血型鉴定及交叉配血 ppt课件

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血型鉴定与交叉配血

原理
根据红细胞膜上有无A抗原或B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。通常利用红细胞凝集试验，通过正定型和反定型鉴定ABO血型。
正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或B抗原；反定型是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗A或抗B。
血型抗原
抗B A型RBC B型RBC O型RBC
-
-+
+
-
结果 O
+
--
+
-
A
-
++
--B来自++-
-
-
AB
Rh血型鉴定
一、试剂 1、IgM抗-D试剂血清 2、待检红细胞悬液
二、操作 1、取12×75mm干净小试管1支 2、滴入IgM抗-D试剂血清1~2滴 3、滴入红细胞悬液 4、混匀后3400转/分离心15秒 5、轻轻摇动试管，观察结果 6、凝集为阳性，不凝集为阴性
红细胞血型抗原：已确定的有29个系统、200多种抗原
其中必查血型抗原： ABO抗原和RhD抗原
血型抗体
常见的血型抗体分子大多属于IgM或IgG两类
*五类免疫球蛋白具有相似的单体结构 *两条轻链(L链)和两条重链(H链)组成的四肽链 (H2L2)---单体结构
1、 IgG 抗体
分子较小，通常以单体形式存在。多经妊娠或输血后免疫产生。在盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能使之凝集，所以又称为不完全抗体。必须通过特定的方法（如抗人球蛋白）使致敏红细胞发生凝集。
2. 各加LIM溶液0.7m1 ，混合均匀后，再各加 Polybrene溶液1滴，并混合均匀，置室温1分钟。
3．普通离心机1000g离心15秒，然后把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。

血型ppt课件

血型鉴定和交叉配血试验
同济医院输血科魏晴
血型基本知识
一、基本概念
血型：血液遗传性状,多态性物质血型系统：由数个相互关联的抗原抗体组
成
二、输血医学中最重要的血型系统
ABO血型系统、 Rh血型系统
三、分子生物学基础
基因控制，基因的间接或直接产物
ABO血型系统
• 人类最早认识的血型系统（1900年 Landsteiner 发现）
ABO、 Rh(D)血型鉴定
ABO血型鉴定 • 正反定型两者决定 • 正定型检测红细胞抗原 • 反定型检测血清中抗体 • 正反定型同时检测，才能正确判断ABO血
型 Rh(D)血型鉴定 • 正定型决定 • 正定型检测红细胞膜的D抗原
抗体筛选
• 目的：发现有临床意义的不规则抗体，保障输血安全。
抗体筛选
• 输血医学中最重要血型系统
ABO血型系统
• 分类分为A、B、O、AB四种血型（1）红细胞上是否存在A、B抗原（2）血清中是否存在抗A或抗B抗体 • 分布
红细胞、组织细胞、体液、分泌液
ABO血型系统分型
红细胞上存在的血清中存在的血型ຫໍສະໝຸດ 抗原抗体A抗原
抗B抗体
A
B抗原
抗A抗体
B
A、B抗原
无
AB
卫生部《临床输血技术规范》
筛选细胞
交叉配血
• 目的：检查受血者与供血者是否存在血型抗原与抗体不合的情况
• 方法主侧：受血者血清 + 供血者红细胞次侧：受血者红细胞 + 供血者血清
ABO、Rh血型系统的临床意义
• 输血安全 • 新生儿溶血病 • 器官移植 • 其他
小结
• ABO血型分类 A型、 B型、 O型、AB型

实验ABO血型鉴定ppt课件

剂量、用法、时间一注意：注意用药后反应
为了规范事业单位聘用关系，建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度，保障用人单位和职工的合法权益
作业
1.完成实验报告：ABO血型鉴定 2.解释“交叉配血试验”及其结果 3.简述输血应遵循的原则。
为了规范事业单位聘用关系，建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度，保障用人单位和职工的合法权益
五、注意事项
1.严格消毒皮肤与采血针 2. 标准抗AB血清不能混淆平稳移动玻片 3.使用牙签时不可混用 4.凝集现象肉眼分辨不清时用低倍镜辨别
六、实验记录
1.实验现象： 2.实验结果：
为了规范事业单位聘用关系，建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度，保障用人单位和职工的合法权益
为了规范事业单位聘用关系，建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度，保障用人单位和职工的合法权益
三、实验用品
标准抗A 和抗B血清、玻片、蜡笔、消毒液、牙签、棉签、采血针、显微镜等
为了规范事业单位聘用关系，建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度，保障用人单位和职工的合法权益
4.观察反应
静置10—15分钟后用肉眼观察有无凝集现象。
为了规范事业单位聘用关系，建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度，保障用人单位和职工的合法权益
结果判断
根据有无凝集现象判定血型
标准抗A血清标准抗B血清
A型 B型 AB 型 O型

血型鉴定与交叉合血课件

一表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。
•血型鉴定与交叉合血
•6
2.玻片法
（1) 取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B、抗A+B,分别用滴管滴加抗-A、抗-B、抗-A+B分型血清1滴于标明的方格内，再各加受检者2 ％红细胞悬液1滴，混和。
（ 2) 另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。
抗-A、抗-B 、抗-A+B,用滴管分别加抗-A、抗-B 、抗-A+B分型血清各1滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。
（ 2）另取洁净小试管（内径10mm×60mm)3支，分别标明A、B、O细胞,用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部，再以滴管分别加入5％ A、B、O试剂红细胞盐水悬液1滴，混和。
•
•血型鉴定与交叉合血
•15
5)如果试验结果未见凝集，应将试验至少在室温和4℃放置30min，用显微镜检查核实。
6) 若疑为A抗原或B抗原减弱，将受检红细胞与抗-A 或抗-B血清作吸收及放散试验以及受检者唾液作 A、B、H血型物质测定。后者只对80%HAB分泌型的人有用。
7) 若试验结果红细胞呈缗钱状排列，加等渗盐水l 滴，混和，往往可使缗钱现象消失。应注意，不要先加盐水l滴于受检者血清中而后和红细胞作试验，以免使血清中抗体被稀释。
十─
十
A
─十
十
B
──
─
O
十十
十
AB
受检者血清+试剂RBC
A细胞 ─ 十十

血型鉴定及交叉配血

严格进行血型鉴定和交叉配血试验，确保供、受体血型一致。
症状
寒战、高热、腰背酸痛、血红蛋白尿、黄疸等，严重者出现血压下降、休克和急性肾衰竭。
非溶血性输血反应
发生机制
与免疫因素有关，如过敏反应、发热反应等。
症状
皮肤瘙痒、红斑、荨麻疹、咳嗽、呼吸困难等，严重者出现过敏性
休克。
预防
对有过敏史的受血者进行预防性用药，输血前仔细询问受血者过
O型血与疾病的关系
O型血人群患心血管疾病的风险较低，但也有一定的风险。
O型血人群对某些病毒和细菌的抵抗力较强，如流感病毒、肺炎
球菌等。
O型血人群患某些癌症的风险较高，特别是结直肠癌和乳腺癌。
04 输血反应
CHAPTER
溶血性输血反应
发生机制
预防
由于供、受体的血型抗原不匹配，导致红细胞在血液循环中溶解破坏。
A型血人群易感染某些病毒和细菌，如流感病毒、幽门螺杆菌等。
A型血人群患癌症的风险也相对较高，特别是消化系统癌症。
B型血与疾病的关系
B型血人群患心血管疾病的风险较低，但也有一定的风险。
B型血人群患某些自身免疫性疾病的风险较高，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。
B型血人群易感染某些病毒和细菌，如流感病毒、肺炎球菌等。
敏史。
输血传播疾病
疾病种类
包括乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒等。
传播途径
通过血液中携带病毒的微量红细胞或白细胞传播。
预防
对献血者进行严格的筛选和检测，采用病毒灭活技术处理血液制品。
05 输血前检查
CHAPTER
输血前检查的内容
01
02
03

交叉配血试验ppt课件

7
一、病人的病史和标本等的检查核对及处理
2．标本的要求: 标本必须有正确的标签。如果标本标签上的内容与血液申请单上的内容不一致或对病人身份确认有疑问的话，必须重抽一份新的血液标本，任何人不得对错误的标签进行修改。
所用血标本能代表患者当前的免疫学状态。输血前检查的各项试验必须使用3天内采集的血标本，反复输血的患者更应注意抽取新的标本作配血试验，避免因回忆反应而产生的抗体漏检。
批号
效期
厂商
试剂质控批号变化
通过质控质控失控失控原因
1
批号: 12345
2
3
…….
口改变口改变 ……. 口未改变口未改变
日期签名
55
ABO/RhD定型质控
检测标本时必须设立阳性和阴性对照试验：对照试验的频次取决于工作模式、使用的方法和试剂的使用说明
每一批抗-A，抗-B，都必须与A1，B和O细胞有合适的反应能力。每一批试剂反定型红细胞都必须与抗-A，抗-B有合适的反应能力。
包括病人的姓名，年龄，床号、住院号及唯一性标识码，性别，种族，临床诊断，输血史，药物史，妊娠史。凡资料填写不全的输血申请单要退回临床科室补充，不得迁就，也不能通过电话修改。
6
一、病人的病史和标本等的检查核对及处理
1．病史资料和信息如果病人以前有过试验，则要注意核查病人以前
检查的血清学试验记录及以往输血反应的记录等。把以前的ABO、Rh血型和抗体检测的解释同现在的解释及任何异常情况的解答进行比较。如既往曾经检出某种血型抗体，即使目前该抗体检测阴性，也应选择无相关抗原的血液输注。
35
用于ABO反定型的试剂红细胞
A 细胞- 与抗A，抗A1反应4＋，与抗B无反应 B 细胞- 与抗B反应4＋，但与抗A，抗A1无反

交叉配血检验(临床检验课件)

4.在急诊配血时, 对急需情况可采用试管法配血，在15min内发血。对特急情况应立即发给O型浓缩红细胞或低凝集价的O型全血。然后尽快复查血型和配血，如表现有配血禁忌，应立即通知负责医师及时处理。
血型鉴定与交叉配血的异常责任性错误
假阴性 1.标准血清不符合要求 2.被检红细胞抗原性减弱 3. 红细胞悬液浓度配置不当 4. 将溶血反应误认为不凝集
微柱凝胶试验原理
凝胶微柱：试管上端、柱体过滤介质：颗粒直径26～103 nm的葡聚糖100凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过缓冲液：LISS（加或不加抗血清）
微柱凝胶试验原理
将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心后观察凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳性游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱，而到达小柱的底部，证明未发生凝集判断凝集反应阴性
报告方式
格式Ⅱ：受血者
供血者
试验结果
照
血型血型
PS+DC PC+DS
盐水介质酶介质抗球蛋白介质
名：
反应情况 PS+PC 阳性对照阴性对
签
交叉配血试验
同。
聚凝胺配血法原理与Rh血型鉴定聚凝胺法原理相
交叉配血试验
聚凝胺配血法的结果如果加入解聚液后观察到凝集散开，则为聚凝胺引起的非特异性凝集，为配血相容。
第十四讲交叉配血
交叉配血试验
交叉配血（cross matching）试验是输血前必须做的红细胞系统的配合性试验，以确保受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体成分。可分为主侧配血和次侧配血。
主侧：受血者血浆

交叉配血试验.ppt

谢谢交叉配血试验.ppt
演讲人
交叉配血实验主要是用于供血前确认供者血型与受者血型是不是配合，尽量的避免输血反应。输血前必须进行两项输血实验，血型鉴定和交叉匹配。
理论上一旦已知受血者血型便可输注配合的血液，是在实践中供者血和受者血可以仍然有不相容的情况，主要是因为供血可能包含其他非常规血型抗原，而受血者血清中如存在针对这些抗原的抗体就可能会造成输血反应，所以交叉配血是非常重要的。
交叉配血实验是观察主副实验是不是发生凝集决定临床输血的可行性，血型完全配合，输血是最安全的。血型部分配合，尽在应急的时候少量输血并需要严密观察是不是有输血反应，血型完全不配合是绝对不要输血的。
总之血型完全配合或者是部分配合是可以输血的指征，血型完全不配合也就是主实验和副实验均凝集是严禁输血的。

疑难血型鉴定及配性 ppt课件

疑难血型鉴定及配型
ppt课件
1
在ABO血型系统内，几乎所有缺乏抗原的人体，在其血清内必具有所缺乏抗原的抗体，若在红细胞上具有抗原时，则其血清内必缺乏对应的抗体，但这种规则偶然也有例外，血清中的抗体和细胞上的抗原不互补，正反定型相互不支持，出现血型难以确定。
另外会遇到即使ABO和RH血型相同，但由于患者血清中存在意外抗体或红细胞上致敏有意外抗体及其它原因造成交叉配血不能相合。
发生改变，而是其血清含有过量的病人血清时，则能
进行正确的ABO分型试验。
ppt课件
12
二、未知的抗原反应
正定型
反定型
病人的红细胞+试剂抗血清病人的血清+试剂红细胞
抗A
抗B
抗AB AC
BC
OC 自身
C
4+ 2+
4+ -
4+
-
-
未知的抗原反应在正定型中产生的情况范例，能有以下七种情况所引起：
ppt课件
反定型
病人的血清+试剂红细胞
AC
BC
-
-
OC
自身C
-
-
（1）正定型抗A4+，暗示为A型，但反定型提示为AB型
（2）补充试验：将正反定型试管放4度10～30分钟，证明反定型的BC管能够出现凝集，自身对照试验仍保持阴性；加大血清量。
（3）结论：病人为A型，抗B减弱。
ppt课件
26
（一）年龄：
新生儿与幼儿及老年人可显示种属抗体的减弱或缺少。对新生儿血清常规不做血清分型法，是因他们尚未开始产生抗体所致。在新生儿或幼儿能检的抗体，都是在母体子宫内被动获得者。
2、疾病状态：减弱的A抗原表现也可病人后天的特性，如：A型急性白血病患者在疾病活动期改变为A2 型或A3亚型，在疾病缓解期又恢复到原来A型反应。抗原性强度的减弱，也能发生于B抗原与H抗原以及其他血型系统的抗原。

血型鉴定和交叉配血专题培训课件

如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
血型鉴定和交叉配血
实验内容
一、红细胞悬液的制备二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
临床中：
待测
制成红细胞悬液，
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型：原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体，进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型方法： 1、试管法：
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
交叉配血：

主侧：受血者血浆+供血者红细胞
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细胞悬液1滴

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1min
二、ABO血型鉴定：
正定型判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起，观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型：原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体，进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果，有凝集（＋），无凝集需按照说明书进一步实验确认是否为阴性
Rh（D）血型鉴定
注意事项：
1、按照试剂说明书操作 2、先加血清，后加RBC悬液，可通过视觉判断以
实验十一：血型鉴定及交叉配血
实验内容
一、红细胞悬液的制备二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
临床中：
待测
制成红细胞悬液，
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
（一）盐水介质法
操作： 1、取两只小试管，标明主和次侧 2、主侧：受血者血浆2滴，献血者红细胞1滴
次侧：献血者血浆2滴，受血者红细胞1滴 3、混匀，离心，1000r/min,离心1min 4、观察结果：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC
浮起，观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
一、正定型原理：用特异性血型抗体检测被检RBC,在盐水介质
中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检RBC膜上有无与特异性血型抗体相对应的抗原，进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
一、正定型方法： 1、试管法：
-A
-B
加标准血清1滴
（-A -B ）
加红细胞悬液1滴（5%）
混匀，离心 1000r/min 观察结果
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
②洗涤：剩余的红细胞中加5ML NS，混匀，洗涤 3000r/min ，弃上清，此步骤重复3次，最后一次上清5min应清亮并全部弃去。
③配制悬液。（根据要求浓度）如：5%：洗涤后压积红细胞1滴+19滴NS，混匀
二、ABO血型鉴定：
（一）、正定型（二）、反定型
二、ABO血型鉴定（盐水介质）：
Ps：patient serum
Dc：donor cell
次侧：供血者血浆+受血者红细胞
Ds：donor serum
Pc：patient cell
Ps
Ds
Pc
受血者
3%-5% 1%
Dc
献血者
一、盐水介质法
原理：ABO血型天然IgM类抗体与对应的RBC
抗原特异性结合时，在盐水介质中出现肉眼可见的凝集。通过判断是否凝集，判断是否有血型不合的情况
注意：1、正反定型一致才能确定结果；
2、所用器材必须清洁干净，避免溶血，专型专用； 3、控制离心速度和时间，防止假阳性和假阴性； 4、抗原抗体比例要适当； 5、溶血时，注意结果的判定； 6、正反定型结果不一致时，不可轻易判定，需查明原因，可能有技术问题也可能有标本问题。
Rh（D）血型鉴定
原理：IgM型抗D标准血清与被检者RBC表面D抗原在
集。低离子液可降低可增强抗原、抗体间的吸引
力，促进血型抗体与红细胞膜上相应抗原结合。
离心后加入再悬液（枸橼酸钠），可中和聚凝胺
的正电荷，正常红细胞表面恢复表面的负电荷，使非特异性凝集散开，而特异性的抗原抗体结合引起的凝集仍然存在。
操作步骤
按照说明书进行