免疫放射分析法与放射免疫分析法测定血清TSH的临床诊断评价

免疫放射分析法(IRMA)检测超敏TSH对甲亢和甲减的诊断价值摘要】目的研究免疫放射分析法（IRMA）检测超敏TSH对甲状腺机能亢进和甲状腺机能减退的诊断价值。

方法对确诊的甲亢患者60例，甲减患者32例，进行血超敏促甲状腺素（sTSH）检测，并以正常人60例进行对照。

结果甲亢患者平均值为0.446±0.891μlu/ml，甲减患者平均值为56.81±41.381μlu/ml，对照组平均值为1.572±0.898μlu/ml。

两组与对照组对比，差异均非常显著，P<0.01。

结论 IRMA法检测sTSH对诊断甲亢和甲减灵敏度较高，明显优于RIA法。

【关键词】免疫放射分析法超敏TSH 甲状腺机能亢进甲状腺机能减退近年来，采用免疫放射分析法（immunoradiometric analysis IRMA）进行血超敏促甲状腺素（sTSH）检测，与过去常用的放射免疫法（radiommunoassay RIA）比较，灵敏度明显增高，提高了TSH在甲状腺疾病诊断中的应用价值。

现将我们用IRMA法检测sTSH的情况和对该法的评价，报道如下。

1 观察对象和检测方法1.1观察对象甲亢组60例，男26例，女34例，年龄20-68岁，全部患者均有甲亢症状及T3、T4增高。

甲减组32例，男12例，女20例，年龄18-65岁，全部病例均有甲低症状，T3、T4降低。

对照组健康体检者60例，男31例，女29例，年龄20-60岁，均无甲亢和甲低的症状和病史。

1.2检测方法 sTSH(IRMA)试剂盒由美国Diagnostic Product Corporation(DPC)提供。

采用中科院上海原子核研究所制造SN697型全自动双探头放射免疫γ计数器进行检测。

最小检测值为0.02μlu/ml。

本实验正常值为1.572±0.898μlu/ml。

操作程序严格按试剂盒说明书规定操作。

2 结果对照组sTSH显著高于甲亢组P<0.01，显著低于甲减组P<0.01。

甲状腺功能诊断的新策略：TSH免疫放射法
储绍琳;叶培红
【期刊名称】《核技术》
【年(卷),期】1992(015)005
【总页数】5页(P291-295)
【作者】储绍琳;叶培红
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R581
【相关文献】
1.检测血清TSH的化学发光免疫法与免疫放射法两种方法的临床价值比较 [J], 康凤芝
2.免疫放射分析法与放射免疫分析法测定血清TSH的临床诊断评价 [J], 赵国兵;张凤丹
3.血清TSH化学发光免疫分析及免疫放射分析对甲亢和甲减的诊断试验评价[J],
4.免疫放射分析法测定血清TSH对甲功异常的诊断及其评价 [J], 明庆华;徐汝晶
5.滤纸干血片TSH免疫放射分析用于新生儿甲状腺功能低下筛查的初探 [J], 顾玉海;王振华;张建婷;孟丽华;石龙;周琳;金成恩;李全乐;曹惠萍
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分析电化学发光免疫法和放射免疫法检测血清FT3、FT4、TSH的方法【电化学发光免疫法【摘要目的探索电化学发光免疫法检测替换放射免疫法检测的可靠性及在方法学上前者是否更具上风。

方法利用2种方法法分别检测血清FT3、FT4、TSH，并进行精密度、正确度、患者结果可报告范围、分析灵敏度、分析特异性、回收率等几方面的比较。

结果 2种方法法检测结果差异有明显性（P ＜0.05），并且电化学发光免疫法在患者结果可报告范围、精密度、分析灵敏度、抗干扰能力、正确度试验方面均优于放射免疫法。

结论电化学发光免疫法完全能够替换放射免疫法，并且还具有报告范围宽，精密度、分析灵敏度高，抗干扰能力强的优点。

【电化学发光免疫法；检测低限；抗干扰试验由于放射免疫法（RIA）检测血清FT3、FT4、TSH本钱较低，目前还有部分实验室仍在采用，但因该法报告时间长，结果不稳定，且存在同位素污染新题目，在国外已趋于淘汰。

近年来国内推出的电化学发光免疫法（ECLIA）检测具有快速、正确、重复性好并平安无毒等优点，受到临床和实验室的关注。

本文分别采用2种方法对血清FT3、FT4、TSH检测做了患者结果可报告范围、精密度、分析灵敏度、抗干扰试验、正确度试验，结果报告如下。

1 材料和方法1.1 仪器和试剂美国罗氏公司生产的2010型电化学发光免疫分析仪，美国生产的Cap-Ria-16型全自动γ计数仪。

电化学发光免疫分析试剂购于罗氏公司，放射免疫分析试剂购于天津九鼎公司。

1.2 方法和结果1.2.1 精密度分别取FT3、FT4、TSH 3种不同浓度的混合血清，见表1。

其中一半重复测定20次，另外一半分成10份，装进塑料离心管置于-20℃冰箱，天天1次共测定10次，测定结果，见表2。

表1 FT3、FT4、TSH 3项不同浓度的混合血清（略）表2 电化学发光免疫法和放射免疫法检测的精密度情况（略）1.2.2 分析灵敏度用2种方法分别对空缺零标准做批内20次检测，分别记录放射强度和发光强度并做统计，再计算检测低限（LLD）［1］。

促甲状腺激素的检测及其临床意义促甲状腺激素（TSH）是调控甲状腺细胞生长和甲状腺激素合成及分泌的主要因子，由垂体促甲状腺素细胞合成和分泌，并受甲状腺激素的负反馈性调节。

甲状腺功能改变时，TSH的波动较甲状腺激素更迅速而显著，是反映下丘脑-垂体-甲状腺轴功能的敏感指标。

因此，通过检测血TSH水平可以反映甲状腺功能状态，有助于甲状腺疾病的筛查、诊断、治疗效果评判和预后判断。

然而，由于早期建立的放射免疫法检测TSH含量只能确定正常范围的上限，临床上仅仅可以作为甲状腺功能减退症的诊断依据。

20世纪80年代后期，随着实验技术的迅猛发展，免疫放射分析法、化学发光免疫分析法及时间分辨免疫荧光技术的建立和运用，使得TSH检测的灵敏度显著提高，单一检测TSH水平已成为临床上开展甲状腺疾病筛查、诊断和治疗随访的有效工具。

一、 TSH的特性与检测方法TSH是糖蛋白类激素，由腺垂体合成分泌，分子量约为28000道尔顿，由α和β亚基非共价键结合组成。

其α亚基与腺垂体分泌的卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）以及胎盘分泌的绒毛膜促性腺激素（hCG）的α亚基相同，而β亚基彼此不同，从而具有不同的结合特性和生物学活性。

TSH受促甲状腺激素释放激素（TRH）刺激，在24小时均呈脉冲式分泌，正常分泌的脉冲幅度均值为0.6μU/ml，频度为1/1.8小时。

正常人TSH的分泌有节律性，高峰出现在午夜10时至凌晨4时之间，失眠可增加其峰值，而睡眠则降低其脉冲。

不仅如此，TSH的分泌尚有季节性变化，春天TSH浓度降低30%。

TSH在血中不与蛋白相结合，正常浓度是1~2ng/ml，其生物半衰期为90~130分钟，据此推算垂体分泌率是110μg/日。

鉴于血清TSH含量为对数正态分布，平均约1.3~1.4mU/L，其正常低限为0.3~0.5mU/L，高限为3.9~5.5mU/L。

若除外甲状腺过氧化酶抗体（TPOAb）阳性患者，TSH正常上限则有所降低。

放射免疫分析测定方法-临床免疫放射免疫分析测定方法：用放射免疫分析进行测定时分三个步骤，即抗原抗体的竞争抑制反应、B和F的分离及放射性的测量。

（一）抗原抗体反应将抗原（标准品和受检标本）、标记抗原和抗血清按顺序定量加入小试管中，在一定的温度下进行反应一定时间，使竞争抑制反应达到平衡。

不同质量的抗体和不同含量的抗原对温育的温度和时间有不同的要求。

如受检标本抗原含量较高，抗血清的亲和常数较大，可选择较高的温度（15～37℃）进行较短时间的温育，反之应在低温（4℃）作较长时间的温育，形成的抗原抗体复合物较为牢固。

（二）B、F分离技术在RIA反应中，标记抗原和特异性抗体的含量极微，形成的标记抗原抗体复合物（B）不能自行沉淀，因此需用一种合适的沉淀剂使它彻底沉淀，以完成与游离标记抗原（F）的分离。

另外对小分子量的抗原也可采取吸附法使B与F分离。

1.第二抗体沉淀法这是RIA中最常用的一种沉淀方法。

将产生特异性抗体（第一抗体）的动物（例如兔）的IgG免疫另一种动物（例如羊），制得羊抗兔IgG血清（第二抗体）。

由于在本反应系统中采用第一、第二两种抗体，故称为双抗体法。

在抗原与特异性抗体反应后加入第二抗体，形成由抗原-第一抗体-第二抗体组成的双抗体复合物。

但因第一抗体浓度甚低，其复合物亦极少，无法进行离心分离，为此在分离时加入一定量的与一抗同种动物的血清或IgG，使之与第二抗体形成可见的沉淀物，与上述抗原的双抗体复合物形成共沉淀。

经离心即可使含有结合态抗原（B）的沉淀物沉淀，与上清液中的游离标记抗原（F）分离。

将第二抗体结合在颗粒状的固相载体之上即成为固相第二抗体。

利用固相第二抗体分离B、F，操作简便、快速。

2.聚乙二醇（PEG）沉淀法最近各种RIA反应系统逐渐采用了PEG溶液代替第二抗体作沉淀剂。

PEG沉淀剂的主要优点是制备方便，沉淀完全。

缺点是非常特异性结合率比用第二抗体为高，且温度高于30℃时沉淀物容易复溶。

放射免疫分析技术测定甲状腺激素分析前质量控制探析目的探讨放射免疫分析技术测定甲状腺激素分析前的质量控制。

方法随机选取我院2010年9月～2013年7月门诊患者20例，分别使用不同采血管对患者进行静脉采血，并对标本进行溶血处理，对各组甲状腺激素分析结果进行对比。

结果不同采血管、不同溶血程度所得到的测定结果各自对比差异无显著性（P>0.05）。

结论采用放射免疫分析仪进行甲状腺功能分析时，应注意保证标本的高质量，从而保证检测结果的可靠性。

标签：放射免疫分析技术；甲状腺激素；质量控制当前，临床常对患者甲状腺激素水平进行测定以判断患者甲状腺功能是否正常，其中游离甲状腺素（FT4）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、促甲状腺素（TSH）是三种常用的甲状腺激素测定指标。

放射免疫分析技术是一种体外超微量分析法，目前被广泛应用于临床甲状腺激素的水平中，为取得满意的分析结果，需进行质量控制以保证其结果具有可靠性[1，2]。

本次研究通过对放射免疫分析技术测定甲状腺激素分析前质量控制中标本采集、溶血对测定的影响等因素进行分析探讨，旨在为临床研究提供可靠的证据。

现将结果汇报如下。

1资料与方法1.1仪器和试剂放射免疫分析仪采用中国科大创新股份有限公司中佳分公司提供的GC-1200γ放射免疫分析仪；甲状腺激素试剂盒选取山东潍坊三潍生物工程集团有限公司产品，批号为070601、070701、070801、070901，质控品由中国药品生物制品检定所提供，T3、T4批号为1603-0404，TSH批号为1603-0409，FT3、FT4批号为1602-0510.1.2材料选取普通负压采血管，批号为070103；分离胶，批号为070416；负压肝素钠采血管，批号为070406，采血管均由湖南浏阳市医用仪器厂提供。

1.3方法1.3.1标本采集随机选取20例门诊患者，分别采用负压肝素钠抗凝采血管、普通负压采血管、促凝剂负压采血管和分离胶负压采血管进行静脉采血，并于抗凝管中进行充分混匀，对各项指标水平进行测定。

甲状腺功能的实验室检测的原理及方法甲状腺功能实验室检查主要包括甲状腺激素、促甲状腺激素、甲状腺激素结合球蛋白和相关自身抗体检测。

目前认为，联合进行游离三碘甲状腺原氨酸，游离甲状腺素和超敏促甲状腺激素测定，是甲状腺功能评估的首选方案和第一线指标。

甲状腺激素的测定多采用免疫分析法，但传统的放射免疫法灵敏度有限，不能区别正常人低值和原发性甲亢。

化学发光免疫法和时间分辨荧光免疫法都更为灵敏、准确，其检测限可达0.001mIU/L。

但无论检测方法灵敏度多高，结果多准确，都必须结合临床和其他甲状腺功能检查才能做出正确诊断和治疗决策。

一、甲状腺素甲状腺素（thyroxine，T4）检测具有多种方法，传统检测方法采用放射性碘标记的放射免疫法。

但其操作过程繁琐，在临床应用中受到一定限制。

时间分辨荧光免疫法和电化学发光法均是目前最先进的标记免疫测定技术，其检测快捷，敏感度高，近年来在临床T4 检测中被广泛应用。

时间分辨荧光免疫法测定血清总甲状腺素如下：1.原理加入待测血清、铕标记T4和鼠抗T4的单克隆抗体（单抗）温育，试剂中的8-苯胺-1-萘磺酸（ANS）能将结合状态的T4游离出来。

抗T4单抗和包被在微孔板上的二抗结合的同时，样本中的T4和铕标记T4竞争结合抗T4单抗上的结合位点，温育后洗板，加入解离增强液将标记在复合物中的铕离子解离至溶液中，与增强液中的有关成分形成荧光螯合物微囊，发出的荧光强度与样品中的总甲状腺素（total thyroxin，TT4）浓度成反比。

2.试剂与仪器购买成套的商品试剂盒，主要成分如下：已包被第二抗体的96微孔反应板，T4标准品（6瓶，分别含0、20、50、100、150和300nmol/L 的T4标准品），抗T4单克隆抗体（含ANS），铕标记T4（含ANS），浓缩洗液（25×），缓冲溶液，增强液。

3.操作（1）试剂准备：1）洗涤液：40ml浓缩洗液加960ml蒸馏水混合（pH 7.8）。

化学发光免疫与免疫放射法检测血清TSH对比分析目的比较化学发光免疫法（CLIA）和免疫放射法（IRMA）检测血清TSH 的精确度、重复性、相关性，评价两种方法对诊断甲状腺疾病的临床价值。

方法将我单位213例受试人员分为正常组、甲亢组、甲减组，用化学发光免疫法和免疫放射法对其血清TSH标本进行检测，进行精确度、重复性、相关性实验，并对三组的TSH结果进行检测比较。

结果两组的相关性良好，CLIA的重复性和精密度优于IRMA，两组的诊断符合率较高。

结论CLIA和IRMA检测TSH均有临床价值，综合来看，CLIA优势更为明显，值得临床推广。

标签：化学发光免疫法；免疫放射法；促甲状腺激素促甲状腺激素（thyrotropin，thyroid stimulating hormone，TSH）是腺垂体分泌的促进甲状腺的生长和机能的激素。

TSH多以游离的形式存在于血液中，其含量很低，是性质稳定的糖蛋白激素。

TSH受下丘脑一脑垂体一甲状腺轴线控制，当人体的甲状腺功能发生变化时，血清TSH的水平出现波动。

甲状腺机能低下即甲减者的表现，多为血清中的TSH水平增高，甲状腺功能亢进即甲亢者，多为血清中TSH的降低。

临床上，因此，TSH是判断甲状腺功能和下丘脑垂体甲状腺轴功能是否正常的一线指标[1-2]。

作者采用化学发光免疫法（CLIA）与免疫放射法（IRMA）两种方法同时测定正常人及患者血清TSH，对其结果比较分析，从不同角度探讨两种检查方法在甲状腺功能疾病中的临床诊断价值，现将结果报告如下。

1资料与方法1.1一般资料所有人员均为来我单位健康查体或就诊的人员，见表1。

1.2仪器与试剂CLIA采用美国雅培公司Axsym免疫化学发光仪，IRMA采用西安262厂F5-20089γ-放射免疫计数器。

免疫化学发光测定试剂盒，由美国雅培公司提供，IRMA采用中国原子能科学研究院提供的试剂盒。

1.3方法1.3.1样品采集于每天上午采集研究对象空腹血清3 ml，然后分离血清，立即进行检测或-20℃冷冻保存，1 w内检测。

电化学发光免疫法和放射免疫法检测血清甲状腺激素的对比分析盛晓光;常红叶;齐力;谭岩;方艳秋;王起来【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2016(020)008【总页数】2页(P1349-1350)【作者】盛晓光;常红叶;齐力;谭岩;方艳秋;王起来【作者单位】吉林省人民医院医学诊治实验中心，吉林长春 130021;吉林省临床检验中心，吉林长春 130021;吉林省临床检验中心，吉林长春 130021;吉林省人民医院医学诊治实验中心，吉林长春130021;吉林省人民医院医学诊治实验中心，吉林长春 130021;吉林省人民医院医学诊治实验中心，吉林长春 130021【正文语种】中文甲状腺功能紊乱是内分泌科常见疾病，甲状腺激素水平检测是临床常用的检测项目，RIA作为传统的检测手段[1]，将抗体用放射性碘元素标记来检测血清中甲状腺素。

但因其需手工加样、操作过程繁琐，且检测过程中可能出现放射性污染、放射性元素的衰减影响检测结果，精准度相对降低[2]，在临床检验中的应用受到一定限制。

新一代标记免疫检测技术ECLIA，由电化学发光(ECL)和免疫测定法结合而成[3]，具有检测迅速，灵敏度高等特点，近年来被广为使用。

促甲状腺激素(TSH)由垂体前叶分泌，是一种糖蛋白类激素，促进甲状腺代谢，诊断甲状腺疾病最灵敏的标志物就是检测血清 TSH 水平，同时也是甲状腺功能检测的首选指标[4]。

TSH 分泌受血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)负反馈调节[5]。

本文分别用放射免疫法及电化学发光免疫法对TSH、FT3、FT4进行检测，比较其结果。

1.1 标本来源选取我院2012年10月至2013年11月门诊及住院患者共130例，其中正常对照组及甲状腺功能亢进组(甲亢组)各50例，甲状腺功能减退组(甲减组)各30例。

1.2 仪器与试剂电化学发光法采用瑞士罗氏Cobas e411全自动分析仪及原厂家配备的检测试剂；放射免疫法采用上海日环仪器厂的SH-682 放射免疫计数器,试剂盒来源于北京北方生物技术研究所。

免疫放射法测定甲状腺和非甲状腺疾病患者血清TSH水平吴艺捷;时钟孚
【期刊名称】《贵阳医学院学报》
【年(卷),期】1995(020)002
【摘要】用免疫放射法（ＩＲＭＡ）测定了３７８例各种甲状腺疾病及非甲状腺疾病（ＮＴＩ）患者血清ＴＳＨ以及Ｔ３、Ｔ４和ＦＴ４水平。

结果：未治疗或症状未控制的甲亢患者血清ＴＳＨ明显低于对照组，甲亢治愈者则恢复正常。

甲减者ＴＳＨ变化与其临床表现相一致。

在碘缺乏病区ＴＳＨ－ＩＲＭＡ能较Ｔ３、Ｔ４更好的反映居民的碘营养状况，在ＮＴＩ时虽有Ｔ３、Ｔ４的改变，但ＴＳＨ－ＩＲＭＡ和ＦＴ４结果大多为正常。

本文表明ＴＳＨ－ＩＲ
【总页数】4页(P100-103)
【作者】吴艺捷;时钟孚
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R581.02
【相关文献】
1.181例老年非甲状腺疾病患者血清FT3FT4和TSH测定结果分析 [J], 方自国
2.老年非甲状腺疾病慢性病患者血清s-TSH水平变化的探讨 [J], 田辉;王平
3.130例中年非甲状腺疾病患者血清FT3、FT4和TSH测定结果分析 [J], 王琴;赵小爱
4.Cobas601对中年非甲状腺疾病患者血清FT3、FT4、TSH测定结果分析 [J],
王琴;赵小爱
5.2型糖尿病并不同水平血清TSH亚临床甲状腺功能减退患者的临床特点及高血清TSH水平对患者的影响 [J], 刘彩娟;黄锡藩;杨俊锋
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全自动化发光免疫分析与放射免疫法测定血清促甲状腺激素的对比目的：对全自动化发光免疫分析法、放射性免疫法在血清促甲状腺激素中的检测情况进行调查。

方法：选择我院2012年9月-2014年9月间51例来院就诊的患者，抽取患者静脉血，分别采用全自动化发光免疫分析和放射性免疫法对患者血清促甲状腺激素进行检测，对两种检测方式的效果进行调查。

结果：低值水平的放射性免疫法批内变异系数、批间变异系数超过标准值，且与全自动化发光免疫分析比较存在明显差异，P＜0.05；中值水平中全自动化发光免疫分析的批间变异系数与放射性免疫法比较存在明显差异，P＜0.05；高值水平中全自动化发光免疫分析与放射性免疫法的批内、批间变异系数比较均无明显差异，P>0.05。

低值水平、中值水平以及高值水平下的全自动化发光免疫分析和放射性免疫法回收率比较均无明显差异，P>0.05，且所有检测结果均符合检测标准。

两种检测方式检测的血清促甲状腺激素水平呈正相关性，其线性回归方程为Y=0.241+0.901X。

结论：两者均具有较高的准确性，但全自动化发光免疫分析具有更高的精准度。

标签：全自动化发光免疫分析；放射免疫法；血清促甲状腺激素随着医疗科技不断的发展完善，医疗检验也逐渐趋于自动化、标准化。

全自动化发光免疫法和放射性免疫法是临床中应用率较高的两种检验方式，在临床中有着非常重要的作用。

我院在2012年9月-2014年9月间对全自动化发光免疫分析、放射性免疫法在血清促甲状腺激素中的检测情况进行调查，旨在进一步了解全自动化发光免疫分析、放射性免疫法的作用。

1.资料与方法1.1一般资料选择我院2012年9月-2014年9月间51例来院就诊的患者，患者平均年龄为（45.6±21.2）岁，男性26例，女性25例，所有患者均同意参与调查。

1.2一般方法1.2.1仪器和试剂：全自动化发光免疫分析仪器均为德国Siemens 公司提供；放射性免疫法试剂由天津协和生物技术有限公司提供。