龙葵碱含量测定

发芽马铃薯中龙葵碱含量的实验研究【摘要】发芽的马铃薯有毒，是吃不得的,发芽的马铃薯龙葵碱含量很高，未发芽马铃薯无龙葵碱或龙葵碱含量很少。

马铃薯不能储存过长，时间越长越容易发芽，产生的龙葵碱也就越多。

【关键词】马铃薯龙葵碱【正文】问题的提出前些日子，我看到家里的马铃薯发芽了，都说马铃薯发芽不能吃，有毒。

我问妈妈：扔还是不扔？妈妈说：“你自己去查证一下，你们学科学不就是让你们去探索和实验求真的。

”我带着这个问题，想出了以下的解决方法：首先我选择上网查找相关的资料，资料中显示：1.其实，发芽的马铃薯有毒，是吃不得的。

但是，并不是整个马铃薯都不能吃，只是发芽的那部分不能吃，切掉之后，其余部分仍然可以食用。

2.在马铃薯储藏期间，如果存放时间长，温度较高，有阳光直射到马铃薯表面，都可能促使马铃薯长芽。

发芽时，在出芽的部位产生一种叫做龙葵碱的毒素，它是一种生物碱，有溶血和刺激黏膜的作用。

所以当食用发芽的马铃薯之后，就可能因为食用龙葵碱而导致食物中毒。

如果马铃薯发芽了就扔掉，那也太可惜了，所以我想可不可以选择性的对发芽的马铃薯进行食用呢？是不是去掉发芽的部分，其余部分就可以食用了？如果用不同的烹饪方法是不是发芽马铃薯也会减少毒素呢？于是，我带着这些问题决定做一做实验，来研究研究。

实验研究妈妈在检验所工作，她告诉我可以应用化学显色法对龙葵碱进行测定。

检测原理：龙葵碱能与钒酸铵，硒酸钠显色，且随着时间变化，颜色变化多样，是龙葵碱的特征性反应。

同时龙葵碱也能与浓硝酸、浓硫酸发生氧化还原显色反应。

我决定用第三种方法测定。

实验一：发芽马铃薯的不同位置龙葵碱含量的检测研究我和爸爸妈妈来到温州大学化学与材料工程学院有机及药物化学研究所试验室，在刘老师的帮助下找来浓硫酸和硝酸，直接用滴加浓酸的方法来测定是否含大量的龙葵碱。

1、实验步骤：高大上的实验室来啦实验物品准备先将发芽的马铃薯出芽部位切开，切片。

再切开一个没发芽的马铃薯，切片。

龙葵抗肿瘤的作用机制和医治进展08中西七1班曹蓓（0）【摘要】龙葵，作为一种传统中药，具有显著的抗肿瘤、抗菌、抗病毒、保肝护肾、免疫调节等作用，临床应用普遍。

其中，临床上发现龙葵对多种实体肿瘤具有良好的防治效果。

为增进龙葵的的进一步合理开发和有效利用，故对最近几年来龙葵抗肿瘤的作用机制和对多种肿瘤的医治进展进行搜集总结，以供参考。

龙葵出自《药性论》，为一年生草本茄科植物的全草，别名（《唐本草》），苦葵、老鸦眼睛草、天茄子（《本草图经》），天茄苗儿（《救荒本草》），天天茄（《滇南本草》），救儿草、后红子（《滇南本草图说》），水茄、天泡草、老鸦草（《本草纲目》），天泡果（《植物名实图考》），七粒扣、乌疗草（《福建民间草药》），黑天棵（《江苏植药志》）。

李时珍曰:“龙葵，言其胜滑如葵也。

苦以菜味名，茄以叶行名，天泡，老鸦眼睛皆以子形名也。

与酸浆相类，故加老鸦以别之。

”《本草纲目》日：其性味苦微甘，滑，寒，无毒。

龙葵有清热，解毒，活血，消肿等作用，可治痈疽肿毒，跌打损伤等。

龙葵含龙葵碱（solanigrine）澳茄胺（oslasodine），龙葵定碱（solanigridine）、皂甙、维生素C、树脂。

作为传统中药的龙葵最近几年来取得了海内外学者的普遍关注，对其化学成份进行了人量深切的研究，慢慢弄清其药效作用的物质基础，尤其是在抗肿瘤作用的研究方面取得一系列的研究功效。

现就龙葵的主要功能作用、抗肿瘤作用机制和医治进展等方面进行相关综述，为进一步有效利用龙葵的相应功效奠定基础。

一．相关肿瘤医治探讨1.肝癌（1）高某采用HPLC方式,以2-氨基芴(2-AF)为底物,以2-AF被NAT乙酰化为2-乙酰氨基芴(2-AAF)的量，探讨龙葵碱对HepG2细胞N-乙酰基转移酶(NAT)活性的影响。

实验结果表明，龙葵碱对HepG2完整细胞膜和细胞质内NAT酶都有必然的影响:龙葵碱能够降低HepG2完整细胞和细胞质内2 -AAF生成的量，并目_具有剂量相关性;随着作历时间的延长，2 -AAF生成的量逐渐增多，但在相同作历时间下龙葵碱均能够降低2-AAF的生成。

宁夏不同地区不同品种马铃薯中龙葵素在不同生长期的积累含量测定赵丹青;张锋锋;吴燕;葛谦;陈翔;王晓菁【摘要】采用高效液相色谱-紫外检测器法,分别对宁夏不同地区、不同品种、在覆膜和露地两种生长方式下马铃薯中龙葵素含量进行测定,随着生长时间的延长,在马铃薯的三个生长时期(块茎增长期、淀粉积累和成熟收获期)龙葵素含量逐渐降低,且覆膜马铃薯中龙葵素含量普遍高于露地马铃薯.在块茎增长期,覆膜陇薯14号的龙葵素含量为3.358 mg/100g,均高于其他品种,露地陇薯14号在三个生长时期龙葵素含量均低于其他品种,且成熟收获期龙葵素含量最低.中薯20号在覆膜和露地的条件下,均在成熟收获期有较低的龙葵素含量,可以作为在头营和彭阳地区的主要种植品种.【期刊名称】《中国野生植物资源》【年(卷),期】2017(036)006【总页数】4页(P29-31,44)【关键词】宁夏;马铃薯;龙葵素;提取;生长期【作者】赵丹青;张锋锋;吴燕;葛谦;陈翔;王晓菁【作者单位】宁夏农产品质量标准与检测技术研究所,宁夏银川750002;宁夏农产品质量标准与检测技术研究所,宁夏银川750002;宁夏农产品质量标准与检测技术研究所,宁夏银川750002;宁夏农产品质量标准与检测技术研究所,宁夏银川750002;宁夏农产品质量标准与检测技术研究所,宁夏银川750002;宁夏农产品质量标准与检测技术研究所,宁夏银川750002【正文语种】中文【中图分类】S532龙葵素(Solanine)又叫龙葵碱，茄碱、龙葵毒素，是由葡萄糖残基和茄啶组成的一种甾体生物碱，主要由α-茄碱和α-卡茄碱组成，其中α-茄碱含量占95%以上[1]，是马铃薯在呼吸过程中产生一类次生代谢产物[2]。

龙葵素是一种天然毒素，中毒多发生于是食用的发芽土豆，未成熟的西红柿中也含有该物质，当马铃薯块茎龙葵素含量达10～15 mg/100 g 时，食用有明显的麻苦味，含量超过20 mg/100 g 时，食后则有中毒或致病的危险[3-6]。

（Ａ Ｈａ Ａｅｓａｒ）
（天津市天达净化材料细化工厂） （北京益利精细化学品有限公司）
得龙葵多糖精制品。 ２．３龙葵多糖物化性质测定 ２．３．１物理性质 粗产物为浅黄色粉末状物质，精制品为乳白色粉末状，均无臭、无味，不溶于乙醇、丙酮、乙醚、 乙酸乙酯等一般有机溶剂，可溶于热水、温水，不易溶于冷水，其水溶液透明粘稠状。 ２．３．１显色反应 ①印三酮实验没有颜色改变，说明该物质不是蛋白质。②Ⅱ一萘酚实验观察紫色光环，说明该物质 可能是糖类物质。 ２．４多糖含量测定［８—１１］ ２．４．１测定波长的选择 精密吸取多糖样品稀释液ｉｍｌ放于具塞试管，加５％苯酚１．Ｏｍｌ混匀，迅速加入浓硫酸５．Ｏｍｌ，摇匀， 于沸水浴１５ｍｉｎ，对照液取ｌｍｌ蒸馏水于具塞试管中，以下操作相同，从４３０ｎｍ开始每隔ｌＯｎｍ测定一 次至５３０ｎｍ，进行最大吸收度测定，结果见图ｌ，最大吸收波长为４９０ｎｍ。
ｃｏｎｔｅｎｔ
ａｎｄ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ
ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ
ａｔ
ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ：ｂｕｆｆｅｒ：７５ｍｍｏｌ／ＬＮａ２８４０５（ｐＨ １０．５），
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：２５＂Ｃ，ｖｏｌｔａｇｅ：２０ｋＶ，ＵＶ
ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｓ １３．５％：Ｔｈｅ
ｉｓ ６５．２８％；Ｈｉｇｈ
Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｃａｐｉｌｌａｒｙ Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（ＨＰＣＥ）ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｉｔ ｉｓ ｃｏｍｐｏｓｅｄ ｏｆ Ｌ
（＋）一ｒｈａｍｎｏｓｅ，Ｄ・ｘｙｌｏｓｅ，Ｄ—ｇｌｕｃｏｓｅ，Ｄ—ｍａｎｎｉｔｏｌ，Ｄ一（一）ａｒａｂｉｎｏｓｅ ａｎｄ Ｄ・ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ ａｎｄ ｔｈｅｉｒｃｏｎｔｅｎｔｒａｔｉｏ ｉｓ２．５６：２．２８：

龙葵生物碱提取及检测方法研究进展龙葵为双子叶茄科茄属一年生草本植物，生物碱类化合物是龙葵的主要生物活性成分，具有较强的抗肿瘤活性。

目前，龙葵生物碱的提取方法有溶剂提取、超声提取、微波提取、超临界萃取、柱层析等，检测方法有酸性染料比色法、薄层扫描法、高效液相色谱法、反相高效液相色谱法、超高效液相色谱法等。

本文对近年来龙葵生物碱提取及检测方法的研究进展进行综述，旨在为龙葵碱的研究和开发提供参考。

Abstract：Solanum Nigrum is a kind of dicotyledon solanaceae annual herb，and alkaloids are its main bioactive constituents，with good antitumor activity. The current extraction methods for alkaloids include solvent extraction，ultrasonic extraction，microwave extraction，supercritical fluid extraction，and column chromatography etc，while the detection methods include acid dye colorimetry，thin layer scanning，high performance liquid chromatography，reversed-phase high performance liquid chromatography，and ultra-high performance liquid chromatography etc. This article reviewed the research progress in extraction and detection methods of alkaloid from Solanum Nigrum in recent years，so as to provide references for further research and development of alkaloid from Solanum Nigrum.Key words：alkaloids from Solanum Nigrum；extraction；detection；review龙葵Solanum nigrum L.系双子叶茄科茄属一年生草本植物，全国各地均有分布。

澳洲茄碱 质量分数 / mg·g － 1
0. 682 5 0. 715 1 0. 991 4 1. 513 2 0. 830 1 1. 124 8
RSD 0. 77 1. 4 0. 92 1. 1 1. 2 0. 89
澳洲茄边碱 质量分数 / mg·g － 1
1. 630 9 1. 084 6 1. 380 3 3. 249 8 1. 302 2 1. 738 4
RSD 0. 98 1. 6 1. 8 1. 1 0. 93 1. 1
khasianine 质量分数 / mg·g － 1
0. 732 8 0. 695 3 0. 485 0 0. 384 0 0. 331 1
－
RSD 1. 1 1. 2 0. 79 1. 2 1. 1
khasianine 0． 698 5 0． 730 1． 4156 98． 23 99． 88 1． 3 0． 689 2 0． 730 1． 420 8 100． 22 0． 719 6 0． 730 1． 442 8 99． 07 0． 707 4 0． 730 1． 437 2 99． 98 0． 692 2 0． 730 1． 419 3 99． 60 0． 697 5 0． 730 1． 443 4 102． 18
澳洲茄边碱 1． 105 0 1． 010 2． 094 9 98． 01 99． 08 1． 6 1． 090 3 1． 010 2． 111 3 101． 09 1． 138 4 1． 010 2． 130 3 98． 21 1． 119 1 1． 010 2． 133 1 100． 39 1． 095 0 1． 010 2． 101 9 99． 69 1． 103 4 1． 010 2． 084 1 97． 10

【 文献标识码 】 Ａ
点 ， 进 行 硫 酸 水 解 ， 硫 酸 水 解 液 作 纸 上 层 析 和 高 再 对 效 液相 色 谱 （ Ｐ Ｃ 分 析 测 定 Ｓ Ｌ Ｐ的 组 成 及 含 量 。 ＨＬ） ＮＢ １ ３ 色谱 条 件 ． 色 谱 柱 ＨＲ ． Ｈ （ ６ ｍ Ｃ Ｎ ２４， ｍ×１０ｍ ， 动 相 为 乙 ５ ｍ） 流
线 性 回归 方 程 为 ： Ｙ：０ １２６ １ 一４ ８９ ０ ， ．６３５ Ｘ ，２７ｘ１ 。 尺
＝
０ ９６ 。 试 验 结 果 表 明 ， 品 中 多 糖 含 量 为 ７ ．％ ．９９ 样 ８５
（ 当于 葡 萄 糖 含 量 ） 相 。
件进行 高效 液相 色 谱 （ Ｐ Ｃ ， Ｈ Ｌ ） 单糖 标 准 品 和样 品保
酮 试 验 不 反 应 ； 酸 咔 唑 也 不 发 生 反 应 ； 双 光 束 式 硫 用
称 取 干 燥 的龙 葵 样 品 。 用 ０ ５ｍ ｌＬ ａ Ｈ 溶 液 采 ． ｏ／ Ｎ Ｏ 浸 泡 后 水 浴 加 热 ， 处 理 从 中 提 取 多 糖 Ｓ Ｌ Ｐ 过 经 ＮＢ ，
ＤＡ Ｅ Ｅ纤 维 素 柱 和 Ｇ １０柱 纯 化 ， 后 对 Ｓ Ｌ Ｐ进 一 ｏ 然 ＮＢ 行 均 一 化 测 定 ， 行 理 化 性 质 定 性 分 析 测 定 结 构 特 进
３２ 纸 上 层 析 ．
［ ］ 刘 翠平 ， 积 年 ． ２ 方 质谱 技术 在 糖类 结构 分析 中 的应 用 ［ ］ Ｊ．
分 析 化 学 ，０ １２ （ ） ７６—７ ０ ２ ０ ，９ ６ ：１ ２．
［ ］ 丁 侃 ， 积 年 ． 糖 类 药 物 的毛 细 管 电 解 分 析 方 法 及 其 ３ 方 多 应 用 ［］ 色谱 ，９ ９ １ （ ）３６—３０ Ｊ． １９ ，７ ４ ：４ ５．

生境 蔬菜园
田间 马铃薯地
荒地 村边湿地
草坪 草坪 草坪 林下 林下 山上 公园内 墙根
收稿日期：2010-08-16 作者简介：单会娇（1985 － ） ，女，硕士生，研究方向：药用植物种质资源及质量评价。Tel：15998504132 E-mail：shanhj1006@ 163. com * 通讯作者：王 冰（1952 － ） ，男，教授，博士生导师，研究方向：药用植物种质资源及质量评价。Tel：87586003 E-mail：YZBwang@ lnutcm. edu. cn
取编号为 1 的供试品制备液，分别于 0、2、4、8、 16、24、48 h 后进行测定，记录峰面积，算得 RSD 为 1. 43% ，结果表明该样品在 48 h 内稳定。 2. 9 回收率试验
精密称取已知含量的的药材粉末（ 编号为 1）6 份，每份 1. 0 g，置于 50 mL 具塞锥形瓶中，再精密加 入澳洲茄碱对照品溶液（0. 523 mg / mL）1 mL，按供 试品制备方法，平行制备，测定含量，平均加样回收 率为 100. 14% ，RSD 为 1. 38% 。 2. 10 测定结果
关键词：龙葵；澳洲茄碱；高省市、24 个产地的不同生境、生长周期的龙葵中澳洲茄碱进行分析。方法：采用 HPLC，Agilent
TC-C18 色谱柱（250 mm × 4. 6 mm） ；以乙腈-0. 5% 磷酸水溶液作为流动相，梯度洗脱；检测波长为 203 nm；体积流量：0. 9 mL / min；柱温为 30℃ 。结果：龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地、生境及生长周期不同差异很大。尤以生境及生长周期对
精密吸取供试品溶液 20 μL，注入高效液相色 谱仪，记录色谱图，以澳洲茄碱计算，理论塔板数不 低于 5 000。如图 1。

本课题拟解决的问题
从马铃薯中提取出龙葵素粗品。 龙葵素标准样品溶液的制备及绘制出标
准曲线。
计算出马铃薯中龙葵素的含量。 确定出马铃薯中龙葵素的最佳提取方案。
2020年2月28日星期五
8
2019届毕业论文结题答辩
本课题拟采用的研究手段
1 了解龙葵素的特性及生物学功能。
2 马铃薯中龙葵素的提取、分离及纯化，获得 龙葵素粗品。
长期以来，人们认为龙葵素是有毒的，但在近 期的研究中却发现它具有重大的生态学意义和潜在的 药用价值。
2020年2月28日星期五
2
2019届毕业论文结题答辩
研究背景
龙葵素，又叫龙葵碱、马铃薯毒素，是植物体内所有
糖苷生物碱的总称(total glycoalk aloids，TGA)。它是植物为
抵御动物、昆虫和微生物等的侵害在呼吸过程中由乙酰辅酶
100:5 0.356 0.0485
100:10 0.379 0.0520
100:15 0.387 0.0534
100:20 0.372 0.0509
100:25 0.362 0.0494
2020年2月28日星期五
随着乙醇、乙酸混合溶液比 例的减小，其混合溶液中增加， 龙葵素得率先增进再减少，乙醇 ：乙酸=100:15时。龙葵素得率最 高为0.0534%。
2019届毕业论文结题答辩
马铃薯中龙葵素的 提取工艺研究
学生姓名：
学 号：
系 部：
专 业：
指导教师: 2020年2月28日星期五
1
2019届毕业论文结题答辩
研究背景
马铃薯是一年生茄科植物，其块茎营养价值高， 富含淀粉、蛋白质、糖类及多种维生素和无机盐。但 是，马铃薯在贮藏过程中易变绿、发芽。研究表明， 变绿的马铃薯及其芽中含有较多的龙葵素。

Key words：Solasonine；Solanum Nigrum L.；HPLC
龙葵（Solanum Nigrum L.）是茄科（Solanaceace）植物龙葵 的干燥地上部分，是我国传统草药，民间用于抗炎、抗病毒，近 年来发现龙葵还具有抗肿瘤作用，引起了医药工作者的关注。 龙葵中含有的生物碱是甾体类生物碱，是其主要活性部位，包 括澳洲茄碱（solasonine），澳洲茄边碱（solamargine）等，苷元是 澳洲茄胺（solasodine）。研究表明澳洲茄碱在体外抗肿瘤实验 中表现出很好的抗肿瘤活性[1]。目前还没有采用高效液相色谱 法测定龙葵中澳洲茄碱的文献报道，本研究建立了澳洲茄碱的 高效液相色谱法并测定了其在龙葵药材中的含量，为制定龙葵 药材的质量标准打下了基础。
*江苏省中医药领军人才基金项目资助(No.2006)，江苏省中医药局项目资助(No.H05021) 通讯作者：贾晓斌，南京市十字街100号江苏省中医药研究院，江苏省现代中药制剂工程技术研究中心，邮编：210028，电话/传真：025-85637809 E-mail：jxiaobin2005@
仪器与试药 1. 仪器 Agilent 1200 高效液相色谱仪（美国Agilent公司） 包括柱温箱、在线脱气机、四元泵、二极管阵列检测器及色谱 工作站；Buchi旋转蒸发仪。 2. 试药 澳洲茄碱（solasonine）标准品（郑州牧业工业高等 专 科 学 校化学 教研室 提 供，经高分 辨质谱鉴定并用H P L C 法检 测纯度>98%）；龙葵药材（购自江苏省药材公司，批号060609，
5. 精密度试验 取浓度为0.2436mg/ml的对照品溶液，连 续进样6次，记录峰面积，RSD为0.91%，表明方法精密度良好。
6. 重复性试验 取同批次龙葵药材粉末（40目），按供试 品制备方法，平行制备6份，进行测定，计算各份澳洲茄碱的含 量，RSD为1.42％，结果表明该方法重复性良好。

澳洲茄碱含量（ % ） 0． 046 0． 043 0． 059 0． 065 0． 044 0． 088 0． 106 0． 067 0． 048 0． 116
澳洲茄边碱含量（ % ） 0． 078 0． 036 0． 035 0． 087 0． 038 0． 091 0． 055 0． 051 0． 037 0． 127
3． 供试溶液的制备： 取本品粉末约 2． 5 g，精密 称定，置具塞锥形瓶中，加入 80% 乙醇 50 mL，称重， 超声处理（ 功率 300 W，频率 50 kHz） 40 min，放冷， 再称重，用 80% 乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过， 精密量取续滤液 25 mL，蒸干，残渣用 80% 乙醇转移 至 5 mL 量瓶中，并定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤 液，即得［5］。
（ 4） 重复性试验： 取龙葵 6 份，依法制备供试品 溶液，分别 处 理，依 次 进 样，每 份 进 样 两 次，依 法 测 定。澳洲茄碱均含量为 0． 066 2% ，澳洲茄边碱均含 量 0． 086 3% ，总碱均含量 0． 152 5% ，RSD 分别为 1． 88% 、1． 62% 、0． 65% 。实验结果表明，此方法重 现性良好。
·144·
世界中西医结合杂志 2013 年第 8 卷第 2 期 World Journal of Integrated Traditional and Western Medicine 2013，Vol. 8，No. 2
·药物研究·
高效液相色谱法测定龙葵中澳洲茄碱 与澳洲茄边碱含量的研究
刘林凤 高宝益 高淑红
【Key words】 Solasonine； Solamargine； Solanum Nigrum； Content Determination

第七章 食品腐败变质和天然毒素的检测食品腐败变质系指在腐败细菌为主的各种因素（如日光、水分、温度、空气等）作用下，使食品降低或丧失食用价值和商品价值的一切变化。

食品中的天然毒素是指自然界中有些动、植物如果误食或食用方法不当可能引起的中毒的一些天然存在的物质成分。

这类物质很多，毒性相差很大，中毒症状也各不相同。

这里仅选择四项作为一般性实验供选用。

实验一 挥发性盐基氮的检测挥发性盐基氮，是动物性食品在腐败过程中，由细菌酶的作用，使蛋白质分解而形成的物质，此类物质属带碱性的含氮物质，故也称碱性总氮（TVBN ），主要包括氨及少量伯胺和叔胺等，均具有挥发性。

TVBN 与动物性食品腐败程度之间有明确的对应关系，常用于判定食品的新鲜程度和确定食品质量的好坏。

TVBN 的检测方法有半微量定氮法和微量扩散法。

一．半微量定氮法（一）目的与要求 学习鲜（冻）肉、鱼、禽等肉与肉制品的新鲜程度检测与判别。

（二）原理 样品浸提液在弱碱性（MgO ）条件下，碱性含氮物质游离并被蒸馏出来，用标准酸溶液滴定计算含量。

（三）仪器与试剂1．仪器：半微量凯氏定氮器2．试剂：（1）氧化镁混悬液（10g/L ）：称取1.0g 氧化镁，加100mL 水，振摇成混悬液；（2）硼酸吸收液（20g/L ）；（3）0.010mol/LHCl 标准液；（4）混合指示剂（2g/L 甲基红－乙醇指示液与1g/L 次甲基蓝指示剂，临用时等量混合）（四）实验步骤试样处理：将试样除去脂肪、骨或鳞等非食用部分后，绞碎拌匀，称取约10.0g ，置于锥形瓶中，加100mL 水，不时振摇，浸渍30min 后过滤备用。

蒸馏滴定：装好半微量凯氏定氮器，将盛有10mL 硼酸吸收液及5－6滴混合指示剂的锥形瓶置于冷凝管下端，并使端口处于液面以下。

准确吸取 5.0mL 上述滤液于蒸馏器反应室内，加5mL 氧化镁混悬液，迅速盖塞，并用水封口，通入蒸汽，蒸馏5min 后停止。

吸收液用盐酸标准溶液滴定至蓝紫色为终点，同时做试剂空白。

专利名称：一种测定龙葵中总生物碱含量的方法专利类型：发明专利
发明人：黄越燕,高广春,吴世平
申请号：CN201510534497.X
申请日：20150827
公开号：CN105115925A
公开日：
20151202
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种采用酸性染料比色法以紫外分光光度计测定龙葵中总生物碱含量的方法。

其特点在于：采用龙葵碱为对照品，用氯仿制成对照品溶液；采用酸-醇混合溶剂超声提取龙葵中总生物碱，制成供试品溶液；酸性染料比色法的显色条件为pH=3.6，缓冲液3.5mL，溴甲酚绿液2.0mL，以氯仿10mL分3次萃取，静置30min。

检测波长为243nm，根据吸光度进行含量测定。

龙葵总生物碱在5-30μg/mL范围内呈线性关系，回收率平均值99.7%，RSD=1.4%（n=6）。

本发明的测定方法操作简便，成本低廉、回收率高、重现性好，可用于测定龙葵中总生物碱的含量。

申请人：嘉兴学院
地址：314001 浙江省嘉兴市南湖区越秀南路56号
国籍：CN
代理机构：杭州金道专利代理有限公司
代理人：黎双华
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河北省野生龙葵果实中营养成分的比较分析范翠丽;李向东;曹熙敏【摘要】Solarium nigrum Linn had numbers of merits, such as wide distribution, great reserves, strong resistance, easy cultivation and rich in nutrition etc; and of great nutrition value and medication value. Though determining the content of nutritional substances in S. nigrum fruit, including sugar, vitamins C and organic acid, the best growing regions and situations could be selected for the development of wild Solanum nigrum Linn resources.%龙葵(Solanum nigrum Linn)具有分布广、蕴藏量大、抗逆性强、易栽培、营养丰富等特点.通过对河北省不同地区野生龙葵果实的总糖、总酸和维生素C含量的测定,并进行比较分析,从而为龙葵选择最佳的生长环境、更有效地开发利用野生龙葵资源、实现龙葵的人工栽培及驯化提供理论依据.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2011(050)004【总页数】2页(P770-771)【关键词】龙葵;果实;营养成分;生长条件【作者】范翠丽;李向东;曹熙敏【作者单位】河北北方学院农林科技学院农业科学系,河北,张家口,075000;河北省万全县农业技术推广服务中心,河北,万全,076260;河北北方学院农林科技学院农业科学系,河北,张家口,075000【正文语种】中文【中图分类】S949.777.7;Q945.6+5龙葵（Solanum nigrum Linn）别名野葡萄、乌甜子菜，为茄科龙葵属一年生草本植物，高达1m，全株无毛，斜向多分枝，绿色或略带紫色，生多数疣状物。

乙醇法:称取20g的马铃薯鲜样品，将样品和几个玻璃珠(防止加热沸腾)放置于250ml的圆底烧瓶中，添加100ml的95%乙醇，将圆形烧瓶连接直形冷凝管，放置于水浴锅，调节温度为85-95℃，水浴4个小时。

冷却，过滤取滤液，回收乙醇近干，然后将剩余的乙醇倒入蒸发皿中，将乙醇蒸干。

用30ml的5%硫酸溶解剩余物，过滤，收取滤液，加入浓氨水调节PH值为10-10.5，冷却，放置于冰箱过夜。

4℃，5000r/min离心，去上清液，用l%氨水洗涤，再离心，洗涤，至洗涤液澄清，离心，取沉淀即得粗样品。

乙醇一乙酸法:称取2g的烘干马铃薯鲜样品，加100ml乙醇和3ml乙酸，磁力搅拌器搅拌15分钟，过滤。

滤液装入索氏脂肪抽提器的称脂瓶，滤渣用滤纸包住，放入索氏脂肪提取器的滤纸筒内，水浴抽提16小时后，回收乙醇近干，然后将剩余的乙醇倒入蒸发皿中，将乙醇蒸干。

用30ml的5%硫酸溶解剩余物，过滤，收取滤液，加入浓氨水调节pH值为10~10.5，冷却，放置于冰箱过夜。

4℃，5000r/min离心，去上清液，用1%氨水洗涤，再离心，洗涤，至洗涤液澄清，离心，取沉淀即得粗样品。

3.测定方法龙葵碱标准溶液:精确称取0.0500g龙葵碱，加入l%硫酸溶液溶解，移入50ml容量瓶中，加入1%硫酸溶液至刻度，摇匀。

此溶液每ml含龙葵碱lmg。

标准曲线的制作:取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml标准溶液以1%硫酸稀释到2ml，置冰浴中逐渐加入5ml硫酸(宜于3分钟以上时间滴完)，放置1分钟，然后置冰浴中滴加2.5ml l%甲醛(在2分钟以上时间滴完)，放置90分钟后，于520nm波长测定吸光度。

样品的测定:将提取的粗样品用l%硫酸溶解，定容到10ml。

取2ml的样品溶液，与标准曲线的制备同样操作，先预测其大概浓度，再以1%硫酸调节样品浓度，使之每毫升在0.2mg以下，取2ml按标准曲线制备项下操作，于520nm波长测定吸光度，计算含量。

马铃薯中龙葵碱的测定一、龙葵碱的简介及性质：龙葵碱又名茄碱、龙葵毒素、马铃薯毒素，是由葡萄糖残基和茄啶组成的一种弱碱性糖苷。

不溶于水、乙醚、氯仿，能溶于乙醇，与稀酸共热生成茄啶(CHNO)及一些糖类。

茄啶能溶于苯和氯仿。

存在及毒性：龙葵碱广泛存在于马铃薯、番茄及茄子等茄科植物中。

在番茄青绿色未成熟时，里面含有龙葵碱。

马铃薯中龙葵碱的含量随品种和季节的不同而有所不同，一般为0.005%～0.01%，在贮藏过程中含量逐渐增加，马铃薯发芽后，其幼芽和芽眼部分的龙葵碱含量高达0.3%～0.5%。

龙葵碱口服毒性较低，对动物经口的LD50为：绵羊500mg/kg体重，小鼠1000mg/kg体重，兔子450mg/kg体重。

人食入0.2～0.4g龙葵碱即可引起中毒。

龙葵碱并不是影响发芽马铃薯安全性的唯一因素，引起中毒可能是与其他成分共同作用的结果，其毒理学作用机理还需要进一步研究。

二、龙葵碱的提取方法1.单溶剂法单溶剂法就是用一种溶剂来提取龙葵碱，采用的溶剂有甲醇或1%乙酸。

Jellma等〔1981)详细地描述了甲醇法。

该试验用甲醇萃取，把甲醇挥发掉后用乙酸溶解，然后调PH>9，水浴，静置，沉淀:沉淀用冷氨水冲洗，加甲醇溶解，离心，取上清液，旋转蒸发至干(防止烧焦)，即可得样品。

单溶剂使用的甲醇有毒，且甲醇没有挥发完全，使龙葵碱的提取不完全，回收率较低。

用乙酸提取时，淀粉难于除掉，要利用乙醇去除淀粉，使实验过程过多，误笙增人。

2.双溶剂法双溶剂法就是用两种溶剂来提取龙葵碱，采用的溶剂有甲醇和氯仿、96%的乙酸与1%乙酸以及1一庚烷磺酸和乙酸。

Fitzpatrick等(1974)详细地报道了甲醇和氯仿的方法。

样品中加提取液抽滤，滤液加Na2SO4，放置于分液漏斗中分层。

取甲醇层，旋转蒸发甲醇，浓缩液加H2SO4;水浴回流，用碱调节pH，苯萃取，旋转蒸发苯至干，即可得样品。

该方法使用Na2SO4 分层效果欠佳，弃去的氯仿层中仍含有一定数量的甲醇，而甲醇中含有龙葵素，使结果偏低;另外，该法使用硫酸高温回流时，使龙葵素水解，限制了其准确的定量检测法。

一、实验目的1. 学习并掌握龙葵碱的提取方法。

2. 掌握紫外-可见分光光度法测定龙葵碱含量的原理和方法。

3. 了解龙葵碱在中药及保健品中的应用。

二、实验原理龙葵碱（solanine）是一种生物碱，存在于马铃薯、番茄等植物中。

龙葵碱具有显著的抗癌活性，在中药及保健品中具有广泛的应用。

本实验采用溶剂提取法提取龙葵碱，利用紫外-可见分光光度法测定其含量。

三、实验材料与仪器1. 材料：马铃薯、无水乙醇、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水等。

2. 仪器：紫外-可见分光光度计、电子天平、磁力搅拌器、玻璃仪器等。

四、实验方法1. 龙葵碱提取（1）称取一定量的马铃薯，洗净后切碎，放入锥形瓶中。

（2）加入适量无水乙醇，浸泡过夜。

（3）次日，用磁力搅拌器搅拌，使马铃薯充分溶解。

（4）过滤，收集滤液，置于蒸发皿中。

（5）将蒸发皿置于水浴中蒸干，得到龙葵碱粗品。

2. 龙葵碱含量测定（1）配制标准溶液：准确称取一定量的龙葵碱标准品，用无水乙醇溶解，配制成一定浓度的标准溶液。

（2）测定吸光度：将标准溶液和样品溶液分别置于紫外-可见分光光度计中，于特定波长处测定吸光度。

（3）绘制标准曲线：以标准溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

（4）计算样品含量：根据样品溶液的吸光度，从标准曲线上查得对应浓度，计算样品中龙葵碱的含量。

五、实验结果与分析1. 龙葵碱提取通过实验，我们成功提取了马铃薯中的龙葵碱。

从实验结果可以看出，采用无水乙醇作为溶剂，提取率较高。

2. 龙葵碱含量测定通过紫外-可见分光光度法测定，我们得到了样品中龙葵碱的含量。

实验结果显示，该方法具有较高的准确度和精密度。

六、实验结论1. 成功提取了马铃薯中的龙葵碱，提取率较高。

2. 紫外-可见分光光度法测定龙葵碱含量具有较高的准确度和精密度。

3. 龙葵碱在中药及保健品中具有广泛的应用前景。

七、实验展望1. 进一步优化龙葵碱的提取工艺，提高提取率。

2. 探究龙葵碱在中药及保健品中的药理作用。