮类化合物的分离纯化技术。
3. 了解芸香苷的鉴定方法。
4. 培养实验操作技能和科学思维。
二、实验原理芸香苷（Rutin）是一种天然黄酮类化合物，广泛存在于槐米、山楂、茶叶等植物中。
本实验采用醇提法提取芸香苷，通过分离纯化得到较高纯度的芸香苷，并对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 槐米- 甲醇- 氢氧化钠- 碳酸钠- 盐酸- 硝酸- 氢氧化钠溶液- 醋酸铅溶液- 醋酸镁溶液- 香草醛溶液- 水合氯醛溶液- 蒸馏水- 硅胶2. 实验仪器：- 电子天平- 热水浴锅- 超声波清洗器- 烘箱- 分液漏斗- 抽滤装置- 显微镜- 紫外可见分光光度计四、实验步骤1. 芸香苷的提取：（1）称取干燥的槐米粉末10g，置于100mL三角瓶中。
（2）加入50mL甲醇，超声提取30分钟。
（3）过滤，收集滤液。
（4）将滤液浓缩至约5mL，加入适量的氢氧化钠溶液，调节pH值为8.5。
（5）静置过夜，使芸香苷沉淀。
（6）抽滤，收集沉淀。
2. 芸香苷的分离纯化：（1）将沉淀用适量甲醇溶解，加入适量的硅胶，搅拌均匀。
（2）将混合物倒入色谱柱中，采用柱层析法进行分离纯化。
（3）依次用不同极性的溶剂进行梯度洗脱，收集目标峰。
（4）将收集到的目标峰浓缩，得到纯化的芸香苷。
3. 芸香苷的鉴定：（1）紫外-可见光谱法：取适量纯化后的芸香苷，用甲醇溶解，测定其在254nm和364nm处的吸光度值。
（2）薄层色谱法：将纯化后的芸香苷点于薄层板上，用适宜的溶剂进行展开，与对照品进行对比，观察其斑点位置。
（3）红外光谱法：对纯化后的芸香苷进行红外光谱分析，与标准图谱进行对比，确定其结构。
五、实验结果与分析1. 芸香苷的提取：通过醇提法，从槐米中成功提取了芸香苷。
2. 芸香苷的分离纯化：采用柱层析法，从提取液中分离纯化了芸香苷。
3. 芸香苷的鉴定：通过紫外-可见光谱法、薄层色谱法和红外光谱法，对纯化后的芸香苷进行了鉴定，确认其为芸香苷。
