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利描分析与检测峰蜜中抗生素残留的归因分析与检测技术概要□陈荣锋闽南师范大学摘要：本文分析了蜂蜜中抗生素残留的原因，结合蜂蜜中常见的残留抗生素类别进行介绍，提出了蜂产品当中对于 残留氨基糖苷类抗生素的检测要求与相关技术：一是进行样品前处理，二是亲水色谱柱的选择。
关键词：蜂蜜；氨基糖苷类抗生素；检测技术据悉，在所有出口蜂产品的国家中，中国是出口量最大的国家之_，尤其在发展中国家位居榜首，其主要 发往的国家是_些发达国家，以欧洲 的一些国家以及美国、曰本为主[1]。
那么，在该行业，食品安全问题是被 所有国家所关心的，其中，氨基糖苷 类抗生素的检测已经成了热议的话题。
所以，在安全调查中，分析蜂蜜中抗 生素残留以及利用好科学的检测仪器 与方法，具有举足轻重的意义。
在我 国采用超高效液相色谱仪和三重四极 杆质谱仪联用测定蜂蜜中残留氨基糖 苷类抗生素，该技术结果表明，液质 联用法是测定蜂蜜中残留氨基糖苷类 抗生素的有效方法之一。
1蜂蜜邮生素残留的归因分析据相关人士表明，在养蜂的整个 生产过程中，蜜蜂会得很多的病症，其中腐臭病和败血病是常见的病症，当蜜蜂得这些病的时候，就会大大降 低蜂蜜的产量，从而影响出口量。
所以,养蜂人士为了不让其生病，会加入非 常多的抗生素。
现今，一些有花苞的 农作物被过多喷洒了农药，经过蜂蜜 代谢作用，在部分蜂产品当中有抗生 素的残留p l。
2蜂蜜中常见的残留抗生素类别2.1蜂蜜中常见残留的天然品与半合 成品抗生素种类在众多的天然品和半合成品抗生素中，天然品最主要的是四种，分别 是金霉素、土霉素、四环素等，半合 成品主要是有两种，分别是多西环素 和米诺环素等。
这些天然品与半合成 品抗生素的主要功效就是用来防治蜜 蜂等小幼虫的腐臭病的感染问题，所 以可以初步认定蜂产品中也有相关的 四环素类的药物的遗存。
2.2蜂蜜中常见残留的氯霉素由于氯霉素有着比较大的副作用，会引发一定的再生性的障碍型贫血，有时候会伴有粒状白细胞的缺乏病症,特别是新生儿与早产儿会伴有灰色综合症，这样的话对人类的健康造成了非常大的危险。
用HPLC-MS-MS法多残留分析蜂蜜中的杀虫剂和抗生素摘要：本实验的目的是建立一种检测蜂蜜中两类抗生素和三种杀虫剂残留的分析方法。
分析物为5种四环素、4种磺酰胺、杀虫剂蝇毒磷、多菌灵和阿米曲士（两种代谢物）混合物。
所有的化合物都从蜂蜜中提取，用固相萃取（SPE）预浓缩。
采用高效液相色谱-质谱-质谱（HPLC-MS-MS）方法，用三级四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)的模式,达到识别并量化以上化合物（Sheth et al J Agric Food Chem 38:1125–1130, 1990）。
在分析过程中发现取决于蜂蜜来源的植器官的强矩阵效应。
这就导致乐需要一个标准的方法定量检测到的污染物。
关键词：蜂蜜抗生素杀虫剂多残留HPLC-MS-MS 固相萃取1.引言蜂蜜是一种混合物，长期被视为自然健康食物，也就是说，不含任何污染物[1]。
然而养蜂人必须克服两大威胁—传染病和杀虫剂对蜜蜂的毒害。
因此必须要能够发现蜂巢产物（包括蜂蜜、蜡、蜂胶等等）中可能存在的不良的残留物[2]。
蜂蜜中含有的微量的物质有可能是被授权或者禁止的，比如环境中的杀虫剂。
本研究的目的是建立一种可以同时检测出蜂蜜中抗生素和杀虫剂多残留的方法。
检测两类抗生素,四环素和硫酰胺,因为这些抗生素常被养蜂人用于治疗污仔病（一种蜜蜂幼虫疾病）[2]。
我们还需要检测一些杀虫剂、阿米曲士和蝇毒磷[3],它们被用于治疗蜂螨,还有被广泛用作杀真菌剂的多菌灵[5],特别是用在作为最频繁的蜂蜜来源之一的油菜(油菜籽)上。
四环素是人类和动物经常使用的有效抗生素药物。
这类抗生素在各种各样的食物中存在,如牛奶[6、7],蛋[8],牛肉[9、10]。
同样的,磺酰胺是对人类相对来说无毒的抗感染药物,。
目前为止蜂蜜中还有数量最多的磺酰胺尚未被欧盟[11]授权。
最早在养蜂中使用杀虫剂、阿米曲士是在20世纪80年代初期法国用于治疗蜂螨。
现有的文献中几乎没有报道关于蜂蜜中阿米曲士的存在,但Jimenez报道过其分解产物的存在[12]。
棉花抗黄萎病的分子遗传结构揭示中国农科院建立检测蜂蜜和蜂王浆抗生素残留高通量方法本刊讯（编辑 王雯慧）棉花黄萎病是由大丽轮枝菌引起的头号生产病害，也是世界性难题，严重威胁棉花生产安全。
生产上一直缺乏抗黄萎病棉花品种，根本原因是对棉花抗黄萎病遗传模式及抗病机制等缺乏系统研究和科学认知，制约了棉花抗黄萎病种质材料的筛选、创制和新品种选育。
近日，中国农业科学院农产品加工研究所戴小枫研究员领衔的科研团队发表了首个基于简化基因组测序的棉花黄萎病抗性全基因组关联分析的研究结果，发现了14个抗病新位点，揭示了棉花多基因协同控制黄萎病抗性的分子遗传规律，为后续棉花抗黄萎病功能基因挖掘、分子标记开发和多位点分子标记辅助抗病育种奠定了基础。
相关研究成果于3月29日在线发表于植物学国际权威期刊《植物生物技术杂志（Plant BiotechnologyJournal）》上。
近日，中国农业科学院蜜蜂研究所蜜粉源植物产地识别与控制创新团队建立了一种能够同时分析蜂蜜和蜂王浆中涉及的42种抗生素的高通量技术方法。
相关研究成果近期发表在著名学术期刊《食品化学（Food Chemistry）》上。
我国现有的蜂蜜和蜂王浆国家标准中抗生素残留检测标准方法众多，每个产品中每种或每类药物存在多个不同的标准方法，而且分析方法过于复杂，同时需耗费大量的人力、物力、时间以及大量的有毒有害溶剂，造成蜂产品收储运环节检测成本居高不下，蜂农和蜂产品企业利益受损以及检测过程中的环境污染和实验人员吸入性损伤。
因此，建立快速、准确、稳定、污染小和高通量的污染物残留分析方法一直是国内外农产品质量安全领域追求的共同目标。
研究团队通过优化提取试剂及其pH范围，无机盐的盐析浓度等基质固相分散条件以及选择不同净化试剂及其配比以去除蜂蜜和蜂王浆中的糖类物质、有机酸、色素和非极性干扰物等，减少基质效应对结果的影响。
此外，还建立了快速和高灵敏度的串联质谱分析方法，基于动态多反应监测技术（dMRM）模式解决了由于分析抗生素数量过多而导致的驻留时间不足问题，使42种抗生素在20分钟内获得较好的分离度和尖锐对称的色谱峰，保证了定性和定量的准确性。
蜂产品抗生素残留检测的研究进展抗生素残留问题一直是蜂产品行业的一个难题，其对蜂产品的质量和安全性造成了一定的影响。
对蜂产品中抗生素残留的检测研究成为了当前研究的热点之一。
本文将对蜂产品抗生素残留检测的研究进展进行综述，以期为进一步推进蜂产品质量和安全性的研究提供参考。
一、蜂产品中抗生素残留的原因抗生素残留是由于蜂产品的采摘、加工和存储过程中受到外部环境的污染或者原料的抗生素残留等原因导致的。
在蜂蜜加工过程中，可能会受到植物、环境和设备的污染，导致抗生素残留。
蜜蜂在采集花蜜和花粉的过程中也可能接触含有抗生素残留的植物，从而导致蜜蜂体内的抗生素残留，进而将抗生素残留带入蜂产品中。
二、国内外蜂产品抗生素残留检测研究现状目前，国内外对蜂产品的抗生素残留检测研究主要集中在蜜蜂产品中抗生素的种类、残留水平、检测方法等方面展开。
在国外，已经有较多的研究针对蜜蜂产品中的抗生素残留进行了检测和分析。
国外学者通过高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和质谱法（MS）等方法，对蜂产品中的抗生素残留进行了定量分析，并提出了相应的检测方法和标准。
在国内，也有不少学者对蜂产品中抗生素残留进行了研究。
他们主要通过高效液相色谱法（HPLC）、酶联免疫吸附测定法（ELISA）等方法，对国内蜂产品中抗生素残留进行了分析和检测。
通过上述研究可以看出，国内外对蜂产品抗生素残留的检测研究取得了一定的进展，但仍然存在一些问题和挑战。
不同国家和地区对蜂产品标准的差异，也导致了蜂产品抗生素残留标准的不统一，需要进一步加强国际合作和标准统一。
三、蜂产品抗生素残留检测的主要技术及方法高效液相色谱法（HPLC）是目前应用较为广泛的一种检测方法，其通过色谱柱对样品中的抗生素进行分离和定量分析，具有高灵敏度和分辨率，但也存在一定的检测范围和检测精度问题。
气相色谱法（GC）主要用于挥发性和易挥发性物质的分析，对一些挥发性抗生素残留的检测具有一定的优势。
蜂产品抗生素残留检测的研究进展蜂产品是人们常见的养生食品之一，其中蜂蜜、蜂蜡和蜂王浆等产品健康功能被广泛认可。
随着现代农药和兽药的广泛使用，蜂产品中可能存在一定程度的抗生素残留，对人体健康造成一定风险。
对蜂产品中的抗生素残留进行检测和控制成为当前研究的重点。
抗生素残留在蜂产品中的来源主要包括两方面，一方面是蜜蜂在采食过程中可能会接触到被抗生素污染的植物、水源或者是其他动物的分泌物，从而导致蜂产品中的抗生素残留；另一方面是蜜蜂养殖过程中使用抗生素和兽药，例如在防治蜂病和蜂寄生虫方面常使用的磺胺类、氯霉素、四环素类等抗生素，这些抗生素可能会通过蜜蜂的新陈代谢进入蜂产品中。
针对蜂产品中抗生素残留的检测方法主要包括生物学方法、化学方法和光学方法等。
生物学方法主要是利用微生物的生长抑制或者生长促进来检测抗生素的残留，例如细菌抗生素残留检测、酵母生长抑制法等。
化学方法主要是利用高效液相色谱、气相色谱、毛细管电泳等技术对抗生素进行定量分析，例如高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）被广泛应用于蜂产品抗生素残留检测。
光学方法主要是利用光谱技术对蜂产品中的抗生素进行定性和定量分析，例如近红外光谱技术、荧光光谱技术等。
目前，国内外已经对蜂产品中抗生素残留的检测方法进行了一定的研究和应用。
实验结果表明，不同种类的蜂产品中抗生素残留的含量和种类可能存在差异，调查研究显示蜂蜜中的抗生素残留率相对较低，而蜂蜡和蜂王浆中的抗生素残留率相对较高。
氯霉素和土霉素是蜂产品中最常见的抗生素残留。
针对蜂产品中抗生素残留的监管标准和控制措施，国内外相关部门和研究机构也已经制定和实施了一系列的控制要求和技术规范。
在欧盟国家，已经对蜂蜜、蜂蜡和蜂王浆等蜂产品中的抗生素残留进行了严格的监管和限制，制定了相应的限量标准。
通过加强养殖管理、控制抗生素的使用、加强兽药残留监测等措施，可有效减少蜂产品中抗生素残留的风险。
蜂产品抗生素残留检测的研究进展已经取得一定成果，不断提高了检测的准确性和灵敏度。
蜂产品中抗生素残留的分析方法
摘要：社会发展使食品质量问题逐步突出，在所有不安全因素中，兽药残留是首要的危险因素，本文以蜂产品中残留抗生素为例，研究其分析方法，主要包括柱切换直接进样-高效液相色谱法和固相萃取-高效液相色谱法。
以下对这两种方法的相关实验项目进行研究。
关键词：蜂产品抗生素残留色谱分析
社会的进步，给人们提供了巨大的便利，也使人们对食品质量和安全的要求越来越高，食品安全问题已经不容忽视。
在所有导致动物源性食品不安全性因素中，最主要的就是兽药残留。
兽药残留中又以抗生素残留为主，人类长期接触这类动物产品，会存在诸多不可预知的危险性，加强对其研究已经成为迫切需求。
其中蜂产品中残留抗生素就是典型例子，本文将以食品安全性就基础对其分析方法进行研究分析。
1.、食品安全质量与抗生素残留
古有言：民以食为天。
食品的质量安全是人们赖以生存的基础课题，随着近年来人类科学技术的发展，社会经济正在不断进步，人们对食品安全的呼声越来越高，但是社会工业化所带来的生态环境恶化、化学物质在日常生活中的逐步充斥以及农药化肥和食物添加剂的使用使食品安全面临着巨大威胁。
食品安全对食品质量提出了较高要求，也要求食品要具备良好的营养，其强调重点主要体现在杜绝食品内含有有害于人类健康的物质和因素的研究。
在畜牧业
中，动物的养殖都是密集圈养的，人们会使用抗生素以达到防治病虫害、保护动物健康、控制疫情等目的。
但是在目前的兽药使用过程中存在许多不合理现象，导致可食用的动物产品中残留了部分药物。
抗生素过度使用，会在动物体内形成大量的耐药致病菌，人类食用这些动物产品后极易感染，而且还会有耐药性细菌产生，使人类遭受各种毒副作用。
以上可知，检测药物残留是一项必不可少的分析工作。
2.、柱切换直接进样-高效液相色谱法测定蜂产品中抗生素残留在蜂群中常发一种疾病叫蜂群幼虫腐臭病，为了防治这一疾病，人们常用土霉素、金霉素或四环素，这些药物价格低廉而且效果比较好，但是如果使用过程中用量过度就会导致蜂产品中出现抗生素残留，对人类健康产生危害。
在四环素族抗生素残留检测方面，发展最快的要数液相色谱法，固相萃取技术更是完善了这一检测方法。
近些年，越来越多的进样分析应用都会借助于柱切换阀的多维液相色谱，主要应用于医疗，如尿液、血浆和血清中的药物分析。
这些方法虽然取得了良好发展，但是其需要的仪器相对复杂，一般的实验室根本不能实现其配置。
下面将采用柱切换技术，通过在hplc系统中加设一个柱切换阀，来实现净化样品和分析过程的分离。
2.1 实验部分
2.1.1 仪器、试剂和样品
实验仪器：美国agilent公司生产的hp1100高效液相色谱仪系
统。
标样：tc、otc、ctc，其纯度分别为97.1%、96.2%和84.4%，自行制备100mg/l的标准储备溶液，在-18℃温度下保存；乙腈和甲醇的选择要使用hplc专用；磷酸氢二钠、二水草酸和柠檬酸；自制的二次蒸馏水。
样品：蜂蜜样品。
2.1.2 试验方法
在50ml的具塞离心管内放置2.00g蜂蜜样品，将2ml磷酸氢二钠/柠檬酸缓冲溶解加入其中进行溶解，放置在快速混匀器上振动30s，通过超声波处理十分钟，以3000rpm离心十分钟，抽滤后的滤液直接进行色谱分析。
2.2 结果与讨论
2.2.1 结果
流动相洗脱了大部分杂质，而四环素抗生素则被白柳在了预柱中。
因为流路不会再分析柱经过，所以避免了来自于高浓度糖分对自身的破坏，还使柱头压力得以减小，保护了四元泵和分析柱。
柱对接后，流动相b会将四环素抗生素转移进分析柱进行分离分析。
蜂蜜样品中添加四环素族抗生素的回收率见下表1。
2.2.2 结论
在线净化可以使样品处理的步骤得以最大程度的简化，使有机试剂的用量减少；而且色谱分析具有高灵敏度、稳定的回收率以及良好的结果重现性。
3、.固相萃取-高效液相色谱法测定蜂产品中抗生素残留
下面将研究蜂产品中抗生素残留测定的另一种方法，采用c18spe
小柱净化样品，高效液相色谱-紫外检测法分析蜂王浆中抗生素残留。
3.1 实验部分
3.1.1 实验仪器、试剂和样品
仪器：美国生产的hp1100高效液相色谱仪。
c18固相萃取小柱。
试剂：一级色谱纯的甲醇和乙腈，均为分析纯的柠檬酸、无水磷酸氢二钠、氢氧化钠二水草酸、盐酸和乙二胺四乙酸二钠。
购买于sigma公司的tc、otc、ctc标准品，其纯度分别为97.1%、96.2%和84.4%。
mcllvaine缓冲溶液。
na2edta-mcllvaina缓冲溶液。
甲醇草酸溶液。
自制二次蒸馏水。
样品：蜂王浆。
3.1.2 试验方法
首先对样品进行前处理，主要包括提取缓冲溶液、净化固相萃取两方面。
3.2 结果
当流动相b的配比为7：2：1时，等度洗脱即可完全分离三种四环素族抗生素。
蜂王浆中添加四环素族抗生素的回收率见下表2。
4.、小结
本文主要通过研究柱切换直接进样-高效液相色谱法和固相萃取-高效液相色谱法测定蜂产品中的抗生素残留，这两种分析方法在抗生素残留分析方面取得了较大进展。
参考文献：
[1] 蒋生祥，陈立仁，赵明方.多维高效液相色谱法分析石油中
微量石油磺酸盐.分析化学，1992，20（6）：677-679
[2] 庞国芳，张进杰，李学敏等.高效液相色谱法测定蜂蜜中四环素族抗生素.中国养蜂，2003，54supplement：25-28
[3] 汤瑶，何华，吴斌，陈慧兰，蒋原.固相萃取-hplc法测定蜂蜜中残留的10种磺胺类药物.分析测试学报，2005，24（1）：96-99。
