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实验四槐米中芸香苷的提取分离与鉴定芦丁（Rutin）亦称芸香甙（Rutisude）,广泛存在于植物界中。
现已发现含芦丁的植物约有70余种，如烟叶、槐花米、养麦叶、蒲公英中均含有大量的芦丁。
尤以槐花米和养麦叶中含量最高，可作为提取芦丁的原料，使用最多的是槐花米。
槐花米为豆科植物槐（Sophora japonica L）的花蕾，所含主要成分为芦丁，含量可达12%~ 16%，其次含有槲皮素、三萜皂甙、槐花米甲素、乙素、丙素等。
芦丁具有维生素P样作用，可降低毛细血管前壁的脆性和调节渗透性。
临床上用于毛细血管脆性引起的出血症，并常作高血压症的辅助治疗药。
槐花米中主要化学成分的结构及性质：1. 芦丁（Rutin）淡黄色细小针状结晶，C ~178C （含三分子结晶），188C （无水物）。
溶解度：水：1:100（冷），1:200（热）甲醇：1:100（冷），1:9（热）乙醇：1:650（冷），1:60（热）吡啶：1:（冷），易溶（热）不溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，易溶于碱液中呈黄色，酸化后复析出。
可溶于浓硫酸、浓盐酸，加水稀释复析出。
2. 槲皮素（Quercetin）即芸香甙甙元，为黄色结晶，mp.313C ~314C （含2分子结晶水），316C （无水物）。
溶解度：乙醇：1:290（无水乙醇），1:23（热）可溶于甲醇、乙酸乙酯、丙酮、吡啶、冰醋酸。
不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚等。
3. 皂甙粗品为白色粉末，mp.210C ~220C （分解）。
易溶于水、吡啶，能溶于200咅的甲醇中。
酸水解后得白桦脂醇、槐二醇二种皂甙元及葡萄糖，葡萄糖醛酸及葡萄糖醛酸内酯。
（1）白桦脂醇（Betulin）无色针晶，°C ~252C。
能溶于醋酸、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯、乙醚等溶剂，难溶于石油醚及水。
(2) 槐二醇(Sophoradiol)无色针晶，C ~220C或224E。
能溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇中，难溶于水。
【实验材料】槐花米、石灰乳、0.4%硼砂水溶液、浓盐酸、正丁醇、醋酸、氨水、乙醇、70%乙醇、1%氢氧化钠溶液、1%三氯化铝乙醇溶液、2%氯氧化锆甲醇溶液、2%枸椽酸甲醇溶液、10% α-萘酚乙醇溶液、浓硫酸、2%硫酸溶液、葡萄糖标准品、鼠李糖标准品、芸香苷标准品、槲皮素标准品、碳酸钡、氨制硝酸银试液、广泛pH试纸、中速层析滤纸（4cm×15cm）。
【实验原理】（一）芸香苷又名芦丁（Rutin），维生素P，紫槲皮苷。
分子式C27H30O16，分子量610.51。
浅黄色针晶（水），mp.176℃～178℃，[]23Dα+13.82°(乙醇)，[]23Dα-39.43°（吡啶）。
在各种溶剂中的溶解度为：难溶于冷水（1∶8000～10000）、可溶于热水（1∶200）、热甲醇（1∶7）、冷甲醇（1∶100）、热乙醇（1∶60）、冷乙醇（1∶650）、可溶于吡啶及碱性溶剂，几乎不溶于苯、乙醚、氯仿及石油醚等溶剂。
由于分子中含有多个酚羟基，易被氧化，在空气中久置会使芸香苷颜色加深，尤其在碱性溶液中更易氧化。
OHOO glu OHOHO rha芦丁（二）槲皮素（Quercetin）又名栎精，槲皮黄素。
分子式C15H10O2，分子量 302.23。
为黄色针状结晶（稀乙醇），含2分子结晶水，在95℃～97℃成为无水物。
mp.314℃（分解）。
能溶于冷乙醇（1∶290），易溶于沸乙醇（1∶23），可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、冰醋酸及吡啶等溶剂，不溶于水、苯、乙醚、氯仿及石油醚等溶剂。
（三）其他成分槐花米甲、乙、丙素（Sophorin A、B、C）、白桦脂醇（Betulin）、槐二醇（Sophoradiol）、单宁等。
本实验利用芸香苷分子结构中含有多个酚羟基，显弱酸性，能与碱作用生成盐而溶于碱水，加酸酸化后又能沉淀析出的性质，采用碱溶酸沉淀法进行提取。
利用芸香苷在热水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性质，用水作溶剂进行重结晶精制。
实验一槐花米中芸香甙的提取、精制和检识芸香甙亦称芦丁（Rutin），广泛存在于植物界，已发现的芦丁植物至少在70种以上，以槐米、荞麦叶、蒲公英和烟叶中含量较多，本实验以槐花米作为提取芦丁的原料。
槐花米系豆科植物Sophora joponia L的未开放花蕾，其中芦丁含量高达23.5%，槐花开放后降至13.0%。
芦丁除用作治疗毛细管脆弱引起的出血症和高血病的辅助治疗剂外，还可作为制药原料，用于制造槲皮素（Ruercetin）、羧乙基槲皮素、羧乙基芦丁、二羧丙基芦丁、β-乙基吗啉芦丁、6-二乙胺基芦丁等。
槐花米中除含有芦丁外，还含有白桦脂醇（Betulin）、槐二醇（Sophoradiol）、皂甙以及槐花米甲、乙、丙素（Sophorin A、B、C）和多糖粘液质等。
芸香甙的结构一、槐花米主要成份的理化性质1. 芦丁：是槲皮素3位羧基与芸香糖（Rutinose）脱水缩合成的甙。
浅黄色粉末或极细的针状结晶，含3分子结晶水（C27H36O16·3H2O），mp ll7~178℃。
在110℃ 10mmHg下真空干燥12小时变成无水物，无水物易吸湿，可从大气中吸收约2.5分子水份。
无水芦丁在125℃变褐，在190~192℃变成胶状，当温度升至214~215℃发泡分解。
芦丁溶解度在冷水中1∶10000，热水中1∶200，冷乙醇中1∶300，热乙醇中1∶30，沸甲醇中1∶7，冷吡啶中1∶12，微溶于丙酮、乙醇乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚。
UV λmax nm：259，266（sh），299（sh）。
芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液中，酸化后又析出，因此可以用碱溶液沉的方法提取芦丁。
芦丁分子因含有邻二酚羟基，性质不太稳定，暴露空气中，在光的作用下，能缓缓分解，变为暗褐色，在碱性条件下更容易被氧化分解，硼酸盐能与邻二酚羟基结合，达到保护的目的，故在碱性条件溶液中加热提取芦丁时，往往在加入少量硼砂，就是保护芦丁减少氧化分解。
药材粗粉中芸香苷分离流程一、药材粗粉的准备。
咱得先有药材粗粉呀。
这药材粗粉就像是一群小伙伴聚在一起，里面啥都有呢。
这些药材可能是从山上采来的，或者是从市场上买来的，不过都得经过处理变成粗粉。
就像把一堆水果做成水果泥之前，先得把水果切成小块一样。
这个粗粉的粗细程度也是有讲究的，不能太粗，不然后面的步骤不好进行，也不能太细，太细了可能会在一些步骤中造成损失。
二、提取。
有了药材粗粉之后，就要把芸香苷从这堆“小伙伴”里提取出来。
这就像是从一群人中找到特定的那个人。
通常呢，我们会用到溶剂提取法。
溶剂就像是一个超级英雄，它能把芸香苷从药材粗粉里“拽”出来。
比如说乙醇，它就很厉害，能够溶解芸香苷。
把药材粗粉放到乙醇里，然后让它们充分地混合，就像是在开一场盛大的派对，乙醇分子和芸香苷分子在里面欢快地跳舞。
这个过程可能需要一些时间，就像炖肉一样，小火慢炖才能出好味道。
三、过滤。
提取完了之后，可不能就这么算了呀。
溶液里除了有我们想要的芸香苷，还有一些杂质呢，就像在一杯果汁里有果肉渣一样。
这时候就要过滤了。
过滤就像是一个筛子，把那些不需要的杂质筛出去，只留下含有芸香苷的溶液。
可以用滤纸来过滤，看着溶液一点点地透过滤纸，就像水穿过细密的沙子一样，感觉还挺奇妙的呢。
四、浓缩。
过滤后的溶液里芸香苷的浓度可能还不够高，这时候就要进行浓缩了。
想象一下，把一大锅汤熬成一小碗浓汤，精华都在这小碗里了。
我们可以用加热蒸发溶剂的方法来浓缩，就像把水烧开，水慢慢变成水蒸气飞走了，剩下的就是更浓的含有芸香苷的溶液了。
不过在加热的时候要小心哦，不能太猛了，不然芸香苷可能会被破坏，那就前功尽弃了。
五、沉淀。
浓缩后的溶液里芸香苷还是混在其他东西里面呢，这时候就要想办法让芸香苷单独出来。
我们可以通过改变溶液的酸碱度之类的方法让芸香苷沉淀下来。
就像让一个本来在溶液里游来游去的小虫子突然停下来，沉淀在水底。
当看到芸香苷开始沉淀的时候，就像看到宝藏慢慢浮现一样，心里可激动了呢。
药材粗粉中芸香苷分离流程一、药材粗粉的准备。
咱得先有药材粗粉呀。
这药材粗粉就像是一堆宝贝原料，等着咱们去发掘里面的芸香苷呢。
这些粗粉是经过初步处理得到的，可能就是把药材简单地碾碎之类的。
这一步虽然看起来简单，但可重要啦，要是粗粉的质量不好，后面的分离就会麻烦不少呢。
比如说，要是粗粉太粗了，可能里面的芸香苷就不好被提取出来；要是太细了，又可能会有一些杂质混在里面，增加后续分离的难度。
二、提取过程。
接下来就是提取芸香苷啦。
这就像从一堆沙子里挑出金子一样。
通常呢，会用到一些溶剂，比如说乙醇之类的。
把药材粗粉放到乙醇里，就像给粗粉洗个澡，芸香苷就会慢慢地跑到乙醇这个“大澡堂”里。
这个过程得控制好一些条件哦。
比如说温度，不能太高也不能太低。
温度太高了，可能会把一些其他的成分也带出来，就像洗澡水太烫，把不该洗下来的东西也洗下来了。
温度太低呢，芸香苷又可能不太愿意出来，变得懒洋洋的。
而且溶剂的量也得合适，太少了洗不干净，太多了又浪费。
三、初步分离杂质。
等芸香苷跑到乙醇里之后，可不能直接就说得到纯的芸香苷啦，里面还有好多杂质呢。
这时候就像是要把混在金子里的小石子挑出来。
可以用一些过滤的方法，比如说滤纸过滤呀。
把那些大颗粒的杂质先挡住，不让它们跟着芸香苷混在一起。
这一步就像是给芸香苷和杂质来个初步的分家，让它们先拉开点距离。
不过呢，这时候还是有一些小的杂质在里面，还得继续努力。
四、进一步精制。
那怎么把剩下的杂质去掉呢？这就需要一些更巧妙的办法啦。
有时候会用到重结晶的方法。
就像让芸香苷重新找个舒服的家一样。
把含有芸香苷和杂质的溶液慢慢地改变条件，让芸香苷自己重新结晶出来，而杂质就留在溶液里。
这个过程就像是给芸香苷做个小手术，把那些不好的东西都去掉。
不过这可得小心翼翼的，条件要是没控制好，芸香苷可能就不好好结晶，或者结晶出来的也不纯。
五、最后的检测和确定。
经过前面这些步骤，咱们觉得得到纯的芸香苷了，可不能就这么自信满满地结束哦。
