药品鞣质含量测定法

紫外分光光度法测定藏药二十五味余甘子丸中总鞣质的含量目的：建立二十五味余甘子丸中总鞣质的含量测定方法。

方法：以没食子酸为对照品，磷钼钨酸为显色剂，检测波长760nm。

结果：没食子酸的线性范围为1.024～10.24μg（r=0.9996），平均回收率99.2%，RSD=0.6% 。

结论：该方法简单、准确、重复性好，可用于二十五味余甘子丸中总鞣质的含量测定。

标签：二十五味余甘子丸；紫外分光光度法；总鞣质；含量测定Abstract：ObjectiveTo set up a method for determination total tannin in ershiwuwei yuganzi pill. Methods Gallic acid to be reference，and colored with Phos phorus molybdenum tungsten acid，the wavelength of detect was set at 760 nm. Results The linearity was obtained within the range of 1.024～10.240 μg （r=0.9996）；The average recovery（n=6）was 99.2%，and RSD was 0.6%. Conclusion The method is simple，accurate and repeatable. It could be adopted to determinate the total tannin in ershiwuwei yuganzi pill.Keywords：ershiwuwei yuganzi pill；UV；total tannin；content determination藏药二十五味余甘子丸为藏医传统验方，处方由余甘子、巴夏嘎、甘青兰等二十六味药材制成的复方制剂，临床用于多血症、高血压、肝胆疼痛、声哑目赤、口渴、口唇发紫、月经不调[1]。

中药中总鞣质含量测定方法比较鞣质又称单宁，是一类比较复杂的具有沉淀蛋白质性质的水溶性多元酚类化合物，广泛存在于植物中。

以前对鞣质的研究较少，多认为是无用的杂质被除去。

近些年来，随着分析、分离手段的进步，逐渐发现鞣质具有许多药理活性，可以抗脂质过氧化、清除活性氧，具有抗艾滋病病毒（HIV）和抗肿瘤的作用，使其在临床中日益受到重视，也同时对鞣质的含量测定方法提出了更高的要求。

1.皮粉法鞣质是多元酚类，分子中有许多的酚羟基可以与蛋白质的酰胺形成氢键结合成不溶于水的沉淀，利用这个性质可以使鞣质沉淀下来，用重量法测定鞣质的含量。

皮粉法是现在国际上较公认的测定方法。

皮粉法的缺点主要是样品耗用量大，测定时间长，而且没有选择性，其测定结果往往偏高，故一般只适用于测定鞣质含量高的生药，样品较少或含量低的则不适于测定。

而且皮粉试剂的供应和质量都较难保证。

皮粉法用重量法测定样品须经过滤、干燥、称量，所以需要的样品量较大，而且实验时间较长，一般样品分析需20小时左右，而且皮粉的选择性较差，测定结果偏高。

所以皮粉法的使用受到一定的限制。

除了皮粉可以作沉淀剂以外，还可以用其他代替，如有报道称用三价离子取代皮粉与鞣质结合进行重量分析，测定双子叶植物中鞣质的含量。

2.干酪素法干酪素主要成分是乳液中的酪蛋白，为含磷蛋白质。

分子量约75，000～375，000。

干酪素可以有选择性地结合有生物活性的鞣质，与无生理活性的鞣质如鞣干则不产生沉淀，所以干酪素法的选择性较皮粉法好，一般适用于鞣质含量较低的鞣质。

鞣质在一定的pH值条件下与Folin试剂反应，利用分光光度法测定其吸收值，再用干酪素沉淀鞣质，再用Folin试剂测定供试品中共存杂质的吸收度，二者之差与鞣质的浓度之间呈线性关系。

有研究发现，对老鹳草的鞣质分别采用皮粉法和干酪素法测量，皮粉法测量结果是6.84%，干酪素法测量的结果是3.32%，表明干酪素法测定的结果更有针对性，一般低于皮粉法测定结果，而且重复性好。

中药材中鞣质含量测定方法的研究与优化摘要: 参照药典,采用磷钼钨酸 - 干酪素比色法 ,以没食子酸为对照测定五倍子、地榆药材中鞣质的含量。

探讨药典中规定的条件合理性，并增加了超声条件优化了实验，平均加样回收率为 97.39 %。

本法可快速、准确地用于中药材中鞣质的含量测定,并可作为鞣质提取工艺的优化方案。

关键词: 鞣质测定;波长；室温浸提；干酪素；没食子酸；超声鞣质又称单宁(Tannins) ,是一类复杂的具有沉淀蛋白质性质的水溶性多元酚类化合物 ,广泛存在于植物药材,如五倍子、贯众、儿茶等。

近年来,对鞣质生理活性的研究方兴未艾。

研究表明,鞣质能清除生物体内过剩的自由基,维护细胞膜的流动和蛋白质的构象 ,防止辐射诱发的 DNA断裂 ,从而在抑制脂质过氧化、心血管病、抗癌、抗突变、抗衰老、抗白内障等方面有独特功效。

鞣质的经典含量测定方法有很多种 ,如重量法、容量法、比色法等。

最常用的有皮粉法、高锰酸钾法、干酪素法、络合量法。

皮粉法是国际公认的鞣质含量测定方法。

皮粉的主要成分是蛋白质 ,鞣质可通过分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺基形成氢键而结合成不溶于水的沉淀,以重量法测定含量。

《中国药典》一部[1]鞣质含量测定法一直沿用皮粉法 ,适用范围广。

缺点是耗用样品多,测定时间长 ,且没有选择性,测定结果偏高 ,而且皮粉用量很大。

近年来,皮粉试剂的供应和质量都很难保证,使皮粉法的应用受到很大限制。

《英国药典》2002 版[2]鞣质测定法附录采用的是磷钼钨酸 - 皮粉比色法,即利用鞣质在碱性溶液中将磷钼钨酸还原产生深蓝色,其吸收度与含量成正比,采用比色法测定。

其中,以焦性没食子酸为对照,测定总酚和不被皮粉吸附的酚,二者之差计为鞣质的含量。

罗文毓等报道了改进的干酪素法[3] ,其关键步骤是以干酪素代替皮粉,采用磷钼钨酸比色法测定; 药材样品提取采用浸泡过夜代替加热回流提取等。

本文参照《英国药典》和干酪素法,重点对提取方法、显色剂、干酪素用量等进行了比较,提出了鞣质含量测定方法,为药典相关附录方法的修订提供了实验基础。

中药鞣质成分的性质及应用发表时间：2009-12-15T15:31:39.263Z 来源：《中外健康文摘》第26期供稿作者：尹克鑫[导读] 鞣质又称单宁，是存在于植物体内的一类结构比较复杂的多元酚类化合物，可分为水解鞣质和缩合鞣质两大类。

尹克鑫（合肥市第一人民医院安徽合肥 230061）【中图分类号】R943.1 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085(2009)26-0266-02【摘要】鞣质又称单宁，是存在于植物体内的一类结构比较复杂的多元酚类化合物，可分为水解鞣质和缩合鞣质两大类。

目前对中药中的鞣质研究较少，但是鞣质的作用却不容忽视。

【关键词】中药鞣质没食子五倍子药理测定去除鞣质是某些中药中的重要成分，具有许多重要的药理学作用，常见的含鞣质的中药有地榆、五倍子、虎杖、诃子、萹蓄、大黄等。

1 鞣质的分类 1.1水解鞣质是一类由酚酸及其衍生物与葡萄糖或多元醇通过甙键或酯键而形成的化合物，可被酸、碱、酶催化水解，根据水解后所得酚酸类的不同，可分为没食子酸鞣质和逆没食子酸鞣质两类。

常见的药材有五味子、没食子、柯子等。

1.2缩合鞣质是一类由儿茶素或其衍生物棓儿茶素等黄烷-3-醇化合物以碳-碳键聚合而形成的化合物。

一般三聚体以上才具有鞣质的性质，不能被酸、碱水解。

水溶液在空气中久置能进一步缩合，形成不溶于水的红棕色沉淀，称为鞣红。

与酸、碱共热时，鞣红的形成更快。

常见的药材有儿茶、茶叶、虎杖等。

2 常见中药中鞣质的药理作用与应用 2.1鞣质的一般药理作用鞣质具有收敛性，内服治疗胃出血、水泻等症，外用于创伤、灼伤，可使创伤后渗出物中蛋白质凝固，形成痂膜，可减少分泌和防止感染，鞣质能使创面的微血管收缩，有局部止血作用。

还能凝固微生物的原生质，有一定的抗菌作用，有的可抗肠道病菌，用作止痢药；鞣质外用能沉淀蛋白质，用作创面保护药和局部止血药，治疗烧、烫伤；鞣质还能作为生物碱和重金属中毒时的化学解毒剂，它能与这些物质生成沉淀，减少吸收或不被人体吸收。

大黄中鞣质的含量测定实验报告
实验名称：大黄中鞣质的含量测定实验报告
实验目的：
通过测定大黄中鞣质的含量，了解大黄中鞣质的分布情况。

实验器材：
1. 干燥砝码
2. 预称量纸
3. 秤
4. 研钵
5. 乙醚
6. 电热水浴锅
7. 试管
8. 滤纸
实验步骤：
1. 取一定质量的大黄样品，然后粉碎成细粉。

2. 称取粉碎后的大黄样品约0.2g，转移到研钵中。

3. 将研钵中的大黄样品加入适量的乙醚，用玻璃棒充分搅拌溶解。

4. 配制适量的乙醚溶液，作为空白对照组。

5. 将研钵放入电热水浴锅中，加热至乙醚基本沸腾，保持5分钟。

6. 取出研钵，待冷却后将溶液转移到试管中。

7. 再次加入适量的乙醚，使溶液稀释。

8. 用滤纸过滤溶液，收集滤液。

9. 预称量纸上称取适量的滤液，将其放置于电热水浴锅中加热，使其蒸发至干燥。

10. 取出干燥后的滤纸，通过称重的方法计算大黄样品中鞣质
的含量。

实验数据和计算：
1. 鞣质的含量计算公式：含量 (mg/g) = (干燥后的滤纸质量 -
空白滤纸质量) / 大黄样品质量
实验结果：
根据实验数据计算得到的大黄中鞣质的含量为X mg/g。

讨论与结论：
通过实验测定得到的大黄中鞣质的含量可以用来评估大黄的质量，并了解大黄中鞣质的分布情况。

实验结果可以参考相关文献或标准来判断大黄样品的质量是否符合要求。

鞣质含量测定一、鞣质提取鞣质的提取是含量测定的基础步骤，常用的提取方法有溶剂提取法、超声波辅助提取法和微波辅助提取法等。

溶剂提取法是最常用的方法，主要是利用鞣质在有机溶剂中的溶解性质进行提取。

超声波和微波辅助提取法可以加速鞣质的溶解和提取过程，提高提取效率。

二、含量测定方法1.滴定法：滴定法是一种常用的化学分析方法，通过滴加一定浓度的试剂与样品中的成分发生化学反应，根据消耗的试剂量计算出样品中鞣质的含量。

2.分光光度法：分光光度法是通过测量物质对光的吸收程度来测定物质含量的方法。

鞣质分子中含有一些能够吸收紫外线的基团，因此可以利用分光光度法测定样品中鞣质的含量。

3.高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种分离和测定复杂样品中各组分含量的有效方法。

在色谱柱中，鞣质与其他组分分离，然后通过检测器检测各组分的含量。

4.重量法：重量法是通过测量样品质量的增加或减少来计算物质含量的方法。

通过将样品中的鞣质与其他物质分离，干燥后测量其质量，即可计算出鞣质的含量。

5.络合滴定法：络合滴定法是利用络合反应的原理进行测定的方法。

鞣质分子中含有一些能够与金属离子发生络合反应的基团，通过滴加含有络合剂的溶液与样品发生反应，可以计算出鞣质的含量。

6.碘量法：碘量法是通过测量碘与样品中某些成分反应的量来计算其含量的方法。

鞣质分子中的某些基团可以与碘发生氧化还原反应，通过滴加一定浓度的碘溶液与样品反应，然后加入过量碘化钾还原剩余的碘，最后用硫代硫酸钠滴定剩余的碘，即可计算出鞣质的含量。

7.比色法：比色法是通过比较样品溶液的颜色与标准溶液的颜色来计算物质含量的方法。

鞣质分子中的某些基团可以与特定的显色剂发生颜色反应，通过比较样品溶液与标准溶液的颜色深浅，可以计算出样品中鞣质的含量。