浆膜腔积液检验标本采集

检验科浆膜腔积液常规检测标准操作规程1.【目的】为了使浆膜腔积液常规检验标准化，特制定本规程。

2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

3.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型：新鲜浆膜腔积液3.2患者准备：患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。

3.3容器添加剂类型：乙二胺四乙酸二钠或二钾（EDTA钠盐或钾盐）抗凝管3.4实验试剂：冰醋酸3.5【标本的采集和保存】由穿刺取得的标本为防止细胞变性，出现凝块或细菌破坏、溶解等，送检及检查必需及时。

为防止凝固，最好加入1g/L乙二胺四乙酸二钠或二钾（EDTA钠盐或钾盐）抗凝，每0.1ml可抗凝6ml浆膜腔积液，及时完成细胞涂片检查。

PH测定应用肝素抗凝专用采样器。

4.【测定原理】蛋白定性原理：渗出液中可含多量浆膜粘蛋白，在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。

5.【操作步骤】5.1一般性状检查5.1.1记录标本送检量、颜色及透明度；有无凝固物质或沉淀物，可按浆液性、粘液性、黄色透明、脓样混浊、乳糜样、血样等报告。

测比密前，标本应充分混匀，其方法与尿比重测定相同。

量少时可用折射计法测定。

5.2浆膜粘蛋白定性试验（Rivals应）5.2.［原理］:渗出液中可含多量浆膜粘蛋白，在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。

5.2.［操作］:取1ml量筒，加蒸馏水1ml，滴入冰乙酸0.1ml（PH3-5）充分混匀，静止数分钟，将穿刺液靠近量筒液面，逐滴轻轻滴下，在黑色背景下，观察白色雾状沉淀的发生及其下降速度等。

5.2.［结果判断］:阴性：清晰不显雾状。

阳性（土）：渐呈白雾状。

（+）：加后呈白雾状。

（2+）:白雾云状。

（3+）:白浓云状。

5.2.［附注］:在滴下穿刺液后，如见浓厚的白色云雾状沉淀很快地下沉，而形成较长的沉淀物，即Rivalt反应阳性；如产生白色混浊不明显，下沉缓慢，并较快消失者为阴性反应。

浆膜腔液常规检查标准操作程序1 检验目的浆膜腔液常规检查对许多疾病及并发症的诊断、鉴别诊断、疗效观察及预后判断具有参考价值。

2 检测原理一般性状检查采用目测法；李凡它（蛋白）定性试验；细胞学检查采用显微镜手工检查法。

3 性能参数浆膜腔液常规检查是手工试验，目前还没有试验性能指标。

4 标本采集与接收4.1 浆膜腔液标本由临床医师行胸腔穿刺术，腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。

送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内，常规及细胞学检查约留取 2 毫升，生化检验留 2 毫升，厌氧菌培养留 1 毫升。

如查结核杆菌则约需 10 毫升。

为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，除应即时送验及检查外，常规及细胞学检查宜用 EDTA-K2 抗凝，生化检查标本宜用肝素抗凝。

加留 1 管不加任何抗凝剂用以观察有无凝固现象。

4.2 标本采集后要立即送检，因为放置时间过久，其性质可能发生改变，可能影响检验结果。

采集的浆膜腔液标本应尽量避免混入血液。

5 设备和试剂5.1 仪器：复星公司 ACT-2000 超高倍显微镜系统，Sysmex XT-4000i 分析仪。

5.2 试剂：冰醋酸。

5.3 设备：血细胞计数池。

6 容器和添加剂浆膜腔液常规检查试验的容器为消毒的玻璃试管，一般情况下添加剂（可用EDTA 盐抗凝 1：10 抗凝)。

7 操作步骤7.1 检验申请单及标本的审核检察浆膜腔液常规检验申请单标本，审核合格后，对浆膜腔液检验申请单姓名和标本标识进行复查，确认一致后进行检测。

7.2 一般性状检查浆膜腔液的颜色和透明度测量采用目测法。

7.3 李凡它定性试验7.3.1 取冰醋酸 2ml 置于 100ml 量筒内，用滴管滴入浆膜腔液 1～2 滴，衬以黑背景，立即观察结果。

7.3.2 结果判断：阴性：清晰透明，不显雾状；弱阳性：微呈白雾状，在黑色背景下才能看到；阳性：有明显白色浑浊或浓絮状沉淀；强阳性：有白色絮状物凝块。

7.4 细胞计数7.4. 1 手工法：对澄清的浆膜腔液混匀后用滴管直接滴入一次性计数板，用低倍镜计数全部方格内细胞数；混浊或带血的浆膜腔液可用细胞稀释液或者生理盐水稀释后加入事先准备好的管壁带有冰乙酸的小试管中，混匀后滴入一次性计数板内，用低倍镜计数全部方格内细胞数。

浆膜腔积液常规检测规程1. 目的检测分析浆膜腔积液性质，为临床诊断和治疗提供依据。

2. 检测项目浆膜腔积液颜色、透明度、比密、蛋白、白细胞计数及分类。

3. 检测原理3.1 肉眼观察和显微镜形态学识别。

3.2蛋白定性（李凡它反应）：浆膜粘蛋白在酸性条件下可产生白色云雾状沉淀。

3.3 蛋白定量：双缩脲法。

4. 标本采集及运送4.1 标本采集：浆膜腔积液标本由临床医师行胸腔穿刺术，腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。

4.2 标本要求：送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内，至少留2ml。

为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，应即时送验及检查，生化检查标本宜用肝素抗凝，常规检验宜用EDTA-K2 抗凝。

4.3 标本采集后立即送检，室温运送。

4.4 标本拒收标准：污染、久置、无标识、条码标本拒收。

5. 仪器、器材及试剂仪器：TOSHIBA 全自动生化分析仪；光学显微镜器材：牛鲍氏计数板；比重计；移液器试剂：TOSHIBA 总蛋白检测试剂盒；李凡他试剂；冰乙酸6. 检验程序6.1 浆膜腔积液理学检查6.1.1 观察浆膜腔积液颜色6.1.2 观察浆膜腔积液透明度观察时可轻摇标本，以肉眼观察浆膜腔积液透明度变化。

6.1.3 比密测定充分混匀的浆膜腔积液，缓慢倒入比重筒中，以能悬浮起比重计为宜。

将比重计轻轻放入装有浆膜腔积液的筒中并加以捻转，待其静置自由悬浮于浆膜腔积液中（勿使其接触比重筒壁），读取液体凹面相重合的比重计上的标尺刻度数值并作记录。

6.2 浆膜腔积液蛋白定量检测参见临床生物化学TOSHIBA 全自动生化分析仪总蛋白检测操作规程。

6.3 浆膜腔积液白细胞计数及分类6.3.1 浆膜腔积液白细胞计数6.3.1.1取洁净试管一只，滴入1-2 滴冰乙酸，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去之。

6.3.1.2充分混匀浆膜腔积液，滴加3-4 滴于试管内。

6.3.1.3数分钟后将标本混匀，用微量吸管吸取标本充入牛鲍氏计数板，计数10 个大方格内白细胞总数。

第十三章浆膜腔积液检验考纲正常情况下，人体的胸腔、腹腔和心包腔、关节腔统称为浆膜腔，内有少量的起润滑作用的液体。

病理情况下，浆膜腔内有大量液体潴留而形成浆膜腔积液。

根据产生的原因及性质不同，将浆膜腔积液分为漏出液和渗出液，它们产生的机制和原因见下表。

第 1 页共9 页第 2 页 共 9 页一、胸腔、腹腔和心包腔积液检查 （一）标本采集与保存1.细菌学 结核杆菌标本量-10ml ；厌氧菌培养-1ml 。

2.化学（肝素抗凝）及免疫学-2ml 。

3.常规及细胞学（EDTA-Na 2抗凝）-2ml 。

4.观察凝固现象留取标本后应及时送检，不能及时送检的标本可加入适量乙醇以固定细胞成分。

（二）理学检查1.量 正常浆膜腔内均有少量的液体。

2.颜色 正常为淡黄色。

【临床意义】漏出液颜色较浅，渗出液颜色随病情而改变。

如表：浆膜腔积液的颜色变化及临床意义3.透明度 细胞、细菌和蛋白含量有关。

漏出液清晰透明，渗出液不同程度浑浊。

4.凝块 正常浆膜腔液无凝块。

渗出液由于含有较多的纤维蛋白原和细菌，细胞破坏后释放凝血活酶，可自行凝固。

漏出液不易凝固，渗出液自行凝固。

5.比密 其高低与其所含溶质的多少有关。

漏出液＜1.015，渗出液＞1.018。

（三）化学检查1.蛋白质（1）检测原理1）黏蛋白定性检验：又称Rivalta试验。

浆膜间皮细胞在炎症反应刺激下分泌黏蛋白增加，黏蛋白是一种酸性糖蛋白，其等电点为pH3～5，在稀乙酸溶液中产生白色雾状沉淀。

2）蛋白质定量检验：浆膜腔积液中蛋白质定量，采用与血清蛋白质相同的双缩脲法测定。

积液蛋白电泳可对积液的蛋白组分进行分析。

（2）参考值Rivalta试验：漏出液阴性；渗出液阳性。

蛋白质定量：漏出液＜25g/L；渗出液＞30g/L。

（3）方法学评价：Rivalta试验是一种简便快速过筛试验，无须特殊仪器，但只能测定黏蛋白，积液蛋白质定量可测定清蛋白、球蛋白、纤维蛋白原等蛋白质的含量，蛋白电泳可对蛋白组分进行分析，故蛋白质定量和蛋白电泳有助于积液的性质判断。

浆膜腔积液检查目录1.浆膜腔积液检查的临床意义2.浆膜腔积液标本的采集与处理3.一般性状检查4.化学检查5.显微镜检查6.微生物学检查7.漏出液与渗出液的鉴别复习思考题1.浆膜腔积液检查的临床意义：主要用于漏出液与渗出液的鉴别诊断。

2.浆膜腔积液标本的采集与处理由医师经无菌胸腔、腹腔、心包腔和关节腔穿剌采集。

标本分别置于4个无菌试管中，每个试管1～2ml 。

第1管：细菌学检查，第2管：化学及免疫学检查，第3管：细胞学检查，第4管：不加抗凝剂，观察有无凝集现象。

采集后立即送检，一般不超过1小时。

3.一般性状检查（一）颜色：1. 漏出液：多为淡黄色。

2. 渗出液：多为深黄色，因病因不同可呈不同颜色。

红色血性：恶性肿瘤、结核性胸膜炎或腹膜炎、出血性疾病和内脏损伤。

黄色脓样：化脓性细菌感染。

乳白色：淋巴管阻塞。

绿色：铜绿假单胞菌感染。

（二）透明度：1. 漏出液：多清晰透明。

2. 渗出液：常混浊，化脓菌感染时最混浊，可有凝块及絮状物产生，结核菌感染呈微混、云雾状，乳糜液因含大量脂肪也呈浑浊外观。

（三）凝固性：1. 漏出液，含纤维蛋白很少，一般不易自凝。

2. 渗出液：含较多纤维蛋白原及组织碎片，静置后较易凝结。

（四）比密：1. 漏出液，含蛋白质、细胞成分少，比密常＜1.015。

2. 渗出液：含有较多蛋白质、细胞成分，比密常＞1.018。

4.化学检查（一）粘蛋白定性试验：1.漏出液：多阴性。

2.渗出液：多阳性。

（二）蛋白质定量： 1.漏出液：蛋白总量多＜25g/l。

2.渗出液：蛋白总量常＞30g/l。

（三）葡萄糖定量：1. 漏出液：与血浆葡萄糖接近。

2. 渗出液：较血浆葡萄糖明显降低，以化脓性细菌感染时最低，结核性次之。

（四）酶学检查： 1.乳酸脱氢酶（ld）：渗出液：ld＞200u/l或与血清ld比值＞ 0.6，化脓性胸膜炎显著增高，癌性积液中度增高，结核性略高于正常。

2. 腺苷脱氨酶（ada）结核性积液明显增高。

浆膜腔积液标本的采集与处理程序1．目的有效地指导浆膜腔积液(浆膜腔包括胸腔、腹腔、心包腔、关节腔等)标本的采集、接收及保存，使标本中的待测成分不受影响，保证检测结果准确可靠。

2．范围适用于浆膜腔积液常规及糖、蛋白、氯化物定量检验的浆膜腔积液标本采集、接收及处理。

3．职责3.1 浆膜腔积液标本由临床医护人员采集，医护人员必须明确通告患者浆膜腔积液标本采集的要求及注意事项；检验人员有义务向患者解释标本采集中的各种问题和向临床提供检验项目生物参考范围及临床意义等。

3.2 浆膜腔积液标本的运送应由患者家属或医护人员运送。

3.3 检验后浆膜腔积液标本由检验人员或检验科卫生员按相关程序进行处理。

4．工作程序4.1 患者准备浆膜腔积液标本一般由医护人员采集。

为了正确采集标本，医护人员应该根据标本检验项目的目的，口头和书面指导患者收集标本过程中的注意事项，并消除患者疑虑和恐慌。

浆膜腔积液标本采集前，应避免跑步、骑自行车、爬楼等剧烈的运动，要求患者臣床休息15分钟后进行采集。

使用合理容器并明确标记：浆膜腔积液理学检查和细胞学检查宜采用EDTA-K2抗凝，化学检查宜采用肝素抗凝。

采集标本后，应将可能的资料标记在容器上。

4.2 申请者对患者的指导申请者必须对患者讲清楚浆膜腔积液标本检验的目的，并告诉患者浆膜腔积液标本采集的适应症和禁忌症。

4.2.1 浆膜腔积液穿刺的适应症1 胸膜腔积液：原因不明的积液或伴有积液症状，需进行诊断性或治疗性穿刺的患者。

2 腹膜腔积液：新发生的积液或已有腹腔积液且突然增多或伴有发热的患者，需进行诊断或治疗性穿刺的患者。

3 心包腔积液：原因不明的大量心包积液；有心包填塞症状需进行诊断性或治疗性穿刺的患者。

4 关节腔积液:原因不明的大量关节腔积液伴肿痛；急性关节肿胀、疼痛或伴有局部皮肤发红和发热。

4.2.2 浆膜腔积液穿刺的禁忌症1 有出血倾向，服抗凝剂特别是使用溶栓药患者。

2 严重心肺功能不全者。

浆膜腔积液化学检查作业指导书1. 实验原理同血清相应检测项目相同。

2. 标本采集：2.1 标本种类：浆膜腔积液标本由临床医师行胸腔穿刺术，腹腔穿刺术或心包穿刺术分别采集。

2.2 标本要求：送验标本最好留取中段液体于消毒容器试管或消毒瓶内，至少留2毫升。

2.3 为防止出现凝块，细胞变性、细菌破坏自溶等，除应即时送验及检查外，生化检查标本宜用肝素抗凝。

3. 标本储存：立即送检。

4.标本运输：室温运输。

5. 标本拒收标准：污染，久置标本。

6 实验试剂：参见相应血清检测项目作业指导书。

7 实验仪器：参见相应血清检测项目作业指导书。

8. 操作步骤8.1 PH测定时标本应抽取在肝素化的真空注射器具内，注意与外界空气隔绝。

即时送验及时检查。

8.2 蛋白质、葡萄糖、酶学定量测定方法与血清定量相同。

1.结果判断与分析9.1 PH：漏出液PH>7.4；渗出液一般偏低。

化脓性感染时积液PH<7.0,同时伴有葡萄糖含量降低。

PH降低还可见于类风湿病、结核、恶性肿瘤、红斑狼疮性胸膜炎。

胸水PH在6以下，对诊断食道破裂有参考价值。

9.2 蛋白定量：一般认为渗出液蛋白质含量大于30g/L，漏出液常小于25g/L。

蛋白质如为25-30g/L，则难以判明其性质，蛋白电泳时漏出液的α2和γ球蛋白等大分子蛋白质比例低于血浆，而蛋白质相对较高。

但渗出液的蛋白电泳谱与血浆相近似，其中大分子量蛋白质显著高于漏出液。

9.3 葡萄糖定量：漏出液葡萄糖含量比血糖稍低些。

渗出液葡萄糖因受细菌或炎症细胞的酵解作用，积液中葡萄糖含量降低，尤其是化脓性细菌感染时更低，结核性次之。

9.4 酶学检查浆膜腔种液中所含的各种酶有数十种，其中有诊断价值的有以下几种。

9.4.1 乳酸脱氢酶：浆膜腔积液中LD>200U/L，积液LD/血清LD比值>0.6可作为渗透出液的指标。

在各类渗液中经化脓性感染和积液LD活性最高，其次是癌性种液，结核性略高于正常。