HPLC法测定市售蒺藜饮片中3种黄酮苷元的含量_张超

RP -HPLC 法测定黄芩中3种黄酮刘　源1,邓少伟2,原文鹏3,马双成4α(11深圳市第二人民医院,广州深圳　518035;21国家中药品种保护审评委员会,北京　100061;31深圳市人民医院,广州深圳　518020;41中国药品生物制品检定所,北京　100050) 黄芩为唇形科植物黄芩S cu tella ria ba ica lensisGeo rgi 的干燥根,为常用中药,具有清热泄火、解毒、止血、安胎等作用,其中黄酮类化合物为主要有效成分,含量较高的成分有黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素[1]。

因此,研究制定此3种成分含量的药材标准,对提高黄芩的整体质量水平有很大的意义。

目前《中华人民共和国药典》2000年版一部中[2],仅对黄芩中的黄芩苷进行含量测定。

本实验利用R P 2H PL C 梯度洗脱法,建立了同时测定黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷和黄芩素含量的方法,该方法可为黄芩药材质量控制提供科学依据。

1　仪器、试药和材料 W aters 高效液相色谱仪包括:L C —2690泵,996二极管阵裂检测器,600自动进样品,M illen ium 32数据处理软件系统(美国)。

甲醇为色谱纯;水为M illi 2Q ;四氢呋喃(TH F )、磷酸、甲醇和乙醇为分析纯。

黄芩样品分别购自深圳市华辉药业公司,经深圳市人民医院中药室主任原文鹏副主任中药师鉴定为黄芩S .ba ica lensis Geo rgi 的干燥根。

黄芩苷对照品(中国药品生物检定所提供,含量大于98%);汉黄芩苷和黄芩素对照品(自制,H PL C 归一化法计算其含量大于98%)。

2　方法与结果211　色谱条件:色谱柱为L ich ro sp her C 18柱(250nnm ×416mm ,5Λm );流动相为:11CH 3O H ,21H 2O 2TH F 2H 3PO 4(85∶12∶013)梯度洗脱时间程序见表1;检测波长为275nm ;体积流量为1mL m in ;进样量为10ΛL ,色谱图见图1。

HPLC法测定不同主产地黄芪饮片的4种黄酮的含量蒲清荣;黄锐;赵剑;明俊男;罗群;李静【摘要】目的采用HPLC法同时测定不同主产地黄芪饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的含量.方法色谱柱固定相为Inertsil ODS-SPC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-水(含0.2％甲酸),梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,紫外检测波长260 nm,柱温为40℃.结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素在0.00569 ～0.0569、0.00448 ～0.0448、0.00257～0.0257、0.00265～0.0265mg/mL时与色谱峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为98.72％、99.32％、100.03％、99.78％,RSD为1.06％、2.32％、2.86％、1.08％.结论该方法准确灵敏,可作为评价不同产地黄芪饮片的质量控制方法.【期刊名称】《云南中医中药杂志》【年(卷),期】2016(037)003【总页数】3页(P63-65)【关键词】黄芪饮片;毛蕊异黄酮葡萄糖苷;芒柄花苷;毛蕊异黄酮;芒柄花素;HPLC 【作者】蒲清荣;黄锐;赵剑;明俊男;罗群;李静【作者单位】四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000;四川医科大学附属中医医院,四川泸州646000【正文语种】中文【中图分类】R284.2【Abstract】Objective: To determine the contents of calycosin-glucoside, ononin, calycosin and formononetin in Astragalus Pieces of different main origins by HPLC. Methods: Column stationary phase was Inertsil ODS-SPC18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm) and mobile phase was acetonitrile-water (containing 0.2% formic acid), by gradient elute, with 1.0 mL·min-1 of flow rate and 260 nm of ultraviolet detector wavelength, at 40℃ of column temperature. Results: The calycosin-glucoside, ononin, calycosin and formononetin showed a good linear relationship with chromatographic peak areas at the range of 0.00569-0.0569, 0.00448-0.0448, 0.00257-0.0257 and 0.00265-0.0265mg/mL. The average recovery was 98.72%, 99.32%, 100.03% and 99.78%, and RSD was 1.06%, 2.32%, 2.86% and 1.08%. Conclusion: The method is accurate and sensitive and can be valued as a quality control method for Astragalus Pieces of different origins.【Key words】Astragalus Pieces, calycosin-glucoside, ononin, calycosin, formononetin, HPLC黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao.或膜荚黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。

155第11卷 第10期 2009 年 10 月辽宁中医药大学学报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol. 11 No. 10 Oct . ，2009菌素类抗真菌新药)预先包被，可获得一定的抗白假丝酵母菌生物膜形成功能。

本研究中也发现，提前用适当浓度的这两种中药复方包被96孔板，也可抑制白假丝酵母菌生物膜的形成，提示生物材料如果预先用药物处理，使药物从其中缓慢释放出来，在与生物膜菌的相互作用过程中会产生一定的抗菌效果，这在预防生物医疗材料相关感染性疾病中具有积极的意义。

经3组实验可以看出，两种中药复方都对白假丝酵母菌生物膜有抑制作用，但相比较而言，复方1对白假丝酵母菌生物膜的抑制作用更加显著；从药物预先包被抗白假丝酵母菌生物膜形成方面，复方2效果更为明显。

◆参考文献[ 1 ] 倪慕云，贾仲华，王宏杰，等.抗白假丝酵母菌中草药筛选概况[ J ] .中西医结合杂志，1991 ( 7 )：443-444.[ 2 ] 汪长中，程惠娟，官妍，等.黄连解毒汤对体外白假丝酵母菌生物膜形成的影响[ J ] .热带病与寄生虫学杂志，2007 ( 5 )：82-84.[ 3 ] 上海中医学院妇科教研组.中医妇科临床手册[ M ] .上海：上海科学技术出版社，1981：91.[ 4 ] 牛建昭，郭志强，邢淑敏，等.现代中西医妇科学[ M ] .北京：中国科学技术出版社，1996：214.[ 5 ] Ramage JW，Walle KV，Wickes BL，et al.Standardized Methodfor In Vitro Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms[ J ] . Antimicrob Agents Chemother，2001，45 ( 9 )：2475-2479.[ 6 ] 孙秋宁，方凯.白假丝酵母菌生物膜的结构、影响因素及其对抗真菌药的敏感性[ J ] .中国医学科学院学报，2002，24 ( 5 )：385-388.[ 7 ] Xiaogang Li，Zhun Yan，Jianping Xu. Quantitative variation ofbiofilms among strains in natural populations of Candida albicans [ J ] . Microbiology，2003，49：353-362.[ 8 ] National Committee for Clinical Laboratory Standards. ReferenceMethod for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts ：approved standard. NCCLS document M27- A[ S ] . 1997.[ 9 ] Hawesr S P，Douglas L G，.Biofilm formation by Candida specieson the surface of catheter materials in vitro[ J ] . Infection and Immunity，1994，2：915- 921.[ 10 ] Stefano P Bachmann，Kacy VandeWalle，Gordon Ramage，etal. In Vitro Activity of Caspofungin against Candida albicans Biofilms[ J ] . Antimicrob Agents，2002，46：3591-3596.[ 11 ] M Henriques，J Azeredo，R Oliveira. Candida albicans andCandida dubliniensis ：comparision of biofilm formation in terms of biomass and activity[ J ] . British Journal of Biomedical Science，2006，63 ( 1 )：5-11.[ 12 ] Ramage JW，Walle KV，Wickes BL，et al. Characteristics ofbiofilm formation by Candida albicans[ J ] . Rev Iberoam Micol，2001，18：163-170.蒺藜为蒺藜科蒺藜（Tribulus terrestris L.）的果实，具有平肝解郁、活血祛风、明目、止痒之功效，临床用于治疗头痛、头晕、气管炎、高血压、皮肤瘙痒和风疹等症，现代研究表明，蒺藜的黄酮类、皂苷类是其主要活性成分，虽然蒺藜具有良好的生物活性，但至今尚无有效的质量控制手段[1-2]，因此本文以蒺藜皂苷元(25R-Spirostan-4-ene-3,12-dione)为对照品，用HPLC-ELSD 法对蒺藜含量测定进行了方法学研究[3-4]，结果显示，该方法方便可靠，准确，适用于蒺藜的含量测定。

HPLC法测定沙棘黄酮粉中槲皮素、山柰素和异鼠李素的含量卫罡;侯霄【期刊名称】《国际沙棘研究与开发》【年(卷),期】2014(000)002【摘要】建立同时测定沙棘黄酮粉中槲皮素、山柰素和异鼠李素三种成分含量的HPLC方法，对收集到的7个批次沙棘黄酮粉样品进行质量分析。

采用 Kromasil C18（4.6mm ×250mm ，5μm)色谱柱为固定相，甲醇-0.4%磷酸水溶液为流动相，进行梯度洗脱，流速1.0mL/min ，检测波长为370nm ，柱温25℃。

结果显示：该方法稳定可靠，重复性强。

收集到的7个批次的沙棘黄酮粉样品中三种成分的含量差异较大，即便是同一厂家不同批次的产品差异也较大。

%Objective:To set up a RP-HPLC method to determine the content of Quercetin, Kaempfer-ide and Isorhamnetin in Seabuckthorn flavone powder. Method:The optimum HPLC condition was as follows:Kromasil C18 column (4.6mm × 250mm, 5μm)as the stationary phase;Mobile Phase:Metha-nol-0.4% Phosphoric acid, gradient elution, detectionwavelength:370nm;Column Temperature:25℃;Flow Rate:1.0mL/min. Results:The HPLC method was reasonable, stable and accurate. Conclusion:The contents of three components in seven batchs of seabuckthorn flavone powder we collected was quite difference, even in different batchs producted by same company.【总页数】4页(P22-24,34)【作者】卫罡;侯霄【作者单位】山西省医药与生命科学研究院，山西太原 030006;山西省医药与生命科学研究院，山西太原 030006【正文语种】中文【中图分类】S793.6.08【相关文献】1.HPLC法同时测定护肝颗粒中的槲皮素、山柰素和异鼠李素的含量 [J], 王建平;汪铜芳;陈晓峰;张咏梅;王建春;蒋志涛2.HPLC测定复方银杏颗粒中槲皮素、山柰素、异鼠李素及总黄酮醇苷含量 [J], 徐飞;陆兔林;谢辉;毛春芹3.高效液相色谱法测定垂盆草-柴胡药对不同比例配伍中槲皮素、山柰素、异鼠李素的含量 [J], 蒋志涛;吕玲燕;汪铜芳;陈晓峰;巫静华4.HPLC法同时测定沙棘黄酮中槲皮素、山柰酚和异鼠李素的含量 [J], 张东; 付铭哲; 邬国栋5.HPLC法测定蒲黄炭中槲皮素、异鼠李素和山柰素 [J], 黄海燕;丁安伟;张丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

HPLC法同时测定小花鬼针草中3种黄酮类成分含量刘红燕【摘要】建立了HPLC法同时测定小花鬼针草中芦丁、金丝桃苷和槲皮苷含量的方法.采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2％冰醋酸梯度洗脱,流速为1 mL/min;检测波长为360 nm.结果表明,芦丁、金丝桃苷和槲皮苷在0.50～ 12.50 μg/mL(r =0.999 9)、0.49～ 12.35 μg/mL(r =0.999 8)、0.42～10.55 μg/mL(r =0.999 5)范围内线性良好,平均回收率为99.37％(RSD =0.56％)、99.35％(RSD =0.57％)、99.68％(RSD =0.56％).该方法简便、准确、重现性好,可用于同时测定鬼针草中3种黄酮成分的含量.【期刊名称】《山东科学》【年(卷),期】2014(027)002【总页数】4页(P44-46,82)【关键词】小花鬼针草;芦丁;金丝桃苷;槲皮苷;HPLC【作者】刘红燕【作者单位】山东中医药大学,山东济南250355【正文语种】中文【中图分类】R284.1小花鬼针草(Bidens parviflora Willd.)隶属于菊科鬼针草属，全草入药，具有清热、解毒、止泻等作用［1］，为鬼针草药用植物来源之一。

近年来，随着鬼针草民间药用价值的进一步挖掘，小花鬼针草在治疗高血压、前列腺肥大等方面的研究引起了业内专家的广泛关注。

药理和临床研究［1］显示，小花鬼针草中的黄酮类成分是其降压［2－3］、抗前列腺增长［4］的物质基础。

目前，已从该植物中分离出多种黄酮类成分［5－6］，但关于其质量标准方面的研究尚不多见［7］。

为进一步开发小花鬼针草这一药用资源，为其质量控制研究提供参考，本文采用HPLC 法对其中的3种黄酮类化合物进行了含量测定。

1 材料与方法1.1 仪器与试药DIONEX P680戴安高效液相色谱仪(含自动进样器);微孔滤膜等;天津四友色谱纯甲醇，其他试剂均为国产分析纯。

基金项目：“国家重大新药创制”科技重大专项（2010ZX09502－004）；科技创新专项资金（08FDZDSH01404）作者简介：贾诚，男，硕士研究生研究方向：中药新药研发*通讯作者：叶正良，男，研究员研究方向：中药新药研发Tel ：（022）HPLC 同时测定麦冬药材中3种黄酮类成分的含量贾诚1，2，叶正良2*，姜秀晶1，周大铮2，李德坤2（1.天津中医药大学中药学院，天津300193；2.天津天士力之骄药业有限公司，天津300402）摘要：目的测定麦冬药材中甲基麦冬黄烷酮A 、甲基麦冬黄烷酮B 和6-醛基异麦冬黄烷酮A 的含量，为麦冬药材的质量控制提供科学依据。

方法采用Waters Symmetry C 18柱（4.6mm ˑ250mm ，5μm ），乙腈-0.05%磷酸梯度洗脱，流速为1.0mL ·min －1，检测波长296nm ，柱温30ħ。

结果甲基麦冬黄烷酮A 、甲基麦冬黄烷酮B 和6-醛基异麦冬黄烷酮A 分别在9.6896.8、4.96 49.6、4.18 41.8μg ·mL －1内具有良好的线性关系，平均回收率（n =6）分别为100.1%（RSD 1.03%），99.5%（RSD 1.35%）和100.2%（RSD 1.16%）。

结论该方法快速、准确，可用于麦冬药材中甲基麦冬黄烷酮A 、甲基麦冬黄烷酮B和6-醛基异麦冬黄烷酮A 的含量测定。

关键词：麦冬；甲基麦冬黄烷酮A ；甲基麦冬黄烷酮B ；6-醛基异麦冬黄烷酮A ；HPLC 中图分类号：R283文献标志码：A文章编号：1001－2494（2011）15－1209－03Simultaneous Determination of Contents of Three Flavonoid Ingredients in Radix Ophiopogonis by HPLCJIA Cheng 1，2，YE Zheng-liang 2*，JIANG Xiu-jing 1，ZHOU Da-zheng 2，LI De-kun 2（1.Tianjin University of TraditionalChinese Medicine ，Tianjin 300193，China ；2.Tianjin Tasly Pride Pharmaceutical Company Limited ，Tianjin 300402，China ）ABSTRACT ：OBJECTIVETo determine the contents of methylophiopogonanone A ，methylophiopogonanone B and 6-aldehydo-isoophiopogonone A in Radix Ophiopogonis.METHODSWaters Symmetry C 18column （4.6mm ˑ250mm ，5μm ）was used withphosphoric acid （0.05%，v /v ）and acetonitrile as the mobile phase.Stepwise gradient elution was adopted.The flow rate was 1.0mL ·min －1，the detection wavelength was 296nm ，and the column temperature was maintained at 30ħ.RESULTSThe calibrationcurves showed good linearity within the range of 9.68－96.8，4.96－49.6and 4.18－41.8μg ·mL －1for methylophiopogonanone A ，methylophiopogonanone B and 6-aldehydo-isoophiopogonone A ，respectively.The mean recoveries （n =6）were 100.1%（RSD 1.03%），99.5%（RSD 1.35%）and 100.2%（RSD 1.16%），respectively.C ONCLUSION This method is simple and accu-rate.And it can be used for the determination of methylophiopogonanone A ，methylophiopogonanone B and 6-aldehydo-isoophio-pogonone A in Radix Ophiopogonis .KEY WORDS ：Radix ophiopogonis ；methylophiopogonanone A ；methylophiopogonanone B ；6-aldehydo-isoophiopogonone A ；HPLC麦冬来源于百合科植物麦冬［Ophiopogon ja-ponicus （Thunb.）Ker-Gawl.］的干燥块根。

HPLC对蒺藜不同药用部位总黄酮醇苷含量的测定和比较杨飞快;张曼玲;权秀丽;薛美玲;蔡慧侠;杨静【期刊名称】《现代中医药》【年(卷),期】2014(0)4【摘要】目的采用高效液相色谱法测定蒺藜不同药用部位中总黄酮醇苷的含量，并对蒺藜茎、叶、果实、全草中总黄酮醇苷含量进行比较。

方法以槲皮素、异鼠李素、山奈酚为对照，采用高效液相法，色谱条件：ODS色谱柱（250 mm×4．6 mm，5μm），流动相：甲醇-0．4％磷酸溶液（50：50），检测波长：360 nm。

结果蒺藜不同药用部位中总黄酮醇苷的含量有较大差异，其中茎、叶、果实、全草中总黄酮醇苷含量分别为2．19 mg／g、8．15 mg／g、1．67 mg／g、4．36 mg／g，叶中含量最高，果实中含量最低；槲皮素、异鼠李素、山奈酚在线性范围（分别为0．0312—0．312μg、0．0204～0．204 μg、0．0112—0．112μg）内，呈良好的线性关系（依次r=0．9999、r=0．9998、r=0．9999）；回收率试验的RSD分别为0．92％、1．6l％、1．44％。

结论本研究所建立的分析方法准确可行，可用于蒺藜不同药用部位中总黄酮醇苷含量测定。

【总页数】4页(P61-64)【关键词】蒺藜叶;蒺藜全草;总黄酮醇苷;高效液相色谱法【作者】杨飞快;张曼玲;权秀丽;薛美玲;蔡慧侠;杨静【作者单位】金花企业(集团)股份有限公司西安金花制药厂;西安万隆制药股份有限公司;步长制药生产运营管理中心【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.HPLC法测定蒙药材蒙古山萝卜不同药用部位金丝桃苷的含量 [J], 王旭瑞;于蕾;娜荷芽;李德良;周雪梅2.HPLC法同时测定蒺藜茎叶中3个黄酮醇苷的含量 [J], 桂海水;刘铜华;秦灵灵;李朋收;李春娜;刘洋洋;徐暾海3.HPLC法测定民族药结石草不同药用部位中车前醚苷的含量 [J], 潘泰;李齐激;杨艳;张明;王道平;肖燕云;杨小生4.HPLC法测定不同药用部位及不同贮藏年限的大花红景天中红景天苷的含量 [J], 刘显福;胡敏燕;杨杰5.HPLC测定半枝莲不同药用部位野黄芩苷的含量 [J], 李洁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

HPLC法同时测定蒺藜药材中3种成分的含量＊李春娜;李博;王东超;刘洋洋;时晓娟;魏颖;李朋收;徐暾海;刘铜华【摘要】目的：建立同时测定蒺藜中3种成分含量的方法，比较不同生长期、不同产地及不同药用部位的蒺藜中3种指标成分含量，探究采收时间及种植地区的科学性。

方法：以蒺藜中3种有效成分，即槲皮素-3-O-β-吡喃葡萄糖基-(1→6)-吡喃葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-吡喃葡萄糖苷、Terrestrinone A2为指标成分，高效液相色谱（HPLC）法测定含量。

结果：3种指标成分含量均逐渐递增至6月并达到最大，随后逐渐降低；均表现为茎叶>果>根，根中含量低于检测限；产于内蒙古的蒺藜指标成分含量远远高于其他地区，其次为山东、河北、陕西。

结论：该方法简便、准确，具有较好的重复性和稳定性，可为蒺藜质量控制提供参考。

%This study was aimed to establish a method for the content determination of three components in Tribulus terrestris L., in order to compare index components of different growing periods, production places and medical parts for the scientific explanation of the harvesting time and growing places. Contents of three effective components inTribulus terrestris L., which were quercetin-3-O-β-D-gentiobioside, isorhamnetin-3-O-β-D-gentiobioside and Terrestrinone A2, were determined by HPLC. The results showed that contents of three evaluation indexes all gradually increased until June and then started reducing. The contents in all evaluated indexes were in the order of the stem and leaf > fruit > root. And the content in the root was below the detection limit. The content indexes ofTribulus terrestris L. of the Inner Mongolia were much higher than that of other regions. It was followedbyShandong,Hebei andShanxi province. It was concluded that the method was simple and accurate with good repeatability and stability, which was suitable for quality control ofTribulus terrestris L.【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】5页(P1184-1188)【关键词】蒺藜;含量测定;黄酮;皂苷【作者】李春娜;李博;王东超;刘洋洋;时晓娟;魏颖;李朋收;徐暾海;刘铜华【作者单位】北京中医药大学中药学院北京 100102; 北京中医药大学教育部中医养生学重点实验室北京100029; 北京中医药大学北京市中医养生学重点实验室北京 100029;北京中医药大学中药学院北京 100102; 北京中医药大学教育部中医养生学重点实验室北京100029; 北京中医药大学北京市中医养生学重点实验室北京100029;北京中医药大学中药学院北京 100102; 北京中医药大学教育部中医养生学重点实验室北京100029; 北京中医药大学北京市中医养生学重点实验室北京100029;北京中医药大学中药学院北京 100102; 北京中医药大学教育部中医养生学重点实验室北京100029; 北京中医药大学北京市中医养生学重点实验室北京100029;北京中医药大学中药学院北京 100102; 北京中医药大学教育部中医养生学重点实验室北京100029; 北京中医药大学北京市中医养生学重点实验室北京100029;北京中医药大学中药学院北京 100102; 北京中医药大学教育部中医养生学重点实验室北京100029; 北京中医药大学北京市中医养生学重点实验室北京100029;北京中医药大学中药学院北京 100102; 北京中医药大学教育部中医养生学重点实验室北京100029; 北京中医药大学北京市中医养生学重点实验室北京100029;北京中医药大学中药学院北京 100102; 北京中医药大学教育部中医养生学重点实验室北京100029; 北京中医药大学北京市中医养生学重点实验室北京100029;北京中医药大学教育部中医养生学重点实验室北京100029; 北京中医药大学北京市中医养生学重点实验室北京 100029【正文语种】中文【中图分类】R284.1蒺藜（Tribulus terrestris L.）为蒺藜科（Zygophylaceae）蒺藜属（Tribulus）植物，别名刺蒺藜、白蒺藜、硬蒺藜，为一年生或多年生草本植物，生长期为5-10月，分布于全国各地。