实验四槐米中芸香苷的提取分离与鉴定

2014.07中医中药242槲皮素作为一种黄酮类的物质，在草本植物和食物中有广泛的分布。

同时槲皮素作为一种比较强的植物性抗氧化剂，能够防止动脉硬化等功能，在治疗冠心病等心脑血管疾病中具有重要的作用。

同时还能够清除自由基，保护心肌、降血压、降血脂以及抗菌消炎等作用，对于肿瘤细胞等均有良好的抑制效果。

在槲皮素的提取中已经出现了多种提取方法，而且其方法也越来越先进，对槲皮素的普及具有重要的作用。

[1]1 芸香苷及槲皮素的提取芸香苷是一种广泛存在于植物体内的黄酮类的化合物，在自然界的花、叶、果实等有广泛的存在，在槐米、罗布麻等植物中的含量比较高。

槲皮素可以用来作为中药制剂，能够有效的降低毛细血管的通透性，抗病毒、清除氧自由基等功能。

具有防止动脉硬化和增强人体毛细血管的重要功能，在临床上常常被用来作为治疗心血管疾病的辅助药物。

同时由于它是一种植物提取物，它对于人体没有毒性，因此在食品工业中还被用来作为抗氧化剂和天然黄色素。

取槐米若干，加入六倍体积的量水，在100摄氏度煮沸环境下教学提取。

加入石灰水缓慢的搅拌调整其pH 到8.0~9.0，然后加入适量的浓度为3%的硼砂溶液，并且煮20~30min 。

然后将得到的混合物过滤，过滤的残渣进行反复的减压过滤3次，然后将得到了滤液合并起来。

在60摄氏度的条件下，用浓硫酸将得到的滤液的pH 调整到5.0。

在室温下放置24小时，然后抽滤，将得到的沉淀物用水洗到中性，在60摄氏度的条件下干燥可以得到芸香苷的粗制品。

利用沸水重新结晶，在70摄氏度的环境下干燥从而得到精制的芸香苷。

精制的芸香苷仍然难以满足使用的需要，需要进一步的提纯，将得到了精制芸香苷按照1:80的比例加入到浓度为2%的硫酸溶液中进行水解，加热到100摄氏度保持二个小时，然后冷却进行过滤。

将得到的滤液利用浓度为95%的乙醇进行重结晶，然后进行分离，用甲醇作为洗脱液进行洗脱，槐米中芸香苷及槲皮素的提取分离与检识甄　真北京卫生职业学院　北京市　101101【摘　要】槐米味苦、微寒，有清肝泻火和凉血止血的作用，槐米中主要含有槲皮素和芸香苷，同时还有槐花米甲乙丙素、鞣制等成分。

槐米中芸香苷类成分的提取分离技术实验流程The extraction and separation of saponins in Sophora japonica seeds (槐米) involves several experimental steps. Here is a detailed description of the process.First, prepare the sample by grinding the Sophora japonica seeds into a fine powder. This can be done using a mortar and pestle or a mechanical grinder. Ensure that the powder is homogeneous and free from any clumps.将槐米研磨成细粉，可以使用研钵和杵或机械研磨器。

确保粉末均匀且没有任何团块。

Next, extract the saponins from the powdered Sophora japonica seeds using a suitable solvent. Commonly used solvents for this purpose include methanol, ethanol, and water. Choose a solvent that has higher affinity for saponins to ensure maximum extraction efficiency. Place the powdered seeds in a container and add the solvent. Stir or shake the mixture to facilitate the extraction process.接下来，使用合适的溶剂从槐米粉末中提取皂苷类化合物。

槐米中芸香苷（芦丁）的提取与鉴定【实验目的】1、学会运用碱溶酸沉法，从槐米中提取、精制芦丁，并进行水解。

2、学会用显色反应及纸色谱法检识黄酮类化合物。

【实验原理】采用碱溶酸沉法提取，其原理是芸香苷结构中含有酚羟基，具酸性，能溶于碱水，当加入酸溶液后，则芸香苷沉淀析出。

芸香苷的精制是利用其可溶于热水，难溶于冷水的性质与杂质分离。

【实验材料】设备：电炉、托盘天平、500 ml烧杯、量筒、玻璃棒、移液管、纱布、温度计、滴管、抽滤装置、研钵、250 ml圆底烧瓶、冷凝管、水浴锅、pH 试纸、新华色谱滤纸、紫外灯、展开筒、试管、试管架。

药品：槐米粗粉、浓盐酸、蒸馏水、0.4%硼砂、石灰乳、2%硫酸、95%乙醇、氢氧化钡、葡萄糖标准品水溶液、鼠李糖标准品水溶液、正丁醇、醋酸、芦丁标准品、槲皮素标准品、氨水、三氯化铝、浓硫酸、α–萘酚、氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、镁粉、苯胺-邻苯二甲酸、醋酸镁【实验步骤】实验1、芸香苷的提取：称取槐米粗粉20g，置500 ml烧杯中，加入0.4%硼砂沸水溶液200 ml，在搅拌下加石灰乳，调至pH8～9，加热微沸20分钟（注意保持pH8～9），并随时补充蒸发掉的水分，趁热用四层纱布滤过。

滤渣同样操作再提取一次，合并两次滤液。

滤液在60℃～70℃用浓盐酸调至pH5左右，静置过夜使沉淀完全，抽滤，沉淀用蒸馏水洗2～3次至中性，抽干，置空气中晾干，得芸香苷粗品。

实验2、芸香苷的精制：称一定重量的粗品，按约1∶200的比例悬浮于蒸馏水中，煮沸10分钟使其全部溶解，趁热抽滤，冷却滤液，静置析晶。

抽滤，置空气中晾干或60℃～70℃干燥，得精制芸香苷，称重，计算得率。

实验3、芸香苷的水解和鉴定：取芸香苷1g，研细后置于250 ml圆底烧瓶中，加入2%硫酸溶液100 ml，直火微沸回流约40分钟，至析出鲜黄色沉淀不再增加为止，放冷抽滤，滤液保留作糖检查，沉淀用少量水洗去酸，抽干水分，晾干称重，得粗制槲皮素，然后用乙醇（95%乙醇约15 ml）重结晶即得精制槲皮素。

实验四槐米中芸香苷的提取分离与鉴定芦丁(Rutin)亦称芸香甙(Rutisude)，广泛存在于植物界中。

现已发现含芦丁的植物约有70余种，如烟叶、槐花米、荞麦叶、蒲公英中均含有大量的芦丁。

尤以槐花米和荞麦叶中含量最高，可作为提取芦丁的原料，使用最多的是槐花米。

槐花米为豆科植物槐(Sophora japonica L。

)的花蕾，所含主要成分为芦丁，含量可达12%~16%，其次含有槲皮素、三萜皂甙、槐花米甲素、乙素、丙素等。

芦丁具有维生素P样作用，可降低毛细血管前壁的脆性和调节渗透性。

临床上用于毛细血管脆性引起的出血症，并常作高血压症的辅助治疗药。

槐花米中主要化学成分的结构及性质：1.芦丁(Rutin)淡黄色细小针状结晶，mp.174℃~178℃(含三分子结晶)，188℃(无水物)。

溶解度：水：1:100(冷)，1:200(热)甲醇：1:100(冷)，1:9(热)乙醇：1:650(冷)，1:60(热)吡啶：1:11.7(冷)，易溶(热)不溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，易溶于碱液中呈黄色，酸化后复析出。

可溶于浓硫酸、浓盐酸，加水稀释复析出。

2. 槲皮素(Quercetin)即芸香甙甙元，为黄色结晶，mp.313℃~314℃(含2分子结晶水)，316℃(无水物)。

溶解度：乙醇：1:290(无水乙醇)，1:23(热)可溶于甲醇、乙酸乙酯、丙酮、吡啶、冰醋酸。

不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚等。

3. 皂甙粗品为白色粉末，mp.210℃~220℃(分解)。

易溶于水、吡啶，能溶于200倍的甲醇中。

酸水解后得白桦脂醇、槐二醇二种皂甙元及葡萄糖，葡萄糖醛酸及葡萄糖醛酸内酯。

(1) 白桦脂醇(Betulin)无色针晶，mp.251℃~252℃。

能溶于醋酸、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯、乙醚等溶剂，难溶于石油醚及水。

(2) 槐二醇(Sophoradiol)无色针晶，mp.219℃~220℃或224℃。

能溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇中，难溶于水。