苍耳子炒制前后毒性部位的高效液相指纹图谱研究
- 格式:pdf
- 大小:228.22 KB
- 文档页数:3
第19卷 第1期 安 徽 中 医 学 院 学 报 V ol19 N o1 2000年2月 JOU RN AL O F ANHU I T CM COLL EGE Feb2000不同炮制方法对苍耳子成分及药效的影响金传山,吴德林,张京生1(安徽中医学院药学系,合肥 230038)摘要:目的:探讨不同炮制方法对苍耳子成分、镇痛作用及毒性的影响。
方法:以水浸出物、脂肪油含量及物理常数、扭体镇痛实验、毒性实验对苍耳子样品进行综合分析评定。
结果:苍耳子以炒后碾去刺品水浸出物含量最高,苍耳子炮制后脂肪油含量降低,物理常数及化学组分无多大变化,镇痛作用最强,毒性较小。
结论:苍耳子入药以炒后碾去刺为宜,为其临床用药提供参考依据。
关键词:苍耳子;薄层层析;脂肪油含量;水浸出物;镇痛作用;毒性中图分类号:R282.710.2 文献标识码:A 文章编号:1000-2219(2000)01-0054-02苍耳子为菊科植物苍耳的干燥成熟带总苞的果实,是中医临床常用中药,具有散风、通窍、去湿的功效。
自古以来,多要求以炒后碾去刺入药,生品少用。
关于苍耳子现代研究亦见报道 1~4 ,然而对其炮制前后的化学成分及药理作用变化未见报道。
笔者对苍耳子不同炮制品的脂肪油含量、薄层层析、水作者简介:金传山(1963-),男,讲师1 安徽省亳州工业学校浸出物等项目进行测定,并探讨了各品种的镇痛作用及毒性情况,从而为苍耳子临床用药提供一定的科学依据。
1 实验材料1.1 样品制备 苍耳子购自安徽省合肥市药材公司,经鉴定为菊科植物苍耳X anthium sibiricum Patr的带总苞的果实。
生品:取样品,除去杂质。
炒苍耳子:按文献 1 方法将生品于230 炒11min。
峰面积积分值基本稳定。
2.7 精密度试验 吸取对照品溶液,在同一块薄层板上点相同量6点,展开,扫描测定,RSD= 1.10% (n=6)。
2.8 重复性试验 精密吸取同一批样品溶液6份,按上述方法测定,结果RSD=3.08%。
1)01: 10.111苍耳子炒制前后绿原酸的含量测定李明达',闻光磊二杜跃中2,马双欣2,王悦\武子敬'*(1.通化师范学院,通化134002; 2.吉林人参研究院,通化134001)摘要:目的木论文研究苍H:子炒制前后嫁原酸的含ht方法利用问流提取法提取炒割前和炒割后苍耳子中的绿原酸.采用紫外■可也分光光度计法测定绿嶂酸的含&L结果炒制而苍耳子中绿原触含吊0.20m^niL.炒制后的芷耳f中绿嶂酸含M 0.X0曲mL结论炒制后在耳了中绿原酸含域相比炒硼苍耳子中绿原酸含量有所提高关键询:苍耳子;炒制:绿原酸;含址测定Determination of chlorogenic acid in Xanthii Fructus after processingI.I Ming-ila'.M EN GmmgHH'.DU Yuc-xhong\M A Shuang*-xin J.WANG Yur'.WUZt-jing1*(School of Phamuify and M c<l>r i n<% Tonghua Nonna I llnivrrxity, Ton^iniiu Jilin 1)4002, China)Abstract:Objcctivc To com|>arc lhe content of the chk>n>gcnic Acid in Xanthii Frnclus Method Using rclum extraction methixl to exliact chluivgenit* acid in th<* piiM-ebHing ami cm<le. Using uv-v iA to (iHrmiinatr I hr contrnl <rfrhIiHTigrnir Vfi<l. Kr*uh、The rnnlrnt is 0.20iii|^niL in the (I80ni^/ml. in the processing Conclusion Afterprocessing the content of chlomgcnic M% incivaswLKey words: Xanthii Fiuctus;Saute nw(th<Kl ; chloiogenic ac-Kl; content cktemnnation苍耳子为菊科梢物苍耳Xanthiumsibiricum Pali•.的「•燥成熟带总苞的果实秋季果实成熟时来收.「燥•除上杪、叶""L具有散风您、通卵窍、祛凤湿的功化.I 要用于风腐头痛、鼻塞流涕、鼻孰、食源、风疹寇痒、湿痹拘七中医认为苍叩子生品有毒,过虽使用或炮制不当易导致中毒、甚至死「售苍耳了经炒制后,毒性明!」够伸, 现代药理学研究说明,苍耳子具有降血糖、钮咳、降压、抗炎、抑萌等作用%苍耳子化学成分复杂,主要有脂肪酸、倍半赣内酯、唾嗪双洵、励酸类、水溶性件类、脂肪油、蛋白质等成分.研究说明苍耳子主要活性成分为酚酸类化合物吃其中以绿原酸为主的酎酸类成分被认为是苍耳子中的主要痛抗炎活性成伊,具有抗炎和钮痛等作用户因绿原破是苍耳子中含房最多的有H撤之一,建立对其含筮测定的方法,为药材及炒捋品质鱼评价提供重要依据:1材料与方法1」材料、仪器和试剂LL1材料苍耳子的干•燥成熟果实。
苍耳子毒性成分及炮制工艺研究进展近年来关于苍耳子药理作用及其复方制剂的研究比较丰富,本文着重对苍耳子毒性成分方面的研究及其炮制工艺和改进等方面进行简述,以期为以后苍耳子的研究和利用奠定更坚实的基础。
标签:苍耳子;毒性成分;炮制工艺苍耳子为菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patr.的干燥成熟带总苞的果实。
秋季果实成熟时采收,干燥,除去梗、叶等杂质。
归肺经。
辛、苦、温; 有毒。
功能为散风除湿, 通鼻窍。
用于风寒头痛,鼻渊流涕,风疹瘙痒,湿痹拘挛[1]。
本文对苍耳子毒性成分研究进展及炮制工艺进行了简述,并通过反复实验得出较理想的苍耳子炮制方法。
1苍耳子毒性成分研究与我国苍耳子的丰富资源相比, 其临床使用量较低, 究其原因,可能与苍耳子有毒(临床上常可见到苍耳子中毒, 甚至死亡病例报道) 和缺乏科学的药材质量标准有关[2]。
《南方主要有毒植物》中指出:“苍耳全株有毒,以果实毒性最大,鲜叶比干叶毒,嫩叶比老叶毒”。
苍耳子油其所含蛋白质无明显毒性,而从脱脂部分得到的水浸剂毒性很大。
动物中毒后发生的强烈阵发性惊厥,与苍耳子中所含的苷类物质使血糖显著降低有关。
苍耳子中水溶性苷类主要指苍术苷与羧基苍术苷[3]。
王素贤等[4]从蒙古苍耳种仁中分离出苍术苷,并确定其结构如下:并认为苍术苷是苍耳子的主要毒性物质基础,毒性反应与苍耳子水煎剂的毒性反应基本一致。
其他成分如羧基苍术苷、羧基苍术酸钾也具有较强的毒性。
2苍耳子的炮制工艺及改进临床上苍耳子生用, 既影响疗效,又增加了毒性反应。
故应严格按照炮制规范炮制,破坏其毒性成分后应用。
2.1苍耳子炮制历史沿革苍耳子历史上的炮制方法很多, 历代文献记载有10 余种,可分为净制、火制和加辅料制三大类。
2.1.1净制净制即净选加工。
主要目的是去刺及其杂质。
本品在去刺时, 应防止果实被压碎, 否则达不到去刺的目的。
2.1.2火制火制为加热炮制,现版药典载有炒苍耳子。
苍耳子辛夷合煎液指纹图谱变化分析王荧荧;冯紫薇;高天【期刊名称】《长春中医药大学学报》【年(卷),期】2009(25)6【摘要】目的建立苍耳子辛夷合煎液的HPLC指纹图谱分析方法,为研究临床苍耳子与辛夷配伍的药效物质基础成分变化提供可行手段.方法采用HPLC法建立指纹图谱,选用Diamonsil C18柱(5 μm,250 mm×4.6 mm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长258 nm.通过对配伍后与单味药材的指纹图谱中各峰相对保留时间的比较分析.进行主要色谱峰的药味归属;利用色谱峰保留时间的对比,鉴定相关色谱峰.结果建立了苍耳子与辛夷配伍的HPLC指纹图谱,未见新成分的增加,苍耳子与辛夷合煎有相互增溶的作用,并对辛夷某些成分溶出有抑制溶出作用.结论该实验方法简便、准确、重复性好,具有良好的精密度和较好的分离效果,为苍耳子与辛夷临床配伍应用提供了科学依据.【总页数】3页(P829-831)【作者】王荧荧;冯紫薇;高天【作者单位】成都中医药大学,四川,成都,610075;成都中医药大学,四川,成都,610075;成都中医药大学附属医院,四川,成都,610072【正文语种】中文【中图分类】R285【相关文献】1.酸枣仁-五味子药对的单煎液、单煎混合液与合煎液UPLC特征指纹图谱相关性研究 [J], 高家荣;吴溪;韩燕全;魏良兵;孟楣;夏伦祝2.柴胡疏肝散分煎混合液和合煎液指纹图谱及有效成分变化分析 [J], 李吉锋;王淑荣3.痛泻要方分煎液和合煎液有效成分变化分析 [J], 李吉锋4.苍耳子炮制对苍耳子-辛夷药对6种指标成分含量和指纹图谱的影响 [J], 孙远;汪永忠;韩燕全;洪燕;陈倩倩;吴影;潘凌宇5.丹栀逍遥散分煎液和合煎液中芍药苷变化分析 [J], 张茜;李吉锋;周慕荣;白毕艳;韩新;初日因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
基于指纹图谱和网络药理学的苍耳子质量标志物预测分析敖慧豪1,2,付梦雅1,2,谢冬梅2,朋汤义1,吴德玲1,韩燕全1*1.安徽中医药大学第一附属医院/国家中医药管理局中药制剂三级实验室/中药复方安徽省重点实验室/现代药物制剂安徽省工程技术中心,安徽合肥230601;2.安徽中医药大学,安徽合肥230031〔收稿日期〕2022-09-19〔基金项目〕安徽省徽派炮制传承工作室项目(皖中医药发展秘〔2021〕10号);2019年度浙江省重点建设高校优势特色学科(中药学)开放基金资助项目(ZYAOXZD2019005)。
〔第一作者〕敖慧豪,男,硕士研究生,研究方向:中药炮制及质量控制研究。
〔通信作者〕*韩燕全,男,博士,主任药师,E-mail:******************。
〔摘要〕目的基于指纹图谱和网络药理学预测苍耳子质量标志物,为其质量控制和药效研究提供依据。
方法选择10批不同产地苍耳子饮片,采用超高效液相色谱系统Waters Acquity UPLC H-Class 建立其UPLC 指纹图谱,通过对照品指认确定其共有峰并初步预测其候选Q-Marker ;运用网络药理学构建“核心成分-靶点-通路”网络,进一步预测苍耳子Q-Marker 及核心靶点,再用分子对接方法预测分析苍耳子Q-Marker 生物活性。
结果建立了10批苍耳子饮片的指纹图谱,确认了18个共有峰,通过苍耳子对照品指认了其中8个峰,分别为原儿茶醛、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸。
经网络药理学分析,以上8种成分关联29个核心靶点与20条关键通路,与苍耳子抗炎、抗肿瘤等作用密切相关,可作为苍耳子药效活性成分。
分子对接结果显示该8种成分与其对应的核心靶点之间均有较好的结合能力,表明苍耳子候选Q-Marker 拥有较好的生物活性。
结论通过UPLC 指纹图谱和网络药理学分析,预测出苍耳子的Q-Marker ,为其质量及药效学的进一步研究提供了参考。
UPLC指纹图谱技术结合毒性成分含量优选苍耳子的炮制工艺通过16个不同工艺炮制样品水提取部位的UPLC指纹图谱和毒性成分含量比较,优选苍耳子炒制的最佳工艺。
UPLC指纹图谱色谱条件为Acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速0.25 mL·min-1;检测波长327 nm。
毒性成分含量测定的色谱条件为Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氢钠溶液(35∶65);流速1.0 mL·min-1;检测波长203 nm。
实验建立了16个不同工艺样品的UPLC指纹图谱,并对其分别采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件》、SPSS16.0软件和SIMCA13.0软件进行相似度分析、聚类分析和主成分分析;16个炮制样品相似度均大于0.97;聚类分析表明炮制样品可大致聚成4类;主成分分析结果认为影响最明显的3个成分分别是绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和咖啡酸;毒性成分含量测定结果表明炮制后毒性成分明显降低,炮制可起到减毒作用;该实验方法可用于优选苍耳子的炮制工艺。
标签:指纹图谱;毒性成分;苍耳子;炮制工艺苍耳子是临床常用中药之一,其名苍耳子最早出现于唐代医药学家孙思邈所著《千金·食治》一书,但在我国最早的药物学专著《神农本草经》一书中就以葈耳实之名收载,并列为中品[1]。
《中国药典》2010年版项下收载其来源于菊科植物苍耳Xauthium sibiricum Patr.的干燥成熟带总苞的果实,规定其常用量3~10 g,并应炮制后入药[2]。
苍耳子生品有毒,如炮制不当、未经炮制使用或用量过大(单次剂量超过30 g)均可引起中毒,甚至死亡[3]。
现代研究表明,苍耳子所含化学成分较多,已明确的有效成分有绿原酸、咖啡酸等多种酚酸类[4],毒性成分有水溶性苷类包括羧基苍术苷、苍术苷及其衍生物等[5]。
基于目标成分“敲出/敲入”的苍耳子毒性物质辨识和质量评价研究1目的本研究以临床常用的有毒中药苍耳子为对象,基于目标成分敲出/敲入的中药毒性物质辨识和质量控制研究模式,对苍耳子中的毒性物质进行辨识、确认,并对其毒性成分的定量控制与评价方法进行初步研究。
2方法1.采用UPLC 分别对10批苍耳子药材的主要药效成分绿原酸、新绿原酸等5种酚酸成分及毒性成分水溶性苷类苍术苷与羧基苍术苷进行了含量测定;并建立了基于UPLC-DAD的苍耳子水溶性苷类部位的化学指纹图谱。
2.通过小鼠急性毒性试验,测定肝毒性相关指标如ALT、AST及脏器指数等,结合化学指纹图谱信息,通过SPSS 22.0软件进行Pearson相关性分析和逐步回归分析,将“谱-毒”关系相关联,辨识苍耳子的毒性成分。
3.利用薄层色谱法对苍耳子样品进行分离,“敲出”确定的2个目标成分——苍术苷与羧基苍术苷,采用UPLC色谱法对“敲出”的目标成分及其阴性样品进行鉴定,评价该方法的“敲出率”。
采用体外细胞毒性试验MTT法、台盼蓝拒染法和LDH释放法测定“敲出”的目标成分的细胞毒性作用,进一步辨识和确认苍耳子中的主要毒性成分。
4.通过“敲入”策略,将目标成分混合样品“递增敲入”各阴性样品中,并对所得样品进行细胞毒性评价,得到目标成分的“量-毒”关系。
基于“量-毒”关系,得出敲出组分的最高含量限度,为制定毒性成分含量控制的上限提供依据。
3结果1.10批苍耳子药材中的主要药效成分,新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量均较高。
苍耳子中的水溶性苷类成分苍术苷与羧基苍术苷的含量测定结果表明,10批苍耳子中羧基苍术苷含量较均一,不同产地、来源的药材的酚酸类和苍术苷与羧基苍术苷含量较佳,具有代表性。
实验建立了以水溶性苷类为指标成分的化学指纹图谱,相似度结果表明所选的10批苍耳子药材总体质量较均一。
2.小鼠急性毒性试验结果表明:10批苍耳子水提液对小鼠产生了不同程度的肝毒性,血清AST值均大于73.16±1.02 IU/L,ALT值均大于22.65±0.89 IU/L,脏器指数也与血清ALT、AST值呈现相似趋势,表明不同苍耳子对小鼠的急性毒性作用不大相同,其中S9、S10样品毒性较弱,S7样品毒性较强。
中药苍术炮制前后DNA指纹图谱研究
许腊英;夏险峰;毛维伦
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2006(028)005
【摘要】目的:探讨苍术炮制前后DNA指纹图谱研究方法.方法:采用RAPD技术对不同产地的茅苍术炮制前后进行DNA指纹图谱研究.结果:不同产地的茅苍术生品DNA指纹图谱一致,几种麸炒苍术的DNA指纹图谱与生品有较大差异.结
论:DNA指纹图谱可用于鉴别同种药材的生品.
【总页数】3页(P674-676)
【作者】许腊英;夏险峰;毛维伦
【作者单位】湖北中医学院药学院,湖北,武汉,430061;湖北中医学院药学院,湖北,武汉,430061;湖北中医学院药学院,湖北,武汉,430061
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.中药苍术炮制方法及理论研究进展 [J], 杜庆山
2.南北苍术炮制前后特征图谱及苍术素含量研究 [J], 张金龙;秦昆明;徐自升;姚仲青;蔡宝昌
3.焦苍术中药炮制规范项目的测定研究 [J], 程华;谢冬;李健;毕建洪;洪志坚
4.孟河医派苍术特色炮制品与其他炮制品中β-桉叶醇、\r苍术酮和苍术素含量差异的研究 [J], 曹琰;刘产明;张琪;朱月琴;黄玮
5.以苍术饮片炮制为例虚拟仿真技术在中药炮制学实验教学中的探讨 [J], 曹国胜;杜鸿志;刘先琼;王光忠;刘艳菊
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
苍耳子4种提取物小鼠急性毒性比较研究[摘要]目的:研究苍耳子生品和炒品的水提、醇提4种提取物对小鼠的急性毒性。
方法:观察小鼠灌胃给药后的毒性反应,并计算半数致死量(LD50)。
结果:苍耳子水提取物组毒性反应为静卧、竖毛、尾足发绀、震颤、呼吸抑制、间歇性惊厥、翻正反射消失、后腿抽搐等,乙醇提取物组则表现为静卧、腹式呼吸、部分竖毛、震颤、严重间歇性惊厥、跳跃、后腿抽搐,部分动物出现大小便失禁等。
苍耳子炒品水提取物、炒品乙醇提取物、生品水提取物、生品乙醇提取物的小鼠灌胃给药的LD50分别为生药15593,31780,16760,27541g·kg-1。
结论:苍耳子水提取物的急性毒性明显大于乙醇提取物,而炒品和生品的毒性差异不明显。
[关键词]苍耳子;生品;炒品;水提;醇提;急性毒性1材料1.1受试药物苍耳子(生)水提取物、(生)乙醇提取物、(炒)水提取物、(炒)乙醇提取物收得率分别为原生药998,1708,900,1619g·g-1药粉,样品均由中国科学院成都生物研究所王明奎教授提供。
根据预试验结果,将药粉用蒸馏水以等比稀释法配制成不同浓度的药液用于试验。
1.2动物健康昆明种小鼠,SPF级,280只,雌雄各半,体重18~22g,由四川省中医药科学院实验动物中心提供,动物生产许可证号SCXK(川)20080019。
1.3仪器EB3200D电子天平,日本岛津;JA1003A电子天平,上海精天电子仪器有限公司;Leica RM2015半自动切片机,德国;OL YMPUS H0 2112型显微镜,日本。
2方法[2]采用小鼠急性系统毒性试验方法,根据预试验获得的苍耳子4种提取物LD0~LD100致死量范围,将小鼠按性别、体重随机分为6~7个剂量组,组间比为1∶080~1∶095,每组10只,雌雄各半。
试验前禁食不禁水14h,给药剂量为40mL·kg-1,灌胃给药1次。
给药当天4h内每小时观察1次,共4次。
快速提取分析小剂量苍耳子中毒性成分摘要】目的:通过对小剂量苍耳子中毒性成分的提取、纯化和色谱分析,建立和完善苍耳子中毒性成分的限量检测方法。
方法:探索提取、纯化苍耳子中毒性成分的最佳方法,并采用薄层色谱检测毒性成分的含量。
结果:提取小剂量苍耳子中毒性成分的溶剂是70%(v/v)丙酮,用量是1:10,工艺是超声提取15 min。
结论:该方法简单、快速、准确,可作为苍耳子中毒性成分的限量检测方法。
【关键词】小剂量苍耳子毒性成分快速提取和分析【中图分类号】R991 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2012)08-0114-02苍耳子为菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patr. 的带总苞的果实。
收载于历版中国药典,在我国资源丰富,为历代治疗鼻病及头痛的要药。
多用于治疗慢性鼻炎、慢性鼻窦炎、过敏性鼻炎等疗程长的疑难病症。
调查统计分析发现:在治疗鼻炎、鼻窦炎以及过敏性鼻炎的30 种常用中药方剂中,含有苍耳子的有23 种,占76.7%,且均作为君药或臣药使用。
据报道苍耳子的治疗效果令人满意,但临床常因长期、过量、反复使用,以及炮制不当或未经炮制使用而发生中毒。
其中毒表现为动物和人在误食一定量后出现血糖下降,昏迷,严重者出现肾衰竭甚至死亡[1、2]。
国内外对苍耳子的毒性研究初步确立了其毒性成分是苍术苷、羧基苍术苷和4' - 去磺基苍术苷[3、4]。
苷类化合物能溶于水、乙醇及甲醇中,受其他多类化学成分的干扰,苍耳子中毒性成分的提取分离非常复杂,必须用不同的色谱柱,经过反复的色谱分离,才能得到三种毒性成分单体。
这种分离方法是不适合于苍耳子和含苍耳子复方的质量控制,因此,到目前为止,苍耳子质量标准中毒性成分控制指纹图谱尚未建立。
为了保证临床用药安全,必须要摸索小剂量苍耳子中毒性成分的提取分离方法,以利于苍耳子和含苍耳子复方的质量控制标准的制订。
1 实验部分1.1 仪器 FW100 万能粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司), QT08超声清洗器(天津市瑞普电子仪器公司),RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)1.2 试剂1.2.1 丙酮、乙醇、甲醇、氯仿等试剂均为分析纯。
2019年第5期第40卷总第295期(自然科学)学报收稿日期:2019-06-20基金项目:第三届全国大学生生命科学竞赛项目(30380).作者简介:武子敬,女,满族,吉林通化人,通化师范学院医药学院讲师;徐佳新,李明达,朱成光,通化师范学院(吉林通化134002).苍耳子炮制前后植物蛋白含量的比较研究武子敬,徐佳新,李明达,朱成光摘要:目的:以苍耳子中的植物蛋白为研究对象,考察苍耳子炮制前后植物蛋白的变化.方法:双缩脲试剂与考马斯亮蓝法测定苍耳子炮制前后植物蛋白质的含量.结果:苍耳子炒制后植物蛋白的含量下降,样品溶液在595nm 处有最大吸收,标准蛋白液溶液3.62~18.25mg ·mL -1呈良好线性关系,方程为Y =0.284X +0.5698(r =0.9972),平均回收率95.4%,RSD 为1.24%.结论:苍耳子经炒制后,其植物蛋白的含量较生品低,达到炮制降毒的目的,而且考马斯亮蓝法测定植物蛋白的含量快速、简便、易行.关键词:苍耳子;炮制品;植物蛋白;含量测定中图分类号:R285文献标志码:A文章编号:1008-7974(2019)05-0019-03DOI :10.13877/22-1284.2019.10.005苍耳子(Fructus xanthii )为菊科植物,味甘,温,有小毒,归肺经,具有散寒通窍祛湿的功效,用于治疗风疹头痛,鼻塞流涕,鼻鼾等,为鼻渊头痛之要药[1].植物蛋白有多种药理作用,如抗氧化活性、抗菌活性,还具有一定免疫活性等[2].苍耳子有小毒,其植物蛋白又是其毒性成分之一,本实验以苍耳子中植物蛋白作为研究内容,考察炮制前后植物蛋白含量变化,以便为苍耳子在临床应用方面提供依据,现将研究结果报告如下.1实验仪器与材料1.1试药中药材:购于通化市医药大厦的苍耳子药材.试剂:考马斯亮蓝G-250(购自国药集团化学试剂有限公司);牛血清蛋白对照品(批号:20180808);乙醇(天津市致远化学试剂有限公司);氯化钠(天津市致远化学试剂有限公司);磷酸(天津市致远化学试剂有限公司);硝酸(天津市致远化学试剂有限公司).1.2仪器可控调温电炉(郫县永信电器厂);BCD-265(KG28EV2S0C )型冰箱(博西华家用电器有限公司);电子天平(深圳市无限量衡器有限公司经销);分光光度仪(北京普析通用仪器有限责任公司);玻璃试管;高速多功能粉碎机(永康市天祺盛世工贸有限公司).2方法与结果2.1制备炮制品生品:取原药材5g ,除去杂质,用时粉碎.炒品:取净苍耳子5g 置炒制容器内,用中火加热翻炒至黄褐色,刺焦时即可取出,碾去刺筛净.长白山资源开发与利用··192019年第5期(自然科学)学报2.2定性鉴别(1)硝化反应.分别取蛋白质对照品溶液和加入苍耳子炮制品粉末的样品溶液5mL 放置于试管里,加入2mL 浓硝酸后,静置5min ,观察二者的颜色变化,结果显示,加入苍耳子的样品溶液呈棕黄色,蛋白质对照品呈现黄色,基本保持一致,说明其苍耳子中含有蛋白质.另取一支试管,加入5mL 纯化水,同样加入2mL 浓硝酸,静置5min 观察颜色变化,结果显现白色,无明显变化.(2)色谱鉴别.阳性对照:取浓度为10mg ·L -1蛋白质对照品溶液5mL ,加入双缩脲试剂5mL ,震荡均匀后显现紫色;供试品溶液:取5g 苍耳子样品置试管中,并向5g 苍耳子的样品的试管中加入纯化水10mL ,超声过滤收集滤液水,滤液浓缩5mL ,加入双缩脲试剂5mL ,震荡均匀,显现紫色;阴性样品溶液:取纯化水5mL ,加入双缩脲试剂5mL ,震荡均匀,呈浅蓝色.此外,需要取这3种染色液,相应试剂为空白,在紫外分光光度仪400~700nm 波长处扫描,均有最大吸收峰位于540nm 处,阴性样品溶液在该波长范围内无最大吸收.2.3定量检测(1)溶液的制备[3-4].①精密称取0.438g NaCl 溶于50mL 容量瓶中,再加纯化水,定容前检查装置是否漏水,然后倒转和摇动的方法使瓶内液体混合,配好0.15mol ·L -1NaCl 的溶液.②取考马斯亮蓝G-25050mg ,放入烧杯,加入25mL 乙醇,50mL 磷酸,注意要混匀,然后加入纯化水,慢慢将其稀释至500mL ,所制得的溶液为考马斯亮蓝G-250的染色液,以备实验所用.③选用电子天平称取牛血清蛋白25mg ,放于25mL 容量瓶中,用纯化水溶解后,定容,即得,放于4℃下放置在冰箱中保存.取该溶液0.2mL ,加0.15mol ·L -1NaCl 溶液到2mL ,再加考马斯亮蓝G-250溶液10.0mL ,混合均匀后,大约放5min ,得到蛋白质对照品溶液.④取苍耳子炮制品粉末0.1g ,加入0.15mol ·L -1NaCl 溶液到2mL ,此处一定要记得利用超声波进行溶解,加入考马斯亮蓝10.0mL ,混合均匀,放置大约5min ,等待反应.⑤取2mL 的0.15mol ·L -1NaCl 溶液,10.0mL考马斯亮蓝G-250溶液,混合,放置一段时间,待其充分反应,得到的是空白样品溶液.(2)测定波长的选择.上述配制的5种溶液,除了0.15mol ·L -1NaCl 溶液和考马斯亮蓝G-250溶液,其余三种分别放置于紫外分光光度仪上扫描,设定一个固定波长围为500~700nm ,记录蛋白质对照品和样品溶液在595nm 处有最大吸收,即设定波长为595nm ,如图1~图3.图1蛋白质对照品溶液紫外吸收谱图2样品溶液紫外吸收谱图3空白样品溶液紫外吸收谱(3)曲线方程的建立.分别精密称取蛋白质对照品储备液0.2mL 、0.4mL 、0.6mL 、0.8mL 、1.0mL 放置于10mL 试管中,每管加0.15mol ·L -1的NaCl 溶液至1.0mL ,混和均匀.分别取0.1mL 上述各个试管中的溶液放置于试管中,加入考马斯亮蓝G-250溶液染色液5.0mL 放置一段时间,即得到相应毫升中所含蛋白质含量.分别放于595nm 处测定吸光度值,读取5次,取其平均值,··20武子敬,等:苍耳子炮制前后植物蛋白含量的比较研究浓度值为横坐标,吸收度为纵坐标,曲线方程:Y=0.284X+0.5698(r=0.9972),标准蛋白质溶液3.62~18.25mg·mL-1呈良好线性关系.(4)精密度试验.分别取蛋白质对照品和空白样品溶液,在595nm波长处测定吸光度值数次,重复多次,才会使结果更加接近准确,算得结果RSD为1.24%,表明仪器精密度良好.(5)稳定性试验.主要考察所要测的蛋白质在一段时间内是否稳定,那么取经过染色后的蛋白质对照品溶液,595nm波长处测定吸光度值,但是要分别放置30min、60min、120min、180min、360min,结果算得RSD为1.86%,表明供试品溶液在360min内稳定.(6)重复性试验.取苍耳子炮制品粉末0.1g,加入0.15mol·L-1NaCl溶液到2mL,此处一定要记得利用超声波进行溶解,加入考马斯亮蓝G-250溶液10.0mL,混合均匀,放置大约5min,等待反应充分得样品溶液.取该溶液5份,595nm处测定吸光度,计算出样品含量,算得结果为RSD为1.43%.表明此方法重复性良好.(7)回收率试验.多次称取固定含量的苍耳子炮制品1g放置于试管中,分组编号,然后按样品含量的不同百分比,如60%、90%、120%加入蛋白质对照品溶液.加入0.15mol·L-1NaCl溶液到2mL,利用超声波进行溶解,加入考马斯亮蓝G-250溶液10.0mL,混合均匀,放置大约5min,等待反应充分得样品溶液,再取空白溶液于相同波长处测吸光度值,计算含量,得回收率为95.4%,表明该方法准确度较高.(8)含量测定.精密吸取苍耳子炮制品粉末0.1g放置于试管中,各3份,按照最开始的方法制备样品溶液,同样要取空白样品溶液595nm处测定吸光度值,见表1.表1样品含量表(-x±s,n=3)样品炒制苍耳子生品苍耳子样品含量1.021.04RSD/%1.211.34本实验研究表明,炮制前后的苍耳子中植物蛋白的含量有所变化,炮制后的苍耳子中植物蛋白的含量的变少.3讨论与结论考马斯亮蓝法的检测原理是基于染料考马斯蓝G250和蛋白质之间形成的特异性结合,是最常用的测蛋白质含量的方法中比较不受干扰的一种[4].而双缩脲试剂是目前首先推荐的蛋白质定量方法,其原理是蛋白质分子中的肽键在碱性条件下与二价铜离子(Cu2+)作用生成蓝紫色的化合物,这种颜色反应强度在一定浓度范围内与蛋白质含量成正比,经与同样处理的蛋白标准液比较,即可求得蛋白质含量[3].利用双缩脲试剂、考马斯亮蓝法能快速测得植物蛋白中的含量.本实验研究表明,炮制前后的苍耳子中植物蛋白的含量有所变化,炮制后的苍耳子中植物蛋白的含量变少,而苍耳子毒蛋白为其毒性成分之一[5],其现代炮制方法有净制、炒制,苍耳子药用必须炒焦黄,由于加热炮制后脂肪中蛋白变性,而不被溶解,达到减毒的目的,盛昌翠[6]、张婷婷[7]通过实验均发现苍耳子炒制品毒性较生品降低,本实验研究首次从植物蛋白的角度考察苍耳子的炮制意义,为苍耳子的开发和利用提供了更好的依据.同时,可以从植物蛋白的角度重新审视中药炮制在中药发展的重要作用,也为中药炮制品的发展提供新的研究思路.参考文献:[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典:2015年版.1部[M].北京:中国医药科技出版社,2015.[2]高蕾蕾,李迎秋.植物蛋白的研究进展[J].江苏调味副食品,2018(4):6-10,16.[3]陈宁清,郑司雨.双缩脲试剂在检测蛋白质上的应用研究[J].中国医疗器械杂志,2014,38(6):458-460.[4]王孝平,邢树礼.考马斯亮蓝法测定蛋白含量的研究[J].天津化工,2009,23(3):40-42.[5]龚千锋.中药炮制学[M].4版.北京:中国中医药出版社,2016:117-118.[6]盛昌翠,宋世伟,聂磊,等.苍耳子炒制前后贝壳杉烯苷类成分毒性比较研究[J].时珍国医国药,2015,26(2):359-360.[7]张婷婷.苍耳子毒效学及毒性机制研究[D].泸州:泸州医学院,2010.(责任编辑:王海波)··21。
xx[基原]本品为菊科植物苍耳x。
M2AiM舰5j6fri‘Mm P则n ex widd.的成熟带总苞的果实。
[化学成分]果实台苍耳昔(xanthokrumarLn)、苍耳醇(Knnthan01)、异苍耳醇(is。
x8nthan01)、苍耳酯(朋nthumtn);台脂肪酸类化台物,主要为亚油酸(1inohc acid)占6L 20托、油酸(01e—ic acN)占26.8%、棕桐酸(Patmit[c acid)占;.32%、硬脂酸(st印rLc acid)占3.63%、硬脂酸甘油酯(et朗nn);台糖类化物.主要为葡萄糖(81ucose)、果糖(fructose)、蔗糖(su—crose),含氨基酸类化合物,主要为亮氨酸(1eucine)、苯丙氨酸(phenytaLnnine)、甘氨酸(8Iycine)、天门氨酸<aspanM acid)、天门冬柬(asparamNe);台磷脂类化合物有卵磷脂、脑确脂;含有机酸类化合物有酒石酣(taric acN)、琥肉强(suc。
Mc acid)、延胡索强(fM—maric肌id)、苹果酸(malic acid);此外,尚含有蜡醇(cevtatcoh01)、谷笆酪(咖os比如1),还含二蔽羧酸苍术昔(carbo”yatrac、yloside),油菜笆酵、挥发油、倍半蔽、谷笛酵、豆笆酪。
种仁含亚油酸,还含有毒成分毒蛋白、氢酪、苍术昔。
M。
1994年郭亚红报道按中国药典(1985年版)法提取苍耳子的挥发油,得17个化学成分及相对含镊如下:于醛(Nonal)0.09%;2,A—葵二烯醛(2,A—Decsdienal)0.15%;反式—石竹烯(Tr8nrc8ryophyclene)O.08%6十五烷(Pentsdecan)0.18%E9—芹子燥<9—SGliene)0.32%P。
—古艺烯(。
—8。
nunen。
)o.21%3十六烷(He朋decane)0.66%;十七烷(HePtade—cane)1.61%12,6,10,14—四甲基十五烷(2?6,10,14—T曰ram破hyLpentad。
苍耳子配伍黄芪的HPLC-DAD指纹图谱研究曹敏;武斌;刘树民【摘要】目的建立苍耳子配伍黄芪的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析方法,研究配伍对各单味药主要特征峰的影响.方法采用HPLC分析苍耳子、黄芪单煎及苍耳子配伍黄芪合煎样品,选用Diamonsil C18色谱柱(5 μm,250 mm×4.6 mm),以甲醇-0.2%甲酸水为流动相进行线性梯度洗脱,流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm.结果建立了苍耳子配伍黄芪的HPLC指纹图谱,基本为两单味药特征峰的加和,无明显新特征峰的增加,但配伍合煎对某些成分的溶出有明显的相互抑制作用.结论本方法简便、快捷,为临床类方的配伍应用以及制定复方质量标准提供了参考.%Objective To establish the method for analyzing compatibility components from Fructus Xanthii and Radix Astragali by HPLC fingerprint chromatogram and to study the influence of main characteristic peaks variations induced by compatibilities. Methods Diamonsil-Cis column (4.6 mmX250 mm, 5 pm) was used to analyse these samples including the water extracts of Fructus Xanthii, Radix Astragali and compatibilities between them, with methanol and water containing 0.2% methanoic acid as mobile phases in a gradient elution, detection wavelength as 260 nm, and flow rate was 0.8 mL/min. Results HPLC fingerprint chromatogram of the compatibilities from Fructus Xanthii and Radix Astragali was established, and the whole characteristic peaks were the summation, with no new characteristic peaks existing Compared with the single decoction, dissolution rate of some ingredients was decreased reciprocally in compatibilities. Conclusion The method is simple and convenient, whichprovides the references to clinical applications of compatibility and the basis for the quality assessment of compound.【期刊名称】《中国中医药信息杂志》【年(卷),期】2012(019)002【总页数】3页(P55-57)【关键词】苍耳子;黄芪;配伍;指纹图谱;高效液相色谱法【作者】曹敏;武斌;刘树民【作者单位】黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江,哈尔滨,150040;黑龙江中医药大学中医药研究院,黑龙江,哈尔滨,150040【正文语种】中文【中图分类】R284.1苍耳子始载于《神农本草经》,系菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patr.干燥成熟带总苞的果实,有散风除湿、通鼻窍之功,是历代中医临床治疗鼻渊头痛的要药[1]。
炒与炒后碾去刺2种炮制法对苍耳子成分及药效的影响作者:陈亚芬黄群张周英来源:《中国民族民间医药·上半月》2020年第08期【摘要】目的:分析炒與炒后碾去刺2种炮制法对苍耳子成分及药效的影响。
方法:通过水浸出物含量、脂肪油含量及其物理常数测定、薄层色谱分析、镇痛与毒性实验综合分析不同炮制法对苍耳子的影响。
结果:苍耳子炒品与炒后碾去刺品的水浸出物含量、对小鼠的镇痛率明显高于生品(P<0.05),其中炒后碾去刺品的水浸出物含量、镇痛率最高。
苍耳子炒品与炒后碾去刺品的脂肪油含量、对小鼠的致死率明显低于生品(P<0.05),炒品与炒后碾去刺品的脂肪油含量及对小鼠的致死率相比无明显差异(P>0.05)。
苍耳子炮制后脂肪油物理常数及化学成分无明显变化。
结论:炒后碾去刺炮制法更适用于苍耳子入药,在不明显改变其脂肪油物理常数及化学成分的情况下,可提升苍耳子镇痛效果,且毒性较小。
【关键词】苍耳子;炮制;炒后碾去刺;成分;药效【中图分类号】R283 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517(2020)15-0021-04Abstract:Objective To analyze the effect of two processing methods of frying and grinding and stabbing after frying on the composition and efficacy of Xanthium fruit.Methods The effects of different processing methods on Xanthium fruit were analyzed by water extract content, fat oil content and its physical constants, TLC analysis,analgesic and toxicity experiments.Results The content of water extract and the analgesic rate to mice of stir fried and milled Xanthium fruit were significantly higher than those of raw Xanthium fruit (P<0.05), among which the content of water extract and the analgesic rate of milled Xanthium fruit were the highest.The content of fat oil and the lethal rate to mice of stir fried and milled products of Xanthium fruit were significantly lower than those of raw Xanthium fruit (P<0.05),and there was no significant difference in the content of fat oil and the lethal rate to mice between fried and milled Xanthium fruit (P>0.05).There was no significant change in physical constants and chemical components of fat oil after processing Xanthium fruit.Conclusion The method of grinding and stabbing after frying is more suitable for Xanthium fruit as medicine. It can improve the analgesic effect of Xanthium fruit without changing its physical constant and chemical composition of fat oil, and has less toxicity.Keywords:Xanthium Fruit;Processing;Stir Fry and Grind to RemoveThorns;Ingredients;Efficacy苍耳子是一种较为常见的中药材,其为菊科植物苍耳干燥成熟带苞的果实,苍耳子辛、苦,具有散风除湿、通窍的效果,有毒,过量服用或炮制不当均有可能导致中毒[1]。
不同产地苍耳子UPLC指纹图谱研究[通信作者] *韩燕全,研究方向为中药炮制与质量控制,E-mail:hyquan2003@2010年版《中国药典》一部项下收录其来源为菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Part.的成熟带总苞的果实[1]。
苍耳子味辛苦、性温、有毒,具有散风热、通鼻窍之功效,是中医临床上散热、解疮毒、通鼻窍、痹证的要药;我国大部分地区均产,主要为野生,其适应性强,易于散布,各种环境都适宜生长,尤其在荒野路边、田边最多,药材资源丰富[2]。
《中国药典》2010年版项下关于苍耳子的质量控制是以性状鉴别和对照药材薄层色谱为指标进行的。
由于我国幅源辽阔,不同的气候条件、生态环境对其地域内所产的药材质量有很大的影响,仅靠性状鉴别和含量测定不能全面控制苍耳子的质量,因而对其质量进行进一步提高研究具有十分重要的意义。
目前,对于苍耳子药材的质量控制研究主要是应用高效液相色谱(HPLC)等方法对其一种和几种成分的含量测定,来评价其质量的优劣[3-5];然而,从传统中医药理论的观点来看,仅从指标成分的含量控制还难以满足对中药质量的全面控制的要求。
鉴于此,笔者采集了全国12个省,不同产地的26批苍耳子药材,建立能够反映该中药特征的UPLC色谱指纹图谱,在数据化处理的基础上,结合相似度评价、模糊聚类分析和主成分分析的方法,进行药材的质量分析和评价,以期能更为全面地控制该药材的质量。
1 材料Waters Acquity UPLC(ultra-performance liquid chromatography)H-Class超高效液相色谱系统,配有四元超高压溶剂系统、自动进样恒温样本管理器、柱温箱、PDA测器和Empower 2 色谱工作站(美国Waters公司);1/10万电子分析天平(AG285型,德国赛多利斯公司)。
超声仪(KQ-3200B型,江苏昆山超声仪器有限公司);中药粉碎机(HFB-200型,吉首市中州市中药机械厂),真空干燥箱(DZF-6050型,上海博讯医疗设备厂)。