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mrna差异表达摘要：1.mRNA 差异表达的概述2.mRNA 差异表达的原因3.mRNA 差异表达的应用4.mRNA 差异表达的挑战与未来发展正文：1.mRNA 差异表达的概述mRNA 差异表达是指在不同的生物体、不同组织、不同发育阶段以及不同处理条件下，基因的表达水平出现差异，从而导致mRNA 的表达量也不同。
这种现象在生物学研究中具有重要的意义，因为mRNA 差异表达往往与生物体的生长、发育、免疫、疾病等许多生物学过程密切相关。
2.mRNA 差异表达的原因mRNA 差异表达的原因多种多样，主要包括以下几个方面：(1) 基因本身的特性：不同的基因具有不同的表达水平和表达模式，这是由基因本身的序列特性、结构和功能决定的。
(2) 表观遗传调控：表观遗传是指通过化学修饰等方式，在不改变DNA 序列的前提下，影响基因的表达。
这种调控机制可以导致mRNA 的表达水平发生变化。
(3) 转录后调控：转录后调控是指在mRNA 合成后，通过剪接、修饰、运输和降解等过程，调控基因表达。
这些过程可以导致不同条件下mRNA 表达水平的差异。
(4) 环境因素：外部环境因素，如温度、光照、营养等，可以影响生物体内基因的表达，从而导致mRNA 差异表达。
3.mRNA 差异表达的应用mRNA 差异表达在生物学研究中具有广泛的应用价值，包括：(1) 基因功能研究：通过研究不同条件下基因表达水平的变化，可以推测基因在生物体内的功能和作用机制。
(2) 疾病诊断：许多疾病都与基因表达异常有关，通过检测mRNA 差异表达，可以为疾病的早期诊断和疗效监测提供依据。
(3) 药物研发：mRNA 差异表达可以为药物靶点发现和药物筛选提供重要线索。
4.mRNA 差异表达的挑战与未来发展尽管mRNA 差异表达研究取得了显著进展，但仍面临许多挑战，如数据分析方法的完善、样本多样性、数据标准化等。
随着高通量测序技术的发展，越来越多的mRNA 差异表达数据得以积累，为数据挖掘和生物信息学分析提供了基础。
mrna差别显示技术分离产物
MRNA差别显示技术（Differential Display of mRNA，DD）是一种用于寻找不同表达的基因的方法，属于基因差异分析的一种。
该技术以聚合酶链式反应（PCR）为基础，利用反转录酶将mRNA逆转录成cDNA，利用DD引物引导PCR扩增特定区域的cDNA，通过PCR扩增产物的差异性，从而分离出不同表达的mRNA。
这个方法已被广泛应用于许多生物领域中。
DD技术的实验步骤如下：
（1）以反转录酶为媒介，将总RNA逆转录成cDNA，加上合适的引物，经特定PCR扩增后，在聚丙烯酰胺凝胶中进行分离。
由于PCR扩增引物的选择性，只有与引物对应的mRNA 会被扩增出来。
（2）将不同条件下（如不同组织、不同发育阶段、不同细胞状态等）提取的RNA样品按照第一步的方法进行反转录、扩增和分离，得到不同的PCR产物。
（3）将不同条件下得到的PCR产物大小和数量进行比较，筛选出只在其中一个样品中存在的PCR产物，这就是mRNA的差异表达产物。
（4）将差异表达产物纯化后，进行后续的克隆、测序和同源比对等分析，确定其详细信息，为研究差异表达的基因提供线索。
DD技术的优点在于不需要事先了解基因的序列信息，能够从许多的基因中快速筛选出有差异表达的基因并进行深入研究。
缺点是有可能会测量到某些零星的基因表达变化，需要进行进一步的验证。
总之，DD技术在生物医学领域中具有广泛的应用前景，尤其在寻找某些疾病的分子机制和治疗靶点等方面起到了重要作용。
mRNA差异显示技术mRNA differetial display1.概述mRNA差异显示技术（mRNA differetial display）是一种快速有效的克隆差异性表达基因的方法。
•方法建立：1992年Liang P和Pardee首次应用DD技术对比人类乳腺癌细胞与正常细胞所表达的mRNA，以此来克隆癌细胞所特有的基因•目前已应用于个各领域：–农业、植物–动物–医学•胚胎发育•遗传病•药物•肿瘤2.mRNA差异显示原理•是分离差异表达基因的一个重要方法。
人类大约含有三万个不同的基因。
在不同的单个细胞中只有10％的基因处于表达状态。
•生物体在不同的生理，病理状态下，基因的表达水平不同。
•生命过程中选择性表达的基因主要有：发育与分化、体内平衡、对攻击的应答、细胞周期调节、老化和程序性细胞死亡等。
•差异显示获得的只是某个基因的片段，而不是直接获得全长cDNA克隆。
3.基本程序–选择表型特性差异显著对象–展示mRNA的差异–基因差异–克隆与表型差异高度相关的新基因4.技术•基本技术–逆转录（RT ）–聚合酶链反应（PCR）–凝胶电泳5.RT-PCR•锚定引物T12-MN，含有12个T可以结合于mRNA 3`端poly（A）尾，M为A、C、G 3种碱基之一，N为A、T、C、G 4种碱基之一。
•荧光锚定引物，引物5`端加入T7 RNA多聚酶启动子并带有荧光分子----------- AAAAAAAAAA –3` mRNA------------XAAAAAAAAAAA–3` 1/3 mRNAMTTTTTTTTTTTT（12T）Prime---------YXAAAAAAAAAAAAA –3` 1/12 mRNANMTTTTTTTTTTTT（12T）Anchor Prime•荧光锚定引物：NMTTTTTTTTTTTT-T7 RNA多聚酶启动子-荧光分子（Genomyx company）因此共有12种锚定引物•同位素标记锚定引物•随机引物（Arbitrary Prime）可以随机地与cDNA不同位置多个位点结合，扩增出不同长度的cDNA片段混合物。
