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替硝唑葡萄糖注射液中替硝唑标示含量测定法的研究作者：白丽娟来源：《科学与财富》2014年第02期摘要：为了测量替硝唑葡萄糖注射液中替硝唑的标示含量，本文从替硝唑葡萄糖注射液的性质作用入手，并结合具体试验案例，采用紫外分光光度对照比较法来对含量进行测量，观察分析试验结果，得出了相关结论，以供同行参考借鉴。
关键词：替硝唑葡萄糖注射液；替硝唑；标示含量；测定方法利用紫外分光光度对照比较法来测量替硝唑葡萄糖注射液，通过波长确定，线性关系考察，稳定性试验，回收率试验、样品测定等多个操作步骤来测定溶液中替硝唑的标示含量，这一测定方法经过试验论证后，具有一定的可行性。
该方法可准确测量、测定出替硝唑葡萄糖注射液中替硝唑的标示含量，充分满足替硝唑的生产、试验需求。
现对紫外分光光度计对照比较法测定替硝唑葡萄糖注射液中替硝唑的表示含量作试验研究，详细如下。
一、替硝唑葡萄糖注射液的性质替硝唑葡萄糖注射液是一种医学药物，对生物细菌，如黑色素拟杆菌、真细菌、梭形细菌等有着极强的抗菌活性作用。
该注射液应用于医药医学时，可用于治疗人体败血症、腹膜炎、盆腔炎等疾病，用法用量要适当，一般选用静脉注射形式。
注射液的用药注意事项有：本药品滴注时应该尽量减缓滴注速度，如果滴注的注射液浓度为2mg/ml，那么在实际滴注时，该药品的滴注时间必须要保持在1个小时以上；如果浓度大于了2mg/ml，药品的滴注速度应该放得更慢，至少要比浓度为2ng/ml时的滴注速度慢上1-2倍。
替硝唑葡萄糖注射液的药理作用为：对原虫及厌氧菌有较高活性。
对脆弱拟杆菌等拟杆菌属、梭杆菌属、梭菌属、消化球菌、消化链球菌、韦容球菌属及加得纳菌等具抗菌活性，2～4mg/L的浓度可抑制大多数厌氧菌；微需氧菌、幽门螺杆菌对其敏感；对阴道滴虫的MIC与甲硝唑相仿，其代谢物对加得纳菌的活性较替硝唑为强。
本品的作用机制尚未完全阐明，厌氧菌的硝基还原酶在敏感菌株的能量代谢中起重要作用。
一、实验目的1. 了解替硝唑的药理作用和临床应用。
2. 掌握替硝唑的实验方法。
3. 观察替硝唑在不同条件下对实验菌株的抑制作用。
二、实验原理替硝唑是一种广谱抗生素，对多种厌氧菌和需氧菌有抑制作用。
其作用机制主要是抑制细菌DNA合成，从而达到杀菌效果。
本实验通过观察替硝唑对实验菌株的抑制作用，了解其药理作用和临床应用。
三、实验材料1. 替硝唑原药：纯度为99.5%，含量为250mg/g。
2. 实验菌株：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等。
3. 培养基：肉汤培养基、沙堡培养基、营养琼脂等。
4. 实验仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、移液器、显微镜等。
四、实验方法1. 替硝唑溶液的配制：称取一定量的替硝唑原药，加入适量蒸馏水溶解，配制成不同浓度的替硝唑溶液。
2. 菌株的培养：将实验菌株接种于肉汤培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时，得到菌悬液。
3. 替硝唑对实验菌株的抑制作用实验：（1）将菌悬液接种于营养琼脂平板上，制成菌落。
（2）用移液器取不同浓度的替硝唑溶液，滴加于平板上的菌落周围，形成圆环。
（3）将平板置于37℃恒温培养箱中培养24小时，观察替硝唑对实验菌株的抑制作用。
4. 结果观察与记录：观察不同浓度的替硝唑对实验菌株的抑制作用，记录抑菌圈直径。
五、实验结果与分析1. 替硝唑对大肠杆菌的抑制作用：随着替硝唑浓度的增加，抑菌圈直径逐渐增大，说明替硝唑对大肠杆菌有抑制作用。
2. 替硝唑对金黄色葡萄球菌的抑制作用：随着替硝唑浓度的增加，抑菌圈直径逐渐增大，说明替硝唑对金黄色葡萄球菌有抑制作用。
3. 替硝唑对白色念珠菌的抑制作用：随着替硝唑浓度的增加，抑菌圈直径逐渐增大，说明替硝唑对白色念珠菌有抑制作用。
六、实验结论1. 替硝唑对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等多种实验菌株有抑制作用。
2. 替硝唑是一种广谱抗生素，在临床治疗中具有广泛应用。
3. 本实验结果表明，替硝唑在不同浓度下对实验菌株的抑制作用明显，为替硝唑的临床应用提供了实验依据。
紫外分光光度法在药物分析中的研究进展紫外分光光度法在药物分析中的研究进展紫外分光光度法是通过可见⼀紫外分光光度计，产⽣可见光、紫外线照射某些不同物质，由于不同浓度的吸收光谱的不同，可获得不同吸收光谱的曲线[1]。
紫外与可见光区的光谱.主要是由具有共轭结构有机化合物分⼦的电⼦跃迁⽽产⽣的。
因此分光光度法对于这些化合物的定性分析、定量分析、结构鉴定等具有重要意义。
分光光度法是药物分析中应⽤较多的⼀类⽅法。
1.定性⽅法及应⽤⼀些药物分⼦本⾝带有吸收紫外或可见光的基团，在选择合适的溶剂之后做吸收光谱，在吸收峰λmax处溶剂及其它⼲扰组分的吸收很⼩，这时则可直接利⽤λmax进⾏测定该药物[2]。
因此⼀般采⽤紫外分光光度法对总提取物或部分提取物中具有紫外吸收化合物的分析，并可对⼀些中药材进⾏真伪鉴别。
1.1 ⽐较光谱⼀致性袁久荣[3]等在对中草药进⾏紫外光谱测试研究中发现⼀些不同中药材的同⼀种溶剂浸泡液的紫外吸收光谱出现相同的谱图像，即出现相同的紫外吸收峰数⽬及峰位值，因此⽆法实现鉴别。
他们以中医药理论为基础．遵照“物质相似溶于相似”及混合物各组分的紫外吸收光谱具叠加性原理，建⽴了中药鉴别的紫外谱线组法。
不同种中药及其复⽅制剂的各种成分的质和量不尽相同，则其对应的各浸泡液中成分应有差异，由各种成分的紫外吸收光谱叠加⽽成的紫外吸收光谱应呈现出差异性和特异性．其紫外吸收谱线组上的全部吸收峰数⽬及峰位值应有差异。
1.2 ⽐较最⼤吸收波长及吸收系数或吸收度⽐值的⼀致性赖德有[4]研究了鸡⾎藤的紫外光谱，结果表明，只有在(279±1)nm波长处有最⼤吸收者为鸡⾎藤，否则为伪品。
在此波长处吸收度达0．45以上，为合格品，否则为劣品。
2.定量⽅法及应⽤在遵循朗伯⽐尔定律的基础上，紫外分光光度法可以采⽤多种研究⽅法，如双波长、导数、显⾊及层析⼀紫外联⽤等⽅法，对药物中相关成分进⾏定量分析。
2.1单波长法张俊贞[5]等⽤TU⼀1901分光光度计对盐酸苯海拉明糖浆中主药的含量进⾏测定。
化妆品中替硝唑等15种禁用硝基咪唑类抗生素的检测方法（征求意见稿）1 适用范围本方法规定了采用液相色谱-串联质谱法测定化妆品中替硝唑等15种禁用硝基咪唑类抗生素的方法。
本方法适用于水剂类、香波类、膏霜类和散粉类化妆品中替硝唑（CAS：19387-91-8）、4-硝基咪唑（CAS：3034-38-6）、2-甲硝咪唑（CAS：88054-22-2）、羟基甲硝唑（CAS：4812-40-2）、甲硝唑（CAS：443-48-1）、二甲硝咪唑（CAS：551-92-8）、特尼哒唑（CAS：1077-93-6）、氯甲硝咪唑（CAS：4897-25-0）、苯硝咪唑（CAS：94-52-0）、塞克硝唑（CAS：3366-95-8）、羟基异丙硝唑（CAS：35175-14-5）、奥硝唑（CAS：16773-42-5）、异丙硝唑（CAS：14885-29-1）、羟基二甲硝咪唑（CAS：936-05-0）、洛硝哒唑（CAS：7681-76-7）等15种禁用硝基咪唑类抗生素的含量测定。
本方法中各化合物的检出限、定量下限及取0.5g样品时的检出浓度及最低定量浓度见表1。
表1 15种硝基咪唑抗生素的检出限、定量下限、检出浓度及最低定量浓度化合物名称检出限/（ng/mL）定量下限/（ng/mL）检出浓度/（μg/g）最低定量浓度/（μg/g）4-硝基咪唑0.25 0.5 0.02 0.042-甲硝咪唑0.25 0.5 0.02 0.04羟基甲硝唑0.25 0.5 0.02 0.04羟基二甲硝咪唑0.25 0.5 0.02 0.04 甲硝唑0.25 0.5 0.02 0.04二甲硝咪唑0.25 0.5 0.02 0.04洛硝哒唑0.75 1.5 0.05 0.1特尼哒唑0.25 0.5 0.02 0.04氯甲硝咪唑0.75 1.5 0.05 0.1苯硝咪唑0.75 1.5 0.05 0.1塞克硝唑0.25 0.5 0.02 0.04（续表）化合物名称检出限/（ng/mL）定量下限/（ng/mL）检出浓度/（μg/g）最低定量浓度/（μg/g）羟基异丙硝唑0.75 1.5 0.05 0.1 奥硝唑0.25 0.5 0.02 0.04异丙硝唑0.1 0.2 0.005 0.012 方法提要化妆品样品经过超声提取、高速离心及固相萃取后，用高效液相色谱-串联四极杆质谱进行检测分析。
一、实验目的1. 学习并掌握紫外-可见分光光度法测定甲硝唑含量的原理和方法。
2. 掌握实验操作技能，提高实验操作规范性。
3. 培养分析问题和解决问题的能力。
二、实验原理甲硝唑在紫外光区具有特征吸收，其最大吸收波长为316nm。
根据比尔定律，在一定浓度范围内，吸光度与甲硝唑浓度成正比。
通过测定吸光度，可以计算出甲硝唑的含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、电子分析天平、容量瓶、移液管、比色皿等。
2. 试剂：甲硝唑标准品、无水乙醇、氯化钠、磷酸二氢钠、氢氧化钠等。
四、实验步骤1. 标准溶液的配制（1）准确称取甲硝唑标准品10.0mg，置于100ml容量瓶中。
（2）加入少量无水乙醇，溶解后定容至刻度，摇匀。
此溶液为甲硝唑储备液，浓度为100μg/ml。
（3）取10.0ml甲硝唑储备液，置于100ml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，摇匀。
此溶液为甲硝唑工作液，浓度为10μg/ml。
2. 样品溶液的配制（1）准确称取甲硝唑样品10.0mg，置于100ml容量瓶中。
（2）加入少量无水乙醇，溶解后定容至刻度，摇匀。
此溶液为甲硝唑样品溶液。
3. 吸收光谱的绘制（1）取甲硝唑标准工作液、样品溶液，分别在316nm波长处测定吸光度。
（2）以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
4. 甲硝唑含量的测定（1）取甲硝唑样品溶液，在316nm波长处测定吸光度。
（2）根据标准曲线，计算甲硝唑含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
根据线性回归方程，计算相关系数R²为0.9999，表明标准曲线线性关系良好。
2. 甲硝唑含量的测定取甲硝唑样品溶液，在316nm波长处测定吸光度。
根据标准曲线，计算甲硝唑含量为9.8mg。
六、实验讨论1. 实验过程中，甲硝唑的溶解度较小，需要选择适当的溶剂进行溶解。
本实验采用无水乙醇作为溶剂，能够较好地溶解甲硝唑。
2. 在测定吸光度时，应注意比色皿的清洗和干燥，避免残留物质对吸光度的影响。
紫外分光光度法测定替硝唑膜的含量
【摘要】目的：探讨替硝唑膜的含量测定方法。
方法：采用紫外分光光度法，在316.6 nm波长处测定替硝唑的含量。
结果：替硝唑在3.07～15.35 μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.9999），平均回收率为99.57%，RSD为0.409%（n=6）。
结论：该制剂含量测定方法快速、简便，结果准确、可靠，适合基层医院制剂的质量控制。
【关键词】紫外分光光度法；替硝唑；含量测定
替硝唑膜由替硝唑、聚乙烯醇、甘油等组成，具有抗厌氧菌的作用，主要用于治疗厌氧菌感染引起的牙周脓肿、牙周炎等。
为了保证制剂质量，笔者采用紫外分光光度法测定替硝唑膜的含量，现报道如下。
1 仪器与试药
UV-2401型紫外分光光度计（日本岛津）；替硝唑及各种原料均为长龙药业提供；替硝唑膜（规格为每片0.2 cm×0.5 cm，含替硝唑0.5 mg，本院制剂室生产）。
2 方法与结果
2.1 测定波长的选择：精密称取105 ℃干燥至恒重的替硝唑适量，置100 ml 量瓶中，用水为溶媒稀释成含替硝唑为10 μg/ml的溶液；另按处方比例精密量取聚乙烯醇、甘油等组分，以水为溶媒制成不含替硝唑的空白溶液；以水为空白，将替硝唑溶液和空白溶液在200～400 nm波长范围内扫描，得到两者的紫外吸收光谱图，替硝唑在316.6 nm波长处有最大吸收，空白溶液在此波长处几乎无吸收，故选择316.6 nm作为替硝唑的测定波长。
2.2 标准曲线的制备：精密称取干燥至恒重的替硝唑适量，置100 ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀作为贮备液。
分别精密量取贮备液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml置100 ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；以水为空白，分别在316.6 nm波长处测定吸收度。
结果表明替硝唑浓度在
3.07～15.35 μg/ml范围内与吸收度线性关系良好，回归方程为A=0.03705C+0.0026，r=0.9998（n=6）。
2.3 稳定性试验：将上述测定液于室温保存，每隔1 h测定吸收度，结果替硝唑的各种浓度的溶液至少在4 h内吸收度基本无变化，说明测定液稳定。
2.4 回收率试验：取空白药膜0.5 cm×1 cm置于100 ml量瓶中，再精密加入105 ℃干燥至恒重的替硝唑对照品适量，用蒸馏水溶解并稀释至刻度，分别制成含替硝唑5 μg/ml、10 μg/ml、15 μg/ml的溶液各2 份，溶解后过滤，弃去初滤液，取其续滤液在316.6 nm波处测定吸收度，代入上述回归方程，计算含量并得出回收率，6次测定结果的平均回收率为99.57%，相对标准偏差(RSD)为0.409%。
2.5 样品测定：取替硝唑膜(0.2 cm×0.5 cm)20片，置100 ml量瓶中，加蒸馏水至刻度，多次振摇使其充分溶解后过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液10 ml 置于100 ml量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀；在316.6 nm波长处测定吸收度，代入上述回归方程，计算含量即得[本品每片含替硝唑(C8H13N3O4S)应为标示量的90.0%～110.0%]。
3批样品测定结果分别为97.05%，100.52%和98.76%，相对标准偏差(RSD)分别为0.45%，0.38%和0.62%。
3 讨论
本文采用紫外分光光度法测定膜剂中替硝唑的含量，具有操作简单，结果准确、制剂中的其它成份不干扰测定等优点，适合于医院制剂室对其进行质量控制。
